<4D6963726F736F667420576F7264202D20CF2EC7E1E5C7E320C7D3E3C7DAEDE120E620C8EDCFC7C120CDC7CAE3> آاظمو الشمري 2012، 267 - 257 ) : 1( 4مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 257 بعض قشور باستخدامالمعزول محليا Aspergellus nigerكتنيز من فطر أنتاج أنزيم الب .الفواكه بيداء حاتم كاظم الشمري إسماعيلالهام elhamfadel@yahoo.com - جامعة بغداد -كلية الزراعة - قسم علوم األغذية والتقانات اإلحيائية* خلصالمست والتي عزلت من بعض النماذج للفضالت ،عزالت من الفطريات ةتم الحصول على عشر باالعتماد األخرىالبكتنيز مقارنة بالعزالت إلنزيمفعالية عالية ذات العزالت هذه ثالث من ،الزراعية شملت ،ون على بكتين تجاري كمصدر وحيد للكارب اويعلى قطر المنطقة الشفافة المتكونة في الوسط الح . penicillum spp.(P1)ثم Aspergillus spp (A1) تتبعها Aspergillus niger(A2)ه العزالتهذ فضالت زراعية مختلفة شملت قشور البرتقال وقشور التفاح باستخدامالبكتنيز إنزيمتنتج العزالت الثالث البكتنيز على الوسط نتاجإل األفضلA.niger(A2)العزلة كانت ،وقشور الموز كمصدر وحيد للكاربون وحدة 370و 675للبكتنيز اإلنزيميةبلغت الفعالية . الحاوي على قشور البرتقال كمصدر وحيد للكاربون باستخدام)smf(صلبة والطريقة المغمورةطريقة التخمرات ال باستخدامملغم بروتين على التوالي / التخمرات الصلبةالبكتنيزبأستخدام إلنزيم اإلنزيميةالعالي للفعالية يالحظ المستوى. A.niger(A2)العزلة البكتنيز إلنتاجكما يالحظ ان قشور البرتقال هي مادة جيدة ورخيصة الثمن . بالطريقة المغمورةمقارنة .من العزلة قيد الدراسة Aspergillus nigerأنزيم البكتنيز ، : الكلمات المفتاحية المقدمة إذ ،من الحقول النامية ذات المستقبل الواعد في مجال التقنية الحيوية اإلنزيماتملية أنتاج تعد ع ن ـم األكبروالجزء 2008ام ــالضعف ع إلىبليون ووصلت 1.5 لإلنزيماتبلغت السوق العالمية ) . Vibh ،2010 ؛ 2009 ، وآخرون Lali(ي ــا مايكروبــة مصدرهــالصناعي اإلنزيمات بوجود البكتين إنتاجهاوالتي يحفز Pectinaseـن بــالمحللة للبكتي اإلنزيماتمجموعة تعرف )Alkort 1998 ، وآخرون Adriana ; 2002، وآخرون ; Ahlawat والبكتين . )2007، وآخرون ا هو جزيئات ــفيه األساسب ــالتركي, عبارة عن سكريات متعددة حامضية عالية الوزن الجزيئي D- galacturonic acid بآصرةع بعضها ــة مــمرتبط α )1-4(ات مـع عدد قليــل من جزيئ Rhamnose ة و سلة الرئيسي السلــفArabinose وXylose ة الجانبيةفــي السلسل ) Venugopalيكوسيدية لسلسلة الكال اآلصرةتعمل انزيمات البكتنيز على كسر . )2007، وآخرون Pactalelyaseو Pectinlyaseو Polygalactoronase اإلنزيماتوتشمل هذه ة الكاربون الطويلــ Anthappan ،2006 ; Reda و Dalvi ; 2004 ، وآخرون (Pectin esterase Nalaliaو . ) 2008،وآخرون ـــــــــــــــ . 2011/ 10/ 13تاريخ استالم البحث . 2011/ 1/ 8تاريخ قبول النشر آاظمو الشمري 2012، 267 - 257 ) : 1( 4مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 258 ولكن الرؤيا االقتصادية البكتنيز إلنزيمن ة المصدرين الرئيسيـالمجهري واألحياءد النباتات تع من بين المصادر األهمالمصادر المايكروبية للبكتنيز أصبحت وبسرعة كبيرة أن إلىوالتقنية تشير التي المجهرية األحياءوتعد . ) 2011، وآخرون Nazneen ; 2002، وآخرون Marie( األخرى فهي موجودة في التربة والفواكه والخضروات التالفة ،االنتشار تمتلك فعالية لتحليل البكتين واسعة ). 2005، وآخرون Jayani( المصابة والخشب واألوراق تلفــة تتميز بقدرتها على تحطيم ة مـن مواد مخالمجهري األحياءرا عدد كبير من عزل مؤخ ، Anthappanو Dalvi(ــي الفواكه والخضر المنتجة للبكتنيزات ودة فالسكريات المتعددة الموج 2006 .