4: 1 تأثير التسميد البوتاسي والرش بالبورون في نمو صنفين من نباتات القرنفل وازهارهما: بلغذسخ ّبخشّى 2416، 52 - 44 ( : 1) 8هػلد دٗةلٔ للعلْم بلضسبع٘د ، 44 Pseudomonas fluorescens ISHعشي وتٕمٍت وتىطٍف أشٌُ اٌبزوتٍٍش إٌّتح ِٓ اٌبىتزٌا ودراست دورٖ فً تذهىر ٔىعٍت اٌدبٓ اٌطزي اٌعزالً وتسذٌذ اٌظزوف اٌّثٍى الٔتاج إٔشٌُ Pseudomonas fluorescensعشي وتشخٍض اٌبىتزٌا -1 اٌبزوتٍٍش. غاسي ِٕعُ عشٌش *** ر **عاِز ِسّذ عًٍ طاٌ ة *سٌاد طارق اٌسذر ziadsedrah@gmail.com - غةهعد دٗةلٔ –كل٘د بلضسبعد -هذسط* Salih1943@yahoo.com - غةهعد جغذبد –كل٘د بلضسبعد -بعسةر ** Ghazi_m56@yahoo.com -غةهعد جغذبد –كل٘د بلعلْم -بعسةر *** اٌّستخٍض بلعةئمذخ للممٔ Pseudomonas fluorescensزمن بلسؿمشٕ عممي ّغمْد عممضتذ عمذخ زعمْد للح سشٗممة ٌمسع فمٖ ( فٖ عٌ٘ةذ بلػحي بلطمشٕ بلوPsychrotrophic bacteriaهػوْعد بلح سشٗة بلوسؿولد للحشّدخ ) عضلممد هممي ُممزٍ بلعممضتذ بللةجل٘ممد علممٔ بلسؿلممأ 24غةهعممد جغممذبدت لهسل ممر –هعوممأ بلحممةى كل٘ممد بلضسبعممد بلحشّزٌٖ٘ ، ّغشٓ زشخ٘ظِة هي خمل دسبعمد بلظم ةذ بلوضسع٘مد ّبلوةِشٗمد ّبل ٘وْ٘ؾْ٘ٗمد ، كومة زمن بألك مأ جغمشب ت جعمذُة بخس٘مشذ بلعمضتذ بلخومظ Vitek 2 compact systemزأك٘ذ بلسشخ٘ض جػِةص لر جلغممر بل عةل٘ممد P. fluorescens ISHبلسؿممشٕ بل وممٖ عممي بًممضٗن بلحشّز٘٘ممض ، ّف٘ممَ زو٘ممضذ بلعضلممد ّؾذخ/هلغن جشّز٘ي ، لزب لًسخحر ُزٍ بلعضلد جًسةظ بجًضٗنت 8ت117بلٌْع٘د ْعممؾ ُممٖ لعممسعوة بل P. fluorescens ISHزحمم٘ي بى بلةممشّم بلوطلممٔ جًسممةظ بلحشّز٘٘ممض هممي بلعضلممد جذسغمد 8% ، ّسقمن ُ٘مذسّغٌٖ٘ 1بلومذعن جةلؿل٘مث بل مشص جٌغمحد Minimal salts mediumبلغمزبئٖ x 14 1عةعد ّؾػمن للمةؼ 96م هذخ 15ؾشبسخ 7 125ّ ذ م / همأ جسعمسعوة بلؿةػمٌد بلِمضبصخ جغمشعد دّسخ / دق٘لد ت ت ًضٗن بلحشّز٘٘ض ، بلػحي بلطشٕ، ب P. fluorescens ،Psychrotrophic bacteria اٌىٍّاث اٌّفتازٍت : اٌّمذِت ٗسن زذبّ بلؿل٘ث بلخةم جسعسعوة بلخضى بلوحشد فٖ بلؿلمأ ّفمٖ بضٌمة بلٌلمأ ، فؼملخ عمي خضًمَ همذخ لػةف٘د فٖ بلوعوأ قحأ بلسظٌ٘ع ، ّعلٔ بلشغن هي بى بلخضى بلوحشد ٗؿذ هي عشعد ًوْ بألؾ٘ة بلوػِشٗد ( ّٗشم أ رشفمةخ Psychrotrophsػع ًوْ هػوْعد بلح سشٗمة بلوسؿولمد للحمشّدخ )لت بًَ فٖ بلْقر ً غَ ٗش هلئوةخ لس ةضشُة ّعشعةى هة زظحؽ ُٖ بلغةئذخ ت هي بلوعشّم بى بغلث بًْبع ُزٍ بلوػوْعمد همي بلح سشٗمة تٗعمذ همي بلح سشٗمة بلوشػم٘د ، ّتزلمةّم عول٘مد زِة ز وي فٖ لفشبصُة لًضٗوةذ خةسظ خلْٗد ضةجسد بلحغسشخ بّ بلوعةهلذ بلؿشبسٗد بألخشٓ ، لت بى خطْس زػمممةٍ بلؿمممشبسخ بلعةل٘مممد ، زعومممأ علمممٔ زؿل٘مممأ ه ًْمممةذ بلؿل٘مممث ، ّتعممم٘وة بجًضٗومممةذ بلوؿللمممد للحمممشّز٘ي (Proteases( ّبجًضٗوةذ بلوؿللد للذُي )Lipases ٖبألهش بلزٕ ٗؤدٕ للٔ زلف بلؿل٘مث ّهٌسػةزمَ فم ، ) ( تCempirkova ّMikulova ،2449بضٌة بلسظٌ٘ع ّبلخضى ) % هي بألؾ٘ة بلوػِشٗد فٖ بلؿل٘ث بلطمةصظ 14ًغحد ت زضٗذ عي Pseudomonasٗوطأ غٌظ بلوؿلْت ؾذٗطةخ ، لت بًَ بُمن بغٌمةط هػوْعمد بلح سشٗمة بلوسؿولمد للحمشّدخ لغم٘ةدزَ علمٔ بألؾ٘مة بلوػِشٗمد بلٌمْع بلح س٘مشٕ بلوطمةلٖ بلوغمحث للوشمةكأ P. fluorescensبلوغححد للسلف فٖ بلؿل٘ث ّهٌسػةزمَ ت ّزعمذ ( ت زِذم ُزٍ بلذسبعمد بلمٔ عمض بلح سشٗمة Vyletelova ّHanus ،2444فٖ هػة طٌةعد بأللحةى ) Pseudomonas fluorescens هممي ًوممةرظ هممي بلػممحي بلطممشٕ بلعشبقممٖ ّزشخ٘ظممِة ّفلممةخ لطشبئمم ز٘٘ض هي بلعضلد بعلٍتبلسشخ٘ض بلوعشّفد ّزؿذٗذ بلةشّم بلوطلٔ جًسةظ بلحشّ ــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــ ت 2414/ 7 / 16بلحؿص زغلنزةسٗخ ت 2415/ 3/ 8زةسٗخ قحْ بلٌشش تهي بؽشّؾد دكسْسبٍ للحةؾص بتّ غض بلحؿص http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ mailto:ziadsedrah@gmail.com mailto:Salih1943@yahoo.com mailto:Ghazi_m56@yahoo.com http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ بلغذسخ ّبخشّى 2416، 52 - 44 ( : 1) 8هػلد دٗةلٔ للعلْم بلضسبع٘د ، 41 طزائك اٌبسثاٌّىاد و كل٘ممد -أ بأللحممةى بلسممةجع للغممن علممْم بألغزٗممد عضلممر بلح سشٗممة هممي بلػممحي بلطممشٕ بلوٌممسع فممٖ هعومم ت 2412ؾضٗشبى –غةهعد جغذبد ، خل