4: 1 تأثير التسميد البوتاسي والرش بالبورون في نمو صنفين من نباتات القرنفل وازهارهما: ؽغٍٛ 2016، 57 - 50 ( : 2) 8يغهخ دٚبنٗ نهؼهٕو انضساػٛخ ، 50 الكشف الوبكز عي الحضبعف الكزوهوسوهي الٌبجج عي جبثيز الكولشسيي في ًببت الكبسيب angustifolia Cassia. *َجٌبى قبسن حسيي dr.janan77@yahoo.comثبثم -عبيؼخ انمبعى انخؼشاء-كهٛخ انضساػخ-لغى انجغزُخ ُْٔذعخ انؾذائك-أعزبر يغبػذ* الوسحخلص - عبيؼةخ انةشاص٘ - كهٛةخ انضساػةخ-شاد انضساػخ انُغٛغٛخ ٔانزمبَبد االؽٛبئٛخَفزد انزغشثخ فٙ يخزج ، نهكشف انًجكش ػٍ ؽذٔس انزؼبػف انكشٔيٕعٕيٙ 2014اٚشاٌ. خالل انًٕعى انظٛفٙ نؼبو -كشيُشبح 0.05، 0.025، 0.01 ْٙانُبرظ ػٍ َمغ انجزٔس انًغزُجزخ نُجبد انكبعٛب فٙ صالصخ رشاكٛض يٍ انكٕنشغٍٛ عةةبػخ. رةةى انكشةةف ػةةٍ ٔعةةٕد انزؼةةبػف انكشٔيٕعةةٕيٙ 24، 12، 6ْةةٙ ٔنةةضالس فزةةشاد صيُٛةةخ % DNA (RAPD) Randomlyثبالػزًبد ػهٗ يإششاد انزؼبػف انؼشٕائٙ انًزؼةذد االشةكبل نغهغةهخ Amplified Polymorphic DNA ٔاكةةذد َزةبئظ انزؼةةبػف انكشٔيٕعةٕيٙ نهُجبرةةبد انزةٙ اػ ةةذ ، ( RAPDػذد انكشٔيٕعٕيبد نٓب فٙ خالٚب اؽشاف انغزٔس. ثُٛذ َزبئظ رمبَةخ ) اػهٗ ثؼذ ٔساصٙ ثؾغبة ؽضيخ يزشبثٓخ ٔ 35ؽضيخ ) 78ثبدئبد 9ش اػ ذ ٛٔعٕد رغبٚشاد ٔساصٛخ ثٍٛ يؼبيالد انكٕنشغٍٛ، ؽ T6(0.025 %X24 % ، اػ ةذ يؼبيهةخ انكٕنشغةٍٛ 55.43ؽضيخ يزجبُٚخ( ٔلذسد َغجخ انزجةبٍٚ ة 43 T7(0.05 X 6 عةبػخT3(0.01 X 24ٔ ) % ٔرهزٓب َجبرةبد انًؼةبيالد 0.39ٔساصٙ عبػخ( اكجش ثؼذ % ػهةةٗ انزشرٛةةت. ثُٛةةذ انُزةةبئظ انًخزجشٚةةخ نؾغةةبة ػةةذد 0.33% ٔ 0.35عةةبػخ( ٔثُغةةجخ ثؼةةذ ٔساصةةٙ ، T6 ,T3 ,T7( فٙ ثؼغ َجبربد انًؼبيالد 4N=56انكشٔيٕعٕيبد ؽذٔس رؼبػف كشٔيٕعٕيٙ) T6رهزٓب َجبرةبد انًؼةبيالد T7% فٙ َجبربد انًؼبيهخ 64.71كشٔيٕعٕيٙ ار كبَذ اػهٗ َغجخ رؼبػف (57.14ٔ )% T3(26.09.)% DNAكبعٛب ، كٕنشٛغٍٛ ، انزؼبػف انؼشٕائٙ انًزؼذد االشكبل نغهغهخ ًفزبؽٛخ: انكهًبد ان الوقذهة ْٕٔ Leguminosaeانٗ انؼبئهخ انجمٕنٛخ angustifolia Cassia ُٚزًٙ َجبد انغُب )كبعٛب( َجبد ػشجٙ يؼًش ال ٚضٚذ اسرفبػّ فٙ انغبنت ػهٗ يزشٍٚ ٔٚؾًم انُجبد أٔسالب يشكجخ سٚشخ انشكم رزكٌٕ يٍ صٔعٍٛ ئنٗ عجؼخ أصٔاط يٍ انٕسٚمبد، ٔأصْبس فٙ لًى األغظبٌ ػهٗ ْٛئخ يغبيٛغ يب ثٍٛ صْشرٍٛ خ رشجّ صًبس انفبطٕنٛب أٔ انفٕل ئنٗ عجغ صْشاد فٙ شكم ػُبلٛذ راد نٌٕ اطفش ئنٗ ثشرمبنٙ. انضًبس لشَٛ عهذٚخ انًهًظ راد نٌٕ ثُٙ يظفش رؾزٕ٘ ثذاخهٓب ثزٔسا راد نٌٕ سيبد٘ ٔلٕايٓب طهت. انًٕؽٍ األطهٙ نُجبد انغُب ْٙ انغضٚشح انؼشثٛخ ٔيظش ٔانغٕداٌ ٔانُٓذ ٔانٛبثبٌ ٔئٚشاٌ، ٔٚؼزجش انغُب يٍ ل اصْبسِ ٔٔفشرٓب كَّٕ ٚضْش فٙ انشثٛغ ٔانخشٚف َجبربد انضُٚخ انًشغٕثخ فٙ انؾذائك ٔانًزُضْبد نغًب ٔٚغزًش اصْبسِ نفزشح ؽٕٚهخ، ايب يٍ انُبؽٛخ ان جٛخ رؾزٕ٘ أٔساق ٔصًبس انغُب ػهٗ عهٕكٕصٚذاد ( ٕٔٚعذ يُٓب أسثؼخ أ، ة، ط، د. كًب رؾزٕ٘ ػهٗ Sennoesاَضشاكَُٕٛٛخ ٔرؼشف ثًغًٕػخ عُٕصاٚذ ) يٕاد فالفَٕٛذٚخ ٔصٚذ ؽٛبس نزنك ٚذخم فٙ يغبالد ؽجٛخ ػذٚذح، عهٕكٕصٚذاد َفضبنُٛٛخ ٔيٕاد ْاليٛخ ٔ Mohanty)ٔرؼزجش يظش ٔانغٕداٌ ٔانُٓذ ٔانٛبثبٌ انذٔل انًظذسح نهغُب ػهٗ يغزٕٖ رغبس٘ كجٛش نمذ اطجؼ انزؼبػف انكشٔيٕعٕيٙ يٍ اْزًبيبد يشثٙ انُجبد نًب نّ يٍ اًْٛخ فٙ .