وآخرانعبيد DJAS ،01(2 :)004-022 ،2102 مجلة ديالى للعلوم الزراعية 004 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ تأثير منظمات النمو النباتية ونوع الجزء النباتي في انتاج المركبات الفينولية لنباتات الشليك النامية 1*في ظروف الحقل وبالزراعة النسيجية 2العزاويعماد خلف 2دداو مالك سامو 1،3دعبي عاصي اياد جامعة ديالى، العراق. –كلية الزراعة -قسم البستنة وهندسة الحدائق 0 جامعة ديالى، العراق. -الصرفة للعلوم التربية كلية -قسم علوم الحياة 2 Ayadassi73@gmail.com المسؤول عن النشر:3 المستخلص اجريت ونُفذت الدراسة في البيت البالستيكي والظلة الخشبية التابعة لكلية الزراعة جامعة ديالى، التجارب في مختبر زراعة األنسجة النباتية التابع لقسم البستنة وهندسة الحدائق/ كلية الزراعة/ جامعة نتاج المركبات الفينولية من الكالس إالكالس وشوء نديالى، بهدف دراسة تأثير منظمات النمو النباتية في Duch Fragaria ananassa و Fragaria vescaومقارنتها بالنباتات النامية في الحقل للشليك ، Salwan. بينت نتائج اختبار تاثير منظمات النمو في نشوء الكالس من اوراق صنف Salwanصنف وبلغ معدل وزنه ،%01بة تكون للكالس بلغت أعطى أعلى نس 0-لتر ملغم 1.0بتركيز D- 2,4ان تأثير الغذائية المحتوية ، وجد إن األوساطBAأو .Kinمع D-2,4غم، أما عن تأثير تداخل 1.130الجاف غم، اما 2.0.1أعلى متوسط للوزن الطري بلغ 0D -2,4-لتر ملغم Kin + 0.1. 0-لتر ملغم 0.1على NAA 0-لتر ملغم Kin. +1 0-لتر ملغم 1.5، وجد أن معاملة .Kinأو BAمع NAAنتائج تداخل غم على التتابع. ونميت االجزاء 0.127و 2.107سجلت أعلى متوسط للوزن الطري والجاف بلغ على اوساط غذائية مجهزة بمنظمي النمو .Fragaria vesca L نوع الخضرية النسيجية للشليك Kin. وNAA كالس بهدف انتاج الكالس لتقدير المركبات الفينولية. بينت نتائج تقدير الفينوالت من ال ن األنسجة المتمايزة أعطت مستويات عالية في معظم المركبات الفينولية أ واألنسجة المزروعة في الحقل Caffic acidو Meryctinأعلى قيم في مركبات vescaقياساً بأنسجة الكالس إذ أعطت أوراق الشليك و Comarinsو Alpha penineوأعطت إزهار النوع نفسه أعلى قيم لمركبات Gallic acidو Quercetin وأعطت جذور النوع نفسه أعلى كمية لمركبي ،P-hydroxy benzoic acid وFerulic acid في حين أعطى كالس النوع نفسه أعلى كمية لمركب ،Camphene وEllagic acid وأعطى . Catachin أعلى كمية لمركب Salwanكالس الشليك ، المركبات الفينولية.، منظمات النمو النباتيةالشليك، الكالس الكلمات المفتاحية : المقدمة الشليك نبات عشبي معمر يمتاز بشكله الجميل وطعم ثماره اللذيذ ويعد من الفواكه ذات الثمار الصغيرة المنتشرة في العالم لما يتمتع به من قيمة غذائية وعالجية جيدة، وينتمي الشليك إلى رتبة Rosales والعائلة الورديةRosaceae وتحت العائلةRosaideae والى الجنسFragaria (السعيدي، (. تتميز ثمار الشليك بكونها غنية بالمواد الغذائية الحتوائها على بعض العناصر المعدنية، تؤكل 2000 ثماره طازجة، ويصنع منها العصير والحلويات والمربى والشراب وتستخدم أوراقه في خلطة الشاي، عالجاً لإلنسان مارعصير الث يستخدموويعتقد إن لألوراق والجذور خصائص طبية أو دوائية، (Aprona ،2006) تستخدم التقنيات الحياتية في المجاالت الزراعية والصناعية والطبية وفي إنتاج . مركبات مفيدة في ظل ظروف مسيطر عليها واستخراج مواد فعالة ذات استخدامات طبية من كالس البحث مستل من رسالة ماجستير للباحث الثالث.* 1 31/6/2132استالم البحث: 32/9/2132 قبول النشر: http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ mailto:Ayadassi73@gmail.com وآخرانعبيد DJAS ،01(2 :)004-022 ،2102 مجلة ديالى للعلوم الزراعية 000 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ (. إن Ramawat ،2004 ؛ 2008وآخرون، Parkالنباتات طيلة أيام السنة دون التقيد بموسم النمو ) وآخرون، Khatunنجاح زراعة الخلية والنسيج يعتمد على تكوين مزارع الكالس الجيد للنبات ) الحصول على المركبات الطبية في تقنية الزراعة النسيجية يتم من خالل التحكم في المسارات .(2003 المركبات ومن ضمنها الدوائية، الذي يصعب االيضية للخاليا النباتية في مزارع األنسجة إلنتاج هذه تم عزل أكثر من (،2004 الزبيدي،؛ Purohit ،1999حداثه في النباتات النامية في بيئاتها الطبيعية )ا وآخرون Hongمن المركبات االروماتية من مزارع المعلقات الخلوية للشليك وتمكن مركب 200 البيوتانول وااللفاكيتوفالريت كأمثله أخرى على المركبات االروماتية ( من الحصول على 1990) ، فضالً عن الحصول على االستيل الديهايد وااليثانول تحصلة من المزارع الخلوية للشليكالمس (، وتعد المركبات الفينولية من Berger ،1983و Drawertالمستحصلة من المزارع الخلوية للشليك ) Mohan) همة التي تستخدم في مجاالت عديدة أهمها في مقاومة أورام السرطانالمواد الطبية الم وآخرون، Aharoniفقد أمكن استخالص المركبات الفينولية من ثمار الشليك من قبل ،(2008 وآخرون، ومن األوراق 2007))وآخرون، Aaby و( 2004)، وآخرون Maatta-Riihinenو( (2002 Hukkanen) ،وتمكن 2007)وآخرونHanhineva من استخالصها من األزهار. 