المقدمة األنباري 2010، 8 - 1 ) : 2 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، اليوريز والكاتليز في البذور الحديثة والقديمة لنباتي الحمصإنزيميفعالية واإلنبات Cicer arietinum L والماش Phaseolus aureus Roxb. آاظم االنباري أسيل جامعة ديالى-) الرازي( آلية التربية -قسم علوم الحياة الخالصة للبذور الحديثة والقديمة والفعالية اإلنزيمية إلنزيمي اليوريز تمت دراسة العالقة بين اإلنبات uraese والكاتليز catalase حيث تم حساب النسبة المئوية لإلنبـات لبـذور , لنباتي الحمص والماش أما الماش فقد كانت نـسبة إنبـات , على التوالي ) % 0 و 83.3( الحمص الحديثة والقديمة وكانت الحديثة صبذور الحم إن الفعالية اإلنزيمية الكلية لليوريز في . للحديثة والقديمة % )0 و 91.1( بذوره مليلتر على التوالي أما الماش فقد كانت الفعاليـة اإلنزيميـة / وحدة ) 0.07 و 2.90( والقديمة كانت يـة وعنـد قيـاس الفعال , مليلتـر / وحدة ) 0.02 و 1,43( لليوريز في بذوره الحديثة والقديمة هي أما , مليلتر / وحدة ) 0.04 و 3.23( اإلنزيمية الكلية للكاتليز للبذور الحديثة والقديمة للحمص كانت , مليلتر على التوالي / وحدة ) 0.01 و 0.95( اش الحديثة والقديمة فأن الكاتليز فيه كان في بذور الم ها لمدة تم معاملة البذور الحديثة بنقع دوالكاتليز في عملية إنبات وتنفس البذور فق ولمعرفة دور اليوريز وانخفضت نسبة اإلنبات لبذور الحمـص والمـاش ) EDTA( وريز ساعة بإحدى مثبطات الي )36( )يز يثة بإحدى مثبطات الكاتلعلى التوالي وعند معاملة البذور الحد ) % 40.8 و33.3 ( إلىالحديثة CuSO4) وفـي , للحمص والماش على التـوالي % )36.5 و 27( فأن نسبة اإلنبات انخفضت الى ساعة بمحلول اليوريا وارتفعت نسبة اإلنبـات ) 36(الوقت نفسه تم معاملة البذور القديمة بنقعها لمدة أما عند معاملة البذور القديمة للحمص والماش , على التوالي ) % 21 و 16.5( للحمص والماش الى .على التوالي )% 19.4 و17.8( الى بحامض االسكوربيك فأن نسبة اإلنبات ارتفعت المقدمة االتزان بين عناصر ( Homeostasis التعمير هو الفشل في المحافظة على ثبات البيئة الداخلية إن ـلة كاـال ـ الحيويئن الحي المــختلفة مرتبطا بقـ وان عملية سلبا ـلتأثرل ية لـابـ مع زيادة الق Viabilityة ـ ذ د الكثير من تعمير الب ينور تؤدي إلى تقيي وآخرون Vieirasantos ( الفعاليات الفسيولوجـــية للجن محمد ويونس ( إنباتها تدهور ىإلتتأثر حيوية البذور بزيادة الفترة الزمنية لخزنها مما يؤدي ) . 2001، يــــذور الحرة التـالجد وليـب في تـسبـ تتأنكن ـ الدهون التي من الممدةـــــأآسآونها تزيد من )1991 ، ـيير فـ وتغلإلنبات الضرورية األنزيمات في فعالية ألضرار تقود و Smith( االمينية أحماضهاي ـ Bergak ، 1995( . زيم يحفز ة إن وريز عملي ات الي ز اإلنب قي مع االرجنيي ن خالل دوره التناس Arginase)( وذلك م ) Holland ، 1993 و (Polacco اإلنبات ر خالل عملية في بروتين البذو اإلنبات ليستحث نقاط ه ك بتحريك ض وذل روتين اي زون لتغذيالب ادرات ةالمخ رون ،(Goldraij الب دور . )2003 وآخ إن ال ا بصورة الرئيسي لليوريز ا الخارجية فضال عن المتكونة داخلي هو تمكين النباتات من استخدام اليوري وهذه