(2010ٔاخشٌٔ، انُجبربد كبالصْبس انكجٛشح ٔاالٔساق انغًٛكخ راد انخؼشح انذاكُخ ٔصٚبدح رؾغٍٛ انظفبد انجغزُٛخ نجؼغ َغجخ انؼشع نه ٕل فٙ انًغ ؼ انٕسلٙ أ اؽبنخ فزشح انزضْٛش أ صٚبدح رشاكٛض انًٕاد انفؼبنخ فٙ انُجبد (Gao ،ٌٔ1996ٔاخش.) ــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــ . 2014/ 12 / 31انجؾش غهىرربسٚخ . 2015/ 5/ 10ربسٚخ لجٕل انُشش http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ http://www.agriculmag.uodiyala.edu.iq/ ؽغٍٛ 2016، 57 - 50 ( : 2) 8يغهخ دٚبنٗ نهؼهٕو انضساػٛخ ، 51 ًٚكٍ نهزؼبػف انكشٔيٕعٕيٙ اٌ ٚؾذس ثشكم ؽجٛؼٙ ٔخبطّ فٙ انُجبربد االؽبدٚخ انًغًٕػخ انكشٔيٕعٕيٛخ ؽٛش رؼزجش االخٛشح ؽبنخ غٛش ؽجٛؼٛخ، أ ثشكم اط ُبػٙ ثأعزخذاو انؼذٚذ يٍ انًٕاد )ْٔٙ يبدح كًٛٛبٔٚخ رغبػذ ػهٗ يُغ ركٌٕ خٕٛؽ انًغضل اصُبء Colchicineغٍٛ انكًٛٛبئٛخ يضم انكٕنشٛ االَمغبو االػزٛبد٘ نهخالٚب انغغًٛخ يًب ًُٚغ عؾت انكشٔيٕعٕيبد انٗ ال بة انخهٛخ فزُزظ ػٍ رنك خهٛخ يزؼبػفخ انؼذد انكشٔيٕعٕيٙ( رغزخذو ْزِ انًبدح ثزشاكٛض يخزهفخ ٔاصيُخ يخزهفخ ٔؽشق يخزهفخ ؽغت Bir ٔKumari (1982 )(، ٔلذ اعشٖ 2002ٔاخشٌٔ ، Petersenانغضء انُجبرٙ انًشاد يؼبػفزخ ) angustifoliaدساعخ ٔساصٛخ نؾغبة االػذاد انكشٔيٕعٕيٛخ الَٕاع يخزهفخ يٍ انكبعٛب ٔلذ ٔعذ اٌ Cassia ٗ2رؾزٕ٘ ػهn=28 .كشٔيٕعٕو نٗ ادٔاد اكضش فؼبنٛخ فٙ ػًهٛخ انزشثٛخ، ٔلذ ثٍٛ رؾزبط ثشايظ انزؾغٍٛ انُجبرٙ دائًب ٔثشكم يزضاٚذ ا De Laat ( ٌٔثأٌ ان شق انزمهٛذٚخ انًغزخذيخ يجبششح فٙ رمذٚش انؼذد انكشٔيٕعٕيٙ 1987ٔاخش ) ٔرؾذٚذ يغزٕٖ انزؼبػف فٙ انُجبربد ؽٕٚهخ ٔيؼمذح عذا ٔرؾزبط انٗ يخزجشاد عٛذح انزغٓٛض ٔكبدس بربد انًؼبيهخ دٌٔ رؾذٚذ يغجك ال٘ انُجبربد انزٙ ؽذس فٛٓب يذسة ٔرٔ خجشح، ٔرغشٖ ػهٗ عًٛغ انُج انزؼبػف، نزنك فبنؾبعخ يبعخ الٚغبد ؽشق غٛش يجبششح ٔفؼبنخ فٙ رؾذٚذ يغزٕٖ انزؼبػف ٔثشكم يجكش يضم اعشاء انجظًخ انٕساصٛخ نهُجبربد فٙ يشؽهخ انجبدسح ٔػُذ ظٕٓس أل ٔسلخ ؽمٛمٛخ ثبالػزًبد ٔيٍ ْزِ انزمبَبد انزؼبػف انؼشٕائٙ انًزؼذد االشكبل DNAٔرمذٚش ال ػهٗ رمبَبد ػذٚذح نفؾض رؼزًذ ْزِ انزمبَخ ػهٗ DNA (RAPD )Randomly Amplified Polymorphic DNAنغهغهخ انؾبٔٚخ ػهٗ DNAانُجبرٛخ فٙ رغهغهٓب انُٕٛكهٕٛرٛذ٘ ػشٕائٛب ؽٛش رؼخى ل غ DNAئكضبس ل غ ُٓب أٌ رشكم رزبيٛخ يغ انجبدئبد انؼشٕائٛخ فٙ َٓبٚزٓب. ًٚكٍ سؤٚزٓب ػهٗ رزبنٛبد َٕٛكهٕٛرٛذٚخ، ٔانزٙ ًٚك ( . 