2008،واخرون المواد وطرائق العمل /من مركز الزراعة العضوية .Salwan Fragaria ananasa Lجهزت شتالت الشليك صنف وزرعت في تربة نهرية في ظروف البيت البالستيكي وبنظام الري بالتنقيط، ،وزارة الزراعة العراقية بهدف الحصول على مزارع لألمهات. فصلت االجزاء النباتية وعقمت بعد غسلها بالماء باستعمال القاصر وتم تخفيف القاصر (NaOCl) ت الصوديوميهايبوكلورمن % 5 التجاري )الفاس( الذي يحتوي على ،% 0.1مادةً ناشرة بتركيز قة واستخدم الصابون السائل بوصفهدقي 00بالماء المقطر ولمدة % 0.05إلى دقائق في كل مرة للتخلص من آثار 5ثم غسلت االجزاء النباتية أربع مرات بالماء المقطر المعقم لمدة لزراعة مادة التعقيم، علما بان كافة خطوات التعقيم كانت تجري تحت ظروف معقمة في كابينة ا Laminar air flow cabinet. استعملت أمالح الوسط الغذائيMS Murashige) وSkoog، ثم وزع الوسط الغذائي بعد إضافة منظمات 5.7 -5.8إلى (pH)وتم تعديل الدالة الهيدروجينية ،(1962 وذلك 2-كغم سم 1.04وضغط مْ 121عقمت على درجة حرارة حسب التجارب وبالنمو النباتية و (.1990، وعمرمحمد دقيق ) 15ولمدة Autoclaveباستخدام جهاز المؤصدة على 2سم 1اجريت التجارب بزراعة اقراص ورقية بمساحة : Salwanتجارب نشوء الكالس للصنف ة ـوفق التجارب االتية: درس تأثير اضافعلى اوساط لدراسة نشوء الكالس ووزنه الطري والجاف Dمع 0-لتر ملغم 4و 0،2بالتراكيز 2,4ــBA اوKin. لكل منهما على 0-لتر ملغم 1.5و 1بالتركيزين بنفس التركيز السابق وبتجارب مستقلة عن اضافة .Kinاو BAمع NAAدرس ايضا اضافة و ،انفراد D وبهدف مقارنة نتائج الصنف 2,4ــ ،Salwan مع صنف اخر لمحتواه من المركبات الفينولية ومحتوى في الظلة .Fragaria vesca Lنوع تم زراعة بذور الشليك والجذور واالزهار من هذه المركبات، بناًء على نتائج التجارب السابقة F. vescaتم تحفيز نشوء الكالس للشليك اذنسجيا وزرعت ايضا 1، اذ نميت االجزاء الخضرية النسيجية على اوساط غذائية مجهزة بمنظمي النمو Salwanللصنف (.0بهدف انتاج الكالس )صورة NAA 0-لتر ملغم Kin. +1 0-لتر ملغم قدرت المواد الفاعلة في الكالس وفي أوراق وجذور وأزهار التقدير الكمي والنوعي للمركبات الفينولية: ، جفف الكالس على درجة وجيا العراقيةالنباتات المزروعة في البيت البالستيكي في وزارة العلوم والتكنول http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ وآخرانعبيد DJAS ،01(2 :)004-022 ،2102 مجلة ديالى للعلوم الزراعية 00. http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ مل من كحول الميثانول 10غم وأضيف له 1ساعة ثم طحن واخذ من المسحوق 24ولمدة م ˚ 60حرارة 15وضعت العينات في جهاز الهزاز ذي الموجات فوق الصوتية لمدة وبنفس الطريقة للنباتات الحقلية، ملم 0.2دقيقة ثم وضعت في عمود من النتروجين السائل ورشح المحلول باستخدام ورق ترشيح بقطر زمن لتحديد Shimadzu LC -10Aنوع HPLCحقن كل من المحلول القياسي والعينة في جهاز و لكل من المحلول القياسي والعينة حيث حقن Areaوارتفاع حزمة العينة (Retention time) االحتجاز phase) (mobileوطور متحرك mm I.D 4.6× 50من نوع (Column)المستخلص في عمود وكانت v/v 80:20وبنسبة acetic acid in Dionized water :acetonitrile % 0.1يتكون من وعلى نانومترا 275وقيست القراءات على طول موجي قدره ، 0-دقيقة مل1.5سرعة جريان الجهاز حسب تركيز كل عينة باستخدام المعادلة اآلتية:بوم ْ 30درجة حرارة مساحة حزمة النموذج Hadi)، (1999 عدد مرات التخفيف ×تركيز المحلول القياسي ــــــــــــــتركيز النموذج= ـــــــــــــــــــ مساحة حزمة القياس Completely)استخدم التصميم العشوائي الكامل التصميم التجريبي والتحليل اإلحصائي: Randomized Design, CRD) (1996)واستعمل البرنامج الجاهز SAS لتحليل البيانات وتم في تجارب T، واستعمل اختبارمتعدد الحدودالوفق اختبار دنكن على ت المقارنة بين المتوسطا وقورنت المتوسطات باستعمال اقل فرق معنوي لبيان الفروق اإلحصائية بين ،استخالص الفينوالت (.1990 ،)الساهوكي ووهيب 0.05 المعامالت وعلى مستوى احتمال النتائج والمناقشة Salwan: تأثير منظمات النمو في نشوء الكالس للصنف 3 في نشوء الكالس ونموه D -2,4مع BA: تأثير اضافة 3-1 كان D-2,4و BAإن تأثير التداخل بين 0تبين النتائج الموضحة في الجدول نسبة تكون الكالس: BA +4 0-ملغم لتر 1.5أسابيع من الزراعة وتفوقت المعاملة 8معنوياً في نسبة تكون الكالس بعد مرور + BA 0 -لترملغم 1، تلتها معاملة %100في أعطاء أعلى نسبة لتكون الكالس بلغت D-2,4 0-لترملغم إذ تفوقت معنوياً على األوساط الغذائية المجهزة %90التي أعطت نسبة بلغت D -2,4 0-لترملغم 4 ،% 40التي أعطت اقل نسبة لتكون الكالس وبلغت D-2,4 0-لترملغم 0BA +1-لترملغم 1.5بتركيزي في حين أعطت األوساط D-2,4 0-لترملغم 2أو 0BA +1-لترملغم 1ولم تختلف معنويا عن معامالت . % 80نسبة تكون للكالس بلغت D-2,4ملغم /لتر 0BA +2-لترملغم 1.5المجهزة بتركيز .%5حسب اختبار دنكن متعدد الحدود عند مستوى احتمال ب*األرقام التي تحمل أحرف متشابهة التختلف فيما بينها معنويا من األوراق للشليك ووزنه الطري والجاف نسبة تكون الكالس في D-2,4 مع BA. تأثير تداخل 3جدول ال MSأسابيع من الزراعة على وسط 8بعد مرور Salwanصنف تراكيز منظمي النمو ملغم /لتر الوزن الجاف )غم ( الوزن الطري )غم( نسبة تكون الكالس % BA 2,4-D 1 1 ab 60 b 0.890 b 0.070 2 ab 70 ab 1.140 ab 0.082 4 ab 90 a 1.534 a 0.106 1.5 1 b 40 ab 1.257 ab 0.086 2 ab 80 ab 1.135 ab 0.087 4 a 100 ab 0.986 ab 0.079 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ وآخرانعبيد DJAS ،01(2 :)004-022 ،2102 مجلة ديالى للعلوم الزراعية 000 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ D-2,4 0-لتر ملغم+ BA 0-لتر ملغم 1تفوق معاملة إلى ( 0تشير النتائج )الجدول الوزن الطري )غم(: ملغم BA +1 0-لتر ملغم 1غم وبفارق معنوي عن الوسط الغذائي المجهز بتركيز 1.534التي أعطت ملغم 1غم، في حين أعطت معامالت 0.890التي حققت اقل قيمة للوزن الطري وبلغت 0D -2,4-لتر متوسط للوزن 0-لترملغم 4أو 2أو BA +1 0-لترملغم 1.5و D-2,4 0-لترملغم BA +2 0-لتر غم على التتابع. 