الزبيدي ويوسف 2027، 43 – 63 (:2)9مجلة ديالى للعلوم الزراعية، 63 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ 1 * المرضية البكتريا لبعض انواع المضادة Propolisالعكبر مستخلصات فعالية تقييم فاطمة عمران يوسف نجم عبد هللا جمعة الزبيدي najm_alzubaidy@yahoo.com omran@yahoo.com fatima89_ ، العراقجامعة ديالى -كلية التربية للعلوم الصرفة -قسم علوم الحياة المستخلص Propolisأجريت هذه الدراسة في مدينة بعقوبة، بهدف معرفة التأثير التثبيطي لمستخلصات العكبر Escherichia coliالعزالت البكتيرية، شملت بكتريا على النمو البكتيري لثالث من ، تضمنت الدراسة تحضير ثالثة انواع Pseudomonas aeruginosaو Staphylococcus aureusو ، 00، 20، 20من المستخلصات هي المستخلص الكحولي والمستخلصين المائي الحار والبارد وبالتراكيز ، باستعمال طريقة الحفر باألكار، تم مقارنة نتائج التثبيط لمستخلصات العكبر مع الفعالية 2-ملغم مل 200 CiprofloxacinوAmoxicillin و Nalidixic acidالتثبيطية لسبعة من المضادات الحيوية وهي: باستعمال اختبار الحساسية للمضادات Ampicillin و Trimethoprimو Amikacinو Cefotaximeو 17.19بقطر تثبيط بلغ Staph. aureusية، أظهرت نتائج الدراسة ان العكبر ثبط نمو عزالت بكتريا الحيو بقطر تثبيط بلغ Ps. aeruginosaملم ثم بكتريا 15.02بقطر تثبيط بلغ E. coliملم ثم تليها بكتريا ملم. 14.61 .E.coli ، Staphylococcus aureus ،Seudomonas aeruginosaالعكبر، تثبيط، الكلمات المفتاحية: المقدمة (Polis)دفاع و (Pro)، معناها دفاع المدينة، فمعنى اطلقها ارسطو اصلها اغريقي Propolisكلمة هوو، وقد يدعى وسخ الكواب (bee glue)معناه مدينة، ويسمى باللغة العربية العكبر، او غراء النحل من مختلف انواع النباتات Apis melliferaعبارة عن مادة صلبة راتنجية تنتج بوساطة حشرة النحل ذلك لمنع ،واالشجار، السيما اشجار الصنوبر وخشب الحور لسد الفتحات والثقوب الموجودة في خلية النحل مادة معقدة (Propolis)العكبر . (Burdock ،1998دخول مختلف انواع الممرضات الى داخل الخلية ) راتنجات %50مركب( تحتوي بصورة عامة على 200)اكثر من التركيب بوصفها خليط من مواد متعددة (Resins) شمع %30و(Wax) دهون اساسية %10و(essential oils) حبوب لقاح %5و(Pollen) خرون، آو Bankovaمركبات عضوية مختلفة مثل السكريات والفيتامينات واالحماض االمينية ) %5و (.2002خرون، آو Pietta؛ 2000 استخدم العكبر في الحضارات القديمة المصرية واالغريقية لعالج االصابات الجلدية وتقرحات الفم، ان مشكلة (. 2005خرون،آو Kosalicومازال حتى اليوم يستخدم في العالج ومستحضرات التجميل ) مقاومة غالبية االنواع الجرثومية للمضادات الحيوية تعد من اهم المشاكل التي ادت بالباحثين الى ايجاد بديل لهذه المضادات بهدف التغلب على االمراض الجرثومية وايجاد فرص اخرى الكتشاف عالجات اكثر فعالية ت الحيوية المستخدمة لها اضرار جانبية كثيرة في عالج االصابات الجرثومية، فضالً عن ان غالبية المضادا وعديدة بجانب اثمانها الباهظة، وان االستمرار في استخدامها لفترة طويلة يؤدي الى تناقص فعاليتها المضادة، وبالمقابل تؤدي الى زيادة مقاومة الجراثيم لفعل هذه المركبات،هذه كلها ادت بالمختصين الى .للباحث الثاني ماجستير رسالة من مستل *البحث 1 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ mailto:najm_alzubaidy@yahoo.com mailto:omran@yahoo.com mailto:omran@yahoo.com الزبيدي ويوسف 2027، 43 – 63 (:2)9مجلة ديالى للعلوم الزراعية، 67 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ ؛ 1999لية وذات اثار جانبية قليلة في مواجهة االصابات البكتيرية )حدادين، ايجاد بدائل اخرى اكثر فعا Digrak 2001خرون، آو.) من هنا جاءت محاوالت عديدة في مجال استكشاف االهمية الطبية للعكبر ومستخلصاته في العزالت .