دراسة نسيجية مرضية لمبيد الميثوميل على غلاصم وكبد اسماك ألخشني Liza abu (Heckel,1843) النصير و عبد الصمد 2010 ، 53 - 44 ) : 1 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، Liza abuغالصم وكبد اسماك ألخشني في نسيجية ال المرضيةالتأثيرات (Heckel,1843)المعرضة لتراكيز تحت قاتلة من مبيد الميثوميل. ** سعد محمد صالح عبد الصمد * ناصر بدر النصيرأزل .لبصرة جامعة ا/ كلية الطب البيطري/ والتشريحاألنسجةفرع * . جامعة البصرة/ كلية التربية/قسم علوم الحياة ** الخالصة 96لمـدة (1ppm,0.5ppm)مبيد الميثوميل من قاتلين تحت عرضت اسماك الخشني لتركيزين المعاملة بهذا المبيد وقد األسماك وكبد لغالصم النسيجية حيث درست خاللها التغيرات المرضية ساعة نـزف دمـوي وانفصال النسيج ألطالئـي و بالتنكسرات لكال التركيزين في الغالصم تمثلت هذه التغي تغيرات الكبد أما الشكل الهروي اندماج الصفائح الثانوية مع بعضها و ظهور حالة و نخر في الخاليا و ظهور مناطق نزفية ونخر حويصلي , هناك انتفاخ في الخاليا الكبدية وفقدانها لشكلها الطبيعي إن فظهر .ونخر النواة المقدمة النباتات والتي آفات الحد من أوة ائية التي تستعمل لمنع أو السيطر تعتبر المبيدات من المواد الكيمي وآخـرون Pandey وأشـار . )2001 ، وآخـرون ( Sharma في النهاية اإلنسانيتضرر منها النظام البيئـي المـائي إلى تدخل فإنهادفة المسته اآلفات قتلها إلى باإلضافة المبيدات إن إلى (1999) aquatic ecosystemقدم الميثوميـل . المائية األحياء كافة وتستهدف Methomyle للعـالم سـنة يصنف هـذا المبيـد ).Laws ,1990 و(Hayesواسع االستعمال Insecticide كمبيد حشري 1966 والتــي تعمل على تــثبيــط Carbamates تحت صنف المبيدات الكيميائية المسماة كارباميت -Mc للوظيــفة في الجهـاز العـصبي ي األســاساإلنزيم ويعتبر Cholinesterase إنزيم Ewen ) و Stephenson ،1979 ؛ Worthing ، 1983.( والكائنات البحرية فـان مقـدار التركيـز باألسماك المبيدات فتكا أكثر كذلك يعتبر الميثوميل من لتر ولسمكة / ملغم3.4هو Rainbow trout ساعة لسمكة96في LC50يت لنصف الحيوانات المم Bluegill sunfish لتر/مــلغم0.8هو) Hartleyو Kidd، 1983( األسـماك والن غالصمgills التأثيراتتبقى عرضة بصورة مباشرة للماء فهي تتأثر بمستوى عالي بالمبيدات و الملوثات وعليه فان المائي في تلـك ث معيار لتحديد درجة التلو أوة النسيجية التي تظهر بالغالصم تعتبر كدليل المرضي أنـسجة كـذلك فـان )Perry ،1976 وHughes ؛2004 ، وآخـرون Dhanapakiam (المنطقة والمواد toxic دا للسمومج الحساسةءاألعضايعد من liverالكبدف األخرى تتأثر هي األخرى األسماك تـأثير تحديدإلى الحالية الدراسةوعليه تهدف .metabolic substances (1970,Konar)ةااليضي Lizaعلى غالصم وكبد اسـماك الخـشني (ppm) جزء من المليون1 و 0.5مبيد الميثوميل بتركيز abu. ـــــــــــــــ .2010 / 3 / 22تاريخ استالم البحث . 2010 / 5/ 2 تاريخ قبول النشر 44 النصير و عبد الصمد 2010 ، 53 - 44 ) : 1 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، بحثالمواد وطرائق ال سم 9-12 بأطوالجامعة البصرة /األسماك من محطة استزراع Liza abu جمعت عينات اسماك منزوع حنفية مليئة بماء لتر 6 سعة مائية بأحواض نقلت للمختبر حيث وضعت غم7-11.75 أوزان و ـ أوكـسجين وتركيـز 0.3± 7.8م ودالة حموضة 2º±20 بدرجة حرارة الكلور 0.4 ±8.1ذاب م أسـبوع لمدة األسماك تركت تجارية ، بعليقهوغذيت ، الفضالت إلزالةبدل الماء كل يومين لتر، \ملغم أيام كذلك خالل ساعة من بدء التجربة و 24 قبل األسماك الغذاء عن قطع acclimation األقلمة ألجل أجريـت راكيز مختلفة من المادة ثم لت األسماك معرفة التراكيز القاتلة للمبيد تم تعريض ألجل.