دراسه تاثير الامبرازول omeprazole كمثبط لمضخات دفق السبروفلوكساسين والنورفلوكساسين في بعض العزلات المرضيه من بعض مستشفيات عبد الرزاق 2010، 43 - 38 ) : 2 ( 2 مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، كمثبط لمضخات دفق السبروفلوكساسين ) Omeprazole( االمبرازولتأثير ةدراس .ضىوالنورفلوكساسين في بعض العزالت البكتيريه المعزوله من المر رغد عبد اللطيف عبد الرزاق الجامعة المستنصرية– كلية العلوم – قسم علوم الحياة الخالصه الختبـار )Efflux pumps(ثبط لمـضخات الـدفق كمomeprazole)(درس تاثيراالمبرازول .والنورفلوكساسين السبروفلوكساسيني بعض العزالت المرضيه لمضادة تقليل مقاومإمكانية Esherichia.coli , ٍٍٍ ٍ Enterobacter, Pseudomonas aeruginosa تم اختيـار عـزالت ,Staphylococcus aureusاسين والنورفلوكساسين بعد ذلـك مقاومه لكل من مضادي السبروفلوكس لكل مـن مـضادي ) MIC)Minimal Inhibitory concentrationتم تحديد التركيز المثبط االدنى وقد ه المتسلسله في اكار مولر هنتون السبروفلوكساسين والنورفلوكساسين بطريقه التخافيف المتضاعف بكتريـا مـل لكـل مـن / وغراممايكر 64مل و/ مايكروغرام256 للسبروفلوكساسينMICبلغت قيم E.coli وEnterobacter ــوالي و ــى الت ــايكروغرام512 عل ــل / م ــل لك ــنم S.aureusم E.coliمل لكل مـن /مايكروغرام 512 للنورفلوكساسين MICبينما بلغت قيم . Ps.aeruginosaو لبكتريـا مـل / مايكروغرام256 وS.aureusلبكتريا مل /مايكروغرام 1024 و Ps.aeruginosaو Enterobacter , فحص إجراء تم آخرمن جانب MIC لالمبرازول لوحده ولم يظهر لـه اي تـاثير .على العزالت المرضيه السبروفلوكـساسين والنورفلوكـساسين باضـافه ي لمـضاد MIC بعدها تم اجراء فحـص رفلوكساسين مل لكل تركيز من تراكيزالسبروفلوكساسين والنو/ مايكروغرام 100االمبرازول وبتركيز 128و E.coli, Enterobacterملـل لعـزالت / مايكروغرام 32 للسبروفلوكساسين MICوقد بلغ MICوبلـغ Ps.aeruginosa وS.aureusلكـل مـن مـل /مـايكروغرام 64مل و/ممايكرو غرا ـ /مايكروغرام 64و E.coliلبكتريا مل /مايكرورام 128للنورفلوكساسين Enterobacterمـل للـ .Ps.aeruginosa و S.aureusمل لكل من /راممايكروغ 256و المقدمة ة واسعQuninolons ناتو يعد مضادي السبروفلوكساسين والنورفلوكساسين من مجموعه الكوينول . )Katzung ، 2004 (الطيف ولهما فعاليه ضد البكتيريا السالبه والموجبه لملون غرام تحوير الهدف الذي يعمل عليه المـضاد وهـو انظـيم طريق للمضادين عن المقاومة تطورت DNAgyrase الــذي يحــول الكروموســوم البكتيــري فــائق اللــف super coiled ) Alexandara العوامل التـي أهممن التي تعد وجود مضخات الدفق ل وكذلك. )2005 ، وآخرون فق على تقليل تركيز المـضاد تعمل مضخات الد إذ, لمضادات الحياة المتعددة المقاومة نشوء إلى أدت . ) Keith ،2005 (وقع الهدف الذي يعمل عليه المضادفي م ــــــــــــــ . 2010 / 5 / 9تاريخ استالم البحث . 2010 / 9 / 21 ريخ قبول النشر تا 38 عبد الرزاق 2010، 43 - 38 ) : 2 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، تتـوزع مـابين MATE,ABC,SMR,RND وهـي عده عوائل إلى تقسم مضخات الدفق -Mexcp مـضخه دفـق Ps.aeruginosaتوجد في بكتريـا .