البكتيرية، لتوافره محلياً وبأسعار رخيصة المواد وطرائق البحث وتحضيرهاجمع العينات العكبر من فرع النحالين في محافظة ديالى، إذ تم 2024جمعت عينات العكبر خالل شهر تشرين الثاني سنة بالماء االعتيادي ثم بالماء المقطر لغرض التخلص من االتربة العالقة به، وترك في غسل عينات العكبر حدوث التعفن، ثم طحن بوساطة مطحنة الظل ليجـف بدرجة حرارة الغرفة مع التقليب المستمر لمنع لحين االستعمال )الخفاجي، ºم 4كهربائية، وحفظ المسحوق الناتج في عبوات جافة ومعتمة بدرجة حرارة 2000.) تحضير المستخلصات المستخلص المائي البارد على مل ماء مقطر معقم لكي يتم الحصول 200غم من المسحوق الجاف وأضيف الى 20تم وزن ، رشح المستخلص بورق ºم 60ساعة بدرجة 24المستخلص المائي، تركت في الحاضنة الهزازة لمدة دقائق بجهاز الطرد 20لمدة 2-دورة دقيقة 2000. عرض الراشح لالنتباذ بقوة Whatman NO.1ترشيح Rotary . بعدها عرض الراشح المتبقي للتبخير باستخدام المبخر الدوارCentrifugeالمركزي evaporator م 00–40تحت ضغط منخفض ودرجة حرارةº ثم جفف المتبقي كليا بوساطة الفرن ، كررت العملية مرات عدة لغرض الحصول على كمية كافية من ºم 40( بدرجة حرارة Ovenالكهربائي ) لحين ºم 4المستخلص. وضع المستخلص الناتج في قناني معتمة وحفظت في الثالجة بدرجة حرارة (.Chanda ،2003و Parekhاالستعمال ) المستخلص المائي الحار 200غم من مسحوق الجاف، اضيف له 20( وذلك بوزن 2996) Perzو Anesini اتبعت طريقة ، Whatman No.1دقيقة ثم رشح بوساطة ورق ترشيح 60مل من الماء المقطر المغلي وتركت لمدة . Centrifugeدقائق بجهاز الطرد المركزي 20لمدة 2-ورة دقيقةد 2000عرض الراشح لالنتباذ بقوة تحت ضغط منخفض Rotary evaporatorبعدها عرض الراشح المتبقي للتبخير باستخدام المبخر الدوار °م 40( بدرجة حرارة Oven) ، ثم بخر المتبقي كليا بوساطة الفرن الكهربائيºم 00–40ودرجة حرارة لجاف للمستخلص، كررت العملية مرات عدة لغرض الحصول على كمية كافية للحصول على المسحوق ا لحين االستعمال. °م 4منه، ووضع الناتج في قناني معتمة وحفظ في الثالجة بدرجة حرارة المستخلص الكحولي %90اتبعت خطوات تحضير المستخلص المائي البارد نفسها ماعدا استخدم الكحول االثيلي بتركيز (. 2002خرون )آو Rhajaouiن الماء المقطر كما ذكرهبدال م المحلول االساس الخزين غم لكل من المستخلص المائي البارد 2بإذابة Stock solutionحضر المحلول االساس الخزين م ـملغ200ن الماء المقطر ليصبح تركيز المحلول ـل مـم 20ة في ـوالحار والكحولي المحفوظ في الثالج http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ الزبيدي ويوسف 2027، 43 – 63 (:2)9مجلة ديالى للعلوم الزراعية، 63 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ ( الحاوية Millipore Filter unit( عقمت المحاليل المركزة بتمريرها في وحدات الترشيح الدقيقو، 2-لـم تراكيز لكل ة، ثم حضرت من المحلول المركز اربعامايكروميتر 0.22على ورق ترشيح ذي قطر (.6299)العوادي، 2-ملغم مل 200، 00، 20، 20مستخلص، والمستخدمة في االختبارات الميكروبية وهي فحص الحساسية للمضادات الحيوية القياسية المعتمدة من قبل منظمة الصحة العالمية في اختبار حساسية Bauer–Kirbyاستعملت طريقة (.2992 ،خرونآو Vandepitteالبكتريا للمضادات الحيوية ) ساعة الى انبوبة اختبار معقمة تحوي على محلول 24مستعمرات بكتيرية نقية من عمر 0-2نقلت -2 لمدة بضع هم 67لعمل العالق البكتيري. حضن العالق بدرجة حرارة Normal salineالملح الفسيولوجي لذي يجب ( ا.Macfarland NO 0.0ساعات تمت مقارنة العكورة مع محلول ثابت العكورة القيـاسي ) . 2-خلية مل X 203 2.0ان يكون مقارباً الى مل من العالق البكتيري، اذ تم نشرالعالق على االطباق الحاوية 0.2بوساطة مسحة قطنية معقمة نقلت -2 على وسط مولر هنتون الصلب، ثم تركت االطباق لتجف لبضع دقائق بدرجة حرارة الغرفة. حضرت اقراص المضادات الحيوية، ووضعت على االطباق مع مراعاة ترتيبها بابعاد متساوية مع تعقيم -6 الملقط المستخدم في كل مرة وعملت ثالث مكررات. ساعة مباشرة بعد وضع االقراص على الوسط. 24ولمدة ºم 67 حضنت االطباق بدرجة حرارة -4 وية وهي المساحة الخالية من النمو الجرثومي حول االقراص لكل تم قياس اقطار التثبيط للمضادات الحي -0 قرص بالملميتر باستعمال مسطرة قياسية، ومقارنة النتائج مع تلك المذكورة في الجداول القياسية NCCLs) ،2007.) فحص تأثير مستخلصات العكبر في فعالية البكتريا االختبارية وذلك بحسب ما أشار Well Diffusion Assay methodاستخدمت طريقة االنتشار في الحفر ( وهي كاالتي:2002العكيلي ) ( ووضعها Loopتم تحضير العالق الجرثومي بأخذ عدد من المستعمرات البكتيرية بالناقل المعدني ) ( السائل لغرض تنشيط البكتريا، حضنت االنابيب BHIفي انابيب حاوية على وسط نقيع القلب والدماغ ) ساعة، وتمت مقارنة العالق البكتيري مع محلول ماكفرالند القياسي الذي يعتمد على درجة تعكر 23لمدة مل من العالق اذ يفضل ان يكون العدد الجرثومي 2العالق الجرثومي بحساب عدد الجراثيم المتوقعة لكل وية على وسط مولر ، بعدها نشر العالق الجرثومي على