الكميات من النتروجين الموجودة في )2005، وآخرون (Witte طبيعية آمصدر للنتروجين ا ليكون اليوريز ، حيث يحفز اليوريز التحلل المائي لليوري اليوريا تكون غير متاحة للنبات ما لم تتحلل ب دمج ئانث ا الذي ين glutamine إنزيمطة اسبو المرآبات العضوية معي اوآسيد الكاربون واالموني synthetaseهذا يزيد من قدرة النبات الستخدام النتروجين و Gallardo) ، 1999 وآخرون(. ـــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــ 1 . 2010 / 1 / 19تاريخ استالم البحث . 2010 / 5 / 27 تاريخ قبول النشر األنباري 2010، 8 - 1 ) : 2 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، ل زيم يعم سيولوجية إن ات الف دء العملي ى ب ذور عل ي الب اتليز ف ا الك ي وأهمه د ف ث يتواج نفس حي الت )1995 ، آخرونو (Willekensفي البذرة يا المايتوآوندر ووالسايتوبالزمGlyoxysomes تراآيب ن اتليز م اتيعتبر الك ة المضادة اآللي سيد لألآسدة الدفاعي حيث يعمل على سحب وتخزين بيروآ .)Poovaiah ، 2002 و (Yang) آاسح الجذور الحرة ( الهيدروجين وقد بين تدهور وتغيير لون البذرة أو وعواملها تؤثر على البذور مما ينتج عنه فساد األآسدة إن Luhova دبيروآسي رانشطا الكاتليز يظهر نوعين من الفعالية وهي تحفيز إنزيم إن) 2003 (وآخرون تتأآسد البروتينات بالجذور , وتحويل الواهب المختزل الى واهب مؤآسد وأوآسجينالهيدروجين الى ماء ـبتيدية مغيرا الشـحنة الــكهربائية مما يؤدي الى الحرة ويحصل تداخالت بين القوى بين السالسل ا لبـ آخرون ، و (Desikan الخلية بتراآم بيروآسيد الهيدروجين إلجهاد نتيجة Protolysis تحلل البروتين باعتبارها EDTAمثل مادة بعض المواد لها القابلية على تثبيط عمل اليوريز إنقد تبين و) 2001 ا في االرتباط بالموقع الفعال حي Chelatorعامل آالبي ا إلنزيم ث تتنافس مع اليوري آبريتات و اليوري ذا إنزيم النحاس المائية باعتبارها آمثبط لعمل إنزيمي العالقة بين لمعرفة هدفت هذه الدراسة الكاتليز ل ـلة البقولية وتنفس البذور لجنسين من إنباتوالكاتليز في اليوريز Cicer arietinum L.الحمص العائــ التي تستهلك آثيرا بين األجناس من باعتبارها قديمةوالة حديثال .Phaseolus aureus Roxbوالماش . الشعوب المواد وطرائق البحث :المواد الكيمياوية المستخدمة) 1 محلول حامض االسكوربيك ,خزين اليوريا ,فات ـــدارئ الفوس, هايبوآلوريد الصوديوم ,HEPES )2 Hydroxy ethyl piperazine N2 ethan sulphate (Nدارئ H2O2بيروآسيد الهيدروجين, EDTA ( Ethylene diamine tetra acetic acid )محلول نيتروبروسيد الصوديوم ,فينول , مولبيدات االمونيوم , (CuSO4.6H2O) المائية محلول آبريتات النحاس . محلول البايوريت , HCL امض الهيدروآلوريك ح, البومين , NaOHهيدروآسيد الصوديوم , :طرائق العمل ) 2 آانت بذور الحمص إذ ابلجامعة ب / علومآلية المعشب من قديمة تم الحصول على البذور ال لمدينة الحلة من السوق المحلية 2007 من محصول عام والحديثة 1991 عام لحاص من قديمةوالماش ال .)1988( وعباس أمين أوردهذور بمادة التترازوليوم حسب ما م اختبار حيوية البت ومن الصنف المحلي معاملة البذور وزراعتها دقائق ثم غسلت بالماء المقطر 3ولمدة %1الصوديوم بهايبوآلوريدحديثة والقديمة