<4D6963726F736F667420576F7264202D20E32EE32EE3D5D8DDEC20DAE1ED20DAD0C7C820E620C7CED1E6E4> عذاب و آخرون 2013، 627 - 618) : 2( 5مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 618   . في العراق Cucumber mosaic virusفايروس موزائيك الخيار ل ةوجزيئي يهتشخيصدراسة *رقيب عاآف العاني *محمد محمود سليمان **آريم عبد اهللا حسن *مصطفى علي عذاب Rakiba99@yahoo.com . العراقجمهورية – جامعة بغداد –آلية الزراعة –وقاية النبات قسم* maa_adhab@hotmail.com . العراقجمهورية –جامعة ديالى –آلية الزراعة –قسم وقاية النبات ** المستخلص اعتمادا على ) CMV(هدفت الدراسة الى تشخيص ساللة جديدة لفايروس موزائيك الخيار االعراض على النباتات المشخصة والصفات المصلية والوزن الجزيئي لبروتينات الغالف وسحقت مع تظهر عليها اعراض موزائيك خيارنباتات أوراق جمعت عينات من. الفايروسي نباتات خيار بالمستخلص اعديتو موالري في هاون خزفي، 0.01محلول دارئ فوسفاتي اعديت بمستخلص من . واعتمدت النباتات التي ظهرت عليها اعراض موزائيك مصدرا للفايروس استخلص الفايروس . ميكانيكيا )الكاشفة( المشخصة وعة من النباتاتاوراق الخيار المصابة مجم على هالم االآريالمايد ونقي من النباتات المصابة ، وحللت عينات منه بتقنية الترحيل الكهربائي عومل جزء من المستخلص مع االشرطة المناعية الحاوية ). SDS )SDS-PAGEالحاوي على اوضحت النتائج انه من بين العوائل . CMVلفايروس على اجسام مضادة متعددة الكلون بتكوين بقع Nicotiana tabacum Xanthiالمشخصة للفايروس ، استجابت نباتات التبغ صنف ، آما جهازيا الى االوراق الحديثة بمرور الوقت تتقلانموضعية صفراء على االوراق المعداة شرطة المناعية الخط ترسيب على اظهر .ظهرت اعراض موزائيك على نباتات الفاصوليا Immunostrip مصابة ولم يظهر مثل هذا الخط مع االشرطة خيار المعاملة بمستخلص اوراق اوضح نمط الترحيل الكهربائي على هالم االآريالمايد . المعاملة بمستخلص من اوراق سليمة تمثل بروتينات الغالف آيلو دالتون 26و 24حزمتين بروتينيتين اوزانهما الجزيئية SDSبوجود هذه النتائج الى ان عزلة الفايروس موضوع الدراسة هي عزلة من فايروس ؤآدت. الفايروسي Xanthiوان ظهور بقع موضعية صفراء بدل الموزائيك على نبات التبغ CMVموزائيك الخيار لبروتينات وآذلك ظهور حزمتين بروتينيتين في نمط الترحيل الكهربائي تمثل الوزن الجزيئي .الغالف يشير الى ساللة جديدة من الفايروس تشخص الول مرة في العراق . فايرس موزائيك الخيار اشرطه مناعية ، ترحيل آهربائي ، :مفتاحيةالكلمات ال المقدمة يعد الخيار من اآثر محاصيل الخضر زراعة وأهمية في العراق ، اذ يزرع في البيوت المحمية يصاب محصول الخيار بالعديد من الفايروسات ويعد فايروس . ة صيفًاكشوفالم شتاًء وفي الحقول Cucumovirus، جنس ) Cucumber mosaic cucumovirus )CMVالخيار موزائيك ــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــ . 2012/ 9/ 2تاريخ استالم البحث . 2013/ 1/ 28 تاريخ قبول النشر عذاب و آخرون 2013، 627 - 618) : 2( 5مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 619   أشير الى ان الفايروس يصيب أآثر من . من بين اآثرها أهمية وانتشارًا Bromoviridaeعائلة و Christieو Edwardson( ًة نباتيةلعائ 100جنسًا نباتيًا والى 518عائال نباتيا تعود لـ 1287 موضعية بقع تتراوح من اعراضا مختلفة على العوائل النباتية CMVيسبب فايروس ). 