االطباق الحا2-خلية مل x 203 2.0مقارباً الى ( وباتجاهات عدة، يترك الطبق لفترة قصيرة حتى Sterile Swabهنتون أكار بوساطة المسحة المعقمة ) ملم في الوسط المزروع باستخدام الثاقب الفليني المعقم، وضعت التراكيز 0يجف، عمل حفرة بقطر في الحفر، 2-ملغم مل 200، 00، 20، 20للمستخلصات العكبر )المائية والكحولية( المحضرة مسبقاً وهي مل من التراكيز السابقة الذكر لكل حفرة وبالتسلسل وعملت أطباق السيطرة المتمثلة 0.2اضيف مقدار للمستخلصات الكحولية ، عملت %90بإضافة ماء مقطر للمستخلصات المائية ووضع الكحول بتركيز ساعة في الحاضنة، حددت فعالية 24لمدة °م 67ثالث مكررات لكل طبق، بعدها حضنت االطباق بدرجة كل تركيز من المستخلصات العكبر بقياس قطر التثبيط لكل مستخلص بوساطة مسطرة قياسية، مقارنة اقطار التثبيط لكل من مستخلصات العكبر )المائية والكحولية( مع أقطار التثبيط للمضادات الحيوية يد الدراسة.المستخدمة النواع البكتريا المرضية ق http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ الزبيدي ويوسف 2027، 43 – 63 (:2)9مجلة ديالى للعلوم الزراعية، 69 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ التحليل االحصائي ( الستخراج اقل فرق معنوي بين المعامالت SPSSحللت نتائج التجربة بحسب البرنامج اإلحصائي ) LSD (.2934)الراوي، 0.00عند مستوى احتمالية النتائج والمناقشة Cefotaximeأظهرت مقاومة عالية لكل من المضادات E. coli ان بكتريا 2بينت النتائج في الشكل وكان قطر التثبيط صفر لكل األنواع، إذ تتفق نتيجة TrimethoprimوAmoxicillin و Ampicillinو ، من جانب %200(، إذ كانت المقاومة 2000خرون )آو Arias( و2003الدراسة الحالية مع عبدالكاظم ) Amikacinو Ciprofloxacinلمضادات E.coliسية بكتريا اخر فان الدراسة الحالية أظهرت حسا على التوالي وهذا يتفق مع ماتوصل ملم 22.4و 23.40و 20.2فقد بلغ قطر التثبيط Nalidixic acidو فقد أظهرت اعلى مقاومة S. aureusاما بكتريا Bashir (2007.)( و2004)Chaudhari ليه إ ، إذ بلغ قطر التثبيط صفر وتتفق هذه Nalidixic acidو Trimethoprimو Cefotaximeللمضادات ملم وهذا 27.30فقد بلغ قطر التثبيط له Amikacin اما المضاد ،(2000النتيجة مع ماتوصل إليه المولى ) ملم وهذا يتفق مع 20.2فقد بلغ قطر التثبيط له Ciprofloxacin(، اما المضاد 2992يتفق مع محمود ) فقد بلغ Ampicillinو Amoxicillinملم، اما المضادات 24.2بلغ قطر التثبيط ( إذ 2002الجبوري ) فقد أظهرت مقاومة عالية P. aeruginosaملم على التوالي. اما بكتريا 20.32و 23.33قطر التثبيط لهما Nalidixicو Trimethoprimو Amoxicillinو Ampicilli و Cefotaximeلكل من المضادات acid وCiprofloxacin ( و2004إذ بلغ قطر التثبيط صفر هذا يتفق مع الموسوي )Abdullah خرون آو فقد بلغ قطر التثبيط له Amikacin، اما المضاد %200( إذ بلغت المقاومة 2002( ؛ العبيدي )2020) Goossens (2006.)ملم وهذا يتفق مع 20.30 ت البكتيرية المدروسة الفعالية التثبيطية للمستخلصات الكحولية والمائية . تأثير المضادات الحيوية في العزال1الشكل E. coliللعكبر تجاه بكتريا 0 5 10 15 20 25 لم م ية و حي ال ت دا ضا لم ل ية ط بي تث ال ر طا الق ا Escherichia coli Staphylococc us aureus http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ الزبيدي ويوسف 2027، 43 – 63 (:2)9مجلة ديالى للعلوم الزراعية، 40 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ ، فقد أظهر E. coliالعكبر يعطي تأثيراً تثبيطياً عالياً ضد بكتريا ان 2 بينت النتائج في الجدول أظهر خلص الماء البارد. والمستخلص الكحولي فعالية تثبيطية عالية يليه مستخلص الماء الحار ثم مست ملم ويعود 25.63بقطر تثبيطي بلغ 2-ملغم مل 200المستخلص الكحولي تأثيراً تثبيطياً عالياً عند التركيز ملغم 10(، اما عند التركيز 2004السبب الى قابلية المواد الفعالة للذوبان في المذيبات العضوية )زنكنة، ملم، ذلك الحتواء المستخلص الكحولي على اغلب 13.57فقد كان قطر التثبيط لذات المستخلص 2-مل والفالفونيدات المواد الفعالة، إذ يحتوي على الصابونين والقلويدات والكاليكوسيدات والزيوت الطيارة 20.33و 22.27و 26.04و 20.07و 23.33و 27.20والفينوالت والتانينات التي نسبها المئوية بلغت قابلية تثبيطية ضد البكتريا المرضية فهو يعمل على تثبيط إذ أن الصابونين لهعلى التوالي، %20.04و عمل االنزيمات المسؤولة عن التفاعالت االيضية االساسية بتداخلِه غير المخصص مع البروتينات