بلوذخ هةج٘ي شحةؽ –بلضسبعد ؾذدذ رشّم عول٘مد بلعمض لسشم أ ػمغْؽةخ لًسخةج٘مد زغمِأ عول٘مد بلعمض ّلخسظمةس بلخطمْبذ بٗمةم جِمذم 7خ م همذ7ّطْتخ لل ةئي بلوػِشٕ بلوطلْت ، لر ّػعر ًوةرظ بلػحي بلطشٕ جذسغد ؾمشبسخ زغل٘ث بلح سشٗة بلوطلْجد لسظحؽ ُٖ بلغمةئذخ علمٔ ؾغمةت بألًمْبع بلح س٘شٗمد بألخمشٓ ، كومة بخس٘مش بلْعمؾ بلوطحطد لٌوْ بلح سشٗة بلوْغحد لسظح٘غ غمشبم ل٘لسظمش Crystal violetبلؿةّٕ علٔ هةدخ CVAبلغزبئٖ Pseudomonasم ّهٌِمة بلح سشٗمة بلغمةلحد لسظمح٘غ غمشب Psychrotrophicبلٌوْ علٔ هػوْعد ج سشٗة fluorescens (Harrigan ّMcCance ،1976ت ) ؾذدذ هغسعوشخ هٌ شدخ ًةه٘د علٔ بلْعؾ بعلٍ ، ّبخز غض هٌِة ّفؿض عمي قةجل٘مد بجطمطحة جسظح٘غ غشبم هع هلؾةد ش أ بلخلٗة زؿر بلوػِش ، فٖ ؾةلد كْى بلخلٗة عظْٗد عةلحد لسظح٘غ غشبم خش هي بلوغسعوشخ ً غِة ّبغشٕ لَ لخسحةس بألّكغم٘ذٗض ، فمٖ ؾةلمد كمْى بلٌس٘ػمد هْغحمد فمةى ، بخز غض ب ( ت 1989)ع٘لٖ ّفةى دٗوةسك ، Pseudomonasُزب ٗعذ لؾسوةتخ جأى بلوغسعوشخ زةجعد لػٌظ بلؿمممةّٕ علمممٔ بلوؼمممةدبذ بلؿْ٘ٗمممد ACCًلمممأ غمممض بخمممش همممي بلوغمممسعوشخ ً غمممِة بلمممٔ بلْعمممؾ Ampicillin ّChloramphenicol ّCyclohexamide ى ُمممزب بلْعمممؾ ٗغممموؽ فلمممؾ جٌومممْ ل، لر ، Pseudomonas (Palleroni( بلسةجعممد لػممٌظ Fluorescent groupبفممشبد بلوػوْعممد بلوسأللممد ) ( ت 2444 شخظر بلح سشٗة هي خل زؿذٗذ بلخظةئض بلش ل٘د ّبلوضسع٘د ّبغشب بل ؿْص بل ٘وْ٘ؾْ٘ٗد Stolp( ؛ 1976) Harrigan ّMcCanceبلسظممممممٌ٘ ٘د بلممممممْبسدخ فممممممٖ بللصهممممممد جةزحممممممةع بلو ممممممةز٘ؽ ّGgadkari (1981 ؛ )Palleroni (2444ت ) Harriganزن بلسؿشٕ بلٌْعٖ عي قةجل٘د بلعضتذ بلح س٘شٗد علٔ بًسةظ بلحشّز٘٘ض ّف هةّسد فمٖ ّMac Cance (1976ّبخسحمشذ بلعضلمد بألك مأ فمٖ بًسمةظ بلحشّز٘٘مض جةزحمةع بلطشٗلمد ، ) بلوْطمْفد همي Mu ( ت قذس زشك٘ض بلحشّز٘ي ّفلة للطشٗلد بلسٖ بّسدُة 2449ّبخشّى )Bradford (1976 ّق٘غر ، ) هممأ هممي 8ت1( ، ّرلممب جْػممع 2446ّبخممشّى ) Sharmaبل عةل٘ممد بجًضٗو٘ممد ّفلممة للطشٗلممد بلسممٖ بّسدُممة 5م همذخ 35جذسغمد ؾمشبسخ % كةصٗي ( فٖ بًحْجد بخسحةس زشكمر فمٖ ؾومةم همةئٖ 1هؿلْ هةدخ بلس ةعأ ) دق٘لمد ، 34م همذخ 35هأ هي هؿلْ بجًضٗن ، ضن ؾؼمٌر بألًةج٘مث جذسغمد ؾمشبسخ 2ت4دقةئ قحأ بػةفد ، ّؾؼممش 5%( جسشك٘ممض TCA) Trichloroacetic acidهممأ هممي هؿلممْ 3ّبّقممف بلس ةعممأ جةػممةفد ، ضممن بغممشٕ بلٌحممز TCAْ جممةلخطْبذ ً غممِة هةعممذب بػممةفد بجًممضٗن جعممذ بػممةفد هؿلمم بألك ممةبلوؿلممْ TCAم ت عٌ٘ر كو٘مد بلٌمةزع بلوس مْى بلمزبئث فمٖ 4دق٘لد جذسغد ؾشبسخ 30هذخ 3500xgبلوشكضٕ عٌذ ًمةًْهسش ، لر عشفمر ّؾمذخ بل عةل٘مد لمًمضٗن 280جْعةؽد ق٘ةط بجهسظةط٘د للطةفٖ عٌذ بلطْ بلومْغٖ ًمةًْهسش ل مأ 284ةطم٘د عٌمذ ؽمْ همْغٖ فمٖ بجهسظ 0.001علٔ بًِة كو٘د بجًضٗن بلسمٖ زعطمٖ صٗمةدخ دق٘لد زؿر رشّم بلسػشجد ، ّزع٘٘ي فعةل٘د بلحشّز٘٘ض جسعسعوة بلوعةدلد بٙز٘د : 2تx 34 x 4 441ت4ًةًْهسش / 280فعةل٘د بلحشّز٘٘ض ) ّؾذخ/هأ ( = بجهسظةط٘د عٌذ لر بى : هي زعشٗف ّؾذخ بجًضٗن ضةجر : 441ت4 د ( : هذخ بلس ةعأ ) دق٘ل 34 : ؾػن بلوؿلْ بجًضٗوٖ )هأ( 2ت4 إٌتائح وإٌّالشت دسعمر بلظم ةذ بلوةِشٗمد للح سشٗمة بلوعضّلمد ، لر : Pseudomonas fluorescensتشخٍض اٌبىتزٌا زو٘ضذ عٌذ فؿظِة زؿر بلوػِش ج ًِْة خلٗة عظْٗد ، عةلحد لسظح٘غ غشبم ، ه شدخ بّ هضدّغد ، غ٘مش ( ت زس م ُمزٍ 1جسعسعوة فؿض بللطشخ بلوعللد( ، ّكوة هْػؽ فمٖ بلػمذّ ) ه ًْد لألجْب ، هسؿشكد ) بلغذسخ ّبخشّى 2416، 52 - 44 ( : 1) 8هػلد دٗةلٔ للعلْم بلضسبع٘د ، 42 Pseudomonas( ؾممممْ بلظمممم ةذ بلوةِشٗممممد لح سشٗممممة2444) Palleroniبلٌسممممةئع هممممع هممممةركشٍ fluorescens اٌّعشوٌت ِٓ اٌدبٓ Pseudomonas fluorescens. بعض اٌظفاث اٌشىٍٍت ٌبىتزٌا 1دذوي اٌ خاِعت بغذاد . -وٍٍت اٌشراعت -ً اٌباْ لسُ عٍىَ االغذٌت اٌطزي إٌّتح فً ِعّ اٌّالزظاث اٌظفت - قةجل٘د بجططحة جسظح٘غ غشبم عظْٗد هغسل٘ود ش أ بلخلٗة زػوع بلخلٗة غةلح٘سِة ه شدخ ّجعؼِة هضدّظ + بلؿشكد - لًسةظ بألجْب Acid fastبلظحغد بلولةّهد للؿةهغ ) stain ) - ( Circular( شمم لخ دبئشٗممةخ )NAغممسعوشبذ بلٌةه٘ممد علممٔ بلْعممؾ بلوغممزٕ بلظمملث )برِممشذ بلو ( ّؾةفمد هغمسعوشخ كةهلمد Convex( هشز ع جش أ هؿمذت )Glistening( لوةع )Smoothّعطؽ ًةعن ) (Entire فؼمملخ عممي ّغممْد سبئؿممد غ٘ممش هشغْجممد ت ّعٌممذ زٌو٘ممد بلعممضتذ فممٖ بلْعممؾ بلوغممزٕ بلغممةئأ ، ) (NB لزخز ًوُْة ش ) لخ ؾلل٘ةخ فٖ بعلٔ بلْعؾ ، ُّزب دل٘أ بّلٖ علٔ بى بلعضتذ ُْبئ٘د ت ججمممشبص طممم د بلسمممأل ، لر زوسمممةص بلح سشٗمممة King Bًو٘مممر بلح سشٗمممة بلوعضّلمممد علمممٔ بلْعمممؾ P. fluorescens جسًسةغِة لظحغةذ هسأللد ) خؼشب هظم شخ ( هٌسشمشخ فمٖ بلْعمؾ ت بز لمر ُمزٍ بلٌسمةئع ( ؾممْ بلظمم ةذ بلوضسع٘ممد لح سشٗممة 2444) Palleroni( ؛ 1981) Stolp ّGgadkariٍ هممع هممةركش Pseudomonas fluorescens ت بغشٗر للعضتذ بلٌل٘د لخسحةسبذ بػةف٘د جسعسعوة جعغ بتّعةؽ بلغزبئ٘مد بلظملحد ّكومة هْػمؽ ( ت 1981) Stolp ّGgadkari( ، ّزسشةجَ ُزٍ بلظ ةذ هع هةركشٍ 2فٖ بلػذّ ) عٕذ ّٔىها عٍى بعض األوساط Pseudomonas fluorescens. اٌظفاث اٌّشرعٍت ٌبىتزٌا 2دذوي اٌ اٌظٍبت . اٌّالزظاث اٌىسظ اٌغذائً Brolacin agar هضسقد –هغسعوشبذ خؼشب Citrimide agar هغسعوشبذ هسأللد MacConkey agar هغسعوشبذ عذٗود بللْى GSP agar -ٌ غػ٘د هغسعوشبذ كح٘شخ ج هضسقد Pseudomonasبغشٗممر بٗؼممةخ جعممغ بل ؿممْص بل ٘وْ٘ؾْ٘ٗممد بلؼممشّسٗد للس شٗمم جمم٘ي بًممْبع غممٌظ ( ، ّكةًمر بلٌسمةئع 3)بلػذّ Pseudomonas fluorescensلمقسظةس علٔ بلعضتذ بلسٖ زعْد للٌْع ( ت 1981) Stolp ّGgadkariهشةجعد لوةركشٍ بلغذسخ ّبخشّى 2416، 52 - 44 ( : 1) 8هػلد دٗةلٔ للعلْم بلضسبع٘د ، 43 Pseudomonasٍّىزٍىٌت اٌضزورٌت ٌٍتفزٌك بٍٓ أٔىاع خٕس . بعض اٌفسىص اٌىٍ 3دذوي اٌ اٌّالزظاث اٌفسض اٌّالزظاث اٌفسض - بلسؿلأ بلوةئٖ للٌشأ + بألّكغ٘ذٗض + بلسؿلأ بلوةئٖ للػ٘لز٘ي + بل ةزةل٘ض + م 4بلٌوْ فٖ دسغد ؾشبسخ - بجًذّ - م 41بلٌوْ فٖ دسغد ؾشبسخ + لًسةظ بألهًْ٘ة هي بألسغٌ٘ي ( : بل ؿض عةلث-)+( : بل ؿض هْغث ، ) بغشٕ لخسحةس ًْعٖ لل شف عي بفؼمأ عضلمد اٌتسزي إٌىعً عٓ لابٍٍت اٌعشالث عٍى إٔتاج اٌبزوتٍٍش : ، ضمن Milk agar، ّرلمب جسٌو٘سِمة علمٔ بلْعمؾ P. fluorescensفٖ زؿل٘مأ بلحمشّز٘ي همي جم٘ي عمضتذ عوشبذ بلٌةه٘دت ق٘ةط قطش بلوٌطلد بلش ةفد ؾْ بلوغس دلر بلٌسةئع علٔ لخسلم قةجل٘مد بلعمضتذ علمٔ لًسمةظ لًمضٗن بلحشّز٘٘مض همع بًِمة زٌسومٖ بلمٔ ًمْع ّبؾمذ ، لر كةًر بألعلٔ هلذسخ علٔ زؿل٘أ بلحشّز٘ي ، لر P. fluorescens ISH( بى بلعضلد 4ٗسؼؽ هي بلػذّ ) لر جلغمر E6 ّT2 ّAB ّM2ِمة بلعمضتذ هلمن ، زلس 2ت4جلغ قطمش بلوٌطلمد بلشم ةفد ؾمْ بلوغمسعوشخ هلمن علمٔ بلسشز٘مث ، لمزب بخس٘مشذ ُمزٍ بلعمضتذ جغمشب 4ت3ّ 1ت3ّ 3ت3ّ 4ت3بقطةس بلوٌةؽ بلشم ةفد لخسحةس بلعضلد بألك أ فٖ لًسةظ بجًضٗن جطشٗلد بلوضبسع بلوغوْسخ ت اٌّعشوٌت ِٓ اٌدبٓ Pseudomonas fluorescens. لابٍٍت اٌعشالث اٌّسٍٍت ٌبىتزٌا 4دذوي اٌ .Milk agarاٌطزي اٌعزالً عٍى تسًٍٍ اٌبزوتٍٕاث بإستعّاي اٌىسظ لطز ِٕطمت اٌتسًٍ ) ٍُِ ( اٌعشٌت لطز ِٕطمت اٌتسًٍ ) ٍُِ ( اٌعشٌت A1 13ت C1 0.7 AB 3.1 FG 1.3 B4 17ت H5 0.5 M2 3.0 R4 0.9 T7 13ت Y1 2.1 K4 17ت Z1 1.9 E6 3.4 L5 0.9 ISH 42ت U8 0.7 T2 3.3 SC 1.0 R8 49ت MN 0.8 S8 18ت J6 2.1 H7 48ت G2 2.2 بلسمٖ بعطمر بعلمٔ ًغمحد P. fluorescensبخس٘مشذ عمضتذ اختبار اٌعشٌت األوفأ فيً إٔتياج اٌبزوتٍٍيش : ألغممأ زؿذٗممذ ISH ّE6 ّT2 ّAB ّM2ُّممٖ بلعممضتذ Milk agarزؿلممأ علممٔ بلْعممؾ بلظمملث Muلعضلممد بألك ممأ فممٖ لًسممةظ بلحشّز٘٘ممض فممٖ بلوممضبسع بلوغوممْسخ ، لر زممن لعممسعوة بلْعممؾ بلوْطممْم هممي ب % ؾل٘ث فشصت1( بلوذعن جـ NB( ّبلوس ْى هي بلوشق بلوغزٕ )2449ّبخشّى ) جسًسةغِمة بلعمةلٖ جًمضٗن بلحشّز٘٘مض هلةسًمد جمةلعضتذ بألخمشٓ ، لر P. fluorescens ISHزو٘ضذ بلعضلد ّؾمذخ/هلغن جمشّز٘ي ، فمٖ ؾم٘ي جلغمر بل عةل٘مد بلٌْع٘مد 8ت117 عةل٘د بلٌْع٘مد لمًمضٗن بلوٌمسع هٌِمة جلغر بل ّ E6 ّT2ّؾممذخ/هلغن جممشّز٘ي جًممضٗن بلحشّز٘ممض بلوٌممسع هممي بلعممضتذ 46.6ّ 63.6ّ 87.3ّ 98.2 AB ّM2 ( ت ّجٌممة بخ علممٔ بلٌسممةئع بعمملٍ بخس٘ممشذ ب 1علممٔ بلسشز٘ممث ، ّكوممة هْػممؽ بلشمم أ )لعضلممد P. fluorescens ISH لسػشٕ علِ٘ة بل ؿْص بللؾلد بلوسعللد جةلسشخ٘ضت بلغذسخ ّبخشّى 2416، 52 - 44 ( : 1) 8هػلد دٗةلٔ للعلْم بلضسبع٘د ، 44 