1987، جهازية تشمل النبات بأآمله وأآثر االعراض الجهازية أهمية اصابة على االوراق الملقحة فقط الى يسبب الفايروس فضال . هي الموزائيك وتتراوح من طفيفة الى شديدة جدا قد تؤدي الى موت النبات ، تقزم ، وتشوه طماطةعلى نباتات ال عن اعراض الموزائيك تحول االوراق الى شكل خيطي ينقل الفايروس من النباتات المصابة ). Arenal ،2003و Palukaitis ؛ Hull ،2002(الثمار ؛ Hull ،2002(الى السليمة ميكانيكيا وبالبذور وينقل بالعديد من حشرات المن بطريقة غير باقية Dijkstra و Khan، 2006( . ائل النباتية تجابة العواسالمستنده على اعتمدت الطرق الحيوية آثيرا في تشخيص فايروس ELISA وخاصة اختبار والطرق المصليةالمختلفة للفايروس ؛ 2001 ،وآخرون Hord(موزائيك الخيار وتحديد سالالته على عوائله النباتية المختلفة Yordonova وHristova ،2002 ؛Adkins وRosskopf ،2002 ؛ Silva وآخرون، ).2007 ،وآخرون Aramburu ؛ 2004 ،وآخرون Bhat ؛ 2003 ،وآخرون Lin ؛ 2002 المتعدد مع آبريتات دوديسيل الصوديوم هالم االآريالمايدبتقنية الترحيل الكهربائي واستعملت Sodium dodecyl sulfate )SDS( آثيرا في الكشف عن الفايروسات والتفريق بين سالالتها Singh ؛ 1993 ،وآخرون Raj(يئي لبروتينات الغالف الفايروسي اعتمادا على الوزن الجز .)2010 ،والعاني عذاب؛ 2005 ،صبر ؛ 1998 ، وآخرون وبينت المشاهدات التي سجلت على العديد من النباتات العائلة لهذا الفايروس وجود اعراضا تختلف ك اجريت هذه الدراسة التشخيصية قليال عن االعراض التي تسببها السالله النمطيه للفايرس لذل باستعمال الطرق الحيوية و المصلية و الجزيئية لتاآيد وجود الفايروس مع احتمال وجود ساللة .بالطرق الحيوية والمصلية والوزن الجزيئي لبروتينات الغالف جديده له البحثالمواد وطرائق يت الصوديوم اا بواسطة هايبوآلورنباتات االختبار سطحي عقمت بذور :اعداد النباتات الكاشفة مدة دقيقة واحدة ثم غسلت بالماء المقطر وجففت على ورقة ترشيح ، زرعت % 20) القاصر( س 121ºبدرجة حرارة بالمؤصده معقمة) 1:1(في خليط من تربة مزيجية وبتموس البذور فردت . كية، في أصص بالستي ساعة 24وآرر التعقيم بعد دقيقة 30مدة 2سم/آغم 1.5وضغط بمبيد حشري ومبيد ضد الحلم لحمايتها من هذه وعوملتأصيص / النباتات بعد االنبات الى نباتين .حفظت النباتات في بيت بالستيكي في أقفاص خشبية مغلفة بالململ لحمايتها من الحشرات .االفات ا اعراض تظهر عليهجمعت عينات من نباتات خيار :مصدر الفايروس والعدوى الميكانيكية 7.0موالري بدرجة حموضة 0.01سحقت االوراق مع محلول دارئ فوسفاتي . موزائيك وتشوه رشح المستخلص من خالل طبقتين من قماش الململ . في هاون خزفي) مل/غم( 4: 1بنسبة .واستعمل الراشح لقاحا للفايروس عذاب و آخرون 2013، 627 - 618) : 2( 5مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 620   تشخيص عزلة الفايرس مصل ب المعاملة Flashkitsقة االشرطة لمناعية طري أجري االختبار باستعمال :االختبار المصلي 0.15سحق . االمريكية Agdia biofordsمن شرآة و المنتجة مضاد لفايروس موزائيك الخيار معداة بمستخلص الفايروس ) خيار ، بطيخ ، شجر ، وقرع(غم من أوراق النباتات المراد اختبارها مجهز من قبل الشرآة ، بواسطة هاون ، في آيس بالستيكي PBSفي محلول دارئ االستخالص 5- 3سم في المستخلص مدة 0.5غمرت نهاية الشريط المعامل بالمصل المضاد لمسافة . خزفي ان ظهور حزمة ملونة . آررت العملية مع مستخلص نبات سليم بنفس الطريقة للمقارنة. دقائق .