مما (.2003خرون، آو Millsيؤدي الى عدم قدرتها على االستمرار ) أن الفعالية التثبيطية للمستخلص المائي الحار جاءت بالمرتبة الثانية أيضا 2ت النتائج في جدول أظهر 200بعد المستخلص الكحولي، إذ بينت النتائج ان المستخلص المائي الحار اعطى نسبة تثبيط عند التركيز مستخلص المائي الحار قطر فقد اعطى ال 2-ملغم مل 20ملم، اما التركيز 23.7بقطر تثبيط بلغ 2-ملغم مل ملم، وذلك الحتواء مستخلص الماء الحار على نسب اقل من المواد الفعالة مقارنةً بالمستخلص 22.0تثبيط الكحولي، إذ يحتوي على الفينوالت والفالفونيدات والكاليكوسيدات والزيوت الطيارة والقلويدات والتانينات على %3.6و 3.9و 9.2و 22.24و 22.46و 20.74و 23.36والصابونين التي نسبها المئوية بلغت التوالي، اذ ان الفينوالت تعمل على مسخ البروتين في البكتريا وايقاف فعل االنزيمات المسؤولة عن (.2000التفاعالت االيضية وبالتالي عدم قدرة البكتريا على االستمرار )السالمي، )ملم( E. coliر تجاه بكتريا. االقطار التثبيطية لمستخلصات العكب1الجدول اما المستخلص المائي البارد فقد اعطى اقل نسبة تثبيط إذ بينت النتائج ان المستخلص المائي البارد ملم على التوالي، يعزى سبب ذلك 20.4و 24.3أعطيا قطري تثبيط 2-ملغم مل 200،20عند التركيزين الى أن بعض المواد الفعالة ال تذوب بشكل جيد في الماء وإنما تذوب بصورة جيدة بالمذيبات العضوية حسب (، إذ يحتوي على الفينوالت والفالفونيدات والكاليكوسيدات 2004خرون، آو Abu-shanabما ذكره ) 20.37و 22.24و 24.76رة والتانينات والصابونين والقلويدات التي نسبها المئوية بلغت والزيوت الطيا طريقة النبات االستخالص ة طريق×النبات (2-التركيز ) ملغم مل 200 00 20 20 االستخالص العكبر 23.33 20.36 29.33 23.67 13.57 كحول 24.67 23.70 24.70 22.30 22.00 الماء الحار 22.30 24.30 22.30 20.30 20.40 الماء البارد 0.05LSD 2.76 2.40 20.02 29.34 20.69 26.20 22.32 العكبر التركيز × النبات 0.05LSD 2.33 2.40 × طريقة االستخالص التركيز 23.90 22.36 27.36 24.39 22.44 كحول 26.20 27.20 26.33 22.69 20.43 الماء الحار 20.02 22.47 20.22 9.29 3.29 الماء البارد 0.05LSD 2.40 2.33 26.69 27.40 26.94 22.30 20.63 متوسط التركيز 0.05LSD 2.33 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ الزبيدي ويوسف 2027، 43 – 63 (:2)9مجلة ديالى للعلوم الزراعية، 42 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ على التوالي، الفالفونيدات لها القابلية على النفاذ خالل الجدار الخلوي للبكتريا، %0.2و 3.2و 9.2و 9.04و اذ تعد مواد كيميائية مؤكسدة ذات مفعول سام لألحياءالمجهرية. Staph. auerusطية للمستخلصات الكحولية والمائية للعكبر تجاه بكتريا الفعالية التثبي ، فقد أظهر S. auerusالعكبر يعطي تأثيراً تثبيطياً عالياً ضد بكتريا ان 2 بينت النتائج في جدول المستخلص الكحولي فعالية تثبيطية عالية يليه مستخلص الماء الحار ثم مستخلص الماء البارد. وأظهر ملم ويعود 27.76بلغ بقطر تثبيطي 2-ملغم مل 200ستخلص الكحولي تأثيراً تثبيطياً عالياً عند التركيز الم -ملغم مل 10( اما عند التركيز 2004السبب الى قابلية المواد الفعالة للذوبان في المذيبات العضوية )زنكنة، ملم، ذلك الحتواء المستخلص الكحولي على اغلب المواد 14.53فقد كان قطر التثبيط لذات المستخلص 2 الفعالة، إذ يحتوي على الصابونين والقلويدات والكاليكوسيدات والزيوت الطيارة والفالفونيدات والفينوالت %20.04و 20.33و 22.27و 26.04و 20.07و 23.33و 27.20والتانينات التي نسبها المئوية بلغت قابلية تثبيطية ضد البكتريا المرضية، إذ يعمل على تثبيط عمل االنزيمات صابونين لهإذ أن ال على التوالي، المسؤولة عن التفاعالت االيضية االساسية بتداخلهُ غير المخصص مع البروتينات مما يؤدي الى عدم قدرتها (.2003خرون، آو Millsعلى االستمرار ) )ملم( Staphylococcus aureuر اتجاه بكتريا . االقطار التثبيطية لمستخلصات العكب2الجدول طريقة النبات االستخالص طريقة × النبات التركيز )ملغم. مل-2( 200 00 20 20 االستخالص العكبر 29.30 27.73 20.03 23.04 24.06 كحول 27.60 22.37 27.33 24.30 26.90 الماء الحار 24.63 29.37 20.20 22.40 20.20 الماء البارد LSD0.05 6.20 2.30 التركيز × النبات 27.29 26.46 27.33 24.03 22.37 العكبر LSD0.05 2.30 6.00 ستخالصاالطريقة التركيز × 23.20 24.69 23.33 20.34 26.70 كحول 24.92 29.24 20.60 22.99 22.23 الماء الحار 22.20 23.24 22.92 20.33 