تم تعقيم البذور ال :ساعة بالمحاليل التالية ) 36( لمدة وتم نقع البذور :ة قسمت الى حديثذور الالب ) أ )ةمقارنمعاملة (بدون نقع -1 ) جزء بالمليون200( بترآيز EDTAمنقوعة بمحلول -2 mM 10 )(منقوعة بمحلول آبريتات النحاس بترآيز -3 : البذور المعمرة قسمت الى ) ب )ةمقارنمعاملة (بدون نقع -1 mM 500)(منقوعة بمحلول اليوريا بترآيز -2 )جزء بالمليون300(ض االسكوربيك بترآيزمنقوعة بمحلول حام -3 2 األنباري 2010، 8 - 1 ) : 2 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، بوضع مل من الماء المقطر 10 وإضافةيح بتري تحتوي على ورقتي ترش أطباق البذور في عت زر البذور في حاضنة بلغت درجة الحرارة باتستن ا تم . وبعشرة مكررات الواحد بذور في الطبق 10 .اإلنباتنسبة ثم حسبت ايوم) 15( ولمدة % 50طوبة نسبية ورم ° +25فيها تحضير مستخلص البذور لهاوأضيفغم من البذور المطحونة ) 5( وذلك بأخذ الحديثة والقديمةالبذور تم تحضير مستخلص دقيقة في حمام ثلجي هزاز رشح المزيج 45 ثم ترك لمدة pH=7.5,0.2N)(محلول دارئ الفوسفات سرعته دقيقة 15شاش ووضع الرائق في جهاز الطرد المرآزي لمدة المن قماش بعدها بثالث طبقات .والكاتليز لليوريزاإلنزيميةالدقيقة ثم اخذ الرائق وتم تقدير الفعالية / دورة 3000 تقدير البروتين مل 2بأخذ ) 1996 (البذور من البروتين حسب طريقة محمد وعبد اهللا تم تقدير محتوى مستخلص دقيقة في حمام مائي 30 مل من محلول البايوريت ثم وضع لمدة 3 له وأضيف خلص البذور من مست ة صاصية ° م37بدرج اس االمت م قي ضوئي وت اف ال از المطي عةبجه ة لألش المرئي Spectrophotometer وقورن مع منحنى البروتين نانوميتر 555)(عند الطول الموجي . لليوريز اإلنزيمية قياس الفعالية ذ م اخ ن215 ت ايكروليتر م ول دارئ م ن 25 وHEPES) (50mM )(pH=7.5محل ايكروليتر م م ا محلول خزين 3 لمدة °م37بدرجة حرارة اختبار وترآت في حمام مائي أنابيب ووضعت في اليوري م ائق وت حضنت . مليلتر 250 ليصبح الحجم النهائي اإلنزيمي مايكروليتر من المحلول 10 إضافةدق phenole nitroprossud مليلتر من 5 وأضيف دقيقة 15لمدة بنفس الدرجة في الحمام المائي ألنابيبا °م37مائي بدرجة الحمام ال مع الرج السريع وترآت في hypochloride sodium 6% مليلتر من 5و ر ثم قدرت نانومت 625 وتم قياس االمتصاصية عند الطول الموجي األزرق دقيقة ليظهر اللون 20لمدة : يةاآلتوفق المعادلة ) مليلتر/وحدة (اإلنزيميةالفعالية Ureae ( µ) Uraese activity (u /ml ( = ـــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــ ) 2007 الخفاجي ، ( 2 × 15 × 0.01 : إن حيث ا خالل الدقيقة الواحدة إلى من اليوريا مول الالزمة لتحويل واحد مايكر اإلنزيمهي آمية )0.01( اموني ° م 37وعند درجة حرارة ) دقيقة ( زمن التفاعل )15( ا تحلل اليوريآمية االمونيا الناتجة من) 2( للكاتليز اإلنزيمية قياس الفعالية التي استخدمها ة طريقالحسب حديثة والقديمة بذور الحمص والماش ال تم تقدير الفعالية اإلنزيمية في واني ك )2006(العل ط وذل ن 5 بخل رام م ذور غ يوم الب فات البوتاس ول دارئ فوس ع محل ) 0.1M( م pH)7.8 ( سبة م 1:2( وبن رد ا ) . وزن/ حج راء الط م إج شاش وت طة ال يحه بواس م ترش ستخلص ت لم