التجربة ثالث معامالت هي معاملة السيطرة ومعاملتين بواقع معاملة لكل من إلى األسماكقسمت التجربة حيث وبعـد سمكات أربعوتكرارين لكل معاملة و ضم كل تكرار 1ppm و0.5التركيزين تحت القاتلين غسلت بمحلول واألكبادالغالصم عزل ثم شرحت لغرضاألسماكساعة من التعريض قتلت 96 فترة سـحب المـاء مـررت النمـاذج فـي عمليـات ساعة ثـم 24ن لمدة يفسلجي ثم حفظت بمحلول بو dehydration والترويق تراكيز تصاعدية من الكحول clearing بالزايلين والطمر embedding (Lunaينـــايوس –سلين مايكرون وصبغت بالهيماتوك5-7 بسمك العيناتقطعت,بشمع البارافين فحصت الشرائح باستعمال مجهر ضوئي وصورت بواسطة كـاميرا ) Humason ،1972؛1968، .من حاصل ضرب قوتي العدستين العينية والشيئية رقمية واحتسبت قوة التكبير والمناقشة النتائج الغالصم وصفائح ثانويـة primary filaments أولي غالصم مجموعة السيطرة خيط غلصمي أظهرت secondary lamellae) مكسوة بنسيج طالئي يتميز بطبقتـين مـن األوليةكون الصفيحة ت )1شكل وبالتحديد عند قاعدة الصفائح الثانوية تتواجد خاليا الكلوريـد األولعلى طول الخيط ,الخاليا الطالئية chloride cellsالخاليا الحرشفية المدعمة بما يعرف من طبقة مفردة منفتتألف الصفائح الثانوية أما لوحظت بعض التغيرات في نـسيج .blood sinuses وجيوب دمويةpillar cellsالخاليا الداعمة في الـصفائح atrophy لوحظ ضمور األول ففي التركيز 1ppm,0.5ppmالغالصم المعاملة بتركيزي بين الصفائح وبعـض هـذه الـصفائح كريات دم حمراء منتشرة لوحظ نزف ل ,الثانوية وعدم انتظامها ة كبيرة ومنتفخة بسبب يالخاليا الحرشف , المواد المخاطية إفراز degenerationمتكسر بسبب التنكس وجـود الخاليـا االلتهابيـة بكثـرة ) .2شـكل ( hydropic degeneration التنكس أالستـسقائي انفـصال النـسيج ) 3شـكل (لبعدد اق lymphocyte و monocyte بعدد كبير و neutrophilمثل فوجـد زيـادة فـي النـزف )1ppm( فـي التركيـز العـالي أمـا الطالئي عن الغشاء القاعـدي ظهور , اختفاء بعض الصفائح الثانوية أو erosion تآكل ما بين الصفائح كذلك hemorrhageالدموي حام شامل لها والت ) .4شكل ( بعض الصفائحأطراف في clubbing formالشكل الهروي ما يسمى . )5شكل (proliferation of cells الخاليا تكاثربسبب في عملية التبادل الغـازي و عمليـة التنظـيم ألهميتهاتعتبر الغالصم جزء حيوي للسمكة المواد النيتروجينية لذا فان وجود وإفرازوالتوازن الحامضي القاعدي osmoregulation االزموزي لوحظ ظهور بعـض ) Fanta، 2003و Machado (اء تؤثر على الغالصمأي مادة كيميائية في الم النسيجية المرضية على الغالصم في اسماك الخشني المعرضة للمبيـد كظهـور الـصفائح التأثيرات نتيجـة هي هذه التغيرات إن Mallatt (1985) أشار,انفصال النسيج الطالئي وبشكل غير منتظم المواد المخاطية وإفراز necrosisكذلك لوحظ ظهور التنخر .ة قي الماء لوجود بعض المواد الكيميائي مــلئ الفـراغات بيـــن الـصفائح إلى المؤدي االلتهابية الخاليا ارتشاح و واحتقان دموي حاد و Paul ؛ Pandey،1994 ؛ 1979 ،وآخـرون (Dalelaهذه النتائج مشابهة لما ذكره كل مـن و 45 النصير و عبد الصمد 2010 ، 53 - 44 ) : 1 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، Banerjee، 1996.( أشار Kumaraguru وآخرون )فرط التنـسج إن إلى) 1982 hyperplasia لـوحظ فـي .