بلون بنفسجي على الشريط يدل على تفاعل موجب غم من أوراق نباتات خيار مصابة بفايروس موزائيك 100سحق :ئيك الخيارموزا فايروستنقية 0.5فوسفات الصوديوم (في مازجة آهربائية مع محلول دارئ االستخالص ) CMV(الخيار ، % Diethyl dithiocarbamate (DIECA) 1حامض االسكوربيك ، % 0.2/ موالري خالل طبقتين من ورق مرر المستخلص ). حجم/وزن( 3: 1بنسبة )8بدرجة اس هايدروجيني الترشيح وأضيف للراشح حجم مساِو من الكلوروفورم مع التحريك بواسطة جهاز الدوار أخضع المستخلص لعملية انتباذ . س4ºمدة ساعة بدرجة ) Magnetic stirrer(المغناطيسي ف للطافي اضي). ALC ،4239R(دقيقة بجهاز انتباذ نوع 15دقيقة مدة /دورة 3000بسرعة بنسبة 6000وزنه الجزيئي ) Polyethylene glycol )PEG الكاليكول متعدد االثيلين مادة اخضع . س4ºساعة بدرجة 24موالري مع التحريك المستمر مدة 0.1وآلوريد الصوديوم % 10 أذيب الراسب في . س4ºدقيقة بدرجة 15دقيقة مدة /دورة 12000المحلول لعملية انتباذ بسرعة أجريت للمعلق عملية ديلزة في . وأجريت عليه عملية انتباذ pH =8% 2دارئ ال البوريت لمحلو .ساعة 14ماء مقطر لمدة خلط حجم من مستخلص الفايروس النقي ومستخلص البروتين الكلي :الترحيل الكهربائي )Dardick 1999، خرونوآ( مع حجم من دارئ الفصلDissociation buffer )0.125 Tris-HCl ،pH =6.8 ،SDS 4% ،mercaptoethanol 4 % ،glycerol موالري س مدة دقيقتين وحللت النماذج بطريقة الترحيل 100ºسخن المزيج بدرجة حرارة . )30% أجريت عملية ). SDS )SDS-PAGEبوجود %. 10 المتعدد الكهربائي في هالم االآريالمايد البروموفينولساعات باستعمال ازرق 5فولت لمدة 125الترحيل الكهربائي بفرق جهد )Bromophenol blue (ول خط الدليل قاعدة وصأوقفت العملية عند . دليال لعملية الترحيل أجري الكشف عن وجود الحزم البروتينية بتصبيغ الهالم بصبغة الكوماسي الزرقاء بنسبة . الهالم دقيقة ثم ازالة الصبغة في 30 مدة) 5-1- 5( الماء-حامض الخليك-في خليط من ميثانول% 0.25 .)Laemmli ،1970( ساعة 24مدة ) حجم/حجم(ميثانول % 5حامض الخليك و% 7.5محلول والمناقشة النتائج ظهرت على االوراق الحديثة لنباتات الخيار صنف بيتا ألفا المعداة بمستخلص :االعراض ميع االوراق رافقه تقزم الفايروس مناطق صغيرة شاحبة تطورت الى موزائيك جهازي على ج للعدوى ) الكوسة(واستجابت نباتات البطيخ والقرع والشجر). 1شكل ال(النباتات وتشوهها عذاب و آخرون 2013، 627 - 618) : 2( 5مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 621   وقد أشارت دراسات عدة الى اعراض مماثلة على هذه . بالفايروس باعراض تبرقش وموزائيك ،وآخرون Bhat؛ 2002 ،وآخرون Silva(العوائل استجابة للعدوى بفايروس موزائيك الخيار .)2005 ،صبر ؛ Agrios، 2005 ؛ 2004 ،وآخرون Verma؛ 2004 وعلى الفاصوليا المعداة ميكانيكيا بالفايروس اعراض موزائيك جهازي، ظهرت على اوراق أيام من 5المعداة بمستخلص الفايروس بقع موضعية شاحبة بعد Black eyeنباتات اللوبيا صنف وهذه النتائج مماثلة لما أشارت اليه دراسات ) 2 شكلال(بة جهازية العدوى ولم تتطور الى اصا Eiras ؛ 2003 ،وآخرون Cardin ؛ 1998 ،وآخرون CMV )Rajسابقة خاصة بفايروس أدت عدوى نباتات الزربيح بمستخلص الفايروس الى ظهور ). 