تحديد الظروف المثلى لانتاج L- arabinose isomerase من عزله محلية من بكتريا Bacillus stearothermophilus HB4 عجش 2012 ، 41 - 26 :( 1 ) 4ِغٍخ د٠بٌٝ ٌٍؼٍَٛ اٌضساػ١خ ، 26 يحهٍت يٍ بكخزٌبة يٍ عشل L- arabinose isomeraseححذٌذ انظزوف انًثهى الَخبج اَشٌى Bacillus stearothermophilus HB4 حًٍـذ عبـىد خبـز خبيعت بغذاد - كهٍت انشراعت - اإلحٍبئٍت وانخقبَبث األغذٌتقسى عهىو E-mail: dr_hameedm59@yahoo.com انًسخخهض Bacillus ِؾ١ٍخ ٔم١خ ِٓ ثىزش٠ب ح ػضي12 رُ اٌؾظٛي فٟ ٘زٖ اٌذساعخ ػٍٝ stearothermophilus ِٓاخؼؼذ . ِٓ ِظبدس ِخزٍفخ ِٓ اٌزشة اٌؼشال١خ ح ػضي40 ِٓ ث١ٓ اوضش L-arabinose isomerase٘زٖ اٌؼضالد اٌٝ اٌغشثٍخ اال١ٌٚخ ٚاٌضب٠ٛٔخ ِٓ ؽ١ش لذسرٙب ػٍٝ أزبط أض٠ُ اظٙشد االخزجبساد . ًِ / ٚؽذح 35 االغضس أزبعب ٚثفؼب١ٌخ أض١ّ٠خ ثٍغذ B4 فىبٔذ اٌؼضٌٗ Bacillus اٌجىزش٠ب إٌٝ ػبئذ٠زٙب B4اٌّظٙش٠خ ٚاٌّضسػ١خ ٚاٌفغٍغ١خ ٚاٌى١ّٛؽ٠ٛ١خ ٌٍؼضٌخ stearothermophilus ٚسِض ٌٙبHB4 . رُ رؾذ٠ذ اٌظشٚف اٌّضٍٝ الٔزبط أض٠ُ االساث١ٕٛص اٌّؾ١ٍخ اٌّزوٛسح ثطش٠مخ اٌّضاسع اٌّغّٛسح فزج١ٓ اْ افؼً رٍه اٌظشٚف ٟ٘ حا٠ض١ِٚش٠ض ِٓ اٌؼضي % 0.15وّظذس ٌٍىبسثْٛ ٚاالساث١ٕٛص ثزشو١ض % 1.5ثبعزخذاَ ٚعؾ ٠ؾزٛٞ ػٍٝ اٌى١ٍغشٚي ثزشو١ض ٍٍ ِٓ اٌىبص٠ٓ ٚخالطخ اٌخ١ّشح ٚخالطخ اٌٍؾُ اٌجمشٞ ثزشو١ض ٍٚ وّبدٖ ؽبصخ الٔزبط االٔض٠ُ ٚخ١ٍؾ ِزغب ػٍٝ اٌزٛاٌٟ ، % 0.02ٚ % 0.15وّظذسٌٍٕزشٚع١ٓ ٚوجش٠زبد اٌّغ١ٕغ١َٛ ٚإٌّغ١ٕض ثزشو١ض % 1 َْ 55 عبػخ ِٓ اٌؾؼٓ ػٍٝ دسعخ ؽشاسح 72 ثؼذ 7.5وّظذس ٌال٠ٛٔبد اٌّؼذ١ٔخ ٚثشلُ ١٘ذسٚع١ٕٟ . % 150 ٚثض٠بدح لذس٘ب ؽٛاٌٟ B4ًِ ٌٍؼضٌخ / ٚؽذح 55ٚرؾذ ٘زٖ اٌظشٚف ثٍغذ اٌفؼب١ٌخ االٔض١ّ٠خ . ِمبسٔخ ثٕفظ اٌؼضٌخ لجً رؾذ٠ذ اٌظشٚف اٌّضٍٝ الٔزبط االٔض٠ُ Bacillus stearothermophilus HB4 اساث١ٕٛص ا٠ض١ِٚش٠ض ، ثىزش٠ب أٔض٠ُ : انًفخبحٍت انكهًبث انًقذيت ِٓ االٔض٠ّبد اٌذاخً L - arabinose isomerase ( L-AI EC 5.3.1. 