تم تقدير ) 2003آخرون ، و Luhova( دقيقة 30 لمدة دقيقة و / دورة 12000المرآزي على سرعة H2O2 مل من المزيج الحاوي على 1 مل من المستخلص ويحضن مع 0.2فعالية اإلنزيم حيث يؤخذ )5mM 6 ( مع دارئ الفوسفات)60mM (pH) 7.4 ( 25فيC° بعدها يتم إيقاف عمل . دقائق 4 لمدة تؤخذ القراءات لتقدير فعالية اإلنزيم عند ) . (mM 32.4 مل من مولبيدات االمونيوم 1اإلنزيم بإضافة :تقدير الفعالية حسب المعادلة آالتية ويتم نانوميتر)(405الطول الموجي 3 األنباري 2010، 8 - 1 ) : 2 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، Sample Blank1 Catalase activity (u/ml )= ـــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــ × 271 Blank 2 – Blank 3 : إنحيث Blank 1 : الـ ( األساسمل من المادة 1يحتوي علىH2O2 مل من 1و ) مع المحلول الدارئ . من العينة مل0.2المولبيدات و Blank2 : الـ ( األساسمل من المادة 1يحتوي علىH2O2مل من المولبيدات 1و ) ئ مع المحلول الدار .من المحلول الدارئ مل 0.2و Blank3 : مل من المحلول الدارئ 0.2 مل من المولبيدات و1مل من المحلول الدارئ و 1يحتوي على . النتائج والمناقشة اإلنباتنسبة -1 حديثة اذ الوالماش بذور الحمص إنبات نسبة ) 2(و ) 1 (ين النتائج المبينة في الشكل أظهرت عند معاملة البذور لكال النباتين و % ) 0( ة قديمالوالي و ــــعلى الت ) % 91.1و% 83.7 ( نت آا إلى للحمص والماش انخفضت اتـــــــاإلنبسبة ـــ فان ن EDTA مثبطات اليوريز بإحدىة حديثال ا توصل ) % 40.2 و 33.3%( والي وتتفق هذه النتيجة مع م هعلى الت وآخرون Zonia إلي ـيع بـــ إن إلى) 1995( يؤخر عملية Arabidopsis ذور وجود مثبطـــات اليوريز في وسط تنقـ البذور تم معاملة إنبات اليوريز في ة ولتأآيد دورقديمها تماما في البذور ال ساعة ويوقف36اإلنبات ماش لكل من الحمص وال % ) 0( من اإلنبات ارتفعت نسبة إذ) 1صورة ( ة باليوريا قديمالبذور ال ى وريز ف % ) 21و % 16.5( إل د دور الي ذا يؤآ ـوه ـي تمـــ ا ـ تخدام اليوري ن اس ات م كين النب تفق ـــ وت ) 2005وآخرون ، (Witte تروجينــ در للنيــية آمصــن الداخلــال عــية فضــالخارج اإلنبات إلى دور اليوريز في استحثاث نقاط ) 2003وآخرون ، (Goldraijذه النتائج مع ــــــه .في البذور ة البذور ال د معامل ائج ) آبريتات النحاس ( ة بأحد مثبطات الكاتليز حديثأما عن د أظهرت النت فق شكل ي ال ة ف ورة ) 2(و ) 1(المبين اش ال ) 1( وص ص والم ذور الحم ات لب سب اإلنب ة حديثإن ن ى ضت ال ـ % ) 36.5و % 27.4( انخف ى التوالـــــــ دء عل ي ب اتليز ف د دور الك ذا يؤآ ي وه العمليات الفسلجية في البذور آالتنفس وتثبيطه أدى الى تثبيط العديد من هذه العمليات وتتفق هذه عند معاملة إنزيم الكاتليز المنقى من ثمار التفاح األصفر ) 2005 وآخرون ، Yourk (النتيجة مع ـ عملت , NaNO3 ,KCN , MnCl2 , Citric acid , Benzoic acid CuSO4 , NaClب إن استخدام ) 2(و) 1( الشكلين منعلى تثبيطه وقد يكون ذلك بسبب زيادة المواد الفينولية ويظهر % ) 0( ة فيه قد زاد من نســـبة إنباتها من قديم بنقع البذور الC ( Ascorbic acid )فيــتامين Ascorbic acidلتوالي وذلك الن لكل من الحمص والماش على ا % ) 19.4و % 17.8(إلـى سلة ي لسل ر إنزيم ابح غي ه آ سدة بكون ي لألآ ضاد أول و م سهولة فه رة ب ذور الح ع الج ل م يتفاع ( Willekens وفي دراسة )Smirnoff ، 2000 و Beyer ، 1994( عمليات األآسدة أدى Exogenous suppliedتليز الخارجي ا عند معاملة أوراق التبغ بالك)1997وآخرون ، زيادة سحب بيروآسيد الهيدروجين من داخل الخاليا بالعمل تعاضديا مع إنزيم البيروآسيديز الى .