2005 ،صبر ؛ 2004 ،وآخرون الى ولم تتطور االصابة ) 2شكل ال(لى بقع ميتة بقع صفراء صغيرة على االوراق المعداة تطورت ا CMVجهازية ، وهذه النتائج تتفق مع نتائج دراسات سابقة حول استجابة هذا النبات لفايروس )Verma ؛ 2005 ،صبر؛ 2004 ،البيضاني؛ 2004 ،وآخرون Verma وآخرون، ع موضعية على االوراق سببت عدوى نباتات الداتورة بمستخلص الفايروس ظهور بق). 2004 إلى) 2005(صبر ؛ ) 2004(وقد أشار البيضاني ) 2شكل ال(المعداة تطورت الى تبرقش أصفر تحولت أوراق نبات الطماطة المعداة . نتائج مماثلة استجابة للعدوى بقايروس موزائيك الخيار آما ل خيطية ولم تتطور االصابة الى اشكا )3شكل ال( بالفايروس الى شكل شريطي وتشوهات ،صبر ؛ 2004 ،البيضاني ؛ Harrison، 2001و Gibbs(نتائج دراسات سابقة في ر يأش 2005(. المعداة بمستخلص الفايروس ، بقع موضعية Xanthiظهرت على أوراق نبات التبغ صنف الى وجود ) 2003( Garcia-Arenalو Palukaitisوقد أشار )3 شكل(صغيرة صفراء المعداة تسبب بقع موضعية على نباتات التبغ) II )Sub group IIلتحت المجموعة سالالت تابعة ، في حين تشير معظم المصادر االخرى الى اصابة هذا النبات جهازيا ميكانيكيا بالفايروس 2004وآخرون Eiras ؛ 2003وآخرون Cardin(بتكوين أعراض موزائيك CMVبفايروس .لالصابة بالفايروس موضوع الدراسة) البطيخ االحمر(ت الرقي ولم تستجب نباتا). 2005صبر ؛ على االشرطة المناعية ظهر خط ترسيب :المصلي Immunocromatographyاختبار لفايروس موزائيك الخيار المعامل بمستخلص أوراق النسيلهالحاوية على مصل مضاد متعدد ولم يظهر خط ترسيب ) 4شكل ال(ايروس نباتات الخيار ، بطيخ ، وقرع ، وشجر آوسة مصابة بالف .على االشرطة المناعية المعاملة بمستخلص نبات سليم للمقارنة من نبات مصاب ىنقمأظهر نمط الترحيل الكهربائي لعينات الفايروس ال :الترحيل الكهربائي لحزمتين آيلو دالتون ولم تظهر هاتين ا 26و 24بالفايروس حزمتين بروتينيتين أوزانهما الجزيئية مما )4 شكلال(نبات سليم خضع لنفس خطوات التنقية منفي نمط الترحيل الكهربائي لمستخلص الى ان دراسة سابقة وأشارت . يشير الى ان هاتين الحزمتين تمثالن بروتينات الغالف الفايروسي لتون آيلو دا 28و 22يتكون من وحدتين أوزانهما الجزيئية CMVالغالف البروتيني لفايروس )Kostova في حين أشارت الدراسات االخرى ان الغالف البروتيني لفايروس )2006 ،وآخرون ، عذاب و آخرون 2013، 627 - 618) : 2( 5مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 622   CMV آيلو دالتون 24.5يتكون من وحدة واحدة وزنها الجزيئي)Srivastava 1992 ،وآخرون وأشارت دراسات اخرى ان الوزن ). 1996 ،وآخرون Nasu ؛ 1996 ،وآخرون Haq؛ Kim ؛ 1997 ،وآخرون Raj(آيلو دالتون 26هو CMVبروتيني لفايروس الجزيئي للغالف ال ).2002 ،وآخرون على الخيارأعراض الموزائيك الجهازي . 1 صوره الوسط بقع موضعية على ... اليمين بقع موضعية على االوراق المعداة لنبات اللوبيا . 2 صوره ار تبرقش جهازي على االوراق الحديثة لنبات الداتورة اليس... االوراق المعداة لنبات الزربيح اليسار اعراض البقع الموضعية .. اليمين اعراض االوراق الشريطية على الطماطة . 