عٍى إٔتاج اٌبزوتٍٍش Pseudomonas fluorescens. لابٍٍت اٌعشالث اٌّسٍٍت ٌبىتزٌا 1شىً اٌ % زٍٍب فزس.1( اٌّذعُ بـ NBبطزٌمت اٌّشارع اٌّغّىرة بإستعّاي اٌّزق اٌّغذي ) Pseudomonas( ًسةئع بل ؿْص بل ٘وْؾْ٘ٗد للعضلد 5ٗح٘ي بلػذّ ) :ٌىٍٍّىزٍىٌتدراست اٌظفاث ا fluorescens ISH لر كةًمممر بلٌسمممةئع هطةجلمممد لومممة ّسد فمممٖ بلوشبغمممع بلسشخ٘ظممم٘د ،Harrigan ّ McCance (1976 )؛ Stolp ّGgadkari (1981 ؛ )Palleroni (2444 ّهٌِممممة لزؼممممؽ بى ، ) ( بلمزٕ قغمن 1966ّبخمشّى ) Stanierّف زلغم٘ن (Biovar I)بألؾ٘ةئٖ بألّ بلعضلد زعْد بلٔ بلطشبص بفشبد ُزب بلٌمْع بلمٔ خوغمد ؽمشص بؾ٘ةئ٘مد علمٔ بعمةط بجخمسلم فمٖ بلظم ةذ بلمطلش )لًسمةظ بلل٘ مةى همي ّلًسمةظ بلظمحغةذ غ٘مش بلوسأللمد ( ، ّبعسومذ ُمزب بلسلغم٘ن فمٖ بلوشغمع Dentrificationبلغ شّص ّعول٘د Holt؛ Palleroni ،1984؛ Bergey's Manual (Buchanan ّGibbons،1974بلعلومممٖ (ت بز لممر ًسممةئع بل ؿممْص بل ٘وْؾْ٘ٗممد للطممشبص بألؾ٘ممةئٖ بألّ Palleroni ،2444؛ 1994ّبخممشّى ، ( ت 2444) Palleroniهع هةركشٍ P.fluorescensلح سشٗة اٌّعشوٌيت ِيٓ Pseudomonas fluorescens ISH. بعض اٌظفاث اٌىٍّىزٍىٌت ٌبىتزٌيا 5دذوي اٌ خاِعت بغذاد. –وٍٍت اٌشراعت –اٌدبٓ اٌطزي اٌعزالً إٌّتح فً ِعًّ اٌباْ لسُ عٍىَ االغذٌت بلغذسخ ّبخشّى 2416، 52 - 44 ( : 1) 8هػلد دٗةلٔ للعلْم بلضسبع٘د ، 45 لابٍٍت إستهالن بعض اٌّىاد اٌىزبىهٍذراتٍت واٌسىاِض األٍٍِٕت لومْبد بل شجُْ٘ذسبز٘مد علٔ لعسِلك جعمغ ب P. fluorescens ISH( قةجل٘د بلعضلد 6ٗح٘ي غذّ ) هؼمةم بل٘مَ بلوممْبد ٘ةخ ّعمطةخ بعةعمم Basal syntheticّبلؿمْبهغ بألهٌ٘٘مد جسعمسعوة بلْعممؾ بلغمزبئٖ بلوخسحممشخ كمملخ علممٔ ؾممذخ ، ّبعممسذ علممٔ هلممذسخ بلعضلممد بلوذسّعممد علممٔ لعممسِلك بلوممْبد بل شجُْ٘ذسبز٘ممد ّزغ٘٘شُمة لمْى بلْعمؾ بلمٔ بألطم ش ًس٘ػمد بلوحٌ٘د فٖ بلػذّ بدًمةٍ همي خمل ًوُْمة فمٖ بلْعمؾ بلومزكْس جًسةغِة بلؿةهغ بلزٕ ٗؤدٕ بلمٔ خ مغ بلمشقن بلِ٘مذسّغٌٖ٘ للْعمؾ ّهمي ضمن زغ٘مش لًْمَ ، ّبعمسذ علمٔ هلذسخ بلعضلد بلوذسّعد فٖ لعسِلك بلؿْبهغ بألهٌ٘٘د هي خل زغ٘ش لْى بلْعؾ بلٔ بألخؼش بلوضسق ىزبىهٍذراتٍت واٌسىاِض األٍٍِٕت ِٓ اٌبىتزٌا . لابٍٍت إستهالن بعض اٌّىاد اٌ 6دذوي اٌ Pseudomonas fluorescens ISH ْاٌّعشوٌت ِٓ اٌدبٓ اٌطزي اٌعزالً إٌّتح فً ِعًّ اٌبا خاِعت بغذاد . –وٍٍت اٌشراعت –لسُ عٍىَ االغذٌت اٌّادة ٔتٍدت اٌفسض ٔتٍدت اٌفسض اٌّادة Cellobiose - L-Alanine + Creatin - L-Arabinose + D-Alanine + L-Arginine + D-Arabinose - L-Lysine + D-Fructose + L-Threonine - D-Galactose + L-Tryptophan - D-Mannose + L-Valine + D-Ribose + Maltose - D-Tryptophan + Mannitol + D-Xylose + Starch - Glycine - Sucrose + Lactose - Trehalose + P. fluorescens ISHعٍٍٓ اٌظزوف اٌّثٍى إلٔتاج اٌبزوتٍش ِٓ اٌعشٌت ت بخسحشذ ضلضمد بّعمةؽ غزبئ٘مد هخسل مد بلسشك٘مث لسؿذٗمذ بألفؼمأ همي جٌِ٘مة تسذٌذ اٌىسظ اٌغذائً األفضً : ( بفؼمل٘د 2، لر ٗسحم٘ي همي بلشم أ ) Pseudomonas fluorescens ISHجًسةظ بلحشّز٘مض همي بلعضلمد % ؾل٘ممث فممشص علممٔ جل٘ممد بألّعممةؽ 1بلوممذعن جممـ Minimal salts mediumبلغممزبئٖ ّبػممؿد للْعممؾ بلغزبئ٘د بلوغسخذهد ، لر جلغر بل عةل٘د بلٌْع٘د جًضٗن بلحشّز٘ض بلوٌمسع همي بلعضلمد بلوؿل٘مد ق٘مذ بلذسبعمد فمٖ جمشّز٘ي ّؾمذخ/هلغن 9ت71ّ 4ت86ّؾمذخ/هلغن جمشّز٘ي ، جٌ٘ومة جلغمر بل عةل٘مد بلٌْع٘مد 2ت113ُزب بلْعؾ % 1بلومذعن جمـ Nutrient broth % ؾل٘مث فمشص 1ّبلومذعن جمـ Trypticase soy brothلألّعمةؽ ؾل٘ث فشص علٔ بلسشز٘ث ت لى ل أ كةئي هػِشٕ هسطلحةزمَ بلسغزّٗمد بلخةطمد ، ّعل٘مَ تْٗغمذ ّعمؾ غمزبئٖ جعٌ٘مَ ٗغمسعوأ فمٖ لًسمةظ Tariجوممة ٗلئممن هسطلحممةذ بل ممةئي بلوٌممسع )بلحشّز٘٘ممضبذ ، لممزلب هممي بألُو٘ممد جو ممةى ز ٘٘ممف ّعممؾ بجًسممةظ ( 2446ّبخشّى ، ( فٖ ّعؾ بجًسةظ ، ّٗعمذ بلؿل٘مث Inducerٗؿسةظ لًسةظ لًضٗن بلحشّز٘ض بلخةسغٖ بلٔ ّغْد هةدخ ؾةضد ) ( ت Mckellar ّCholette ،1984بل شص هي بُن ُزٍ بلوْبد ) َ علمٔ بلومْبد بلؼمشّسٗد جًسمةظ ئملمٔ لؾسْبٗعمْد ب Minimal salts mediumلى ز ْق بلْعؾ بلغمزبئٖ Nicodemeّبُوِممة بلؿل٘ممث بل ممشص ) P. fluorescensبلحشّز٘٘ممضبذ بلخممةسظ خلْٗممد هممي بلح سشٗممة ( ت ّكمزلب خلمٍْ همي همي بل لْكمْص بلوعمشّم ج حؿمَ تًسمةظ بلحشّز٘٘مضبذ بلوةٗ شّج٘مد 2445ّبخشّى ، بلغذسخ ّبخشّى 2416، 52 - 44 ( : 1) 8هػلد دٗةلٔ للعلْم بلضسبع٘د ، 46 (Pillai ، ت كوممممممة بى ّغممممممْد 2411ّبخممممممشّى )MgSO4 ّK2HPO4 ّKH2PO4 زممممممذعن لًسممممممةظ بلحشّز٘٘مممضبذ بلخمممةسظ خلْٗمممد فمممٖ جعمممغ بًمممْبع بألؾ٘مممة بلوػِشٗمممد ، ّقمممذ ضحمممر بى لًسمممةظ بلحشّز٘٘مممضبذ بلوةٗ شّج٘د ٗسأضش جْغمْد بألًْٗمةذ بلوعذً٘مد لر بى لألًْٗمةذ بلوْغحمد زمأض٘شبخ دبعومة ل عةل٘مد ّضحمةذ بجًمضٗن (Karan ، ت2411ّبخشّى) Pseudomonas fluorescens. تأثٍز ٔىع اٌىسظ اٌغذائً فً إٔتاج اٌبزوتٍش ِٓ اٌعشٌت 2شىً اٌ ISH ( لًخ مةع لًسةغ٘مد بجًمضٗن عٌمذ بللم٘ن 3ٗسؼمؽ همي بلشم أ ) تسذٌذ اٌيزلُ اٌهٍيذروخًٍٕ األِثيً ٌأتياج : /هلغن جمشّز٘ي عٌمذ قم٘ن ّؾمذخ 4ت34ّ 3ت22بلؿةهؼ٘د هي بلشقن بلِ٘ذسّغٌٖ٘ ، لر جلغمر بل عةل٘مد بلٌْع٘مد علمممٔ بلسشز٘مممث ، ضمممن جمممذبذ بجًسةغ٘مممد جةجصدٗمممةد ّطمممْتخ بلمممٔ قممم٘ن بلمممشقن 6ّ 5ت5بلمممشقن بلِ٘مممذسّغٌٖ٘ 7ت136بلوسعةدلد ّبللةعذٗد بللشٗحد هي بلسعةد ، لر عػلر بعلٔ فعةل٘د ًْع٘مد لمًمضٗن ُّمٖ بلِ٘ذسّغٌٖ٘ 3ت38بلٔ بجًخ ةع هع صٗةدخ قةعذٗد بلْعؾ لسحلمغ ، لسعْد 8ّؾذخ/هلغن جشّز٘ي عٌذ بلشقن بلِ٘ذسّغٌٖ٘ ُممْ بألهطممأ جًسممةظ 8، ّجممزلب ٗ ممْى بلممشقن بلِ٘ممذسّغٌٖ٘ 9ّؾممذخ/هلغن جممشّز٘ي عٌممذ بلممشقن بلِ٘ممذسّغٌٖ٘ ت P. fluorescens ISHبلحشّز٘٘ض هي بلعضلد بذ بلخمةسظ خلْٗمد ، لر ةخ فٖ لًسمةظ بألؾ٘مة بلوػِشٗمد للحشّز٘٘مضهِوٗؤدٕ بلشقن بلِ٘ذسّغٌٖ٘ للْعؾ دّسبخ زحشص بُو٘سَ هي خل زأض٘شٍ فٖ ربئح٘د ه ًْةذ بلْعؾ بلغزبئٖ ّفٖ لزػةٍ ع٘ش بل عةل٘ةذ بألٗؼ٘د ، ّرلب لعلقسَ جومذٓ غةُضٗمد بلوغمزٗةذ فمٖ ّعمؾ بلٌومْ بّ لسمأض٘شٍ بلوحةشمش فمٖ لًسلمة بلو ًْمةذ خمل بألغشم٘د ( ت 2414ّبخشّى ، Haddarبلخلْٗد ) ( عٌممذ زْطمم٘ف لًممضٗن بلحشّز٘٘ممض بلخممةسظ 1991ّبخممشّى ) Kohlmannلٌسممةئع هممع هةّغممذٍ زس مم ُممزٍ ب ، لر كممةى هممذٓ بلممشقن بلِ٘ممذسّغٌٖ٘ بألهطممأ لل عةل٘ممد جمم٘ي P. fluorescens M3/6خلممْٕ بلوٌممسع هممي ( بى بلممشقن بلِ٘ممذسّغٌٖ٘ 2449ّبخممشّى ) Mu، فممٖ ؾمم٘ي ّغممذ 8، هممع ق٘وممد هطلممٔ زحلممغ 5ت8 – 5ت7 ت 5ت7قذ جلغ P. fluorescens Rm12هطأ ل عةل٘د لًضٗن بلحشّز٘٘ض بلوٌسع هي بأل بلغذسخ ّبخشّى 2416، 52 - 44 ( : 1) 8هػلد دٗةلٔ للعلْم بلضسبع٘د ، 47 Pseudomonas. تأثٍز اٌزلُ اٌهٍذروخًٍٕ ٌٍىسظ اٌغذائً فً إٔتاج اٌبزوتٍش ِٓ اٌعشٌت 3شىً اٌ fluorescens ISH Pseudomonas fluorescens ISHبخسحمشذ قةجل٘مد بلعضلمد تسذٌيذ درخيت اٌسيزارة اٌّثٍيى ٌأتياج : Minimal saltsم ، علمٔ بلْعممؾ بلغمزبئٖ 35 – 5علمٔ لًسمةظ بجًممضٗن جسٌو٘سِمة جمذسغةذ هخسل ممد جم٘ي medium ٔتٗسؼؽ همي بلشم أ 8% ؾل٘ث فشص بلوؿؼش جةلشقن بلِ٘ذسّغٌٖ٘ بألهطأ بلحةلغ 1بلؿةّٕ عل م ، 5دسغممد ؾممشبسخ ّؾممذخ/هلغن جممشّز٘ي عٌممذ 7ت57( بى بلعضلممد بعطممر فعةل٘ممد ًْع٘ممد لمًممضٗن قممذسُة 4) ّؾمذخ/هلغن جمشّز٘ي عٌمذ 7ت171ّبصدبدذ بل عةل٘د بلٌْع٘د جضٗةدخ دسغد بلؿشبسخ لسحلغ بقظمٔ ق٘وِمة ُّمٖ م ، ضن زعْد لسٌخ غ جعذُة هع صٗةدخ دسغد بلؿشبسخ ؾسٔ فٖ دسغد بلؿشبسخ بلوطلمٔ لٌومْ 15دسغد ؾشبسخ ّؾذخ/هلغن جشّز٘ي ، ُّْ زأك٘مذ لوةزْطمأ 2ت143م لر جلغر عٌذُة بل عةل٘د بلٌْع٘د 25ُزٍ بلح سشٗة ُّٖ ( هي بى دسغد بلؿشبسخ بلوطلٔ لٌوْ بل ةئي بلوػِشٕ قمذ ت ز مْى دبئومةخ 2444ّبخشّى ) Agarwalبلَ٘ ُممٖ بلوطلممٔ جًسممةظ بجًضٗوممةذ ؾسممٔ جمم٘ي عممـلتذ بلٌممْع بلْبؾممذ ، ّبعممسوشذ جعممذُة بل عةل٘ممد بلٌْع٘ممد -Ikramم ، ُّزب ٗس م همع همةركشٍ 35جشّز٘ي فٖ دسغد ؾشبسخ ّؾذخ/هلغن 8ت13جةجًخ ةع لسظأ بلٔ Ul-Haq ّUmber (2446هممي بى للؿممشبسخ بلعةل٘ممد زممةض٘شبذ هممذهشخ فممٖ لًسممةظ بلحشّز٘٘ممضبذ ت ) ٓٗعممض زأض٘ش دسغد بلؿشبسخ فٖ لًسةظ بجًضٗوةذ بلٔ زأض٘شُة فٖ ًوْ بل ةئي بلوػِشٕ ّبل عةل٘ةذ بألٗؼ٘د للخل٘د ، ُة فٖ ربئح٘د بألّكغػ٘ي فٖ بلْعؾ بلغزبئٖ ّبلطةقد بلؿشك٘مد للػضٗامةذ ّزغ٘٘مش بلخمْبص فؼلخ عي زـأض٘ش ّبخممشّى ) Gugiزس مم ُممزٍ بلٌسممةئع هممع هممةركشٍ ت (2414ّبخممشّى ، Vijayبل ٘ضٗةئ٘ممد للغشممة بلخلممْٕ ) قمأ م ، بٕ ب18 – 