وآبح الجذور الحرة بأقل نسبة من الكاتليز 4 األنباري 2010، 8 - 1 ) : 2 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، .الماش الطرية والمعمرة لبذور اإلنبات نسب .1صورة حمص معاملة معاملة مــــقارنة معاملة املة اليوريا مع مقارنـــــة بذور الحمص والماشإلنبات النسبة المئوية .1شكل ة والقديمةالحديث بذور حديثة بذور قديمة 91.1 % ماش 16.5 % 21% 17.8 % 19.4 % صفرصفر 27.41 % 36.5 % 33.3 % 40% 83.7 % 30 20 10 10 0 90 80 70 60 50 ت40 نبا ال ة ل وي مئ ال بة نس ال 5 األنباري 2010، 8 - 1 ) : 2 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، حديثة والقديمة للبذور الاإلنزيميةالفعالية -2 ت ــــــــــ آانحديثة والقديمة لليوريزلبذور الحمص ال اإلنزيمية الفعالية إن) 1( يبين الجدول إنزيمية لليوريز فعالية رتأظهحديثة والقديمة مليلتر وبذور الماش ال / وحدة ) 20.07 و 2.90 4( دة ) 0.02و 1.43( ع مليلتر/ وح ق م ة تتف ذه النتيج والي وه ى الت رون ، (Hogan عل وآخ ة قديمة مقارنة بالحديث الاألنسجة اليوريز في إلنزيم الى وجود فعالية عالية )1983 .لقديمة ديثة وا والماش الحصلبذور الحم اإلنزيمية الفعالية .1 جدول اإلنزيميةالفعالية البذور الكلية مل لليوريز/ وحدة اإلنزيميةالفعالية الكلية مل للكاتليز/ وحدة محتوى البروتين مل/ ملغم الفعالية النوعية / لليوريز وحدة ملغم بروتين الفعالية النوعية للكاتليز وحدة ملغم / بروتين 0.095 0.085 33.925 3.236 2.904 الحمص ثة دي ح 0.011 0.017 82.012 0.954 1.431 الماش 0.006 0.005 12.601 0.048 0.072الحمص يم قد 0.0005 0.001 21.333 0.012 0.023 الماش ة / وحدة ) 0.048 و 63.23 ( كانت الكاتليز لبذور الحمص الطرية والمعمرة ف إنزيمفعالية أما ا في فعالية الكاتليز حيث آانت حديثة والقديمةلا بذور الماش وأظهرتمليلتر و 40.95( تباين العوامل المسببة لتكون إحدىعلى التوالي وذلك الن عملية التعمير هي مليلتر/ وحدة ) 0.012 التي تعمل على التفاعل مع جذر ) Scandalous ،1993 ( النباتية األنسجة الجذور الحرة في من تلك المرآبات مخلفا مرآبات عضوية حاملة للجذر الحر Absttoction وإزالةالهيدروآسيل األواصر االمينية وآسر األحماض آما تتأآسد البروتينات بالجذور الحرة مسببة تغيير في موقع , ) 2001وآخرون ، (Desikan الببتيدية مؤدية لقطعها بزيادة تراآم بيروآسيد الهيدروجين المصادر وزارة التعليم العالي والبحث.فحص وتصديق البذور.1988. علي حسين عباسهاشم محمد وأمين ، .جامعة بغداد. العلمي اليوريز المستخلص من بذور نبات إنزيمتنقية وتوصيف وتقييد . 2007. محمد عبد اهللا جبرالخفاجي ، .