3 صوره .Xanthiعلى التبغ عذاب و آخرون 2013، 627 - 618) : 2( 5مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 623   صلي باستعمال االشرطة المناعية لعينات ماخوذة من نباتات خيار عليه اليمين نتائج االختبار الم. 4 صوره مقارنة بعينة من نبات.. اعراض موزائيك وتبغ عليه بقع موضعية وطماطة عليها اعراض اوراق شريطية ات اليسار نتائج الترحيل الكهربائي لعينة من بروتينات الغالف الفايروسي منقاة من نب... سليم للمقارنة طماطه .آيلودالتون 26 – 24خيار مصاب بالفايروس ويظهر فيها الوزن الجزيئي نتائج الترحيل الكهربائي لعينة من بروتينات الغالف الفايروسي منقاة من نبات خيار . 5 صوره ).سهم(آيلو دالتون 26-24مصاب بفايروس موزائيك الخيار يظهر فيها الوزن الجزيئي االختبار المصلي بواسطة االشرطة المناعية والوزن ى النباتات الكاشفة ونتائج ان االعراض عل يمثل ساللة لفايروس موضوع الدراسة الجزيئي للغالف البروتيني ، تشير الى ان الفايروس 24.000 KD  66.000 KD  39.000 KD  45.000 KD  6.500 KD  14.200 KD  20.000 KD  29.000 KD  عذاب و آخرون 2013، 627 - 618) : 2( 5مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 624   N. tabacumيالحظ من دراسة االعراض على النباتات الكاشفة أن نبات التبغ . موزائيك الخيار Xanthi جهازيا الى موضعية على االوراق المعداة انتشرت ايروس بتكوين بقعاستجاب للف االوراق األحدث بمرور الوقت وحيث أن معظم الدراسات التي تناولت دراسة االعراض التي بأعراض CMVيسببها فايروس موزائيك الخيار تشير الى ان هذا النبات يستجيب لفايروس ، وهناك ) 2005 ،صبر؛ 2004 ،البيضاني ؛ Harrison ،2001و Gibbs(موزائيك جهازي اشارات الى استجابة هذا النبات بتكوين بقع موضعية لبعض سالالت الفايروس التابعة لتحت الفاصوليا على لموزائيك وأعراض ا، ) Garcia-Arenal، 2003و II )Palukaitisالمجموعة ائج تشير الى احتمال آون الساللة فان هذه النت ،الطماطةوتحول االوراق الى شكل شريطي في تختلف عن السالالت االعتيادية CMVالحالية تمثل ساللة جديدة من فايروس موزائيك الخيار ظهور حزمتين بروتينيتين ومما يؤآد آون الساللة مختلفة . التي خضعت لدراسة االعراض سابقا ات مصابة بالفايروس على هالم عند ترحيل بروتينات الفايروس والبروتينات المستخلصة من نبات وقد ). 2006(وآخرون Kostovaآما أشار الى ذلك .االآريالمايد بطريقة الترحيل الكهربائي اعتمد الوزن الجزيئي لبروتينات الغالف الفايروسي آثيرا للكشف عن الفايروسات من قبل العديد في Dianthus barbatusفي نبات CMVمن الباحثين ، فقد استعملت في الكشف عن فايروس في موزائيك الخيار ، وفي الكشف عن ثالث سالالت من فايروس) 1993 ،وآخرون Raj(الهند I )Subgroupبلغاريا وعلى أساسها حددت مجموعتين لسالالت الفايروس هما تحت المجموعة I ( عزلت من الطماطة والخيار والفاصوليا والفلفل والقرع والتبغ، والمجموعةII )Subgroup II ( من الطماطة والفلفل)Mavrodieva اعتمدت تقنية الترحيل الكهربائي ). 1998وآخرون لبروتينات الغالف الفايروسي ايضا في الكشف عن فايروس موزائيك التبغ والتفريق بين سالالته ،نوآخرو Dardick ؛Culver ،1997و Dardick(المعزولة من نبات الفلفل والتبغ والباذنجان الى تشخيص أربعة سالالت لفايروس موزائيك الخيار في ) 2005(صبر تصلووت. )1999 .