0.986و 1.135و 1.257و 1.140الطري بلغ إلى ظهور فروق معنوية في تداخالت تراكيز 0تشير النتائج المبينة في الجدول :الوزن الجاف )غم( BA وD-2,4 0-لتر ملغم 1فقد أعطت األوساط الغذائية المحتوية على BA +4 0-لترملغم D-2,4 0-لتر ملغمBA +1 0-لترملغم 1غم وبفارق معنوي عن معاملة 0.106أعلى قيمة للوزن الجاف بلغت D-2,4 0-لترملغم 1غم في حين أعطت األوساط المجهزة بالتراكيز 0.070التي أعطت اقل وزن بلغ BA +2 0-لترملغم D-2,4 0-لترملغم 1.5و BA +1 0.082متوسط وزن جاف بلغ 4أو 2أو غم على التتابع. 0.079و 0.087و 0.086و االوكسينات شجع على نحو كبير استحداث الكالس ونموه بينت النتائج أن تداخل السايتوكاينينات مع ربما يعزى ذلك إلى توافر مستوى معين من (، 21102 ،قياسا باستخدام االوكسين منفردا )العزاوي ، ذلك أن الكالس ينشأ عادة عن المركبات المضافة للوسط الغذائي منظمات النمو الداخلية والتي تتداخل مع يا لتغير من قطبيتها )فقدان التميز( لقسم منها ويمكن أن تستمر باالنقسام والتوسع انقسامات كثيرة في الخال إن الزيادة في الوزن الطري للكالس هي إلى Roberts (1985)و Doddsأشار و ،مكونة نسيج الكالس والذي وه فـي الوسط الغذائي المستعملانعكاس للتغيرات في المحتويات المختلفة لخالياه معتمدة على نم ة انقسام خاليا الكالس زيادة فية، يرافق عملييعتمد بالدرجة األساس على منظمات النمو المضاف إلدامة االنقسام والنمو مثل البروتينات واألحماض االمينية مع تغيرات خاصة داخلية مهمةالمحتويات ال الكالس في تقنيات (. يعتمد نمو1989 خرون،آو Wiesmanتؤدي إلى انقسام الخاليا تم تخصصها ) ذلك بمقدار الزيادة الحاصلة زراعـة األنسجة على قابلية خالياه على االنقسام وتكوين خاليا جديدة ويقدر ويؤثر األوكسين عادة من (Abood ،1989و (Mohammadوزن الطري والجاف ومكونات الخاليا بال لنمو.خالل تأثيره في زيادة فعالية الخاليا لبناء المواد األساس ل في نشوء الكالس ونموه D-2,4مع .Kin تأثير اضافة : 2- 3 ظهور فروق معنوية بين المعامالت في تأثير 2تبين النتائج الموضحة في الجدول نسبة تكون الكالس: 1إذ تفوقت معاملتا ،أسابيع من الزراعة 8في نسبة تكون الكالس بعد مرور .Kinمع D-2,4تداخل عطاء إفي D-2,4 0-لترملغم Kin. +4 0-لتر ملغم 1.5و D-2,4 0-لترملغم Kin. +1 0-لترملغم Kin. +4 0-لترملغم 1لكل منهما وبفارق معنوي عن معاملة %90أعلى نسبة لتكون الكالس وبلغت في حين أعطت األوساط المجهزة ،%40التي أعطت اقل نسبة لتكون الكالس بلغت D-2,4 0-لترملغم نسبة 0-لترملغم 2أو Kin. +1 0-لتر ملغم 1.5و D-2,4 0-لترملغم Kin. +2 0-لترملغم 1 يزبالتراك على التتابع. % 60و 80و 70لتكون الكالس بلغت نجح في D-2,4مع .Kinإن تأثير تداخل 2تبين النتائج الموضحة في الجدول الوزن الطري )غم(: أسابيع من الزراعة وأدى ذلك إلى ظهور فروق معنوية بين 8زيادة الوزن الطري للكالس بعد مرور في إعطاء أعلى D-2,4 0-ملغم لتر Kin. +1 0-لترملغم 1المعامالت إذ تفوق الوسط المجهز بتركيز التي D -2,4 0-لترملغم Kin. +1 0-لترملغم 1.5 غم تلتها معاملة 560 .2قيمة للوزن الطري بلغت في حين بلغت اقل قيمة للوزن الطري ،غم إذ تفوقتا معنوياً على المعامالت األخرى الباقية 2.137أعطت http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ وآخرانعبيد DJAS ،01(2 :)004-022 ،2102 مجلة ديالى للعلوم الزراعية 002 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ 1.5أو 1وبفارق معنوي عن معاملتي D-2,4 0-لترملغم Kin. +4 0-ملغم لتر 1 غم عند إضافة .4960 غم 1.324و 1.595اللتين أعطتا متوسط الوزن الطري بلغ 0D -2,4-لترملغم Kin. +2 0-لترملغم متوسط D-2,4 0-لترملغم Kin. +4 0-لترملغم 1.5وأعطت األوساط المجهزة بتركيز ،على التتابع (.0غم )صورة 0.803وزن طري بلغ في صفة .Kinمع D-2,4لتأثير تداخل 2: تشير النتائج الموضحة في الجدول الوزن الجاف )غم( لتر ملغم 1الوزن الجاف إلى ظهور فروق معنوية بين المعامالت وتفوقت معامالت -0 Kin. +2 ملغم .Kin 0-لتر ملغم 1.5أو 1 اغم تلتها معاملت 0.146وأعطت أعلى قيمة للوزن الجاف بلغت D-2,4 0-لتر ،المعامالت األخرى ةغم لكل منهما وبفارق معنوي عن بقي 0.145أعطتا اناللت D-2,4 0-لتر ملغم 1+ 0-لترملغم 1.5غم عند تجهيز األوساط بالتراكيز 0.067في حين بلغت اقل قيمة للوزن الجاف للكالس Kin. +4 0-لترملغم D-2,4 ملغم 1 اوأعطت معاملت Kin. +4 0-لترملغم D-2,4 0-لترملغم 1.5و Kin. +2 2,4 ملغم-D غم على التتابع. 0.083و 0.075 وزناً جافاً بلغ في نشوء الكالس ونموه BAمع NAA: تأثير اضافة 3-1 و NAAوجود تداخالت معنوية بين 3: بينت نتائج التحليل اإلحصائي في الجدول نسبة تكون الكالس BA 0-رلتملغم 1أسابيع من الزراعة وتفوقت المعاملة 8في نسبة تكون الكالس بعد مرور BA 2مع ملغم 1.5وبفارق معنوي على معاملة %90في أعطاء أعلى نسبة لتكون الكالس بلغت NAA 0-رلتملغم ملغم1، تلتها معاملة %30والتي أعطت اقل نسبة لتكون الكالس بلغت NAA 0-رلتملغم BA +4 0-رلت BA +4 1وأعطت معامالت ) %80نسبة تكون للكالس بلغت NAA 0-رلتملغم BA +1 0-رلت NAA 1.5 و BA +1 NAA 1.5و BA +2 NAA 50نسب لتكون الكالس بلغت 0-رلت( ملغم . على التتابع % 70و 60و 0-رلتملغم BA +2 0-رلتملغم 1.5أن معاملة 3: تشير النتائج الموضحة في الجدول (غمالوزن الطري ) NAA أسابيع من الزراعة وبلغ 8أعطت أعلى وزن طري للكالس المستحث من األوراق بعد مرور التي أعطت NAA 0-رلتملغم BA +1 0-رلتملغم 1غم تلتها األوساط المجهزة بالتراكيز 1.131 اقل NAA 0-رلت ملغم BA +4 0-رلت ملغم 1غم، في حين أعطت معاملة 1.127متوسط وزن طري BA +1 1.5 و BA +2 NAA 1غم وأعطت معامالت 0.685متوسط وزن طري للكالس بلغ NAA 1.5و BA +4 NAA 0.733و 0.773 و 0.807متوسط وزن طري للكالس بلغ 0-رلتملغم بين المعامالت.