جامعة بغداد . آلية العلوم . دآتوراه أطروحة . Citrullus colocynthis الحنظل سد من خالل ظاهرة التعمير بداللة فرضية التأآأسباب .2006. بشير عبد الحمزة محمد العلواني ، . دآتوراه أطروحة. .Phaseolus aureus Roxb في عقل الماش ية الجذور العرض تكوين .جامعة بابل. العلوم آلية وزارة التعليم العالي . فسلجة النبات العملي .1996. محمد ، عبد العظيم آاظم و ليلى نجم عبد اهللا .جامعة بابل. العلمي البحث وزارة التعليم . النباتيولوجيا فس أساسيات .1991.مؤيد احمد اليونس محمد ، عبد العظيم آاظم و .غداد جامعة ب .أجزاء ثالثة .العلمي والبحث العالي 6 األنباري 2010، 8 - 1 ) : 2 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، Beyer, R.E.1994 .The role of ascorbic acid in antioxidant protection of biomembranes interaction with vitamin E and coenzyme bioenergy . Biomembr .26 (4) : 349 – 358. Desikan, R. , S. A. Mackerness, J. T. Hancock and S. J. Neill .2001.Regulation of the Arabidopsis transcriptase by oxidative stress. Plant Physiolgy. 127: 159- 172. Gallardo,F.,F. R. Canton ,A. Garcica –Gutierrez , F. M. Canovas and E. G. Kirby. 1999.Expression of conifer glutamine synthetase gene in transgenic poplar . Planta (210) : 19- 25. Goldraij, A. B. , L. J. Beamer and J. C.Polacco.2003. Intra allelic complementation at the ubiquitous urease coding locus of soybean. Plant physiology . (132) : 1801 -1810 . Hogan,M. E., I. E. Swift and J. Done.1983 . Urease assay and ammonia release from leaf tissues .Phytochemistry . 22: 663-667. Luhova ,L.,D.Hederova and,P. Pec.2003. Activities amino oxidase , peroxidase and catalase in seedlings of Pisum sativumL.under different conditions. Plant and Soil Environment. 49 (4): 151 – 157. Polacco,J. C.and M. A. Holland.1993 .Roles of urease in plant cells, Ininternat ional review of cytology ( 14) : 65- 103 . Academic press. Inc.SanDiego. - Scandaluos,J.G.1993.Oxygen stress and superoxide dismutase.Plant Physiology. 101: 712. Smith,M.and,P.Bergak.1995.Deteriorative changes associated with the loss of viability of stored desiccation tolerant and desiccation sensitive seeds, In kigel.J.Galili Geds. Seed development and germination.New York. Marcel.Dekker.Inc.701-746. Smirnoff, N.2000.Ascorbic acid metabolism and function of multifaceted mole- culecurrent opinion . Plant Biology. 3: 229- 235 Vieirasantos, C.L.,A.Compos,H.Azevedo and G.Caldera.2001.Insitu and invitro senescence inducedby KCl stress inutritional in balance lipid peroxidation and antioxidant metabolism . J.of Experimental Botany .52(35): 351-360. Willekens, H., S. Chamngpol, M. Davey , M. Schraudner, C. Langbartels, M. Vanmontage ,D. Inze and W. Vancomp.1997 .Catalase is sink for H2O2and is indispensade for stress defence . C3 Plants .J. EMBO. 16(16): 4806- 4816. Willekens ,H.,D.Inze,M. VanMontagu and W. VonCamp.1995 .Catalase in plants. Mol . Breeding 1:207 – 228. Witte, G.P.,S. Tiller.E. Isidor, H.Davies and M.A.Taylor.2005 Analysis of two alleles of urease gene from potato poly morphisms , expression and extensive alterative splicing of the corres – ponding mRNA . J. of exp. Botany . 