2007ؽغٍٛ، Agarose gel (يخزهفخ انٕصٌ انغضٚئٙ فٙ ْاليخ يٍ االكبسٔص bandsشكم ؽضو ثبَٓب الرؾزبط نًؼشفخ يغجمخ ثبنزشكٛت انُٕٛكهٕٛرٛذ٘ نهًبدح انٕساصٛخ انًشاد دساعزٓب، RAPDرزًٛض رمبَخ ح نذساعخ انؼشبئش راد االػذاد انكجٛشح يٍ االفشاد، كًب ال ٚز هت اَغبصْب ٔلزب ؽٕٚال ٔآَب غٛش ٔيفٛذ يؼمذح ٔال رؾزبط انٗ ٔعٕد يٕاد يشؼخ، ٔرٕفش ػذد كجٛش عذا يٍ انجبدئبد انزٙ ًٚكٍ رجبدنٓب ثٍٛ يشاكض (.2008انجؾش، ئػبفخ انٗ عٕٓنخ يؼشفخ انزغهغم انُٕٛكهٕٛرٛذ٘ نهجبدب)انخٕالَٙ، ( اٌ يؼبيهخ َجبربد انذارٕسح انًُزغخ فٙ انضساػخ انُغٛغٛخ ثبنكٕنشغٍٛ 2009ٔاخشٌٔ) Liuٔعَذ يهغى/نزش ادٖ انٗ رؼبػف انؼذد انكشٔيٕعٕيٙ ٔانزٙ رى انكشف ػُٓب ثٕلذ يجكش ثبالػزًبد 750ثزشكٛض ٍ انكبعٛب َٕػب ي 28ثبدٖء، ٔفٙ دساعخ نهزُٕع انٕساصٙ ػهٗ 14ٔثأعزؼًبل RAPDػهٗ رمبَخ نزؾذٚذ دسعخ انمشاثخ انٕساصٛخ ثٍٛ ْزِ االَٕاع ٔثبنشغى يٍ اٌ RAPD ، SSR ، ISSRاعزؼًهذ رمبَبد اػ ذ RAPDكبَذ االكضش دلخ فٙ كشف انمشاثخ انٕساصٛخ أال اٌ انجبدئبد انًغزؼًهخ ثزمبَخ SSRرمبَخ (.2010ٌٔ، ٔاخش Mohantyاخزالفبد ٔػذد ؽضو اػهٗ ثكضٛش يٍ انزمبَبد االخشٖ ) ( انزُٕع انٕساصٙ نخًغخ رشاكٛت ٔساصٛخ نُجبد انكبعٛب ؽظهٕ 2011ٔاخشٌٔ ) Stephanدسط ٔثغزخ RAPDػهٛٓب يٍ يٍ خًغخ يُبؽك يخزهفخ فٙ انُٓذ، ثبالػزًبد ػهٗ انجظًخ انٕساصٛخ ثزمبَخ ( 0.2059-0.9302ثبدئبد، ٔلذ رٕصػذ االخزالفبد انٕساصٛخ ثٍٛ انزشاكٛت انخًغخ ػًٍ انًذٖ ) TiwariٔMishraٔثضالس يغًٕػبد ؽغت انشغشح انٕساصٛخ نهزشاكٛت انذاخهخ فٙ انذساعخ. ٔعذ عبػخ، 36% ٔنًذح 0.05( ؽذٔس رؼبػف كشٔيٕعٕيٙ نُجبد انفهٕكظ ػُذ َمغ ثزٔسِ ثزشكٛض 2012) ٔؽٕل ٔلذ شخض انزؼبػف فٙ انُجبربد انًؼبيهخ ثؼذ انٕطٕل انٗ انغٛم انضبنش يٍ خالل يزبثؼخ ػذد انًضسٔػخ َغٛغٛب ٔعذ مذٚفخانضغٕس ٔثبلٙ انظفبد انًٕسفٕنٕعٛخ نهُجبربد. ٔفٙ دساعخ ػهٗ َجبربد ان % انٗ ٔعؾ انضساػخ 0.05% ٔ 0.01ؽذٔس رؼبػف كشٔيٕعٕيٙ ػُذ اػبفخ انكٕشغٍٛ ثزشكٛض (Sajjad ،ٌٔ2013ٔاخش.) انجؾش انٗ : َٔظشا ألًْٛخ َجبد انكبعٛب يٍ انُبؽٛخ انغًبنٛخ ٔان جٛخ ْذف رؾذٚذ افؼم رشكٛض نهكٕنشغٍٛ ٔانفزشح انضيُٛخ انالصيخ نُمغ ثزٔس انكبعٛب فٙ أؽذاس انزؼبػف - انكشٔيٕعٕيٙ ٔرؾغٍٛ انظفبد انخؼشٚخ ٔانضْشٚخ ٔصٚبدح انًٕاد انفؼبنّ ثبنُجبد . .RAPDٛخ نزمبَخ انكشف انًجكش )يشؽهخ انجبدسح( نهُجبربد انًزؼبػفخ ثبالػزًبد ػهٗ انجظًخ انٕساص - ؽغٍٛ 2016، 57 - 50 ( : 2) 8يغهخ دٚبنٗ نهؼهٕو انضساػٛخ ، 52 الوواد وطزائق البحث -عبيؼخ انشاص٘-كهٛخ انضساػخ-َفزد انزغشثخ فٙ يخزجشاد انضساػخ انُغٛغٛخ ٔانزمبَبد االؽٛبئٛخ انُبرغّ ػٍ انزهمٛؼ انزارٙ الصْبس َجبد ٔاؽذ ٔنًٕعًٍٛ، اٚشاٌ، اعزؼًهذ ثزٔس َجبد انكبعٛب - كشيُشبح 6 ٔنضالس فزشاد صيُٛخ %0.05، 0.025 ، 0.01ٍ انكٕنشغٍٛ َمؼذ انجزٔس انًغزُجزخ ثضالس رشاكٛض ي ثزسح ٔغغهذ ثًبء 50(، اؽزٕد كم يؼبيهخ ػهٗ 1غذٔلانيؼبيهخ انًمبسَخ ) فؼال ػٍعبػخ 24، 12، عبس٘ نًذح عبػخ نهزخهض يٍ رأصٛش انكٕنشغٍٛ انضائذ. صسػذ انجزٔس انًغُجزخ ٔانًؼبيهخ فٙ اؽجبق فهُٛٛخ ضساػخ انجٛذ يٕط.ؽبٔٚخ ػهٗ ٔعؾ ان رهوس هعبهالت الكولشسيي وفحزات ًقع البذور الوسحٌبحة لٌببت الكبسيب. . 1جذول سيض انًؼبيهخ رشكٛض انكٕنشغٍٛ )%( فزشح انًؼبيهخ )عبػخ( Con. 0 0 T1 0.010 6 T2 0.010 12 T3 0.010 24 T4 0.025 6 T5 0.025 12 T6 0.025 24 T7 0.050 6 T8 0.050 12 T9 0.050 24 ثؼذ ظٕٓس االٔساق انفهمٛخ رى ؽغبة َغجخ االَجبد نًؼشفخ فًٛب أرا كبَذ ُْبنك ثزٔس يٛزخ ثغجت غشاو يٍ االٔساق انُظٛفخ 2رأصٛش انكٕنشغٍٛ، ٔػُذ ظٕٓس االٔساق انؾمٛمٛخ اخزد يٍ كم يؼبيهخ . RAPDهٗ رمبَخ ثبالػزًبد ػ DNAٔانخبنٛخ يٍ انًغججبد انًشػٛخ نغشع ػضل ٔرؾهٛم ٔلذسد كًٛخ انؾبيغ Geneaid يُزظ يٍ ششكخ Kitػضنذ االؽًبع انُٕٔٚخ ثأعزؼًبل كذ ثٕعٕد Spectrophotometer Beckman Du-61فٙ انؼُٛبد ثبعزخذاو عٓبص DNAانُٕٔ٘ ص َبَٕيٛزش، ٔكبَذ كم لشاءح نهكضبفخ انؼٕئٛخ ػهٗ انغٓب 260ٔؽٕل يٕعٙ UVاالشؼخ فٕق انجُفغغٛخ يٍ خالل لغًخ DNAيم يٍ انغبئم. كًب لذسد َمبٔح DNA/1يٛكشٔغشاو يٍ 50رؼبدل 1يمذاسْب َبَٕيزش ػهٗ سلى لشاءح انكضبفخ انؼٕئٛخ ػهٗ ؽٕل 260سلى لشاءح انكضبفخ انؼٕئٛخ ػُذ ؽٕل يٕعٙ .2 -1.8َبَٕ يزش ، ٔٚؼذ انؾًغ انُٕٔ٘ َمٛب ارا رشأػ ؽبطم لغًخ انمشائزٍٛ ثٍٛ انًذٖ 280 ثبدئبد 9ٔاخزٛش يُٓب .OPERON Technologies,Incثبدٖء يظُؼخ نذٖ ششكخ 15ُعشة أعشٚذ كبفخ رفبػالد انزؼخٛى (.2غذٔل ان) DNAرًٛضد ثمذسرٓب ػهٗ اػ بء اخزالفبد ٔاػؾخ فٙ (، ٔيشسد َٕارظ انزفبػم ػجش ْالو يٍ اٜكبسٔص رشكٛضِ 1994) ٔاخشٍٚ Haleyانؼشٕائٙ ٔفمبً ن شٚمخ %فٙ عٓبص انزشؽٛم انكٓشثبئٙ االفمٙ.1.2 نغشع اٚغبد َغجخ SIMQULفٙ عذٔل خبص ثبالػزًبد ػهٗ ثشَبيظ RAPDسرجذ َزبئظ رمبَخ ٔ Neiانًمذسح ) Similarityانزشبثّ ثٍٛ َجبربد انًمبسَخ ٔانًؼبيالد ثبالػزًبد ػهٗ يؼبدنخ لٛى انزشبثّ Li ،1979 :انز٘ ٚؼزًذ ػهٗ انًؼبدنخ ) Similarity = 2nxy / nx + ny ؽٛش اٌ : nxy ٍٛرًضم ػذد انؾضو انًشزشكخ ثٍٛ انًُٕرع :x ٔy ٔانزٙ رًضم طُفٍٛ يٍ االطُبف nx ػذد انؾضو انكهٛخ فٙ انًُٕرط :x ny ػذد انؾضو انكهٛخ فٙ انًُٕرط :y . ؽغٍٛ 2016، 57 - 50 ( : 2) 8يغهخ دٚبنٗ نهؼهٕو انضساػٛخ ، 53 انزشبثّ انٕساصٙ ثٍٛ انًؼبيالد َٔجبربد انًمبسَخ ػضنذ انُجبربد انًؼبيهخ ثؼذ انزؼشف ػهٗ َغجخ انزٙ اػ ذ الم رشبثّ ٔساصٙ يغ انًمبسَخ )اخزهفذ ٔساصٛب ػُٓب( ٔؽغت نٓب ػذد انكشٔيٕعٕيبد ( فٙ خالٚب انُٓبٚبد انغزسٚخ ثؼذ اعزأطبنٓب يٍ 1980) Sharma ٔSharmaثبالػزًبد ػهٗ ؽشٚمخ انجبدساد. الٌحبئج والوٌبقشة ٔعٕد فشٔلبد ٔاػؾخ فٙ َغجخ انجزٔس انًغزُجزخ انؾٛخ ثؼذ يؼبيهزٓب ثزشاكٛض 1ٚزؼؼ يٍ انشكم % ػُذ َمغ انجزٔس انًغزُجزخ ثبنًبء فمؾ 88انكٕنشغٍٛ انًخزهفخ ، ؽٛش كبَذ اػهٗ َغجخ نهجبدساد انؾٛخ % كٕنشغٍٛ 0.05ٔس انًغزُجزخ ثزشكٛض % ػُذ َمغ انجز16)انًمبسَخ(، ٔالم َغجخ نهجبدساد انؾٛخ كبَذ عبػخ، ٔاخزهفذ َغجخ انجبدساد انؾٛخ نجبلٙ انًؼبيالد ثٍٛ ْبرٍٛ انُغجزٍٛ. كًب َالؽظ يٍ َفظ 24ٔنفزشح دساد انؾٛخ رمم كهًب صاد رشكٛض انكٕنشغٍٛ ٔفزشح انُمغ ٔٚؼٕد ْزا انٗ انزأصٛش انغًٙ بانشكم اٌ َغجخ انج Tiwari ٔMishra (2012 )جزخ نُجبربد انكبعٛب ، ارفمذ ْزِ انُزبئظ يغ نهكٕنشغٍٛ ػهٗ انجزٔس انًغزُ ػُذ يؼبيهخ ثزٔس َجبد انفهٕكظ ثزشاكٛض يخزهفخ يٍ انكٕنشغٍٛ. . النسبة المئوية لبادرات الكاسيا الحية بعد معاممتها بتراكيز الكولشسين ولفترت زمنية مختمفة.1شكلال ثبدب ٔٔعذ ثبٌ ثؼغ انجبدئبد نى رظٓش َٕارظ رؼبػف يغ 15ثبخزجبس RAPDرى ر جٛك يإششاد أنـ دَب يغٍٛ انكبعٛب ٔانزٙ رذل ػهٗ ػذو ٔعٕد انًٕالغ انًكًهخ نزهك انجبدئبد فٙ يغٍٛ انكبعٛب ، ٔأظٓشد انًغًٕػخ األخشٖ يٍ انجبدئبد َٕارظ رؼبػف يشزشكخ ثٍٛ انُجبربد انًذسٔعخ رذل ػهٗ اسرجبؽٓب ( أيب انًغًٕػخ األخٛشح يٍ انجبدئبد ْٔٙ Conserved Sequenceنًؾبفظخ يٍ انًغٍٛ )ثبنًُبؽك ا ( ْٔٙ انزٙ أظٓشد َٕارظ رؼبػف يزجبُٚخ ثٍٛ انؼُٛبد انًذسٔعخ، ثبدئبد 9 األْى فٙ ْزِ انذساعخ ) ؽضيخ يزجبُٚخ ٔلذسد 43ؽضيخ يزشبثٓخ 35ٔؽضيخ فٙ انُجبربد انًذسٔعخ كبفخ يٍ ثُٛٓب 78ؽٛش اػ ذ ؽضيخ ٔيزٕعؾ ػذد 8.66%، ٔثهغ يزٕعؾ ػذد انؾضو يغ انجبدٖء انٕاؽذ 55.43َغجخ انزجبُٚبد ة ؽضيخ( ، 13اػهٗ ػذد يٍ انؾضو ) OPB-18ؽضيخ. اػ ٗ انجبدٖء 4.77انؾضو انًزجبُٚخ يغ كم ثبدٖء فٙ كًب اخزهفذ انجبدئبد انًغزخذيخ .ؽضيخ(5الم ػذد يٍ انؾضو ) OPX-18فٙ ؽٍٛ اػ ٗ انجبدٖء افؼم انجبدئبد انزٙ OPX-18كشف انزجبُٚبد انٕساصٛخ ثٍٛ َجبربد انًؼبيالد انًذسٔعخ فمذ كبٌ انجبدٖء %، فٙ ؽٍٛ 80ؽضيخ يزجبُٚخ ثٍٛ انًؼبيالد( ثُغجخ رجبٍٚ 4ؽضيخ، يُٓب 5اػ ذ ػذد كجٛش يٍ انؾضو ) ٍ انًؼبيالد( ٔثُغجخ ؽضيخ يزجبُٚخ ث2ٛؽضيخ يُٓب 8الم يغزٕٖ يٍ انزجبٍٚ ) OPB-12اػ ٗ انجبدٖء (. 2غذٔلان%) 25رجبٍٚ ؽغٍٛ 2016، 57 - 50 ( : 2) 8يغهخ دٚبنٗ نهؼهٕو انضساػٛخ ، 54 . عذد الحشم الكلي وعذد الحشم الوحببيٌة والٌسبة الوئوية للحببيٌبت الٌبججة عي الببدئبت 2جذول لوعبهالت ًببجبت الكبسيب بحزاكيش الكولشسيي. RAPDالوسحخذهة في جقٌية الـ لحزم المتباينةا % عدد الحزم المتباينة عدد الحزم ضاعفةالمت التسمسل النيوكميوتيدي 3 5 البادئات 05 3 6 TGCGCCCTTC OPB-05 05 4 5 GACTAGGTGG OPX-18 37.5 3 8 CCGCTACCGA OPX-04 58.33 7 12 TCGCCAGCCA OPX-12 66.66 6 9 GAGCGAGGCT OPX-07 25 2 8 CCTTGACGCA OPB-12 69.23 9 13 CCACAGCAGT OPB-18 66.66 4 6 AGGGAACGAG OPB-17 45.45 5 11 GTGATCGCAG OPA-10 المجموع ــــــــــــــــــــــــــــــ 78 43 498.83 المتوسط ـــــــــــــــــــــــــــــ 8.66 4.77 55.43 ٔرنك ثاٚغبد انؼاللخ انٕساصٛخ ثُٛٓب RAPDاػزًذد َزبئظ انجبدئبد نزكًهّ رؾهٛم َزبئظ رفبػالد أنـ ( ٔانزٙ رغزُذ ػهٗ ٔعٕد انؾضو انًشزشكخ ثٍٛ كم َجبرٍٛ يٍ Genetic distanceأ انجؼذ انٕساصٙ ) ( ، ٔٚزكش ثبٌ يٍ انؼٕايم انزٙ رإصش ػهٗ انجؼذ انٕساصٙ Pair Wise Comparisonانُجبربد انًذسٔعخ ) زًذ ػهٗ ػذد ْٕ ػذد انؾضو انُبرغخ ٔانز٘ ٚؼ RAPDانز٘ ٚزى انؾظٕل ػهّٛ يٍ ر جٛك يإششاد أنـ َٕٔع انجبدئبد انًغزخذيخ فـــــــــــٙ انزؾهـــــــٛم ،ار ٔعذ ثبٌ انؼبيم األْى فٙ رمذٚش انجؼذ انٕساصٙ ْٕ ( ار كهًب صادد رهك انُغجخ كهًب 1997ٔاخشٌٔ ، Baiَغجخ ػذد انؾضو انًزجبُٚخ ئنٗ ػذد انؾضو انكهٛخ ) ثبدئبد. ثؼذْب 9ؽضيخ ثبعزخذاو 78رى انؾظٕل ػهٗ كبَذ انُزبئظ اكضش دلخ ٔصجبرب ٔفٙ ْزِ انذساعخ ادخهذ انؼُٛبد انُبرغخ يٍ اعزخذاو رهك انجبدئبد فٙ انجشَبيظ انًؼذ خظٛظب نٓزا انغشع ػهٗ انؾبعت ٔانز٘ ٚظٓش ثبٌ َغجخ انجؼذ انٕساصٙ ثٍٛ انًؼبيالد 3االنٙ ، رى اٚغبد انجؼذ انٕساصٙ ٔانًزًضهخ فٙ انغذٔل % ٔانزٙ رذل ػهٗ ٔعٕد َغجخ انزشبثّ انٕساصٙ ثُٛٓب ٔانزٙ رشأؽذ ثٍٛ 0.39–%0.06رشأؽذ ثٍٛ 0.94%-0.61. % % ثٍٛ َجبربد 0.39 ْبانجؼذ انٕساصٙ ثٍٛ َجبربد انًؼبيالد َٔجبربد انًمبسَخ كبٌ اػال اٌانُزبئظ رجٍٛ %( ، ايب الم ثؼذ 0.33) T3 (0.35 ٔ )%T7، رهزٓب َجبربد انًؼبيهخ T6انًمبسَخ َٔجبربد انًؼبيهخ ثُٛٓب ػبنٛخ % أ٘ كبَذ َغجخ انزشبث0.06ّٔثهغ T2ٔساصٙ كبٌ ثٍٛ َجبربد انًمبسَخ َٔجبربد انًؼبيهخ (.3غذٔل ان% ، ٔرٕصػذ ثبلٙ انًؼبيالد ثٍٛ ْزِ انُغت)94عذا ؽغٍٛ 2016، 57 - 50 ( : 2) 8يغهخ دٚبنٗ نهؼهٕو انضساػٛخ ، 55 هي اسحخذام . الٌسبة الوئوية للبعذ الوراثي بيي هعبهالت الكولشيسيي لٌببت الكبسيب الٌبججة3جذول .RAPDفي جقبًة الـ جسعة ببدئبت Con. T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 انًؼبيالد Con. - T1 0.12 - T2 0.06 0.10 - T3* 0.35 0.22 0.18 - T4 0.11 0.08 0.11 0.19 - T5 0.08 0.09 0.08 0.17 0.13 - T6* 0.39 0.21 0.39 0.13 0.32 0.21 - T7* 0.33 0.19 0.23 0.09 0.21 0.24 0.11 - T8* 0.28 0.33 0.38 0.11 0.22 0.20 0.15 0.12 - T9 0.17 0.19 0.21 0.17 0.12 0.08 0.22 0.21 0.18 - انٗ ثٍٛ َجبربد انًؼبيالد َٔجبربد انًمبسَخ RAPDٚشٛش انجؼذ انٕساصٙ انؼبنٙ انًمبط ثزمبَخ ال اؽزًبنٛخ ؽذٔس انزؼبػف انكشٔيٕعٕيٙ ٔرمم ْزِ االؽزًبنٛخ كهًب لم انجؼذ انٕساصٙ ثٍٛ انُجبربد. نزنك ٔانزٙ اػ ذ اػهٗ ثؼذ ٔساصٙ نذساعخ ٔؽغبة ػذد T6 ،T3 ،T7رى اَزخبة َجبربد انًؼبيالد انكشٔيٕعٕيبد فٛٓب ٔانزأكذ يٍ ؽذٔس انزؼبػف. ؾغبة ػذد كشٔيٕعٕيبد إَٚخ خالٚب انمًى انُبيٛخ نغزٔس انُجبربد انًُزخجخ ثُٛذ انُزبئظ انًخزجشٚخ ن ار كبَذ اػهٗ َغجخ T6 ،T3 ،T7 فٙ ثؼغ َجبربد انًؼبيالد 2n=56ؽذٔس رؼبػف كشٔيٕعٕيٙ % صى َجبربد 57.14ٔثُغجخ T6رهزٓب َجبربد انًؼبيهخ T7% فٙ َجبربد انًؼبيهخ 64.71نهزؼبػف (.4غذٔلان% )26.09ثُغجخ T3انًؼبيهخ . الٌسبة الوئوية للحضبعق الكزوهوسوهي في ًببجبت الوعبهالت الحي اعطث اعلى بعذ وراثي 4جذول .