، ولم تظهر نتائج التحليل اإلحصائي فروقاً معنوية غم على التتابع من األوراق ووزنه الطري والجاف نسبة تكون الكالس في D-2,4 مع Kinetin. تأثير اضافة 2جدول ال MSأسابيع من الزراعة على وسط 8بعد مرور Salwanللشليك صنف 0-لترتراكيز منظمي النمو ملغم الوزن الجاف )غم ( الطري )غم(الوزن نسبة تكون الكالس % Kinetin 2,4-D 1 1 a 90 a 2.560 a 0.145 2 ab 70 b 1.595 a 0.146 4 b 40 c 0.496 b 0.075 1.5 1 ab 80 a 2.137 a 0.145 2 ab 60 b 1.324 b 0.083 4 a 90 c 0.803 b 0.067 .%5حسب اختبار دنكن متعدد الحدود عند مستوى احتمال ب*األرقام التي تحمل أحرف متشابهة التختلف فيما بينها معنويا http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ وآخرانعبيد DJAS ،01(2 :)004-022 ،2102 مجلة ديالى للعلوم الزراعية 000 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ في صفة الوزن الجاف للكالس NAAو BA: تبين نتائج تأثير التداخل بين الوزن الجاف )غم( أعطت أعلى وزن للكالس المستحث من NAA 0-رلتملغم BA +1 0-رلتملغم 1( أن معاملة 3)الجدول 0-رلتملغم BA +2 0-رلتملغم 1غم، تلتها معاملة 0.089أسابيع من الزراعة بلغ 8األوراق بعد مرور NAA 1 غم، في حين أعطت األوساط المجهزة بتركيزي 0.085التي أعطت متوسط وزن جاف بلغ 1.5غم وأعطت معامالت 0.045اقل وزن جاف للكالس بلغ NAA 0-رلتملغم BA +4 0-رلتملغم غم 0.058و 0.077 و 0.071متوسط وزن جاف للكالس بلغ 0-رلتملغم 4أو 2أو BA +1 0-رلتملغم ، ولم تظهر نتائج التحليل اإلحصائي فروقاً معنوية بين المعامالت.على التتابع النمو الجيد للكالس في وسط الزراعة يحصل بفعل التوازن الفسيولوجي لنسيج الكالس والمدعم أي منهما على حساب اآلخر سوف يؤثر سلبا في نمو بتركيز األوكسين والسايتوكاينين، وان زيادة تركيز (، وان إضافة كال منظمي النمو إلى وسط الزراعة ضروري الستحثاث الكالس Mineo،1990الكالس ) (. Miller، 1957 و Skoog) إذ يعمل السايتوكاينين بتوافر األوكسين بوصفه مفتاحاً لبدء االنقسام الخلوي المزروع إلى توليفات االوكسينات والسايتوكاينين قد يعود إلى اختالف اختالف استجابة الجزء النباتي محتواها الداخلي من الهرمونات النباتية وهذه بدورها تؤثر على بلوغ التركيز المثالي في استحثاث الكالس من األوكسين أو السايتوكاينين عند إضافتهما إلى الوسط الغذائي. في نشوء الكالس ونموه NAAمع .Kin: تأثير اضافة 4 - 3 إن أعلى نسبة BAو .Kinتأثير تداخل 4في الجدول الموضحة تظهر النتائج :نسبة تكون الكالس ، في حين بلغت اقل نسبة NAA 0-لترملغم Kin. +1 0-ملغم لتر 1في معاملة %60لتكون الكالس بلغت وبلغت نسبة تكون NAA 0-لترملغم Kin. +1 0-لترملغم 1.5في األوساط المجهزة بتركيزي 20% لجميع المعامالت األخرى، ولم تظهر نتائج التحليل اإلحصائي فروقاً معنوية بين المعامالت. %50الكالس وجود فروق معنوية بين NAAمع .Kinتأثير تداخل 4ل الجدو فينتائج التبين :الوزن الطري )غم( ملغم 1.5أسابيع من الزراعة إذ تفوقت المعاملة 8المعامالت في صفة الوزن الطري للكالس بعد مرور ، في حين 0-قطعة ورقية غم 2.107على المعامالت جميعاً وأعطت NAA 0-لترملغم Kin. +1 0-لتر .Kin 0-لترملغم 1.5ائي المجهز بتركيز غم في الوسط الغذ 0.337بلغ اقل وزن طري للكالس المستحث NAA 0-لترملغم 2أو Kin. +1 0-لترملغم 1وبفارق معنوي عن معاملتي NAA 0-لترملغم 2+ غم على التتابع، في حين أعطت األوساط المجهزة بتركيز 1.010و 1.230اللتين أعطتا وزناً طرياً بلغ غم 0.443و 0.596متوسط وزن طري للكالس بلغ NAA 0-لترملغم Kin. +4 0-لتر ملغم 1.5أو 1 (. 0على التتابع )صورة من األوراق ووزنه الطري والجاف المستحث نسبة تكون الكالس في NAA مع BA. تأثير اضافة 1جدول ال MSأسابيع من الزراعة على وسط 8بعد مرور Salwanللشليك صنف (0-تراكيز منظمي النمو )ملغم لتر الوزن الجاف )غم ( الوزن الطري )غم( نسبة تكون الكالس % BA NAA 1 1 a 80 a 1.127 a 0.089 2 a 90 a 0.807 a 0.085 4 ab 50 a 0.685 a 0.045 1.5 1 ab 60 a 0.773 a 0.071 2 ab 70 a 1.131 a 0.077 4 b 30 a 0.733 a 0.058 .%5حسب اختبار دنكن متعدد الحدود عند مستوى احتمال ب*األرقام التي تحمل أحرف متشابهة التختلف فيما بينها معنويا http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ وآخرانعبيد DJAS ،01(2 :)004-022 ،2102 مجلة ديالى للعلوم الزراعية 021 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ االفرع النسيجية للنوع – Aأسابيع من الزراعة، 8بعد مرور MS. كالس شليك ناشئ على وسط غذائي 1صورة vesca المستخدمة في نشوء الكالسB – كالس النوع vesca 3-لتر ملغم 3 للوسط المضاف له.Kin +1 3-لتر ملغم NAA ،C- نبات النوعvesca النامي في الظلة، D – الصنفSalwan 3-لتر ملغم 1إضافة في وسط مضاف له. Kin D-2,4 3-ملغم لتر 1+ إلى ظهور فروق NAAمع .Kin( حول تأثير تداخل 4ل تشير النتائج )الجدو :)غم( الوزن الجاف ، إذ تفوقت المعاملة أسابيع من الزراعة 8معنوية بين المعامالت في صفة الوزن الجاف للكالس بعد مرور في غم، 0.127في إعطاء أعلى قيمة للوزن الجاف بلغت NAA 0-ملغم لتر Kin +1. 0-لتر ملغم 1.5 NAA 0-ملغم لتر Kin. +4 0-ملغم لتر1.5غم في الوسط المجهز بتركيز 0.035حين بلغت اقل قيمة اللتين أعطتا متوسط وزن NAA 0-ملغم لتر 2أو Kin. +1 0-لتر ملغم 1وبفارق معنوي عن معاملتي 0-ملغم لتر Kin. +4 0-ملغم لتر 1 اوأعطت معاملت على التتابع غم 0.066و 0.099جاف للكالس بلغ NAA 0-ملغم لتر 1.5و Kin. +2 0-ملغم لتر NAA غم 0.039و 0.049متوسطاً للوزن الجاف بلغ على التتابع. من ووزنه الطري والجاف المستحث نسبة تكون الكالس في NAA مع Kinetin. تأثير تداخل 4جدول ال MSأسابيع من الزراعة على وسط 8بعد مرور Salwanاألوراق للشليك صنف 0-لتر تراكيز منظمي النمو ملغم الوزن الجاف )غم ( الوزن الطري )غم( نسبة تكون الكالس % Kinetin NAA 1 1 a 60 b 1.230 b 0.099 2 a 50 bc 1.010 c 0.066 4 a 50 bcd 0.596 cd 0.049 1.5 1 a 20 a 2.107 a 0.127 2 a 50 d 0.337 cd 0.039 4 a 40 cd 0.443 d 0.035 .