يحدث في بعض الحاالت كنتيجة لتكيف السمكة وحماية النسيج الداخلي من أي ضـرر ميل حصول حاالت نزف دموي يكون حادا جدا في التركيـز الثـاني وهـذه والغالصم المعاملة بالميث في اسماك الكارب الشائع المعرضـة لمبيـد 1996 خرونوآ Neskovic مشابهة لما ذكره ةالنتيج Glyphosate المساحة الـسطحية التقليل من إلىيؤدي لصفائح مع بعضها الكامل ل ندماجاال إنوذكر Ortiz؛Fanta، 2003و Machado () للتبادل الغازي وجعل مـن الـصعوبة حـدوث ذلـك الكلية شيوع فـي اسـماك أكثرالنسيج الطالئي هو انفصال إن) Mallatt1985 ( وأشار )2003،وآخرون الـشكل وجود مـا يـسمى ب األسماكفي غالصم 1ppmاظهر تركيز .الماء العذبه منه في المالحة Nile في اسـماك التأثير وجود نفس إلى) 2002 (وآخرون Jiraungkoorskul أشار ولقد الهروي tilapia Oreochromis niloticus لمبيد العشبي المعرضة لتركيز عالي من اRoundup. الكبد مرتبة بـشكل شـعاعي hepatocytes يبدو الكبد الطبيعي مجهريا متكون من خاليا كبدية sinuses ما بين هذه الخاليا الكبدية تتواجـد الجيبانيـات central veinمنتظم حول الوريد المركزي 0.5ppm للمبيد ففـي تركيـز لوحظ بعض التغيرات المرضية النسيجية للنسيج المعرض )6شكل ( vacoulation بـسبب وجـود تـنكس حويـصلي swelling cellsوجدت الخاليا الكبدية منتفخة necrosis نزف دموي بسيط توسع قليل الوريد المركزي واحتقـان ,وفاقدة لشكلها المضلع المعروف وأيـضا بالتركيز الثاني واحتقان عالي hyperemiaيزداد ورود الدم بكثرة ) .7 و 8شكل (الجيبانيات حيـث karyolysis necrosisظهور المرحلة الثالثة لنخر النـواة ,زيادة في توسع الوريد المركزي المـسؤول عـن األولييعتبر الكبد العضو ). 9شكل (تظهر الخاليا كمناطق باهتة اللون فاقدة النواة حيـث يعاـــني , المتجمعة داخـله للكثير من المبيدات الحشرية Detoxification السمومإزالة ،هنالك مجموعـة مـن التغيـرات )1970 (وآخرون Metelev األضراربسببـــها الكثير مــن النسيجية التي تظهر في كبد اسماك الخشني المتعرضة للميثوميل منها انتفاخ الخاليا الكبدية وفقـدانها مـن أورد وتتشابه هذه التغيرات مع ما للشكل المضلع ووجود مناطق نزفية تزداد في التركيز الثاني Pandey ؛Shah، 1979 و Dubale؛ Konar)، 1970 المبيدات على الكبد لتأثيردراسات كثيرة كـدليل لعـدم يـأتي حصول انتفاخ الخاليا أن إلىGingerich (1982) أشار). 1997 ،وآخرون في الدراسـة . جهاز الدوران إلىالتوازن ما بين معدل تصنيع المواد في خاليا الكبد ومعدل تحررها الحالية ظهرت حاالت تنخر في الكبد وهذا كنتيجة العمل الواسع المطلوب مـن السمكة للتخـــلص . )Ufodika، 1991و Omoregie ( السموم إزالةمن المبيد الحشري خالل عملية 46 النصير و عبد الصمد 2010 ، 53 - 44 ) : 1 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 4 1 3 2 1 ppm 0.5 لتركيز المعرضةاألسماكفي في نسيج الغالصم طوليمقطع. 2شكل احتقان.2عدم انتظام الصفائح .1 تظهر خاللها ساعة96من مبيد الميثوميل لمدة ) H&E) 100Xنخر الخاليا.4فرط تنسج .3دموي من مبيد الميثوميل لمدة ppm 0.5 لتركيز المعرضةلألسماك في نسيج الغالصم طوليمقطع. 3 شكل 400X (H&E) )( الخاليا االلتهابيةارتشاح ساعة الجزء المؤشر يوضح 96 47 النصير و عبد الصمد 2010 ، 53 - 44 ) : 1 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 3 2 1 96 من مبيد الميثوميل لمدة 1ppm لتركيز المعرضةلألسماكفي نسيج الغالصم طولي مقطع . 