بيي ًببجبت الكبسيب اعى انًؼبيهخ رشكٛض انكٕنشغٍٛ )%( فزشح انُمغ )عبػخ( انجؼذ انٕساصٙ ػٍ َجبربد انًمبسَخ )%( ػذد انجبدساد 2n انؾٛخ ػذد انجبدساد 4nفخ انًزؼبػ انُجبربد انًزؼبػفخ )%( T3 0.01 24 0.35 23 6 26.09 T6 0.025 24 0.39 14 8 57.14 T7 0.05 6 0.33 17 11 64.71 ؽغٍٛ 2016، 57 - 50 ( : 2) 8يغهخ دٚبنٗ نهؼهٕو انضساػٛخ ، 56 فٙ َجبربد انكبعٛب ثؼذ يؼبيهزٓب 4nٚزؼؼ يٍ انُزبئظ انغبثمخ ؽذٔس رؼبػف كشٔيٕعٕيٙ شف انًجكش ػٍ ؽذٔس انزؼبػف انٕساصٙ دلزٓب ٔعشػزٓب فٙ انك RAPDثبنكٕنشغٍٛ ٔلذ اصجزذ رمبَخ انـ دٌٔ انؾبعخ انٗ انضساػخ نؼذح اعٛبل أ اعشاء انفؾض انًخزجش٘ نؼذد انكشٔيٕعٕيبد نغًٛغ انُجبربد انًؼبيهخ نهزأكذ يٍ ؽظٕل انزؼبػف، ٔثزنك اكذد َزبئظ انجؾش اخزظبس انٕلذ ٔانغٓذ يغ انذلخ انؼبنٛخ. ٔاخشٌٔ Mohanty ( ؛2009)ٔاخشٌٔ Liu ؛ (2013)ٔاخشٌٔ Sajjadارفمذ ْزِ انُزبئظ يغ Tiwari ٔMishra (2012.) ( ؛2010) الوصبدر . دساعخ انزجبُٚبد انٕساصٛخ الطُبف انشؼٛش فٙ انغًٕٓسٚخ انًُٛٛخ ثأعزخذاو 2008انخٕالَٙ ، يؾًذ انؼض٘. ساػخ . عبيؼخ . اؽشٔؽخ دكزٕساِ . لغى انًؾبطٛم انؾمهٛخ . كهٛخ انض DNAانًإششاد انغضٚئٛخ نهـ .132رششٍٚ. انغًٕٓسٚخ انؼشثٛخ انغٕسٚخ. ع ص ثؼغ DNAانًُٕ انخؼش٘ ٔانضْش٘ ٔ . رأصٛش انظؼك انكٓشثبئٙ فٙ رغبٚشاد2007ؽغٍٛ، َعُبٌ لبعى . انؼشاق.ع عًٕٓسٚخ َجبربد انضُٚخ. اؽشٔؽخ دكزٕساح . لغى انجغزُخ . كهٛخ انضساػخ . عبيؼخ ثغذاد . .141ص Bai, D., J. Brandle and R. Reeleder. 1997. Genetic diversity in North American ginseng (panax quinque folius L.) grown in Ontario by RAPD analysis. Genome 40: 11-17. De Laat, A.M.M., W. Gohde, and M.J.D.C . Vogelzang. 1987. Determination of ploidy of single plants and plants population by flow cytometry. Plant Breeding 99: 303 – 307. Gao, S.L., D.N. Zhu., Z.H. Coi and D.R. Xu. 1996. Autotetraploid plant from colchicine treated bud culture of Saluia miltiorrhiza. Plant Cell Tissue Culture, 47: 37 – 77. Haley, S.D. , L.K. Afanador , P.N. Miklas , J.R. Starely and J.D. Kelly .1994. Hetergeneous inbred populations are useful as sources of near-isogenic lines for RAPD marker localization. Theor. Appl. Genet. 88: 337-342. LIU X. Z. , H. LIN, X. Y. MO , T. LONG and H. Y. ZHANG .2009. Genetic variation in colchicine-treated regenerated plants of Eucalyptus globulus Labill. Indian Academy of Sciences. Journal of Genetics, 88(3):345-348. Mohanty S. , A. B. Das , N. Ghosh , B. B. Panda and D. W. Smith.2010. Genetic diversity of 28 wild species of fodder legume Cassia using RAPD, ISSR and SSR markers: a novel breeding strategy. Journal of Biotech`1221 Research, 2:44-55. Nei, M. and W.H. Li .1979. Mathematical model for studying genetic variation in terms of restriction endonucleases. Proc. Nat. Acad. Sci. USA.74:5269–5273. Petersen, K.K., P. Hagberg and K. Kristiansen. 