%5حسب اختبار دنكن متعدد الحدود عند مستوى احتمال ب*األرقام التي تحمل أحرف متشابهة التختلف فيما بينها معنويا A B C D http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ وآخرانعبيد DJAS ،01(2 :)004-022 ،2102 مجلة ديالى للعلوم الزراعية 020 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ إلى حصول حالة NAAقد يعود السبب في نجاح نشوء الكالس ونموه عند تداخل الكاينتين مع ( إذ إن االوكسينات 1957) Millerو Skoog التوازن بين السايتوكاينين واالوكسين التي أشار إليها م في مهالنباتية لما لها من اثر بارز و والسايتوكاينينات تستخدم عادة في جميع تقنيات زراعة األنسجة استحثاث نسيج الكالس ونموه من جهة ونشوء وتضاعف الفروع الخضرية وتكوين الجذور عليها من جهة منظمات النمو تعد من العوامل األساسية لنجاح زراعة ( مما يؤكد أن 2008 وآخرون، Georgeأخرى ) األنسجة النباتية، وقد أتفقت بعض الدراسات إلى دور تداخل السايتوكاينين واالوكسين في نشوء الكالس NAA( عند زراعتهم األجزاء الورقية للشليك أن تداخل 2011وآخرون ) Karimونموه ومنها ما وجده (2010وآخرون ) Biswas، وقام %93.33نسبة تكون للكالس بلغت أعطى BAمع D-2,4و BAمع وآخرون Truongاستحثاث الكالس من زراعة نصل الورقة والعقدة وقطع المدادات للشليك، أما ب .حفزوا نشوء الكالس من البراعم الزهرية للشليك، فقد (2012) Meryctin: تظهر نتائج التحليل اإلحصائي فروقا معنوية بين المعامالت في كمية مركبMeryctin 163.56في إعطاء أعلى كمية بلغت vesca(، إذ تفوقت األوراق للنوع 0المفصول من العينات )الجدول ، في حين 0-مايكروغرام مل 127.05وبلغت vesca، تلتها كميتة في الجذور للشليك 0-مايكروغرام مل في الكالس المزروع على األوساط الغذائية المجهزة بمنظمي 0-مايكروغرام مل 48.19بلغت اقل كمية كمية لمركب vescaوإزهار الشليك Salwan، وأعطت األوراق للصنف BA +NAAالنمو Meryctin على التتابع، في حين أعطى الكالس المزروع 0-مايكروغرام مل 96.48و 108.04بلغت محتوى Kin. +NAAو Kin. +2,4-Dو D-2,4على األوساط الغذائية المجهزة بمنظمات النمو .على التتابع 0-مايكروغرام مل 106.82و 50.66و 87.90بلغت Meryctinلمركب Ellagic acid تفوق كالس الشليك 0: تبين النتائج الموضحة في الجدولSalwan المجهز بـKin. + NAA تلتها أوراق الشليك 0-ملمايكروغرام 167.55وأعطت ،vesca 156.05التي أعطت ، 0-مل مايكروغرام 84.54وبلغت vesca، في حين بلغت اقل كمية له في أزهار 0-مل مايكروغرام و Kin +2,4-Dو . D-2,4وأعطى الكالس المزروع على األوساط الغذائية المجهزة بمنظمات النمو 131.68و 106.95بلغت Ellagic acidكمية لمركب vescaوجذور الشليك Salwanأوراق الصنف على التتابع، في حين لم تظهر أي قراءة للمركب في الكالس 0-مل مايكروغرام 130.46و 118.23و فروقا معنوية بين المعامالت. t، وبينت نتائج اختبار BA+NAAـالمزروع على الوسط الغذائي المجهز ب Camphene :( 0 الجدولتوضح النتائج ) كمية مركب انCamphene ًالمفصولة من الكالس فروقا المزروع على الوسط الغذائي vesca، وتفوق الكالس للشليك tوفق اختبار على معنوية بين العينات ، تلتها األوراق والجذور 0-مل مايكروغرام 230.51بكمية بلغت Kin. +NAAالمجهز بمنظمي النمو على التتابع، في حين بلغت اقل كمية 0-مل مايكروغرام 220.71و 207.23وأعطت vescaللنوع ، وأعطى الكالس المزروع على األوساط الغذائية vescaفي أزهار الشليك 0-مل مايكروغرام 24.35 كمية لمركب Salwanو وأوراق الصنف Kin +2,4-Dو . D-2,4المجهزة بمنظمات النمو Camphene على التتابع، في حين لم تظهر أي 0-مل مايكروغرام 68.43و 141.14و 40.091بلغت .BA +NAAقراءة للمركب في عينة الكالس المزروع على الوسط الغذائي المجهز بـ http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ وآخرانعبيد DJAS ،01(2 :)004-022 ،2102 مجلة ديالى للعلوم الزراعية 022 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ من الكالس واالجزاء النباتية لنبات HPLC المركبات الفينولية المفصولة بتقنية الفصل الكروموتوكرافي .5جدول ال Salwanوالصنف Fragaria vescaالشليك Caffic acid : ( فروقاً معنوية بين االجزاء النباتية المختلفة . توضح نتائج التحليل اإلحصائي )الجدول المفصولة من عينات الشليك، وتفوقت األوراق للنوع Caffic acidفي كميات مركب tوفق اختبار على vesca نفسه ، تلتها كميتة في كالس النبات 0-مل مايكروغرام 277.53في أعطاء أعلى كمية بلغت ، 0-ملمايكروغرام 206.24وبلغت Kin +NAAالمزروع على الوسط الغذائي المجهز بمنظمي النمو . ، وأعطى الكالس vescaفي أزهار الشليك 0-مل مايكروغرام 34.36في حين بلغت اقل كمية للمركب وأوراق الصنف BA +NAAو Kin. +2,4-D المزروع على الوسط المجهز بمنظمات النمو Salwan وجذور النبات الحقليvesca كمية لمركبCaffic acid 98.48و 134.75و 133.60بلغت ، في حين لم تظهر قراءة للمركب في الكالس المزروع على على التتابع 0-ملمايكروغرام 141.49و .(0الشكل ) D-2,4وسط مجهز ب Ferulic acid: تفوق الجذور للشليك إلى .تشير النتائج الموضحة في الجدولvesca في أعطاء ، تلتها كميتة في األوراق واألزهار 0-مل مايكروغرام 135.60بلغت Ferulic acidأعلى كمية لمركب ، في حين بلغت اقل 0-مل مايكروغرام 118.36و 104.22النامي في الحقل التي أعطت vescaللنوع المزروع على الوسط الغذائي المجهز vescaفي الكالس للنوع 0-مل مايكروغرام 52.32كمية للمركب + .Kinو D-2,4لكل من Salwan، وأعطت عينات الكالس للشليك Kin. +NAAبمنظمي النمو D-2,4 على التتابع، أما محتوى المركب في أوراق الصنف 0-ملمايكروغرامSalwan فقد بلغت .