56 ( 40) : 91- 99 . 7 األنباري 2010، 8 - 1 ) : 2 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، Yang,T. and B. W. Poovaiah.2002. Hydrogen peroxide homeostasis activation of Plant catalase by calcium calmodnlin .PNAS.99(6):4097-4102. Yourk, I. H. Demir ,K. Ekici ,and A. Savran.2005. Purification and properties catalase from Van apple ( Golden Delicious ) . Pakistan .J.of Nutrition . 4 (1) : 8 – 10 . Zonia ,L. E. ,N. E. Stebbins and J. C. Polacco.1995.Essential role of urease in germination of nitrogen – limited Arabidopsis thaliana seeds .Plant Physiology . 107: 1097- 1103. GERMINATION AND UREASE , CATALASE ENZYMES ACTIVITY IN FRESH AND AGED SEEDS OF Cicer arietinum L AND Phaseolus aureus Roxb. Aseel Kadhom AlAnbari Biology Department- College of Education( al-razi)/ University of Diyala ABSTRACT This study was conducted the relationship between germination and enzyme activity of urease , catalase in fresh and aged seeds of Cicer arietinum L and Phaseolus aureus Roxb. Germination percentage , enzyme activity of extracts of seeds , inhibitors of urease (EDTA) 200 ppm ,catalase (CuSO4) 10mM to fresh seeds , stimulaters of urease ( Urea) 500 mM , catalase (Ascorbic acid) 200ppm to aged seeds was studied. The results showed : of fresh seeds of Cicer arietinum L and Phaseolus The Germination percentage aureus Roxb. was ( 83.7 , 91.1)% while the aged seeds was (0%) for each one of them . the total activity of urease in C. arietinum was ( 2.90 ,0.07) Unit / ml in extracts of fresh and aged seeds . The Ph. aureus plant the total urease activity was(1.43 ,0.02) Unit / ml in extracts fresh and aged seeds .The total activity of catalse in C. arietinum fresh and aged seeds was (3.23 ,0.04) Unit / To . aged seedsandml of fresh /Unit ) .01,0.95 0( was aureus .Phml while the be sure of effective of urease and catalase in metabolism of seeds ( germination , respiration) we Treated of fresh seeds ( soaking ) (36) h in inhibitors (EDTA) to reduction of germination percentage of C. arietinum and Ph. aureus was (33.3,40.8)% while ( CuSO4) reduction of germination was (27, 36.5)% . On the anther hand the aged seeds treated by stimulators by soaking (36) h in urea solution it was increasing the germination percentage to (16.5,21)% for C. arietinum and Ph. aureus , ascorbic acid increasing the germination percentage to (17.8,19.4)% . 8