لملون غرام البكتريا السالبه والموجبه oprj,Mexef- oprn,Mexab,oprm,Mexjk-oprm,Mexxy-opmy وهـــي مـــن عائلـــه RND المسؤوله عن مقاومه البكتريا لمضادات االمينوكاليكوسـايدات والكوينولينـات ) Omeregia ) .2007 ، وآخرون المسؤوله عـن مقاومـه البكتريـا AcrAb-tolc توجد مضخات دفقE.coli وفي بكتريا فتوجد مضخات دفق S.aureus لبكتريابالنسبة أما. ) Kerny ، 2001و Bottner(ونات للكوينول NOrA-Mep-AMDR فلوكـساسين التي ساهمت في نشوء المقاومـه المتعـدده لمـضادي السبرو مضخات دفق Enterobacterوتوجد في بكتريا ) 2008 ، آخرون و Aureli ( والنورفلوكساسين AcrAB-Tolc ,MexAB-opr Murielmasi) 2005 ، آخرونو. ( يعد االمبرازول كعقار يستخدم لتخفيض حموضه المعـده ويـستخدم لعـالج قرحـه المعـده والمرىويساعد في سرعه التئام القرح ويساهم االمبرازول في تثبيط مضخات الدفق المـسؤوله عـن ) .Paul-Magnusc ،2001 (زياده مقاومه البكتريا للمضادات يهدف البحث الى معرفه تاثير االمبـرازول كمثـبط لمـضخات دفـق السبروفلوكـساسين والنورفلوكساسين كمحاوله لتقليل مقاومه بعـض البكتريـا المرضـيه لمـضاد السبروفلوكـساسين .والنورفلوكساسين المواد وطرائق البحث عزلـت مـن لألطفاللبلدي من مستشفى ابن ا Ps.aeruginosa و S.aureusالعزالت البكتيريـة الفحوصات البايوكيميائيه واستخدام إلى وتم تشخيصها استنادا لألطفالحاالت التهاب المجاري البوليه ، وآخـرون Greenwood(من قبـل ورد وحسب ما APISTAPH وAPI20Eشخيص تعده ال 2002( . . السبروفلوكساسين والنورفلوكساسيني لمضادالحساسية فحص -2 السبروفلوكساسين والنورفلوكـساسين يالت البكتيريه قيد الدراسه لمضاد تم اختبار حساسيه العز على وسط اكار مولر هنتون الصلب وقد قورنت مناطق األقراصبطريقه ) mg 5(باستعمال اقراص National Committee for Clinical(2002)التثبيط مع االقطـار القياسـيه التـي وردت فـي Laboratory Stander. . للسبروفلوكساسين والنورفلوكساسين االدنىتحديد التركيز المثبط-3 تم تحديد التركيز المثبط االدنى للسبروفلوكـساسين والنورفلوكـساسين بطريقـه التخـافيف .المتضاعفه المتسلسله على وسط اكار مولر هنتون تحديد التركيز المثبط االدنى لالمبرازول-4 تم تحديد التركيز المثبط االدنى لالمبرازول بطريقه التخافيف المتضاعفه المتسلـسله فـي اكـار .مولرهنتون . السبروفلوكساسين والنورفلوكساسيني لمضادMIC االمبرازول في تقليل تأثير دراسة -5 ـ / مايكروغرام 100 تم خلط االمبرازول وبتركيز ضادي مل مع التراكيزالمختلفـه لكـل مـن م .للمضادين بوجود االمبرازولMICالسبروفلوكساسين والنورفلوكساسين لتحديد النتائج والمناقشه هذه الفعاليـه ولينات فان البحث عن مركبات تعيدنطرا للفعاليه التي تتصف بها مضادات الكوين ـ ه ضـد البكتريـا في العزالت البكتيريه المقاومه لهذه المضادات يعد امرا ضروريا لما لها من فعالي ـ السالبه والموجبه لملون غرام ولها القابليه الى الوصول الى الجسم وبتراكيز عالجيه فعاله و ستخدم ت 39 عبد الرزاق 2010، 43 - 38 ) : 2 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، في عالج اخماج المسالك البوليه والتنفسيه والتناسليه والتهاب الجيوب االنفيه والتهاب االذن الوسـطى وآخرون Anandkumar(في تليف الكبد به المتسببه ويعد النورفلوكساسين فعال ضد البكتريا السال ،2003. ( في هذه الدراسه تم اختيار امكانيه تقليل مقاومه العزالت البكتيريه لمضادي السبروفلوكساسين E.coliتـم الحـصول علـى عـزالت تعـود لبكتريـا . والنورفلوكساسين باستعمال االمبـرازول قاومه لهذين المضادين وقد اختيرت مقاومتهـا م Ps.aeruginosaو S.aureus و Enterobacterو ملم لكل مـن 14باستعمال طريقه االقراص وقد بلغت اقطار منطقه التثبيط لمضاد السبروفلوكساسين E.coli وEnterobacterملم لكل من 13 وS.aureus وPs.aeruginosa بينما بلغت اقطارمنطقـه لكـل مـن ملـم 10 وEnterobacterو coli E لبكتريـا ملـم 11النورفلوكساسين التثبيط لمضاد S.aureus وPs.aeruginosa. E.coliتحديـد التركيـز المثـبط االدنـى للسبروفلوكـساسين لعـزالت نتائج اختبار أظهرت ــايكروغرام MIC 256 ان Ps.aeruginosaو S.aureus وEnterobacterو ــل و/ م 64م S.aureusمـل لكـل مـن /مايكروغرام 512 وEnterobacter وE.coliمل لعزالت /مايكروغرام 512 بينما سجلت قيم