( وتركيب ،ز ـان المنتجة للبكتنيائر واالعفكثيرة من السالالت البكتيرية والخم اعأنوهناك Nazneenو ; 2002 ، وآخرون Marie(ةالمجهري األحياءمابين وعالمحللة للبكتين متن اإلنزيمات و .Bacillus sppا ـي بكتريـالبكتنيز ه مإلنزيالبكتيرية المنتجة األنواعومن ) 2011، وآخرون Clostridum spp. وPsedomonas spp. الفطريات فمنها أماAspergillus spp. وMonillalaxa ، Polyporussquamosus )Vibhaو lanuginosusThermomyces و .Fusarium sppو 2010( . في العمليات التصنيعية وذلك الن الفطرية اإلنزيماتى استخدام العديد من الدراسات علأكدت األكثر Aspergillus niger رـالمحللة للبكتين وخصوصا فط اإلنزيمات إنتاج الفطريات فعالة جدا في للغذاء األمريكيةل المنظمة من قب) GRAS( ن ـا كفطر أميف عالملكونه فطر مصن استخداما وآخرون Chen ، 1992 ; Bruhlmaum و Cao( األغذيةفي تصنيع استخدامهوالمصدق على ،1994 ; Adriana 2002، وآخرون ; Ladjamo 2007 ، وآخرون.( من المجاالت في الكثير بصورة واسعة في مجال البايوتكنولوجي و Pectinases إنزيماتتستخدم ه ،ـلترويق إضافةتزيد من الناتج نهاإ إذوتنقية عصائر الفواكه استخالصالتصنيعية فهي تستخدم في تقليل اللزوجة وزيادة في سرعة الجريان مما إلىر يؤدي ـفي تصنيع العصائ اإلنزيمات استخدام إنكما إزالةوتستخدم في ،رــة العصــعملي إلى ةص وقت العملية التصنيعية دون الحاجـــتقلي إلىيؤدي وآخرون Vivek ; 2005، وآخرون Jayani (الكحولية للمشروبات األحمرالضبابية وتثبيت اللون كما تستخدم في , ) 2006، وآخرون Evnesto(وة ــاي والقهــر الشـوفي عملية تخمي ،) 2010، لها هو األخرىومن التطبيقات ،) 2005، وآخرون Urmila(الصبغات في المواد النباتية استخالص الزيوت وتنقية فايروسات النبات وفي المنظفات استخالصفي عجينة وصناعة الورق وفي استخدامها ة ــيذالبروتوبالست وفي الصناعات النسيجية ومعالجة الفضالت وتغ انشطارالحيوية و Ricard ،2000 ; Hoondelو Jayasinghe ،; 1999 Reidو Salazar(ات ــــالحيوان Ranveer ; 2003 ، وآخرون Revilla ; 2001 ، وآخرون Kashyap ; 2000 ، وآخرون . ) 2005، وآخرون الفضالت الصناعية والزراعية والنواتج العرضية لبعض تعد الفضالت الحيوية الناتجة من ذات األخرىونخالة الحنطة وبقايا العمليات التصنيعية الصناعات مثل قشور البرتقال وبقايا قصب السكر استخداملذا فأن ،ي العمليات التصنيعية ــرة فــل كبيــيحدث مشاكقابلية عالية على التلف ورميها ول ــيوي وااليثانـــاز الحــومواد ذات قيمة مثل الغ اإلنزيماتي أنتاج ـمثل هذه الفضالت ف تكنولوجيا باستخدامالدهنية والكتلة الحيوية واألحماضات النكهة ــك ومركبــوحامض الستري ب ــري المناســن المجهــالكائ باستخدامة ــهما من الناحية االقتصاديم انجازا يعد رــالتخم آاظمو الشمري 2012، 267 - 257 ) : 1( 4مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 259 )Nalalia 2004، وآخرون ; Dalvi وAnthappan ،2006 ; Reda 2008 ، وآخرون ; Venkatesh 2009، وآخرون .( الرخيصة الثمن فواكه كالبرتقال والتفاح والموز بعض ال قشور استخدام إلىدراسة لهدفت هذه ا تخمرات باستخدامأنزيمات البكتنيز المهمة في العمليات التصنيعية من الفطريات إنتاجواد أساس في كم .في أنتاج أنزيمات البكتنيز األفضلوالطريقة المغمورة وتحديد الحالة الصلبة بحثالمواد وطرائق ال :عزل وتشخيص الفطريات المنتجة للبكتنيز :مصادر العزل موعة من الفواكه التالفة المأخوذة من السوق المحلية والمتمثلة بالبرتقال في العزل مج استخدمت .التربة كأحد مصادر العزل استخدام إلى إضافةالتالف والاللنكي التالف والتفاح التالف : عزل الفطريات ( وآخرون Okafor أستخدم في عملية العزل للفطريات الوسط المذكور من قبل: وسط العزل :والمتكون من Trace mineralمليلتر من محلول 1 بإضافةمحور وال) 2010 0.04 %Na2 B4o7 0.008و%Mn So4 من المضاد الحيوي % 0.1أضيف و Ampicilin وسط العزل بعد أجراء عملية التعقيم إلى. :طريقة العزل الت حفظت العز) . 2010( وآخرون Okafor أوردهاعملية العزل حسب الطريقة التي أجريت . م 4في الثالجة بدرجة حرارة PDAوسط مائل من باستخدامالمستحصل عليها باستخدامعلى الخواص المورفولوجية للفطر اعتماداشخصت العزالت على مستوى الجنس ).McCance ،1976و Harrigan(المجهر الضوئي باالعتماد على المفتاح الخاص بتشخيص االعفان :تحضير عالق السبورات ) 2010 ( وآخرون Vivek أوردهاحضر عالق السبورات لالعفان المعزولة حسب الطريقة التي وتعقيمه وصبه في أطباق معقمة وتلقيحه بالتخطيط من العزالت النقية PDAوذلك بتحضير وسط مل 5أضيفت بعدها وفي ظروف معقمة . أيام 3لمدة م 30المستحصل عليها وحضنها بدرجة حرارة حفظت . معقمة أنابيب إلىوغسلت السبورات ونقلت Tween 80% 1من الماء المقطر الحاوي على .م 4بالثالجة بدرجة حرارة األنابيب :البكتنيز إنتاجقدرة العزالت على اختبار البكتنيز أنزيمات إنتاجختبار قدرتها على أجريت الغربلة النوعية للعزالت المستحصل عليها ال عقم الوسط . مصدر الكاربون بالبكتين باستبدال باستخدامالمحور Czapek – Dox agarوسط باستخدام بتري معقمة وترك ليتصلب وعمل فيه حفر بأحجام متساوية في كل طبق ولقحت أطباقي وصب ف 106يحوي المليلتر الواحد على ( كل حفرة مل من عالق السبورات لكل عزلة في 1بـ األطباق ة المتكونة ــة الشفافــحددت المنطق. أيام 5مدة م 30بدرجة حرارة األطباقحضنت ). مل /سبور ).Simb ، 2009 ; 2008 ، وآخرون Logule,s Iodine Solution )Redaول ــمحل باستخدام بعض قشور الفواكه مباستخداالغربلة الكمية للعزالت المنتجة للبكتنيز حضرت قشور الفواكه والمتمثلة بقشور التفاح والبرتقال والموز حسب الطريقة التي أوردها Vivek جمعت كمية كافية منها وقطعت بأحجام متساوية تقريبا وجففت بفرن حراري ، (2010)وآخرون آاظمو الشمري 2012، 267 - 257 ) : 1( 4مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 260 طحنت النماذج بمطحنة كهربائية وحفظت في عبوات . لحين ثبوت الوزن م 55هوائي بدرجة حرارة البكتنيز والمتمثل إنتاجوسط إلىأضيفت نماذج القشور المطحونة . زجاجية بعيدا عن الرطوبة سط وصب في وعقم ال. مصدر الكاربون بقشور البرتقال باستبدالالمحور Czapek – Dox agarبوسط لقحت . طه ثقوب بأقطار متساوية وتحت ظروف معقمة أطباق بتري معقمة وترك ليتصلب وعمل في وس للعزالت التي لها ) مل /سبور 106يحوي المليلتر الواحد على ( مل من عالق السبورات 1بـ األطباق قشور باستبدالأعيدت التجربة نفسها . القدرة على أنتاج أنزيم البكتنيز والناتجة من التجربة السابقة 5لمدة م 30بدرجة حرارة األطباقحضنت جميع . ة وبقشور الموز مرة أخرىالبرتقال بقشور التفاح مر باستخدامLogule ,s Iodine Solution محلول بإضافةقيست المنطقة الشفافة المتكونة حول الحفر . أيام .