15ٗ ْى ج٘ي P. fluorescens( فٖ بى بفؼأ لًسةظ للحشّز٘٘ضبذ هي بلح سشٗة 1991 هي دسغد بلؿشبسخ بلوطلٔ للٌوْ . Pseudomonas fluorescens ISH. تأثٍز درخت اٌسزارة فً إٔتاج اٌبزوتٍش ِٓ اٌعشٌت 4شىً اٌ بلغذسخ ّبخشّى 2416، 52 - 44 ( : 1) 8هػلد دٗةلٔ للعلْم بلضسبع٘د ، 48 ( ّغمْد صٗمةدخ زذسٗػ٘مد فمٖ لًسمةظ بلحشّز٘٘مض جضٗمةدخ 5ٗحم٘ي بلشم أ ) تسذٌذ تزوٍش اٌٍماذ األِثً ٌأتاج : ّؾمذخ/هلغن جمشّز٘ي 1ت34بلْعؾ بلغزبئٖ ، لر جلغر بل عةل٘مد بلٌْع٘مد بعذبد بلخلٗة فٖ بلللةؼ بلوؼةم بلٔ 14عٌذ لعمسعوة للمةؼ جسشك٘مض 2 ّذ م / همأ ، ّبصدبدذ بل عةل٘مد بلٌْع٘مد لمًمضٗن همع صٗمةدخ زشك٘مض بلللمةؼ 14لسحلممغ بقظممٔ ق٘وممد لِممة عٌممذ زشك٘ممض 7 ّؾممذخ/هلغن جممشّز٘ي ، لسعممْد جعممذُة 3ت172ّ ذ م / هممأ لر جلغممر 14ّؾذخ/هلغن جشّز٘ي عٌذ لعسعوة زشك٘مض للمةؼ 7ت144هع صٗةدخ زشك٘ض بلللةؼ لسحلغ ّزٌخ غ 8 ّ ذ م / لى لًخ ةع بل عةل٘د بلٌْع٘د لمًضٗن جسعسعوة زشك٘ض قل٘أ هي بلللةؼ ٗعْد بلٔ بى عذد بلخلٗة تٗ ٖ هأ ت ضٗةدخ زشك٘ض بلللمةؼ بلوغمسعوأ عمي جًسةظ كو٘ةذ كح٘شخ هي بجًضٗن ، بهة لًخ ةع بل عةل٘د بلٌْع٘د لمًضٗن ج بلؿذ بألهطأ ف٘و ي بى ٗعضٓ بلٔ بلسمضبؾن بلشمذٗذ للخلٗمة ّزٌةفغمِة علمٔ بلومْبد بلغزبئ٘مد فمٖ بلْعمؾ ّزغ٘مش ( ت 1994ّبخشّى ، Rossبلشقن بلِ٘ذسّغٌٖ٘ للْعؾ زحعةخ لزلب ) . Pseudomonas fluorescens ISH. تأثٍز تزوٍش اٌٍماذ فً إٔتاج اٌبزوتٍش ِٓ اٌعشٌت 5شىً اٌ Pseudomonas زن هسةجعمد لًسمةظ بلحشّز٘٘مض همي بلعضلمد بلوؿل٘مدتسذٌذ ِذة اٌتسضٍٓ اٌّثٍى ٌأتاج : fluorescens ISH ( زضبٗذ بل عةل٘د بلٌْع٘د 6عحش هذد زؿؼ٘ي هخسل د ، لر ٗسؼؽ هي هلؾةد بلش أ ) ّؾمذخ/هلغن جمشّز٘ي ، لسظمأ بقظمٔ هغمسْٗةزِة عٌمذ 1ت53لمًضٗن بلوٌسع هع صٗةدخ هذخ بلسؿؼ٘ي لر جلغر م ، لسعْد ّزٌخ غ جعمذٍ 15عةعد هي بلسؿؼ٘ي جذسغد ؾشبسخ 96ّؾذخ/هلغن جشّز٘ي جعذ هشّس 8ت232 . عةعد هي بلسؿؼ٘ي 124ّؾذخ/هلغن جشّز٘ي جعذ 2ت141هع صٗةدخ بلوذخ عي ُزب بلؿذ لسظأ بلٔ . Pseudomonas fluorescens ISHاٌبزوتٍش ِٓ اٌعشٌت . تأثٍز ِذة اٌتسضٍٓ فً إٔتاج 6شىً اٌ بلغذسخ ّبخشّى 2416، 52 - 44 ( : 1) 8هػلد دٗةلٔ للعلْم بلضسبع٘د ، 49 ٗو ي بى ٗعضٓ لًخ ةع بل عةل٘د بلٌْع٘د جضٗةدخ هذخ بلسؿؼ٘ي بلٔ بلسؿلأ بلزبزٖ للخلٗة ّبؽلق هؿسْٗةزِة بلٔ بلْعؾ ّؾذّش ُؼن ربزٖ لمًضٗن بّ جغحث زغ٘ش بلةشّم بلوضسع٘د ج عمأ ًمْبزع بلعول٘مةذ بألٗؼم٘د ( تLazazzera ،2444بس ًوْ بلح سشٗة بألهش بلزٕ ٌٗع ظ علحةخ علٔ بجًسةظ )بلوس ًْد هع لعسوش عةعد كةًر ُٖ بألفؼمأ 96( هي بى هذخ زؿؼ٘ي 1991ّبخشّى ) Gugiزس ُزٍ بلٌس٘ػد هع هةركشٍ ( 2449ّبخمشّى ) Mu، ُّْ بألهمش بلمزٕ بكمذٍ Pseudomonas fluorescensجًسةظ بلحشّز٘٘ض هي كةًممر جعممذ هممذخ Pseudomonas fluorescens Rm12سةغ٘ممد لمًممضٗن هممي بلح سشٗممة هممي بى بفؼممأ لً عةعد ت 96زؿؼ٘ي ( بى لًسمةظ لًمضٗن بلحشّز٘٘مض همي بلعضلمد بلوؿل٘مد 7ٗةِش بلشم أ ) تاثٍز عٍٍّت اٌتهىٌت فً إٔتاج اإلٔشٌُ : سعوة بلؿةػمٌد ّؾذخ/هلغن جشّز٘ي عٌذ لعم 5ت231كةًر Pseudomonas fluorescens ISHلح سشٗة عمةعد همي بلسؿؼم٘ي ، ُّمٖ بفؼمأ 96م جعمذ همشّس 15دّسخ/دق٘لد جذسغد ؾمشبسخ 125بلِضبصخ جغشعد ّؾمذخ/هلغن 8ت45ج ط٘ش هلةسًد جسعسعوة بلؿةػٌد بلغةكٌد جٌ ظ بلةشّم بعلٍ لر جلغر بل عةل٘د بلٌْع٘مد جشّز٘يت كغممػ٘ي بلممزبئث ّهػةًغممد ه ًْممةذ بلْعممؾ زعممضٓ بلٌسممةئع بعمملٍ بلممٔ دّس عول٘ممد بلسؿشٗممب فممٖ زممْف٘ش بألّ ّزْصٗممع بلوممةدخ بألعممةط فممٖ ّعممؾ بلسٌو٘ممد ، ّعلممٔ بلعوممْم زٌممسع لًضٗوممةذ بلحشّز٘٘ممض فممٖ رممشّم ُْبئ٘ممد (Nadeem ، لر ٗسممةضش لًسممةظ بلحشّز٘٘ممضبذ بلخممةسظ خلْٗممد فممٖ بألؾ٘ممة بلوػِشٗمممد 2449ّبخممشّى ، ) وسلممب زممةض٘شبذ هخسل ممد علممٔ ز ممْٗي بلوٌممسع خممل بلِْبئ٘ممد جسممْفش بألّكغممػ٘ي بلوممزبت فممٖ بلْعممؾ بلممزٕ ٗ Potumarthiبلسخوممشبذ بلِْبئ٘ممد ّرلممب لسممأض٘شٍ فممٖ بلوغممةسبذ بألٗؼمم٘د لألؾ٘ممة بلوػِشٗممد بلوٌسػممد ) ت(2447ّبخشّى ، Pseudomonas fluorescens. تأثٍز اٌتهىٌت أو اٌتسزٌه فً إٔتاج اٌبزوتٍش ِٓ اٌعشٌت 7شىً اٌ ISH اٌّظادر ت بل ةئٌةذ بلذق٘لد عول٘ة ت زشغود عحذ بلؿةفظ ، ع ت م ت 1989ُـ ت ّ ت ، ّفةى دٗوةسك ، ت ت ظ ت ع٘لٖ ، ، ّهحةسك ، م ت ص ت م ت ، ّهؿوْد ، ط ت ع ت ذ ت ، بلذبس بلعشج٘د للٌشش ّبلسْصٗع ، بللةُشخ ت Agrawal, D., P. Patidar, T. Banerjee and S. Patil. 