التراكيز المثبطـه الـدنيا لمـضاد النورفلوكـساسين . Ps.aeruginosaو لبكتريـا مل /مايكروغرام 256 على التوالي وPs.aureginosaو E.coliمل لكل من /مايكروغرام Enterobacterمل للـ/مايكروغرام 1024 وS.aureus. تم دراسه تاثير االمبرازول لوحده على العزالت البكتيريه قيد الدراسه وقداظهرت النتائج بعد ذلك عدم وجود تاثير لالمبرازول على العزالت البكتيريه مل من االمبرازول لخلطه مع مـضاد السبروفلوكـساسين /مايكروغرام 100 تم اختيار تركيز ملـم 22ملـم و 20اذ اصـبحت البكتيريـه دياد مناطق التثبيط للعزالت والنورفلوكساسين اذ لوحظ از لمضاد بالنسبة Ps.aeruginosaو S.aureus و Enterobacterو E.coli ملم لكل من 18ملم و 19و S.aureusو Enterobacterو coli E.ملم لكل من 14ملم و 15ملم و 17ملم و 18السبروفلوكساسين و التثبيطـي التـأثير لمضاد النورفلوكساسين مما يـدل علـى ةبالنسب على التوالي Ps.aeruginosaو .لالمبرازول لمضخات دفق السبروفلوكساسين والنورفلوكساسين في البكتيريا مل /مايكروغرام32 اصبح للسبروفلوكساسين MICإن األدنى نتائج اختبار التركيز المثبط أظهرت ـ مل /مايكروغرام128 و Enterobacter و E.coliلكل من مـل /مـايكروغرام 64و S.aureusللـ كـان إذ. ) 2007 ( ،وآخـرون Celline إليـه أشاريتفق مع ما وهذا PS.aeruginosaللـ MIC مل لعزالت /مايكروغرام128 للسبروفلوكساسين لوحدهS.aureus مـل /مايكروغرام16 أصبح لمـضاد MIC أصـبح بينما .بعد خلطه مع االمبرازول وهي مقاربه لما توصلنا اليه في هذه الدراسه مـل /مـايكروغرام 64 و Ps.aeruginosaو E.coli مل لكل مـن /مايكروغرام128النورفلوكساسين )1(شكل ) 1(جدول . S.aureusمل للـ/مايكروغرام256 وEnterobacterللـ مقارنه بعـد خلطهمـا مـع يبين التركيز المثبط االدنى للسبروفلوكساسين والنورفلوكساسين لوحدهما .مبرازول اال 40 عبد الرزاق 2010، 43 - 38 ) : 2 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، وحدهما وبعد لمضادي السبروفلوكساسين والنورفلوكساسين لاألدنى التركيز المثبط .1 جدول .خلطهما مع االمبرازول ت البكتيريةالعزالت MIC للسبروفلوآساسين لوحده (µ g/ml) MIC للسبروفلوآساسين بعد خلطه مع gL/ mlµمبرازولاال MIC للنورفلوآساسين لوحده µ( g/ml) MIC للنورفلوآساسين بعد خلطه مع االمبرازول gml)µ( 1 E.coli 256 32 512 128 2 Enterobacter 64 32 256 64 3 S.aureus 512 128 1024 256 4 Ps.aeruginosa 512 64 512 128 0 128 256 384 512 640 768 896 1024 M IC ( µ g /m l) E. co li En te ro ba ct er S. au re us Ps .a er ug ino sa العزالت البكتيرية ciprofloxacin Ciprofloxacin + ompe razole norfloxacin Norfloxacin + ompe razole لمضادي السبروفلوكساسين والنورفلوكساسين لوحدهما وبعد األدنىالتركيز المثبط .1شكل .خلطهما مع االمبرازول 41 عبد الرزاق 2010، 43 - 38 ) : 2 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، المصادر Alexandara Aurby,Xiuo-Supan,L.Mark fisher Vincent Jarlier and E.cambau. 2005. Mycobacterium tuberculosis DNAgyras interaction with Qunolones and correlation with Antimycobacterial drug activity. Antimicrobial Agent and Chemotherapy,VOL 48,no.4, P:1281- 1288. Anandkumar ,H. Dayanand kumar, H., Dayanand, Vinodk umar, and C.S.akd Ikapur.2003. Invitro activity of norfloxacine agent uropathogeneses and drug. efficacy in simulated bladder model under diabetic condition. Medical Microbiology.21(1).P:37-42. Aurelie A.Huet, Josel ,Raygada, K. Rutta, S. Seo and G. Kaatz. 2008. Multidrug efflux pump overxpression in x after single and multiple in vitro exposures to biocides and dyes. Microbiology(154).3144- 3153 Bottner ,J. and S. Kernw. 