المسطرة وثبتت النتائج ى النوععلى مستوA2تشخيص العزلة المذكورة التصنيفيةباالعتماد على المفاتيح ) Species(على مستوى النوع A2شخصت العزلة المجهر الضوئي وباستخدام Gam (1988)و Domschو) Fennell )1965 و Raperفي . Ocular micrometer و Stage micrometerاالعتيادي و المغمورة بطريقة تخمرات الحالة الصلبة والطريقة Aspergillus nigerأنتاج أنزيم البكتنيز من الفطر قشور البرتقال والتفاح باستخدام A.nigerالبكتنيز من التجربة السابقة والمتمثلة بـ إلنزيم إنتاجا األفضلالعزلة استخدمت أعلى أعطتقشور التفاح والبرتقال والتي باستخداموالطريقة المغمورة تخمرات الحالة الصلبة باستخدام الطريقة المتبعة من قبل استخدمت. العزلة المختارة باستخداملسابقة البكتنيز من التجربة ا إلنزيمفعالية Natalia غم من قشور البرتقال 10وذلك بوزن ،بطريقة الصلبة اإلنزيمفي أنتاج 2004)( وآخرون مل وعقمت بالمؤصدة بدرجة حرارة 250في دوارق سعة والتفاح المحضرة مسبقا ووضعت كل منها مل من محلول 10بعد التعقيم وبظروف معقمة أضيف لها ،قةيدق 40لمدة 2انج/باوند 15وضغط م 121 والحاوي على قة يدق 15لمدة 2انج/باوند 15غط ضو م 121المغذيات المعقم بالمؤصدة بدرجة حرارة )0.1%NH4No3 ، 0.1%NH4H2Po4 ، 0.1%Mg So4.7H2O .(مل 10ط بـ ــح الوســلق حضنت الدوارق بدرجة ). مل /سبور 106يحوي المليلتر الواحد على ( لالمعزو من عالق سبورات الفطر .دقيقة/دورة 200أيام في حاضنة هزازة 5مدة م 30حرارة ،لإلنزيمبطريقة التخمرات المغمورة لغرض المقارنة بين الطريقتين في أنتاجها أيضا اإلنزيمأنتج وآخرونVivekقة المذكورة من قبل وذلك بتحضير مستخلص قشور البرتقال والتفاح حسب الطري لكل وأضيفغم من كل من قشور البرتقال والتفاح في دوارق زجاجيـــة 100بوزن وذلك2010)( مدة م 100بدرجة حرارة ) Hot plate( مل من الماء المقطر ووضعت على صفيحة ساخنة 1600منهما مل من 10له وأضيفمل منه 100ذوأخ، م 4حفظ المستخلص في الثالجة بدرجة حرارة . ساعات 3 30مل من عالق السبورات وحضنت الدوارق بدرجة حرارة 10محلول المغذيات المذكور سابقا ولقح بـ .دقيقة/دورة 200في حاضنة هزازة أيام 5لمدة م Crud enzymeالخام اإلنزيم استخالص بإضافةVibha (2010)ردهاالخام من المزارع الصلبة حسب الطريقة التي أو اإلنزيمأستخلص ،على مكونات الدوارق المتخمرة ) Sodium acetate )PH 5.5 ، 0.05 Mدارئ مل من 100 10000(عملية ترشيح تحت التفريغ ومن ثم أجراء عملية النبذ المركزي ثم أجريت ،ومزج الوسط جيدا آاظمو الشمري 2012، 267 - 257 ) : 1( 4مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 261 في المزارع المغمورة فأجريت مباشرة ماأ. الخام اإلنزيمدقيقة وجمع الراشح ليمثل 20مدة ) دقيقة/دورة .لجميع النماذج اإلنزيميةعملية النبذ المركزي للمزرعة السائلة وجمع الراشح وقدرت الفعالية تقدير البروتين و Whitaker أوردهاالخام بالطريقة المطلقة وحسبما اإلنزيميقدر البروتين في المستخلص Glanum (1980) جهاز وباستخدام 280و 235الموجية األطوال باستخدامي بقياس االمتصاص الضوئ . Spectrophotometerف المطيا تقدير فعالية البكتنيز . يةبكتين الحمضيات كمادة أساس باستخدامقدرت فعالية البكتنيز دارئ المحضر في من البكتين % 1يحوي خليط التفاعل على كميات متساوية من محلول Sodium acetate )PH 5.5 ، 0.05 M ( حضن المزيج . امـالخ اإلنزيموتخفيف مناسب من Dinitrosalycylicمل من 1أضيف بعدها للتفاعل ،دقيقة 30في حمام مائي لمدة م 50بدرجة حرارة acid Solution(DNS) )Miller ،1959 (ثم برد وقرأ االمتصاص ،دقائق 10لمدة الخليط اغلي وقدرت الفعالية باالعتماد Spectrophotometer باستخدامنانوميتر 540ي الضوئي على طول موج عرفت وحدة . سابقاالمحضر ) Galactouronic acid( على المنحنى القياسي لحامض الكالكتورونك لكل Galactouronic acidمن ) molµ1( مايكرومول 1الالزمة لتحرير اإلنزيمكمية بأنهاالفعالية .ف التجربةدقيقة تحت ظرو النتائج والمناقشة البكتنيز إلنزيمعزل الفطر المنتج عزالت وتم الحصول على عشر ،مصادر عزل محلية مختلفة باستخدامأجريت عملية العزل و Harrigan(التكاثرية لألجزاءشخصت أجناسها باالعتماد على الخصائص المورفولوجية ، )1جدول( MaCance ،1976.( . لعزالت المستحصل عليها ومصادرها وأجناسهاا . 1جدول جنسها مصدرها العزلة A1 برتقال تالف Aspergillus P1 برتقال تالف Penicillium P2 اللنكي تالف Penicillium F1 اللنكي تالف Fusarium A2 تفاح تالف Aspergillus A3 تفاح تالف Aspergillus F2 تفاح تالف Fusarium P3 تربة Penicillium A4 تربة Aspergillus M1 تربة Moniliella آاظمو الشمري 2012، 267 - 257 ) : 1( 4مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 262 قدرة العزالت على أنتاج أنزيم البكتنيز اختبار للكاربون بدل البكتين كمصدر وحيد بإضافةالمحور Czapek – Dox agarأستخدم وسط 1993)( وآخرون Galiotouأشار إذالسكروز في أجراء الغربلة النوعية للعزالت المستحصل عليها واد ـــط الحاوي على مــالبكتنيز هو الوس إلنتاجأفضل وسط أن إلى1999)( وآخرون Crottieو ة النوعية للعزالت المستحصل عليها ـــنتائج الغربل) 1(يوضح الشكل .اإلنزيم إلنتاجة ــبكتينية محث ا على أنتاج ــزت بقدرتهــتمي) A 1 ، A 2 ، P 1( تم الحصول على ثالث عزالت فطرية إذ ، ى ــها علــقدرت اختبارن خالل ـــوتحت الظروف نفسها وذلك م بكميات كبيرة أنزيم البكتنيز قدرتها على تكوين المنطقة الشفافة الناتجة من تحلل بكتين اختبارة الشفافة من خالل ـــتكوين المنطق و Logule ,s Iodine Solution)Madhavكاشف باستخدامالوسط بأنزيم البكتنيز المنتج من الفطر Pushpalatha ،2002 .( بعض قشور الفواكه باستخدامقدرة العزالت على أنتاج أنزيم البكتنيز اختبار بصورة شبـــه أونوعيا م البكتنيزـــزالت على أنتاج انزيـــدرة العـــق اختبرت تصور ألخذة ـة والمطحونـوز المجففـــال والمـــاح والبرتقــــقشور التف باستخدامكمية إذ ،)Blevins ، 1979و (Davisونوعا ˝اـكم اإلنزيم إفرازعـن قابليــة العزالت علــى واضح المختلفة مع مالحظة األوساط باستخدامالتي أحدثتها كل عزلة المناطق الشفافة أقطار) 2(يوضح الجدول البكتنيز على وسط قشور البرتقال مقارنة ألنزيما في أنتاجهالمعزولة من التفاح التالف A2تفوق العزلة على 2سم P1 3.7 ،3.4و A1للعزلتين لإلنزيمفي حين بلغ أعلى أنتاج ، 2سم 4 األخرىبالعزالت هذه إلكمالوقشور البرتقال A2وبذلك وقع االختيار على العزلة . على وسط قشور البرتقالالتوالي .الدراسة Czapek – Doxوسط باستخدام) A 1 ، A 2 ، P 1(للبكتنيز إنتاجا األفضلالعزالت . 1شكل agar المحور. آاظمو الشمري 2012، 267 - 257 ) : 1( 4مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 263 إنزيمبفعل المنطقة الشفافة المتكونة وأقطارالعزالت المستحصل عليها ومصادر عزلها . 2جدول .قشور التفاح والبرتقال والموز كمصدر للكاربون باستخدامالبكتنيز المنتج من العزالت مصدرها العزلة ر المنطقة الشفافة ـقط قشور باستخدام)سم ( أيام من 5التفاح بعد الحضن ـّقطر المنطّ قة ــ سم (الشفافة قشور باستخدام) أيام من 5البرتقال بعد الحضن )سم (الشفافةقطر المنطقة أيام 5قشور الموز بعد باستخدام من الحضن A2 2.2 4 3.8 التفاح التالف P1 2.4 3.4 2.9 البرتقال التالف A1 1.8 3.7 3.1 البرتقال التالف على مستوى النوع A2تشخيص العزلة النوع على مستوىA2اعتمدت لتشخيص العزلة ) 3(كما موضحة في جدول اختباراتأجريت مجموعة Fennel )1965و Raper وباالعتماد على المراجع العلمية الخاصة بتصنيف الفطريات والتي شملت . Aspergillus niger أساسهاوالتي صنفت على ) 1988( Gams و Domsch و) .