4شكل (H&E) جاورةتفرط تنسج للصفائح الثانوية الم.3 الهرويشكل ال.2نزف دموي حاد .1 يبينساعة 100X 96ميل لمدة من مبيد الميثو1ppm لتركيز المعرضةلألسماك في نسيج الغالصم طولي مقطع. 5شكل )40X (H&E ) (المتجاورة بشكل كاملالثانوية الصفائح اندماجساعة يوضح 48 النصير و عبد الصمد 2010 ، 53 - 44 ) : 1 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 3 2 1 يد المركزي الور.1 يظهر مجموعة السيطرةألسماكفي نسيج الكبد عرضي مقطع . 6شكل )H&E) 100Xالجيبانيات . 3خاليا الكبد . 2 3 2 1 96 من مبيد الميثوميل لمدة 0.5ppm لتركيز المعرضةلألسماك في نسيج الكبد عرضيمقطع .7شكل )H&E) 100X احتقان الجيبانيات.3تنخر الخاليا .2 الكبديةتنكس الخاليا.1 يوضحساعة 49 النصير و عبد الصمد 2010 ، 53 - 44 ) : 1 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، 2 1 من مبيد الميثوميل لمدة 0.5ppm لتركيز المعرضةلألسماك في نسيج الكبد عرضي مقطع.8شكل )H&E) 100Xنزف دموي بسيط .2 الخاليا تضخم.1 ساعة 96 2 1 50 من مبيد الميثوميل ppm 1لتركيز معرضة اللألسماك في نسيج الكبد عرضيمقطع .9شكل )H&E) 100Xنزف دموي حاد .2 نواةنخر ال.1 يوضح ساعة96لمدة النصير و عبد الصمد 2010 ، 53 - 44 ) : 1 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، المصادر Dalela,R.C., M.C. Bhattanager, A.K. Tyagi and S.R.Verna. 1979. Histological damage of gills in Channa gachua after acute and subacute exposure to endosulphan and roger .Microscopia (wien)35:301-307. Dhanapakiam,P., V.K. Sampoomi, M. Kavitha, V.K. Ramasamy, A. Chandrakala and K.C. Aruna. 2004. Gill lesion in the major carp Labeo rohita exposed to lethal and sublethal concentration of tannery effluent .J.Environ.Biol., 25:333-336. Dubale, M.S. and P. Shah. 1979.Histopathological lesion induced by malathion in the liver of Channa punctatus ,Indian J. Exp.Biol. ,17:693-697. Gingerich,W.H. 1982. Hepatic toxicology of fish .in"Aquatic toxicology"LJ Weber Ed,Ravan press. Newyork pp.55- 105. Hartley,D.and H. Kidd eds. 1983.The agrochemicals handbook. Nottingham,England, Royal society of chemistry. Hayes, W.J. and E.R. Laws (ed). 1990.Handbook of pesticide toxicology.Vol.3 classes of pesticides. academic press,Inc,Ny. Hughes,G.M. and S.F. Perry 1976. Morphometric study of trout gill,alight microscopic method suitable for the evaluation of pollutant action .J.Exp.Biol.64:447-480. Humason,G.L. 1972. Animal tissue technique s.3ed.,W.H. Freeman and company ,Sanfrancisco,614 pp. Jiraungkoorskul,W., E.S. Upatham, M. Kruatrachu, S. Sahaphong, S. Vichasri- Grams and P. Pokethitiyook. 2002. Histophathological effects of Roundup aGlyphosate herbicide,on Nile tilapia Oreochromis niloticus .Science Asia ,28:121-127. Konar, S.K. 1970. Some effects of sublethal levels of heptachlor on roho Lobeo rabita .J.Inland fish.Soc.India 2: 51-54. Kumaraguru,A.K., F.W. Beamish and H.W. Ferguson. 1982. Direct and circulatory path of permethrin (NRDC-143) causing histopathological changes in the gill of rainbow trout Salmo gairdneri ,Richard son .J.fish Boil.,20:87-91. Luna,L.G.1968. Manual of histology staining methods of armed forces institute of pathology .3rd edition.McGraw -Hill book company. Machado,M.R. and E. Fanta. 