2004. Production of alkaline protease by Penicillium sp. under SSF conditions and its application to soy protein hydrolysis. Process Biochemistry. 39. 977-981. بلغذسخ ّبخشّى 2416، 52 - 44 ( : 1) 8هػلد دٗةلٔ للعلْم بلضسبع٘د ، 54 Bradford, M.M. 1976. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein dye binding. Anal. Biochem. 72:248–254. Buchanan, R. E. and M. E. Gibbons. 1974. Bergey’s Munual of Determinative Bacteriology. 8 th ed. Williams and Wilkins compression. Baltimore, Maryland. Cempirkova, R. and M. Mikulova. 2009. Incidence of psychrotrophic lipolytic bacteria in cow’s milk. Czech J. Animal Sci. 54: 65-73ت Gugi, B., N. Orange, F. Hellio, J. F. Burini, C. Guillou, F. Leriche and J. F. Guespin-Michel. 1991. Effect of growth temperature on several exported enzyme activities in the psychrotrophic bacterium Pseudomonas fluorescens. J. Bacteriology. 173:12. 3814-3820. Haddar, A., N. Fakhfakh-Zouari, N. Hmidet, F. Frikha, M. Nasri and A. S. Kamoun. 2010. Low-cost fermentation medium for alkaline protease production by Bacillus mojavensis A21 using hulled grain of wheat and sardinella peptone. J. Bioscience and Bioeng. 110: 288-294. Harrigan, W.F. and M. E. McCance. 1976. Laboratory Methods in Food and Dairy Microbiology. Academic Press. London. New York. Holt, J. G., N. R. Krieg, J. T. Staley and S. T. Williams. 1994. Bergey`s Manual of Systematic Bacteriology. 9 th ed. Williams and Wilkins. Baltimore. Maryland. U.S.A. Ikram-Ul-Haq, M. H. and H. Umber. 2006. Production of protease by Penicillium chrysogenum through optimization of environmental conditions. J. Agriculture and Social Sci. 2: 1813–2235. Karan, R., S. P. Singh, S. Kapoor and S. K. Khare. 2011. A novel organic solvent tolerant protease from a newly isolated Geomicrobium sp. EMB2 (MTCC 10310): production optimization by response surface methodology. New Biotechnology. 28: 136-145. Kohlmann, K. L., S. S. Nielsen and M. R. Ladisch. 1991. Purification and characterization of an extracellular protease produced by Pseudomonas fluorescens M3/6. J. Dairy Sci. 74: 4125-4136. Lazazzera, B. A. 2000. Quorum sensing and starvation signals for entry into the stationary phase. Current Opinion in Microbiology. 3:177-182. Mckellar, R. C. and H. Cholette. 1984. Synthesis of extracellular proteinase by Pseudomonas fluorescens under conditions of limiting carbon, nitrogen, and phosphate. Appl. Environ. Microbiol. 47: 1224-1227. Mu, Z.; M. Du and Y. Bai. 2009. Purification and properties of a heat-stable enzyme of Pseudomonas fluorescens Rm12 from raw milk. Eur. Food Res. Technol. 228: 725–734. Nadeem, M., J. I. Qazi and S. Baig. 2009. Effect of aeration and agitation rates on alkaline protease production by Bacillus licheniformis UV-9 mutant. Turkish J. Biochemistry. 34: 89-96. بلغذسخ ّبخشّى 2416، 52 - 44 ( : 1) 8هػلد دٗةلٔ للعلْم بلضسبع٘د ، 51 Nicodeme, M., J. Grill, G. Humbert and J. Gaillard. 2005. Extracellular protease activity of different Pseudomonas strains: dependence of proteolytic activity on culture conditions. J. Appl. Microbiol. 99: 641–648. Palleroni, N. J. 2004. Pseudomonas. In: Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology. (Brenner, D. J.; Krieg, N. R.; Staley, J. T. and Garrity, G. M. eds.). Springer. New York. pp. 323–379. Palleroni, N. J. 1984. Family I: Pseudomonadaceae. In: Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology. (Krieg, N. R. and Holt, J. G. eds.). Williams and Wilkins. Baltimore. Pillai, P., S. Mandge and G. Archana. 