على مستوى النوع A2االختبارات المورفولوجية لتشخيص العزلة .3جدول صفاته المكون Vesicle روية الشكل او قريبة من الشكل الكروي ذات لون بني متدرجك Conidiophores مليلتر 4لم يتجاوز طولها Conidia 4.5كروية الشكل غير منتظمة وخشنة مع وجود نتوءات وذات قطرµ Conidal heads ذات , الكونيدية السالسل إلىصفوف منتظمة اوغير منتظمة إلىكروي الشكل متفرع الكاربونيواألسودأسود مائل للبنيأوودلون أس البكتنيز إنزيمفعالية اختبار قشور باستخدام Aspergillus niger ةالخام المنتج من العزل البكتنيز إنزيمفعالية اختبرت هنالك أنيالحظ إذ ،بطريقة تخمرات الحالة الصلبة والطريقة المغمورة )2(شكل البرتقال كمادة أساس بلغت إذتخمرات الحالة الصلبة مقارنة بالطريقة المغمورة باستخدام اإلنزيمواضح في فعالية ارتفاع . ملغم على التوالي/وحدة 370و 675الفعالية البكتنيز المستحصل عليه من فطر إنزيمارتفاع فعالية (2010) وآخرون Okaforوقد أشار A.niger فطروPenicillum chrysogenum رات الحالة الصلبة بطريقة تخمSSF مقارنة مع آاظمو الشمري 2012، 267 - 257 ) : 1( 4مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 264 عالية من إنتاجيةتعطي وإنما اإلنتاجتقلل من تكاليف وبالتالي فهي ليس فقط Smfالطريقة المغمورة A.nigerفعالية أنزيم البكتنيز المنتج من فطر ارتفاع إلىالتي أشارت األبحاثهناك الكثير من .اإلنزيم إنزيمكمية أن إلىكما أشار .ة بالطريقة المغمورة تخمرات الحالة الصلبة مقارن باستخدام Polygalactuonase المنتج من فطرA.niger بطريقة SSF مرة من المنتجة من الفطر 11بـ أكثر 6بـ أكثر A.nigerذاته المنتج من فطر اإلنزيمكمية أن إلى في حين أشار ،نفسه بالطريقة المغمورة . Smfريقة المنتجة بط اإلنزيممرات من كمية مابين الطريقة المغمورة وتخمرات الحالة الصلبة يعود لعدة أسباب اإلنزيماالختالف في أنتاج إن األساسالمادة انتشاروانخفاض Smfمقارنة بـ SSFفي Catabolic repression انخفاضمنها مما يعزز من Solid – airالعالي في طور األوكسجينمستوى إلى إضافة SSFالمجهرية في لألحياء ).2009 ، وآخرون Venkatesh( سرعة النمو تخمرات الحالة الصلبة باستخدام A.nigerالبكتنيز المنتج من الفطر إنزيمفعالية . 2شكل والطريقة المغمورة المصادر Adriana B. ,E. Telma, B. Denise, M. Mauricio and A. Jorge 2002. Evaluation of filamentous fungi and inducers for production of endo-polygalacturonase by solid state fermentation.Verlag der Zeitschriftfür Naturforschung,57:666- 670 Ahlawat S., B. Battan, S.Dhiman,J.Sharma and Mandhan.2007.Production of the thermostable pectinase and xylanase for their potential application bleaching of kraft pulp. J.Ind.Microbiol Biotechnol.34:763-770. Alkorta I., C. Garbisu, M. LiamaJ and JL. Serra 1998.Industrial application of pectic enzymes, Areview.Proc.Biochem.33:21-28. Bruhlmaum F., K. kim,W.Zimmerman and A. Fiechter 1994.Pectinolytic enzymes from Actinomycetes for the degumming of ramie bastfibers. Applied and Environmental Microbiology.60:2107-2112. آاظمو الشمري 2012، 267 - 257 ) : 1( 4مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 265 Cao J., L. Zhengand S. Chen 1992.Screening of pectinase producer from alkalophilic bacteria and study on it,s potential application degummines of ramie.Enzyme and Microbial Technology. 14:1013-1016. Davis N.D.and W.T. Blevins. 