2003.Effectsof the organophosphorous methyl parathion on the bronchial epithelium of a fresh water fish Metynnis roosevelti . Brazilian Archives of Biology &Technology 46(3):361-372. Mc-Ewen,F.L and G.R. Stephenson. 1979. The use & significance of pesticide in the environment.NY:Jhon & Sons.Inc. 51 النصير و عبد الصمد 2010 ، 53 - 44 ) : 1 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، Mallatt,J. 1985.Fish gill structure changes induced by toxicants &other irritants:astatistical review.Com.J.Fish.Aquat.Sci. , 42:630-648. Metelev,V.V, A.L. Konaev&N.G. Diasokhva. 1970. Water toxicology.Amernid publishing Co .Pvt.Ltd.NewDelhi. Neskovic,N.K., V. Poleksic, I. Elezovic, V. Karan, & M. Budimir. 1996.Biochemical &histopathological effects of Glyphosate on Carp Cyprinus carpio L., Bull.Environ. Contam.Toxicol.56:295-302. Omorogie,E. and E.B. Ufodike. 1991. Histophathological of Oreochromis niloticus N. exposed to actellic 25 EC. J.of Aquatic science ,6:13-17. Ortiz ,J.B., M.L. Gonzales de canales and C. Sarasqute. 2003. Histopathological changes induced by lindane in varios organs of fish.Sci.Mar.,67(1): 53-61. Pandey,A.C., A.K. Pandey and P. Das 1999. Fish &fisheries in relation to aquatic pollution in Das,P., S.R. Verma and A.K. Gupta (eds.).Environmental issues and resource ,Management Nature Conservators Muzaffaranager , pp:76-112. Pandey,A.K. 1994. Branchial &renal lesion of estuarine of mercuray .Proc.Nat.Acad.Sci.,India 64B:283-287. Pandey ,A.K., K.C. George and M.P. Mohamed. 1997. Branchial & hepatic lesion in an estuarine mullet Liza parsia induced by sublethal exposure to BHC.India J.Fish. 44: 279-286. Paul,V.I. and T.K. Banerjee. 1996. Ammonium sulphate induced stress related alternation in the opercular epidermis of the liver fish Heteropneustes fossilis .Curr.Sci.70:1025-1029. Sharma,R.R., A.K. Pandey and G.R. Shukla. 2001. Histophathological alternation in fish tissues induced by pesticides toxicology .Aquaculit. ,2(1):31-43. Worthing,C.R. (ed.). 1983. Pesticide the manual :Aworld compendium Croydon, England:the British Crap Protection Council . 52 النصير و عبد الصمد 2010 ، 53 - 44 ) : 1 ( 2مجلة ديالى للعلوم الزراعية ، HISTOPATHOLOGICAL CHANGES IN GILLS AND LIVER OF Liza abu (HECKEL,1843) EXPOSED TO SUBLETHAL CONCENTRATIONS OF METHOMYLE Azal Naser Bader Al-nusear* Saad Mohammmed Saleh Abdul-Samad ** *Anatomy &histology Dept./ Coll. of veterinary medicine /Univ. of Basrah. **Biology Dept./Coll.of Education/ Univ. of Basrah. ABSTRACT Liza abu fishes were exposed to two sublethal concentrations of methomyle pesticide(0.5&1ppm) for 96 hr., for study the histopathological changes in gills and liver in treated fishes with this insecticide . Histopathological examination for both concentrations in gills showed degeneration of cells, epithelial separation, hemorrhage, necrosis fusion of adjacent lamellae, clubbing cells ,while in liver the changes showed swelling in cells which lost its normal shape, hemorrhaged area, vaculation necrosis & finally karyolysis. 53