العراق باعتماد تقنية الترحيل الكهربائي في هالم االآريالمايد اعتمادا على بروتينات الغالف ان سرعة وسهولة تطبيق ودقة النتائج التي يمكن الحصول عليها من تقنية الترحيل الكهربائي في هالم االآريالمايد تشير الى امكانية استعمالها في الكشف نات الغالف الفايروسي لبروتي .وتشخيص الفايروسات وسالالتها لمصادرا تحديد أربع سالالت لفايروس موزائيك الخيار مصليا وبايولوجيا وعالقتها . 2005. صبر، ليلى جبار .صفحة 99. جامعة بغداد .آلية الزراعة .رسالة ماجستير. باالمراضية . بالطرق الزراعية تشخيص فايروسات القرعيات ومقاومتها. 2004. البيضاني، نصير آاظم حسين .جامعة الموصل .آلية الزراعة والغابات .رسالة ماجستير تقويم آفاءة الترحيل الكهربائي على هالم . 2010. عذاب، مصطفى علي ورقيب عاآف العاني مناعية في الكشف عن فيروسي موزاييك التبغ وموزاييك الخيار في االآريالمايد وتقنية األشرطة ال .189-181: 28 مجلة وقاية النبات العربية. العراق Adkins S. and E.N Rosskopf. 2002. Key west nightshade, a new experimental host for plant viruses. Plant Disease 86(12):1310-1314. Agrios G.N. 2005. Plant pathology, fifth edition Academic Press, London. 922pp. عذاب و آخرون 2013، 627 - 618) : 2( 5مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 625   Aramburu J., L.,Galipienso, and C., Lopez. 2007. Reappearance of Cucumber mosaic virus isolates belonging to subgroup IB in Tomato Plants in North- Eastern Spain. J Phytopath 155:513-518. Bhat A.I., Y.R.Sarma, P.Sreenivasulu, and R.P. Pant. 2004. Occurrence and identification of a Cucumber mosaic virus isolate infecting Indian long pepper (Piper longum). Journal of Medicinal and Aromatic Plant Sciences 26(2): 279-284. Cardin L., A. Poupet, and J.P. Onesto. 2003. First report of Cucumber mosaic virus in tencrium fruticans. Plant Disease 87: 200. Dardick C.D., and J.N Culver. 1997. Tobamovirus coat proteins: elicitors of the hypersensitive response in Solanum melongena (eggplant). Molecular Plant – microbe Interactions 10(6): 776-778. Dardick C.D., Z. Tarapoewala, and J.N Bin Lu. 1999. Comparison of tobamovirus coat protein structural features that affect elicitor activity in pepper, eggplant and tobacco. Molecular Plant-Microbe Interactions 12(3): 247-251. Dijkstra J., and J.A Khan. 2006. Description of positive sense, single stranded RNA viruses. Handbook of plant virology. New York, USA, P. 253-388. Edwardson J.R., and R.G. Christie. 1987. Cucumoviruses. Viruses infecting forage legumes. Gaines Ville. 1: 143-1214. Eiras M., A.J. Boari, A.Colaiccio, A.L.R. Chaves., M.R.S.Briones, A.R. Figueria, and R .Harakava. 2004. Characterization of isolates of the cucumovirus cucumber mosaic virus Present in Brazil. Journal of Plant Pathology 86(1): 61–69. Gibbs A.J. and B.D. Harrison. 2001. Cucumber mosaic virus. CMI/AAB Description of Plant Viruses. Set 1, (June 1970. No. 1 Kew, Surrey, England). Haq Q.M.R., B.P. Singh, and K.M. Srivostava. 