1979.Methods for laboratory fermentation. In Microbial Technology .Vol.2(ed by PepplerH.J.and Perlman D.)2nd ed., Academic AcademicPress.London. DalviP.and P.Anthappan. 2006. Amylase and pectinase from singl source for simultaneous desizing and scouring. Indian Journal of Fibre and Textile Research.32:459-465. Domsch K.H. and W. Gams. 1988.Compendium of soil fungi.Vol.(1),(ed. By DomscK.H.and Gams W.)London, Academic Press. Evnesto F., V. Tania and G. Viniegra 2006.Production of hydrolytic depolmerising pectinase.Food Technol. Biotechnol.44(2):221-227. Giani A., M.Glenio, A.Jorge,E.Telmaand and B. Nelson. 2007.Colum bioreactpr use for optimization of pectinase production in solid substrate cultivation.Brazilian Journal of Microbiology,38:557-562. HarriganW.F.and M.K.McCance. 1976.Laboratory methods in food and dairy microbiology.AcademicPress,London,New york. HoondalGS., RP Tiwari.,R.Tiwari, N.Dahiya and QK. Beg. 2000.Microbaial alkaline pectinases and their application: Areview.Appl.Microbiol.Biotechnol.9:409-418. Jayani R.,S. Saxena and R.Gupta. 2005.Microbial pectinolyticenzymes:Areview, Process Biochem. 40:2931-2944. Kashyap DR., PK. Vohra, S. Chopra and R. Tewari. 2001. Application of pectinasesin the commercial sector: Areview. Biores. Technol. 77:215-227. Ladjama A., Z. Taibi, and A. Meddour. 2007.Production of pectinolytic enzymes using St using Streptomyces strains isolated from palm soilinbiskra area (Algeria). African Crop Science Conference Proceedings , 8:1155-1158. Lali K., Z. Nino,J.Maya, U. Tamar,K.Rusudan and K. Izolda. 2009.Selection of microscopic fungi-pectinase producers. Bulletin of the Georgian National Academy of Sciences.3(1).pp 345-356. Narie K.,D.Kevin and B.Stephen. 2002.Comparative enzyme production by fungi diverse lingocellulosicsubstrates .The Journal of Microbiology, 40(3):241- 244. Natalia M., R. Simone, D. Roberto and G.Eleni. 2004.Pectinase production by fungal strains in solid – state fermentation using agro-industrial bioproduct. Brazilian Archives of Biology and Technollogy.36(2): 342-351. آاظمو الشمري 2012، 267 - 257 ) : 1( 4مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 266 Nazneen A.,M.Alam, U.Azim, B.Feroza,S.Tipu and A.Abulkalam 2011.Production of pectinase Aspergillusnigercultured solid state media.International Journal of Biosciences. 1(1):33-42. Ranveer S.,S.Saxena and R. Gupta. 2005.Microbial pectinolyticenzymes :Areview. Proc. Biochem.40:2931-2944. Raper K.B.and D.I.Fennel. 1965. The Genand Fennel D.I. 1965. The Genus Aspergillus.The Williams and Wilkins Company. Reda A.,M.Hesham,A.Mahmoud and Z.Ebtsam. 2008.Production of bacterial pectinase(s) from agro-industrial wastes under solid state fermentation conditions.Journal of Applied Sciences Research, 4(12):1708-1721. Reid I., and M.Richard. 2000.Pectinase in paper making solving retention problems in mechanicntion problems in mechanical pulps bleached with hydrogen peroxide.Enz.Microbiol.Technol.26:115-123. Revilla I., S.Ganzalez and Ml. Jos. 2003.Addition of pectolytic enzymes: Anenological practice which improves the chromaticity and stability of red wines. Int. J. Food Sci.Technol.38:29-36. Salazar L. and U.Jayasinghe. 