معنوية بين المعامالت ق فرو t، وبينت نتائج اختبار 0-مل مايكروغرام 95.83 Gallic acid: تفوق األوراق للنوع .تبين النتائج الموضحة في الجدولvesca في محتواها من مركب Gallic acid في حين بلغت اقل كمية للمركب في الكالس للصنف 0-مل مايكروغرام 134.21وأعطت ، Salwan 2,4المزروع على األوساط الغذائية المجهزة بمنظمات النمو-D وBA + NAA وبلغت المزروع على وسط Salwanعلى التتابع، وأعطى الكالس للشليك 0-مايكروغرام مل 41.48و 45.20 الفينولية المركبات نباتيةال العينات Alpha penine p-hydroxy benzoic acid Meryctin Ellagic acid Camphene 2,4-D Salwan callus 28.66 59.63 87.90 106.950 140.09 2,4-D+Kin. Salwan callus 52.81 45.18 50.66 131.68 141.14 NAA+BA Salwan callus 42.51 -- 48.19 -- -- Salwan leave 34.06 115.11 108.04 118.23 68.43 NAA +Kin. vesca callus 35.92 42.66 106.82 167.55 230.51 Vesca leave -- 86.22 163.56 156.05 207.23 Vesca roots -- 124.90 127.05 130.46 220.71 Vesca flowers 130.34 106.28 96.48 84.54 24.35 T 3.426 n.s **6.405 **7.288 **11.922 **4.930قيمة اختيار http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ وآخرانعبيد DJAS ،01(2 :)004-022 ،2102 مجلة ديالى للعلوم الزراعية 023 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ Kin. +2,4-D وأوراق الصنفSalwan كمية لمركبGallic acid 84.44و 63.21بلغت المزروع على الوسط vescaعلى التتابع، اما محتوى المركب في الكالس للنوع 0-مايكروغرام مل 59.15فقد بلغت vescaوالجذور واألزهار للشليك Kin. +NAAالغذائي المجهز بمنظمي النمو وجود فروقاً معنوية بين tوبينت نتائج اختبار ،على التتابع 0-ملمايكروغرام 70.89و 64.89و المعامالت. Comarins: وفق على معنوية بين العينات وجود فروق (. تظهر نتائج التحليل اإلحصائي )الجدول في إعطاء أعلى كمية له بلغت vesca، تفوقت أزهار الشليك Comarinsفي كمية مركب tاختبار العينات األخرى، في حين أعطى الكالس المزروع ةوبفارق معنوي عن بقي 0-مايكروغرام مل 208.29 اقل كمية للمركب Kin. +NAAو Kin. +2,4-Dعلى األوساط الغذائية المجهزة بمنظمات النمو وأعطت أوراق vescaو Salwanعلى التتابع للصنفين 0-روغرام ملمايك 17.54و 38.15بلغت المزروع على االوساط الغذائية Salwanوالكالس للنوع vescaوجذور الشليك Salwanالصنف 51.87و 93.82و 83.04بلغت Comarinsكمية لمركب BA + NAAو D-2,4 ـالمجهزة ب .على التتابع 0-مل مايكروغرام 58.18و Quercetin: تفوق أزهار الشليك إلى .تشير النتائج الموضحة في الجدولvesca 213.70وأعطت المزروع على الوسط الغذائي المجهز بمنظمي Salwan، تلتها عينات الكالس للصنف 0-مل مايكروغرام على التتابع 0-مايكروغرام مل 118.89و 191.99ذ أعطت إ vescaوأوراق النوع BA +NAAالنمو في حين بلغت اقل كمية لمركب العينات األخرى ةعلى بقي tوفق اختبار على وبفارق معنوي Quercetin في الكالس المستحث من الوسط الغذائي المجهز بمنظمات النموKin. +2,4-D وKin. + NAA للصنفينSalwan وvesca على التتابع، أما 0-مل مايكروغرام 22.51و 29.91والتي أعطت وأوراق النباتات النامية في D-2,4المزروع على وسط Salwanمحتوى المركب في الكالس للصنف على 0-مايكروغرام مل 80.12و 63.82و 52.95بلغت فقد vescaالحقل لنفس الصنف وجذور الشليك . التتابع من الكالس واالجزاء النباتية لنبات HPLC المركبات الفينولية المفصولة بتقنية الفصل الكروموتوكرافي .6جدول ال Salwanوالصنف Fragaria vescaالشليك الفينولية مركباتلا النباتيةالعينات Caffic acid Ferulic acid Gallic acid Comarins Quercetin Catachin 2,4-D Salwan callus -- 94.97 45.20 51.87 52.95 74.04 2,4-D+Kin. Salwan callus 133.60 99.07 63.21 38.15 29.91 48.90 NAA+BA Salwan callus 134.75 77.03 41.48 58.18 191.99 62.07 Salwan leave 98.48 95.83 84.44 83.04 63.82 48.43 NAA +Kin. vesca callus 206.24 52.32 59.15 17.59 22.51 -- vesca leave 277.53 104.22 134.21 122.51 118.89 64.26 vesca roots 141.49 135.60 64.89 93.82 80.12 -- vesca flowers 34.36 118.36 70.89 208.29 213.70 32.27 T **4.995 **10.903 **6.785 **3.942 **3.770 **9.019قيمة اختيار http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ وآخرانعبيد DJAS ،01(2 :)004-022 ،2102 مجلة ديالى للعلوم الزراعية 024 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ Salwanو Fragaria vescaمنحنيات الفينوالت المفصولة بتقنية الكروماتوكرافيا من عينات نبات الشليك .3شكل ال ،D+ Kin. Salwan callus-2,4 -، دvesca leave-، ج D Salwan callus-2,4 -المحلول القياسي، ب -) أ -ن NAA + Kin. vesca callus-، مvesca leave -ل ،vesca root -و NAA+BA Salwan callus -هـ vesca flower ) Catachin( تفوق الكالس للصنف . : تظهر النتائج )الجدولSalwan المزروع على الوسط الغذائي 0-مل مايكروغرام 74.04آذ بلغت Catachinفي أعطاء أعلى كمية لمركب D-2,4المجهز بمنظم النمو BA +NAAالمزروع على الوسط الغذائي المجهز بمنظمي النمو Salwanتلتها عينات الكالس للصنف على التتابع 0-مل مايكروغرام 64.26و 62.07التي أعطت كمية للمركب بلغت vescaوأوراق الشليك واألوراق النامية في Kin. +2,4-Dوبلغ محتوى المركب في الكالس المزروع على وسط مجهز بـ على التتابع، في حين لم تظهر قراءة 0-مل مايكروغرام 48.43و Salwan ،48.90الحقل للصنف ، vescaوجذور الشليك Kin. +NAAفي معاملتي الكالس النامي على وسط Catachinلمركب فروقاً معنوية بين المعامالت. tوبينت نتائج اختبار و http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ وآخرانعبيد DJAS ،01(2 :)004-022 ،2102 مجلة ديالى للعلوم الزراعية 020 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ بينت نتائج تقدير المركبات الفينولية من أنسجة الكالس واألنسجة النامية في الحقل إن تراكيز المواد . وهذه المفصولة كانت بمستويات عالية في األنسجة النامية في الحقل قياساً بكمياتها في أنسجة الكالس ة بكميات أعلى من األنسجة البرنكيمية النتيجة تعد طبيعية كون األنسجة المتخصصة تنتج المركبات الثانوي في كالس Campheneو Ellagic acid، باستثناء مركب (Ramawat ،2004) غير المتخصصة D-2,4. وبينت نتائج إضافة االوكسينات Salwanفي كالس الشليك Catachinومركب vescaالشليك معظم زاد مستويات D-2,4إلى إن إضافة الكاينتين ،.Kinو BAمع السايتوكاينينات NAAو ، في حين لم 0-مل مايكروغرام 133.60الى Caffic acidالمركبات المفصولة وأدى إلى رفع تركيز فقد BAمع NAAمنفرداً. أما الكالس المزروع على وسط مجهز بـ D-2,4تظهر له قراءة عند إضافة تبين ان مستويات المركبات المفصولة قد انخفضت في معظم المركبات المفصولة ولم تظهر قراءات في حين أن مركب ، Campheneو Ellagic acidو P-hydroxy benzoic acidلمركبات Quercetin في هذه المعاملة. وهذه النتائج تشير إلى مستويات %400زاده تركيزه بنسبة تصل إلى ابة مختلفة تبعاً لنوع المركب وعالقته بمنظمات النمو النباتية والتي تلعب دوراً مهماً في زيادة أو استج (. Ramawat،2004تقليل إنتاج المركبات الثانوية ) المصادر الخلوية . التقدير الكمي لمركب الدايوسجنين في الكالس والمعلقات2004الزبيدي، لمى ذنون صالح . بتقنية كروماتوغرافيا graecum Trigonella foenum الحلبة .ت الشعرية لنباجذور وال جامعة الموصل، العراق. - التربية السائل العالي الكفاءة. رسالة ماجستير، كلية . تطبيقات في تصميم وتحليل التجارب، دار الحكمة 1990الساهوكي، مدحت مجيد وكريمة وهيب. ، العراق.الموصل للطباعة والنشر، ، جامعة الموصل، العراق.. إنتاج الثمار الصغيرة. دار الكتب والنشر2000 السعيدي، إبراهيم حسن. . استجابة نبات الشليك لإلكثار، ونشوء الكالس، وإنتاج بعض 2102 العزاوي، عماد خلف نجم. ، جامعة ديالى ، كلية التربية للعلوم الصرفة،اجستيرالحي، رسالة م المركبات الطبية خارج الجسم العراق. .مصر ،دار الكتب العلمية للنشر والتوزيع ،زراعة األنسجة 2003. فكري جالل محمد. ،فهمي . المفاهيم الرئيسية في زراعة الخاليا واألنسجة 1990.عمر المطلب سيد ومبشر صالح عبد ،محمد العراق. ،جامعة الموصل ،وزارة التعليم العالي والبحث العلمي ،للنبات واألعضاء Aaby, K. D. E. and G. Skrede. 2007. Characterization of phenolic compounds in Strawberry (Fragaria × ananassa) fruits by different HPLC detectors and contribution of individual to total antioxidant capacity. J. Agric Food Chem. 55: 4395–4406. Aharoni, A. CHR. D., HA. Verhoeven, CA. Maliepaard, G. Kruppa, R. Bino and DB. Goodenow. 2002. Nontargeted metabolome analysis by use of fourier transform ion cyclotron mass spectrometry. OMICS 6: 217–234. Aprona, P. 2006. Micropropagation and field evaluation of strawberry in bangladish, M. Sc. Thesis, Department of Botany, University of Rajishahi, Bangladesh. http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ وآخرانعبيد DJAS ،01(2 :)004-022 ،2102 مجلة ديالى للعلوم الزراعية 02. http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ Biswas, M. K., U. K. Roy, I. Rafiul and H. Monzur. 2010. Callus culture from leaf blade nodal and runner segments of three strawberry (Fragaria sp) clones. Turk. J. Biol. 34: 75- 80. Drawert, F. and R. G. Berger.1983. Biogenesis of arema compound in plant and fruits XVIII: Influence of particle size on aroma biosynthesis in fruit essence. Z. Lebensm Unters forsch. 176: 275- 280. Dodds, J. H. and L. W. Roberts .1985 . “Experiments in Plant Tissue Cultures”. Cambridge University Press, UK. George, E. F., M. A. Hall and G. D. Klerk. 2008. Plant Propagation by Tissue Culture. 3rd edition. published by springler, pp: 1 - 479. Hadi, S. M. 1999. Production vinblastine and vincristine from callus tissue of catharnthus roseus using plants tissue culture technique. M. Sc. Thesis Collage of Science, Baghdad University, Iraq. Hanhineva, K., I. Rogachev, H. Kokko, S. Mintz-Oron, I. Venger, S. Karenlampi and A. Aharoni. 2008. Non-targeted analysis of spatial metabolite composition in strawberry (Fragaria × ananassa) flowers. Phytochemistry, 69: 2463–2481. Hong, Y. C. A., L. C. Huang, G. A. Reineccius, S. K. Harlander and T. P. Labuza. 1990. Production of aroma compounds from strawberry cell suspension cultures by addition of precursors. Plant Cell Tissue and Organ Cult. 21(3): 245 -251. Hukkanen, A. T., HI. Kokko, AJ. Buchala, GJ. McDougall, Stewart D. S. O. Karenlampi and R. O. Karjalainen. 2007. Benzothiadiazole induces the accumulation of phenolics and improves resistance to powdery mildew in Strawberries. J. Agric. Food Chem. 55: 1862–1870. Karim, M. R., M. Abdul Aziz, U. K. Roy, M. A. Hoque and M. M. Hossain. 