9.29 الماء البارد LSD0.05 6.20 6.00 20.20 29.92 20.32 26.23 22.72 متوسط التركيز LSD0.05 6.00 بأن الفعالية التثبيطية للمستخلص المائي الحار جاءت بالمرتبة الثانية بعد 2أظهرت النتائج في جدول ملغم 200كيزعند الترالمستخلص الكحولي، إذ بينت النتائج ان المستخلص المائي الحار اعطى نسبة تثبيط فقد اعطى المستخلص المائي الحار قطر تثبيط 2-ملغم مل 20ملم، اما التركيز 22.87بقطر تثبيط بلغ 2-مل ملم، وذلك الحتواء مستخلص الماء الحارعلى نسب اقل من المواد الفعالة مقارنةً بالمستخلص 13.90 نات يكوسيدات والزيوت الطيارة والقلويدات والتانيالكحولي إذ يحتوي على الفينوالت والفالفونيدات والكال على %3.6و 3.9و 9.2و 22.24و 22.46و 20.74و 23.36والصابونين التي نسبها المئوية بلغت التوالي، اذ ان الفينوالت تعمل على مسخ البروتين في البكتريا وايقاف فعل االنزيمات المسؤولة عن (. 2000ة البكتريا على االستمرار )السالمي، التفاعالت االيضية وبالتالي عدم قدر http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ الزبيدي ويوسف 2027، 43 – 63 (:2)9مجلة ديالى للعلوم الزراعية، 42 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ اما المستخلص المائي البارد فقد اعطى أقل نسبة تثبيط إذ بينت النتائج ان المستخلص المائي البارد ملم على التوالي و يُعزى سبب ذلك 10.2، 19.67أعطيا قطري تثبيط 2-ملغم مل 020،20عند التركيزين الى أن بعض المواد الفعالة ال تذوب بشكل جيد في الماء وإنما تذوب بصورة جيدة بالمذيبات العضوية ( إذ يحتوي على الفينوالت والفالفونيدات 2004(خرون آو Abu-Shanabبحسب ما ذكره 24.76لقلويدات التي نسبها المئوية بلغت والكاليكوسيدات والزيوت الطيارة والتانينات والصابونين وا على التوالي، اذ ان الفينوالت تعمل على مسخ البروتين %0.2و 3.2و 9.2و 9.04و 20.37و 22.24و في البكتريا وايقاف فعل االنزيمات المسؤولة عن التفاعالت االيضية وبالتالي عدم قدرة البكتريا على (.2000االستمرار )السالمي، Pseudomonu aeruginosa ية التثبيطية للمستخلصات الكحولية والمائية للعكبر تجــاه بكترياالفعال ، فقد P. aeruginosa العكبر يعطي تأثيراً تثبيطياً عالياً ضد بكتريا ان 6 بينت النتائج في الجدول البارد. وأظهر الماءأظهر المستخلص الكحولي فعالية تثبيطية عالية يليه مستخلص الماء الحار ثم مستخلص ملم ويعود 24.75بقطر تثبيطي بلغ 2-ملغم مل 200المستخلص الكحولي تأثيراً تثبيطياً عالياً عند التركيز -ملغم مل 10( اما عند التركيز 2004السبب الى قابلية المواد الفعالة للذوبان في المذيبات العضوية )زنكنة، ملم، ذلك الحتواء المستخلص الكحولي على اغلب المواد 12.88فقد كان قطر التثبيط لذات المستخلص 2 الفعالة إذ يحتوي على الصابونين والقلويدات والكاليكوسيدات والزيوت الطيارة والفالفونيدات والفينوالت %20.04و 20.33و 22.27و 26.04و 20.07و 23.33و 27.20بلغت والتانينات التي نسبها المئوية قابلية تثبيطية ضد البكتريا المرضية، إذ يعمل على تثبيط عمل االنزيمات أن الصابونين لهإذ على التوالي، المسؤولة عن التفاعالت االيضية االساسية بتداخلهِ غير المخصص مع البروتينات مما يؤدي الى عدم قدرتها (. 2003خرون، آو Millsعلى االستمرار ) )ملم( Pseudomonus. aeruginosaالعكبر اتجاه بكتريا . االقطار التثبيطية لمستخلصات3الجدول النبات طريقة االستخالص طريقة × النبات (2-التركيز )ملغم مل 200 00 20 20 االستخالص العكبر 27.42 24.70 27.29 24.77 22.33 كحول 26.03 29.46 24.00 22.99 22.60 الماء الحار 26.60 27.90 26.30 22.30 20.20 الماء البارد 0.05LSD 2.72 2.32 24.32 23.39 20.29 26.22 22.44 العكبر التركيز ×النبات 0.05LSD 2.32 2.32 طريقة االستخالص التركيز × 20.03 22.22 23.20 22.90 22.99 كحول 22.40 20.44 26.02 22.27 9.33 الماء الحار 20.30 26.96 22.23 9.30 3.36 الماء البارد 0.05LSD 2.20 2.32 22.94 23.33 26.47 22.27 20.27 متوسط التركيز LSD0.05 2.72 ايضاً الفعالية التثبيطية للمستخلص المائي الحار جاءت بالمرتبة الثانية 6ظهرت النتائج في الجدول أ 200تركيز تثبيط عند البعد المستخلص الكحولي، إذ بينت النتائج ان المستخلص المائي الحار اعطى نسبة فقد اعطى المستخلص المائي الحار قطر 2-ملغم مل 20ملم، اما التركيز 19.43بقطر تثبيط بلغ 2-ملغم مل ملم، وذلك الحتواء مستخلص الماء الحار على نسب اقل من المواد الفعالة مقارنةً بالمستخلص 11.35تثبيط http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ الزبيدي ويوسف 2027، 43 – 63 (:2)9مجلة ديالى للعلوم الزراعية، 46 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ والفالفونيدات والكاليكوسيدات والزيوت الطيارة والقلويدات والتانينات الكحولي إذ يحتوي على الفينوالت على %3.6و 3.9و 9.2و 22.24و 22.46و 20.74و 23.36والصابونين التي نسبها المئوية بلغت التوالي، اذ ان الفينوالت تعمل على مسخ البروتين في البكتريا وايقاف فعل االنزيمات المسؤولة عن (.2000ية وبالتالي عدم قدرة البكتريا على االستمرار )السالمي، التفاعالت االيض 200،20اما المستخلص المائي البارد فقد اعطى أقل نسبة تثبيط إذ بينت النتائج ان إنه عند التركيزين ملم على التوالي ويُعزى سبب ذلك ربما الى أن بعض المواد 10.1، 17.9أعطيا قطري تثبيط 2-ملغم مل -Abuال تذوب بشكل جيد في الماء وإنما تذوب بصورة جيدة بالمذيبات العضوية بحسب ما ذكره الفعالة Shanab ( إذ يحتوي على الفينوالت والفالفونيدات والكاليكوسيدات والزيوت الطيارة 2004خرون )آو 3.2و 9.2و 9.04و 20.37و 22.24و 24.76والتانينات والصابونين والقلويدات التي نسبها المئوية بلغت على التوالي، اذ ان الفينوالت تعمل على مسخ البروتين في البكتريا وايقاف فعل االنزيمات %0.2و (.2000المسؤولة عن التفاعالت االيضية وبالتالي عدم قدرة البكتريا على االستمرار )السالمي، فة كل من أثيره على وظييُعزى التأثير المثبط للعكبر الى أثره الفعال في تثبيط انقسام الخلية وت السايتوبالزم وغشاء الخلية مؤدياً الى انكماش جدار الخلية، كما ويعمل العكبر على تحلل البكتريا وتثبيط (.2000خرون، آو Orsi) RNA–polymeraseتصنيع البروتين من خالل تثبيط إنزيم مقارنة التأثير التثبيطي لطرائق االستخالص المستخدمة في الدراسة الدراسة الحالية تم أخذ ثالثة أنواع من المذيبات إلجراء االستخالص وهي الكحول االثيلي بتركيز في ( بأن 2002والماء المقطر الحار والماء المقطر البارد، وذلك لبيان الفرق في تأثيرها كما ذكر هميم ) 90% ي البكتريا قيد الص للعكبر ففعالية المستخلصات تختلف باختالف المذيب، وبعد فحص تأثير طرائق االستخ الدراسة، وجد ان المستخلص الكحولي افضل المذيبات ثم يليه المستخلص المائي الحار، ثم المستخلص ي تفكيك المواد فالمائي البارد، قد يعود سبب تباين الفعالية التثبيطية للمستخلصات الى نوع المذيب االقرب للعكبر، او الى نسبة تركيز المواد الفعالة في العكبر، او الى طبيعة أغشية، اوالى التركيب الكيميائي الفعالة (. هذه النتيجة جاءت مقاربة Chanda ،2003و Parekhاالحياء المجهرية وطبيعة نفاذية المواد خاللها ) ( الذي بين ان المستخلص الكحولي أظهر فاعلية تثبيطية 2003) Enenebeakuو Jomboلما توصل اليه ة اذ جاء بالمرتبة االولى، ثم يليه المستخلص المائي الحار، ثم المستخلص المائي البارد.عالي مقارنة التأثير التثبيطي للمضادات الحيوية مع التأثير التثبيطي لمستخلص العكبر الكحولي في العزالت البكتيرية المرضية التثبيطي للمضادات الحيوية مع التأثير التثبيطي للمستخلصات الكحولية للعكبر عند مقارنة التأثير ثبط بكتريا Ciprofloxacinلوحظ ان المضاد P. Aeruginosaو S. aureusوE.coli تجاه بكترياا E. coli ثبط بكتريا 2-مغلم مل 200ملم بينما المستخلص الكحولي للعكبر بتركيز 20.2بقطر تثبيط بلغ E. coli ملم، اما المضاد 20.36بقطر تثبيط بلغAmikacin فقد ثبط بكتريا S. aureus بقطر تثبيط بلغ بقطر S. aureus بكتريافقد ثبط 2-مغلم مل 200ملم، بينما المستخلص الكحولي للعكبر بتركيز 27.30 20.30بقطر تثبيط بلغ P. aeruginosaفقد ثبط بكتريا Amikacinملم، اما المضاد 27.73تثبيط بلغ بقطر تثبيط P. aeruginosa فقد ثبط بكتريا 2-مغلم مل 200ملم، بينما المستخلص الكحولي للعكبر بتركيز ة لها قدرة تثبيطية عالية أعلى من القدرملم. لذلك نستنتج ان المستخلصات الكحولية للعكبر 24.70بلغ ية قيد الدراسة لذلك نستطيع ان نستغني عن المضاداتالتثبيطية للمضادات الحيوية ضد البكتريا المرض يئياً، كذلك فإن من بآالحيوية ونستخدم بدلها مستخلصات العكبر التي هي احسن تثبيط واقل تأثيرات جانبية و لهذه المستخلصات القدرة على تثبيط او قتل طيف واسع من الجراثيم وعدم االختصار على انواع محددة http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ الزبيدي ويوسف 2027، 43 – 63 (:2)9مجلة ديالى للعلوم الزراعية، 44 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ لمضادات الحيوية المتالك هذه المستخلصات مركبات فعالة