2011. Statistical optimization of production and tannery applications of a keratinolytic serine protease from Bacillus subtilis P13. Process Biochemistry. 46: 1110-1117. Potumarthi, R., S. Chi. and A. Jetty. 2007. Alkaline protease production by submerged fermentation in stirred tank reactor using Bacillus licheniformis NCIM-2042: Effect of aeration and agitation regimes. Biochemical Engineering J. 34:185-192. Ross, I. K., F. DeBerandis, G. E. Emerson, A. Casson and P. A. Sullivan. 1990. The secreted aspartic proteinase of Candida albicans: physiology of secretion and virulence of proteinase-deficient mutant. J. Gen. Microbiol. 136: 687-694. Sharma, J., A. Singh, R. Kumar and A. Mittal. 2006. Partial purification of an alkaline protease from Aspergillus oryzae AWT20 and its enhanced stabilization in entrapped ca-alginate beads. Int. J. Microbiol. 2:2. 98-106. Stanier, Y., N. J. Palleroni and M. Doudoroft. 1966. The aerobic Pseudomonas: Taxonomic studay. J. Gen. Microbiol. 43: 159- 271. Stolp, H. and D. Ggadkari. 1981. Nonpathogenic members of the genus Pseudomonas. In: The Prokaryotes. (Starr, M. P.; H. Stolp; H. G. Truper and H.G. Schlegel eds.). Springer-Varlage. Berlin. Heidelberg. New York. Tari, C., H. Genckal and F. Tokatl. 2006. Optimization of a growth medium using a statistical approach for the production of an alkaline protease from a newly isolated Bacillus sp. L21. Process Biochemistry. 41: 659–665. Vijay A., S. Hemapriya, J. Selvin and S. Kiran. 2010. Production and optimization of haloalkaliphilic protease by an extremophile Halobacterium sp. Js1, isolated from thalassohaline environment. Global J. Biotechnology and Biochemistry. 5: 44-49. Vyletelova, M. and O. Hanus. 2000. Effect of contamination by Pseudomonas fluorescens on principal components and technological parameters of pasteurized milk during storage. Czech J. Food Sci. 18: 224–234. بلغذسخ ّبخشّى 2416، 52 - 44 ( : 1) 8هػلد دٗةلٔ للعلْم بلضسبع٘د ، 52 EXTRACTION, PURIFICATION AND CHARACTERIZATION OF PROTEASE OF Pseudomonas fluorescens ISH AND IT’S ROLE IN DETERIORATION OF IRAQI SOFT CHEESE ISOLATION AND IDENTIFICATION OF Pseudomonas fluorescens AND DETERMINATION OF OPTIMUM CONDITIONS OF PROTEASE PRODUCTION ZIAD T. SEDRAH * AMER M.A. SALIH ** GHAZI M. AZIZ *** * Collage of Agriculture _ Diyala University- ziadsedrah@gmail.com. ** Collage of Agriculture_Baghdad University_ Salih1943@yahoo.com. *** Collage of Sciences_Baghdad University_ Ghazi_m56@yahoo.com. ABSTRACT The presence of psychrotrophic Pseudomonas fluorescens was investigated in samples of Iraqi soft cheese that produced in the dairy plant of the department of food science, college of Agriculture, University of Baghdad, Iraq. Depending on the cultural, morphological and biochemical tests and proteolysis, 24 isolates were diagnosed as proteolytic bacteria. The diagnosis was confirmed by Vitek 2 compact system. The most efficient 5 isolates were used to quantitative investigate protease production capability. The local isolate P. fluorescens ISH was the best in enzyme production (117.8 units/mg protein), and thus it was used in the current study to produce the enzyme by submerged cultures. The optimum conditions for protease production were the use of minimal salts medium with 1% skim milk and pH 8 at a 15 O C for 96 hours and the inoculum size was 1 x 10 7 using shaking incubator at 125rpm of speed. Keywords: Pseudomonas fluorescens, Psychrotrophic bacteria, proteases, Iraqi soft cheese. mailto:ziadsedrah@gmail.com mailto:Salih1943@yahoo.com mailto:Ghazi_m56@yahoo.com