1996. Biological, serological and molecular charac-terization of a Cucumber mosaic virus isolate from India. Plant Pathology 45(5): 823-828. Hord M.J., A. Garcia, and H. Villalobos. 2001. Field survey of Cucumber mosaic virus subgroups I and II in crop plants in Costa Rica. Plant Disease 85(9): 952–954. Hull R. 2002. Matthews' Plant Virology. Fourth edition. Academic Press, London, Uk. 1001 pp. Kim H.J., S.C. Gug., and K.C. Jang. 2002. Characterization of Cucumber mosaic virus subgroup II isolated from paprika (Capsicum annuum Var. grossum) in Korea. Plant Pathology Journal. 18 (1): 6-11. Kostova D., T. Stefanos , L. Angela., L. Vittoria., and V. Anna-Mariag. 2006. New cucumovirus on beans in Bulgaria - an attempt for characterization. Journal of Culture Collections 5(1): 94-101. عذاب و آخرون 2013، 627 - 618) : 2( 5مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 626   Laemmli U.K. 1970. Cleavage of structural protein during the assembly of head of bacteriophage T4. Nature. 227:680-685. Lin H.X., L. Rubio , and A. Smythe . 2003. Genetic diversity and biological variation among California isolates of Cucumber mosaic virus. Journal of General Virology 84: 249–258. Mavrodieva V.A., D.J.Barbara, and N.J Spence. 1998. Subgroup determination of Bulgarian isolates of Cucumber mosaic virus and the presence of satellite RNAs. Plant Disease 82(8): 960. Nasu Y., K Akira, E. Shun , and E.Yoshia. 1996. Cry, the resistance locus of cowpea to Cucumber mosaic virus strain Y. Phytopathology 86(9): 946- 951. Palukaitis P., and F. Garcia-Arenal. 2003. Cucumber mosaic virus. CMI\AAB, Description of Plant Viruses. No. 400. Raj S.K., K.M. Aminuddin. Srivastava, and B.P. Singh. 1993. Natural infection of Cucumber mosaic virus on Dianthus barbatus in India. Plant Pathology. 42: 811-813. Raj S.K., Aminuddin, B.P Singh., and M Pal. 1997. Characterization of a Cucumber mosaic virus isolate causing leaf crinkle and severe mosaic of amaranthus in India. Canadian Journal of Plant Pathology 19: 97-100. Raj S.K., S Saxena., V. Hallan , and B.P. Singh. 1998. Reverse transcription– polymerase chain reaction (RT-PCR) for direct detection of Cucumber mosaic virus (CMV) in Gladiolus. Biochemistry and Molecular Biology international.44(1):234-239. Silva D.P.P., P. Jones, and M.W. Shaw. 2002. Identification and transmission of Piper yellow mottle virus and Cucumber mosaic virus infecting black pepper (Piper nigrum) in Srilanka. Plant Pathology .51(5): 537-545. Singh Z., M.G.K. Jones and R.A.C. Jones. 1998. Effectiveness of coat protein and defective replicase gene-mediated resistance against Australian isolates of Cucumber mosaic virus. Australian Journal of Experimental Agriculture 38: 375-383. Srivastava K.M., S.K. Raj, and B.P. Singh. 