لها القابلية على االنتشار في كما هو الحال في ا االنسجة والنفاذ بكفاءة عالية والقدرة على اختراق الجدار الخلوي للبكتريا وتثبيط نموها، من جهة اخرى ال ، ص ثمنها )النعيميتتولد مقاومة تجاهها كما في المضادات الحيوية فضالً عن سهولة الحصول عليها ورخ 2022 .) المصادر . دراسة عن البكتريا المقاومة للمضادات الحياتية المعزولة من المرضى 2002الجبوري، خلود كريم حسن. المصابين بالتهاب المجاري البولية. رسالة ماجستير. كلية العلوم. جامعة بغداد. سم الفراخ والمريمية والصفصاف على نمو . تأثير مستخلصات نباتات2000الخفاجي، باسمة ربيع احمد. بعض الفطريات الجلدية. رسالة ماجستير. كلية العلوم. الجامعة المستنصرية. والثوم Myrtus commun. دراسة تأثير مستخلص نباتي الياس 2000السالمي، نبراس يحيى عبدهللا. Allium stavium في بكترياPseudomonas .رسالة ماجستير. كلية التربية. جامعة بغداد . االخرى . دراسة االلتصاق والتالزن الدموي وعوامل الضراوة2002العبيدي، سوسن شوكت عبد عبد هللا. ماجستير. كلية لبعض افراد العائلة المعوية والزائفة الزنجارية المسببة اللتهاب السبيل البولي. رسالة تنصرية. العلوم. الجامعة المس في نمو النباتية . دراسة تأثير حامض الخليك وبعض المستخلصات2002العكيلي، عدنان حنون عباس. بكتريا اصابات الحروق. رسالة ماجستير. كلية العلوم. الجامعة المستنصرية. طب. دراسة الفاعلية المضادة لنمو الجراثيم. رسالة ماجستير. كلية ال2996العوادي، سلوى صابر. .البيطري. جامعة بغداد كمسببات . التحري عن البكتريا السالبة لصبغة غرام والخمائر2004الموسوي، يعقوب عبد الواحد صالح. الجامعة المستنصرية. للتسمم الدموي في االطفال وحديثي الوالدة. رسالة ماجستير. كلية العلوم. جرثومتي النباتية ومكوناتها الفعالة في . تأثير بعض المستخلصات2005. المولى، حسن فيصل حسين Staphylococcus aureus وPseudomonas aeruginosa خمج االذن المعزولتين من الخارجية لالنسان. رسالة ماجستير. كلية التربية. جامعة الموصل. ولية لبعض الكح. تقيم الفعالية السمية والتثبيطية للمستخلصات المائية و2022النعيمي، حنان عدنان شاكر. العراقية. البيطرية الطبية النباتات على نمو الجراثيم المرضية المعزولة من حاالت االسهال. المجلة 63(2 :)20-62. . االحصاء الحياتي. مطبعة وزارة التعليم العالي والبحث العلمي. جامعة 2934الراوي، خاشع محمود. الموصل. .0: ص2الطبية. مجلة الدواء العربي. المجلد. األعشاب 2999حدادين، موفق. . تأثير مستخلصات عدد من النباتات على نمو انواع البكتريا2004زنكنة، شكرية علي محمد كريم. المرضية. رسالة ماجستير. كلية العلوم. جامعة االنبار. . دراسة الفعالية التثبيطية 2003سهاد عدنان احمد. و محمودوشيرين شحدة م، لمياء سليم عبد الكاظ المرضية. المجلة في نمو بعض انواع البكتريا Salix acmophyllaلمستخلص نبات الصفصاف . 00-63(: 2)7العراقية للتقانات الحياتية. مرضى. دراسة وبائية لبعض انواع الجراثيم الهوائية المرضية المعزولة من 2992محمود، بشرى محمد. جامعة بغداد. .كلية العلوم .راقدين في احدى مستشفيات بغداد. رسالة ماجستير http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ الزبيدي ويوسف 2027، 43 – 63 (:2)9مجلة ديالى للعلوم الزراعية، 40 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ . فعالية بعض المستخلصات النباتية ضد الممرضات الشائعة في أخماج الجلد2002هميم، سعد سلمان. جامعة البصرة. .كلية التربية .الجرثومية. رسالة ماجستير Abdullah, R. M., S. F. Samaan and A. M. Al-Shwaikh, 2010. Study the effect of antibiotic combination of beta-lactam and aminoglycoside with another group of antibiotics and their synergism effect. Journal of Arab Board of Health Specializations. 11(1). Abu-Shanab, B., G. Adwan, D. Abu-Safiya. N. Jarrar and K. Adwan. 2004. Antibacterial activity of some plant extract unitized in popular medicine in plant. Turk. J. Bio. 28: 99-105. Anesini, C and C. Perz. 1993. Screening of plamts used in Argentine folk medicine for antimicrobial activity. J. of Ethnol. Pharmacology. 39(2): 119- 120. Arias, C. A., P. Courvalin and P. E. Reynolds. 2000. Vanc cluster of antibiotic E. Coli–resistant. BM. Antimicrobial. Agent. Chemother. (6): 166- 170. Bankova, V. S., S. L. Castro and M. C. Marcucci. 