2001 .An substrate and inhibition by efflux pump . Interscence on antimicrobial agent and chemotherapy Chicago , 41st . Celline V. , J. Gulliou,Corinnearpin,Isabelle forfar-Bares Boubakar B.Ba,Jean Grellet,Stephan morean,Danieal – Herr caignard,Christian Jarry, and Clandin Quenth. 2007 .Synthesis of Omeprazole Analogues and evaluation of these as potential inhibitor of multidrug efflux pump NOrA of Staphylococcus aureus antimicrobial agent Chemother ,51(3),P:831-838. Greenwood, D.J. Slack, R.C. and J.F. Peuthere. 2002. Medicals to microbiology 16th ED.Churchill livingen . Katzung, B.G. 2004. Chemotherapeutic drug basic and clinical pharmacology .gth ed : 733-18. Keith P. 2005. Efflux –mediated antimicrobial resistance. Journal of Antimicrobial Chemotherapy VOL56,N.1,P:20-51 Murielmasi, J. ,G. ,Villard and E. Pradel. 2005. The eeFABC multidrug efflux pump operon is repressed by H-NS in Enterobacter aerogenes. Journal of Bacteriology .VOL.187, NO.11, P:3894-3897. National Committee for Clinical Laboratory Stander. 2002 . The performance standard from antimicrobial susceptibility testing methods ( 7th ed) VOL.22(1),USA. Omeregia, A. , D.J.V, D. , Jo, Ibeh, I.N. and H.O. Ogefer. 2007.Prevalance of multidrug efflux pump reguring ciprofloxacine,ofloxacin and pefloxacin as substrates, among clinical isolates of Ps.aeruginosa . Malaysian Journal of Microbiology.VOL 3(20),pp:37-40 . Paul-Magnusc, Rekers Bricks, Klotzu, and Mf. Fromm. 2001 . Interaction of omeprazole, lansoprazole and pantaprazole with P-glycoprotein naunyn Schmiedebers arch pharmacol. : 364 (6) P:551-7 . 42 عبد الرزاق 2010، 43 - 38 ) : 2 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، STUDY THE INHIBITORY EFFECT OF OMPERAZOLE ON EFFLUX PUMPS FOR CIPROFLOXACINE AND NORFLOXACINE ON SOME BACTERIAL ISOLATE FROM PATIENT Raghad Abd-Alatif Dept. of Biology - College of Science- Al-Mustansiria University. ABSTRACT The inhibitory effect of omperazole on drug efflux pumps for decrease of antibiotic resistance in some isolates included(E.coli, Enterobacter, Staphylococcus aureus., Pseudomonas aeruginosa) to ciprofloxacin and norfloxacne.The minimal inhibitory concentration(MIC) of ciprofloxacin and norfloxacin were determined by using tow fold dilution method on muller hinton agar. The MIC of ciprofloxacine was 256µg/ml,64µg/ml, In E.coli and Enterobacter respectively and 512µg/ml in S.aureus and Ps. aeruginosa. the MIC values of norfloxacin was 512µg/ml in E.coli and Ps.aeruiginosa and 1024µg/ml in S. aureus and 256µg/ml in Enterobacter . On the other hand the MIC of omperazole alone was tested there was no effect on pathogenic bacteria. The MIC of ciprofloxacin and norfloxacion were determined after added of 100mg/ml of omperazol on each of concentration .the MIC of ciprofloxacin became 32µg/ml in E.coli and Enterobacter and 128µg/ml,64µg/ml for S.aureus and Ps.aeruginosa. while the MIC of norfloxacin after added omperazole was 128µg/ml to E.coli , 64µg/ml to Enterobacter and 256µg/ml for S.aureus and Ps.aeruginosa 43