2011. In vitro response of strawberry (Fragaria ananassa Duch) for callus induction and shoot regeneration. Int. J. Agr. Agri. Res., 1(1): 29-36. Khatun, M. M., M. H. Ali and N. V. Desamero. 2003. Effect of genotype and culture media on callus formation and plant regeneration from mature seed scutella culture in rice. Plant Tiss. Cult. 13(2): 99-107. Maatta-Riihinen, K. R., A. Kamal-Eldin and R. Trrnen. 2004 . Identification and quantification of phenolic compounds in berries of Fragaria and Rubus species (Family Rosaceae). J. Agric. Food Chem. 52: 6178–6187. Mineo, L. 1990. Plant Tissue Culture Techniques. Pp: 151-174. In: C.A. Goldman, (Editor), Tested Studies for Laboratory Teaching. V. 11. http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ وآخرانعبيد DJAS ،01(2 :)004-022 ،2102 مجلة ديالى للعلوم الزراعية 020 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ Proceeding of the 11th workshop/conference of the association for biology laboratory education (ABLE), 195 p. Mohammad, A. M. S. and S. A. Abood. 1989. Propagation of lettuce (Lactuca sativa L. c.n. longiflora) by tissue culture. Agri. Biol. Chem., 51: 1320-1324. Murashige, T. and F. Skooge. 1962. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue culture. Physiol Plant. 15: 473 -497. Park, S. V., M. R. Uddian, H. xu Y. K. Kim and S. Y. lee. 2008. Biotechno- logical applications for rosmarinic acid production in plant. Afr. J. of Biot. 7(25): 4954 – 4965. Purohit, S. S. 1999. Agricultural Biotechnology. Agro Botanica, J. N. V. Yas Nagger, Bikaner, India. Ramawat, K. G. 2004. Plant Biotechnology. S. Chand and Company LTD New Delhi, India. SAS. 1996. Statistical Analysis System, release7, SAS Institute Inc. Cary. N.C. USA. Skoog, F. and C. O. Miller. 1957. Chemical regulation of growth and organ formation in plant tissues cultured in vitro. symp. Soc. Exp. Biol. 11: 118 – 148. Trigiano, R. N. and D. J. Gray. 1996. Plant Tissue Culture Concepts: An Laboratory Exercises. Boca Raton, Fl CRC Inc., pp: 11-17. Truong, X. N., Y. Susong and M. P. Sung. 2012. Haploid plant production through another culture in Day-Neutral strawberry (Fragaria ananassa Duch) J. ISSAN. 18(1): 173-184. Wiesman, Z., J. Riov, and E. Epstein. 1989. Characterization and rooting ability of indol-3-butyric acid conjugates formed during rooting of mung bean cuttings. Plant Physiol., 91: 1080-1084. http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ وآخرانعبيد DJAS ،01(2 :)004-022 ،2102 مجلة ديالى للعلوم الزراعية 022 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ EFFECT OF PLANT GROWTH REGULATORS AND TYPE OF EXPLANT ON PHENOLIC PRODUCTION FROM STRAWBERRY PLANT IN VIVO AND IN VITRO Ayad Assi Obaid1,3 Wessam Malek Dawood2 Emad Khalaf Al-Azawy2 1Dept. of Horticulture, College of Agric., Univ. of Diyala, Iraq. 2College of Education for Pure Sciences, Univ. of Diyala, Iraq. 3Corresponding author: Ayadassi73@gmail.com ABSTRACT This experiment was conducted in the plastic house and the Lath house /College of Agriculture/ Diyala University while the tissue experiment was conducted in the plant tissue culture lab./ Horticulture Dept./ College of Agriculture/ Diyala University. The aim of this research is to study the effect of plant growth regulators on initiation of callus and phenolic compound in callus and comparing them with the plants in the field. The effect of the interaction of 2,4- D with Kin. or BA. The result showed when the medium supplemented with 1 mg l-1 Kin. + 1 or 2 mg l-1 2,4-D increase the fresh and dry weight of callus to 2.560 and 0.146 g respectively. The results of the effect of interaction NAA with BA or Kin. The result showed when the medium supplemented with 1.5 mg l-1 Kin. + 1 mg l-1 NAA increase the fresh and dry weight of callus to 2.107 g and 0.127 g respectively. On the experiment of evaluating phenolices from the callus and the planted tissues in the field, the results showed that the particular tissues gave the high levels of phenolices compounds as compared to callus tissues. The leaf of Fragaria vesca gave high quantity of merycitn compounds and caffic acid and gallic acid. The flowers of the same type gave the quantity of alpha penine compounds, comarine and quercetin. The roots of the same type gave high quantity of P-hydroxy benzoic acid and ferulic acid. The callus of the same type gave the high quantity of camphene compound and ellagic acid, while Salwan type gave high quantity of catachin compound. Key words: Strawberry, Callus, Plant Growth Regulators, Phenolic Compounds. http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ mailto:Ayadassi73@gmail.com