1999.Fundamentales of purification of Plant viruses. In: Techniques in Plant Virology ,Cip,Training Manual Jo, Virus Purification ,International Potato Centre, Peru. 1-10. Simb A. 2009.The roleof pectinase enzyme in the development of soft rot Caused by Pseudomonas fluorecens in the purple variety of on ions (Allium Cepa).African Journal of Microbiology Researeh. 3(4):163-167. Urmila P. ,D.Vikram, S.Shobhna and B.Chadha. 2005. Pectinase and Polygalactur0nase production by athermophilicAspergillusfumigatus Isolated from decomosting orange peels.Braz. J. Microbiol. 36(1):77-84. Venkatesh M. D. And Girija. 2009. Micrbial pectinase from tropical fruit Wastes.Journul of Tropical Agriculture. 47(1-2):67-69. Venugopal P. ,T.Jayachandra and KA.Appaiah 2007. Effect of aeration Of production of endo-pectinase from coffe pulp by anovelthermophilic Vibha B. 2010. Exploitation of micro-organism for isolation and screening Of pectinase from environment.Globelics Innovation work for Society: Linking, Leveraging and Learning. Malaysia. Vivek R. ,M.Rajasekharan, R.RavichandranK.Sriganesh and V.Vaithees. 2010.Pectinase production from orange peel extraction and dried orange peel solid as substrates using Aspergillus niger .International Journal of Biotechnology and Biochemistry.6(3):445-453. آاظمو الشمري 2012، 267 - 257 ) : 1( 4مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 267 PRODUCTION OF PECTINASE FROM ASPERGILLUS NIGER BY USING SOME FRUIT PEELS Elham Esmael Al-Shamary Badaa Hatam Kadem *Dept. of Food Sci. & Biotech - Coll. Of Agri. Coll. Of Agri- Baghdad Univ. elhamfadel@yahoo.com ABSTRACT Ten filamentous fungi isolated from a growaste samples .Three isolated were of high productivity for pectinase enzyme compared with other isolates , depending on diameter of clear hydrolyzed zones on the medium plates containing commercial pectin as sole carbon source , this isolates were Aspergillusniger (A2),closely followed byAspergillus sp.(A1 ) and penicillum sp.(P1) . The three isolates also produced pectinases with different a growastes ( Orange peels , Apple peels , Banana peels)as the sole carbon source ,Aspergillusniger(A2) was the best isolate for pectinase production on the medium containing orange peels as the sole carbon source . Peak pectinase activity of 675 and 370 u/mg protein was respectively obtained by solid – state fermentation (ssf) and submerged fermentation (smf) for A.niger(A2) .Solid – state fermentation yielded higher levels of pectinase activity than the submerged fermentation . The strain of A.niger(A2) have good prospect for pectinase production ,and the orange peels is a good low – cost fermentation substrate for pectinase production by the investigated isolate Key words: pectinase, Aspergillus niger