2000. Propolis recent advances in chemistry and plant origin. Apidologie. 31: 3-15. Bashir, A., T. Y. Mujahid and N. Jehan. 2007. Antibiotic resistant profile isolation and Characterization of clinical isolation of Staphylococci and E. coli from patient with community acquired skin infection. J. pharm. Sci. 20: 299-304. Burdock, G. A. 1998. Review of the biological properties and toxicity of bee Propolis. Food Chem. Toxicol. 36: 347–363. Chadhari, S. Surry A Wanshi, P. Ambardekar, S. Chinchwadkar and Kinare, A. 2004. Safety profile of ciprofloxacin used for Neonatal Septicemia. Indian Pediatric, 41: 1246. Digrak, M. M. Hakki and A. Icim. 2001. Antibacterial and antifungal activities of Turkish medical plants. J. of Pharmacet. Bio. 93(5): 345-350. Goossens, H. 2003. Susceptibility of multidrug–resistant pseudomonas aeruginosa in intensive care units: result from the European mystic study group. Clin. Micro. Infect. 9(9): 980. Jombo, G. t. and M. N. O. Enenebeaku. 2008. Antibacterial profile of fermented seed extract of Ricinus communia flndincs from preliminary analysis Nigerian. J. of Physiological Sci. 23 1-2: 55-59. Kosalic, I., S. Pepeljnjak, M. Bakmaz and S. V. Knezevic. 2005. Flavonoid analysis and antimicrobial activity of commercially available propolis products. Acta Pharma. 55: 423-430. Mills Edward, Jean–Jacques Duguoa, Dan Perri and Gideon Koren. 2006. Herbal Medicines in pregnancy and lactation. An Evidence–Based Approach. London and New York. http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ الزبيدي ويوسف 2027، 43 – 63 (:2)9مجلة ديالى للعلوم الزراعية، 43 http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ Parekh, J and S. Chanda. 2006. In vitro antimicrobial activities of extract of Launaea procumbens Rox B. (labiateae). Vitis vinifera L. (Vitaceae). African Journal Biomedical Research. 9: 89–93. Pietta, P. G., C. Gardana and A. M. Pietta. 2002. Analytical methods for quality control of propolis. Fitoterapia. 73(suppl 1): 7–20. Rhajaoui, M., H. Oumzil, M. Faid, M. Lyagoubi, M. Elyachioui and A. Benjouad. 2001. Antibacterial activity of Moroccan propolis extracts. Science letters. 3(3). (Research Article). Vandepitte, J., K. Engback P. Piot and C. C. Heuck, 1991. Basic Laboretory procedures in clinical Bacteriology. WHO. Geneva Organizations publications. EVATUATION OF PROPOLIS EXTRACTS AGAINST PATHOGENIC BACTERIA Fatima Imran Yusuf Najim Abdullah Jumaa najm_alzubaidy@yahoo.com fatima89_omran@yahoo.com Department of Biology- Education College for pure sciences - Diyala University, Iraq ABSTRACT This study was conducted in Baqubah city, the period from November to April (2014-2015) in order to find out the inhibitory effect of plant extracts of Propolis on bacterial growth for three of the bacterial isolates included Staphylococcus aureus, E. coli, Pseudomonas aeruginosa, The study included preparing three types of extracts, alcoholic extract, hot aqueous and cold extract, with concentrations 10, 20, 50, 100 mg ml-1, by using drilling method balakar were compared to results of inhibition with extracts by inhibition activation for seven antibiotics (Nalidixic acid, Amoxicillin, Ciprofloxacin, Cefotaxime, Amikacin, Trimethoprim, Ampicillin) by using sensitive test for antibiotics. The study results showed that propolis inhibition of Staph. aureus bacteria at the rate of 17.19 mm then E-coli bacteria at the rate of 15.02 mm then Ps. aeruginosi at the rate of 14.61 mm. Key words: propolis, inhibition, E. coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa. http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ mailto:najm_alzubaidy@yahoo.com mailto:omran@yahoo.com