2002. In vitro chromosome doubling of Misconthus sinensis. Plant Breeding 121, 445-450. ؽغٍٛ 2016، 57 - 50 ( : 2) 8يغهخ دٚبنٗ نهؼهٕو انضساػٛخ ، 57 Sajjady. , J. Muhammad , M. Asim , A. Iftikhir and A. Haider .2013. Effect of Colchicine on In vitro Polyploidy Induction in African Marigold (TAGETES ERECTA). Pakistan. Pak. J. Bot., 45(3): 1255-1258. Sharma . A . K .and A . Sharma . 1980 . Chromosome Techniques . Theory and Practice Butterworth’s Lond . Tiwari K. and S. K. Mishra . 2012. Effect of colchicine on mitotic polyploidization and morphological characteristics of Phlox drummondi. African Journal of Biotechnology Vol. 11(39), pp. 9336-9342. EARLY DETECTION OF CHROMOSOMAL POLYPLOIDY RESULTING FROM EFFECT OF THE COLCHICINE ON Cassia angustifolia . Janan K. Hussein* * Assist. Prof.- Dept. Of Horticulture-Coll. of Agric.,- Univ. of AL-Qasim green - dr.janan77@yahoo.com ABSTRACT The study was carried out at biotechnology and Tissue culture laboratories /College of Agriculture / University of Al-Razi / Kermanshah / Iran in summer season-2014. For early detection of chromosomal polyploidy, resulting from soaking the seeds cultured of Cassia angustifolia in three Colchicine solution concentrations (0.01 , 0.025 , 0.05 %) and three periods( 6 , 12 , 24 hour). The study aimed to detect the presence of chromosomal polyploidy depending on the Randomly Amplified Polymorphic DNA (RAPD), Results confirmed the chromosomal polyploidy of plants which gave higher Genetic Distance counts the number of chromosomes in the cells of the roots tops. The results of RAPD analysis were clear differences in the number of DNA amplified fragments and molecular weights depending on the primers user, 9 primers gave 78 bands (35 similar bands and 43 polymorphic bands) and estimated the contrast ratio to 55.43% . Highest Genetic Distance was in Colchicine treatment T6 (0.025% X24 hour) 0.39%, followed by plants treatment T3 (0.01 X 24 hours)( 0.35% ) and T7 (0.05 X 6 hours)( 0.33%). The results showed laboratory to calculate the number of chromosomes occur chromosomal polyploidy (4N = 56) in some plants transactions T6, T3, T7, The highest rate chromosomal polyploidy 64.71% in plants treated T7 followed T6 (57.14%) and T3 (26.09%) . Key words: Cassia angustifolia , Colchicine , RAPD