1992. Properties of a Cucumber mosaic virus strain naturally infecting chrysanthemum in India. Plant Disease 76(5): 474-477. Verma N., A.K. Singh, L. Singh, S. Kulshreshtha, G. Raikhy, V. Hallan, R. Ram, and A.A. Zaidi. 2004. Occurrence of Cucumber mosaic virus in Gerbera jamesonil in India. Plant Disease .88: 11-61. Yordanova A., and D. Hristova. 2002. Serogroup differentiation of Bulgarian isolates of cucumber mosaic virus/ Comptes rendus de l’Academie bulgare des Sciences 55(2): 75–80. عذاب و آخرون 2013، 627 - 618) : 2( 5مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 627   IDENTIFICATION AND MOLECULAR STUDIES ON Cucumber mosaic VIRUS IN IRAQ. Mustafa A. Adhab* Kharim A. Hassan** Mohammad M. Sulaiman* Rakib A. Al-Ani* *Plant Protection Department, College of Agriculture, University of Baghdad, Iraq. Email: Rakiba99@yahoo.com **Plant Protection Department, College of Agriculture, University of Diyala, Iraq. Email:maa_adhab@hotmail.com ABSTRACT The objective of the study is to characterize new strain of Cucumber mosaic cucumovirus (CMV), based on symptoms on indicator plants, serological characteristics and the molecular weight of virus coat proteins on SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. Leaves from symptomatic cucumber plants were extracted with 0.01 M phosphate buffer and mechanically inoculated on cucumber plants, and those exhibited mosaic symptoms were used as virus source. A number of indicator plants were mechanically inoculated with an extract of symptomatic leaves. The virus was extracted and purified from cucumber infected plants. Samples from pure virus preparation were analyzed on polyacrylamide gel containing SDS by electrophoresis. A part of symptomatic leaves was treated with anti-CMV polyclonal antibodies by Immunocromatography. Results showed that the virus induced chlorotic local lesions on the inoculated leaves of Nicotiana tabacum cv. Xanthi, and mosaic on beans. A precipitation line was appeared on the Immunostrip treated with symptomatic leaf extracts, this line is absent on immunostrip treated with asymptomatic leaves. The analysis of purified virus and on SDS- polyacrylamide gel electrophoresis revealed two protein bands of 24 and 26 Kd. These results indicate that the virus under study is CMV. The responded of N. tabacum Xanthi to virus inoculation by chlorotic lesions, and the apparition of 2 protein bands on acrylamide gel representing the molecular weights of virus coat protein indicates a new strain of CMV in Iraq. Key word: Immunostrip, gel electrophoresis, Cucumber mosaic virus.