4 ) أٔض٠ُ٠ؼزجش اٌٝ (L – arabinose)خ٠ٍٛخ ٚ٘ٛ فٟ االٔظّخ اٌجب٠ٌٛٛع١خ ٠ؾفض اٌزفبػً اٌؼىغٟ ٌزؾ٠ًٛ االساث١ٕٛص أٚ Pentose phosphate path way ػّٓ ِغبس اٌفٛعفبد اٌخّبعٟ L-ribulose اٌشا٠جٌٛٛص ؛ 2008 ، ٚآخشْٚ Ponnandy ؛phosoho ketolase (Patrick ٚ Lee ، 1968اٌـ ِغبس Kim ، ْٚوّب اْ ٌالٔض٠ُ اٌمبث١ٍخ ػٍٝ رؾ٠ًٛ اٌىبٌىزٛص ( 2010 ٚآخش(D-galactos ) اٌٝ اٌزبوبرٛص (D- tagatose ) ٟخبسط اٌغغُ اٌؾ (invitro ) ٌزٌه ٠ؼزجش ٘زا االٔض٠ُ ِٓ االٔض٠ّبد اٌٛاػذح الٔزبط . Izumori ، (2002 )اٌغىش٠بد إٌبدسٖ ِضً عىشاٌزبوزٛص ٌٚىٓ ػذد ل١ًٍ ِٓ حرش١ش اٌّظبدس اٌٝ اِىب١ٔخ أزبط ٘زا االٔض٠ُ ِٓ ػذد ِٓ االؽ١بء اٌّغٙشٞ Jorgensen ؛ 2002 ٚآخشْٚ ، Kim ؛2000 ٚآخشْٚ ، Roh )٘زٖ اٌّظبدس رُ رٕم١خ االٔض٠ُ ف١ٙب . ( 2007 ٚآخشْٚ،Zhang ؛ 2005 ٚآخشْٚ ، Lee؛ 2004ٚآخشْٚ ، ٠ٚز١ّض اٌزبوبرٛص. ٠ؼّذ اٌغىش اٌى١زٟٛٔ اٌزبوبرٛص ٘ٛاال٠ضِٚش ٌٍغىش االٌذ١ٙ٠ذٞ اٌىبٌىزٛص (Zehner ، 1988)ِٓ ؽالٚح عىش اٌغىشٚص ٠ٚؼطٟ ٔفظ اٌّزاق % 92ثؾالٚرٗ اٌؼب١ٌخ اٌزٟ رؼبدي . Livesey ٚ Brown ،(1996 )وّب ٠ؼزجش ِٓ اٌغىش٠بد اٌخب١ٌخ ِٓ اٌغؼشاد اٌؾشاس٠خ ٠ّٚىٓ اعزخذاِٗ فٟ اٌظٕبػبد اٌغزائ١خ ار ٠ظٕف ِٓ اٌّٛاد اٌّّىٓ اعزخذاِٙب ثبِبْ Generally recognized as safe ( GRAS ) ٠ٚز١ّض اٌزبوبرٛص ثبٔٗ ال ٠شفغ ٔغجخ اٌىٍٛوٛص ، ثبٌذَ الٔٗ ٠زب٠غ ثطش٠مخ ِخزٍفخ ػٕذ رب٠غ اٌغىشٚص ١ٌٚظ ٌٗ ربص١ش ػٍٝ ِشػٝ اٌغىشٞ اٞ ال٠ٛعذ ٌٗ ـــــــــــــــ . 2011 / 10 / 13تاريخ استالم البحث . 2011 / 1 / 3تاريخ قبول النشر mailto:dr_hameedm59@yahoo.com عجش 2012 ، 41 - 26 :( 1 ) 4ِغٍخ د٠بٌٝ ٌٍؼٍَٛ اٌضساػ١خ ، 27 ثؼىظ ثم١خ Glycemic index اٚ سفغ ِؼبًِ اٌىٍٛوٛص Axative effectثزأص١ش٠غّٝ ِب ال ٠غجت رغٛط وّب اْ اٌزبوبرٛص . polyols (Marzur، (1989اٌغىش٠بد االٌذ٠ٙب٠ذ٠خ ِٓ ٔٛع فؼال ػٓ اْ اٌـزبوبرٛص ٠ٕظُ ( 1995 ٚآخشْٚ ، Zehner ؛ Lu ٚLevin ، 2002 )االعٕبْ ٚثزٌه ٠ّىٓ اعزخذاِٗ فٟ Equilibrium relative humidity ( ERH ) رٛاصْ اٌشؽ٠ٛخ إٌغج١خ . اٌشؽٛثخ ٌالغز٠خ رٕظ١ُ وً ٘زٖ اٌظفبد شغؼذ اٌّٙز١ّٓ فٟ اٌظٕبػبد اٌغزائ١خ ػٍٝ اعزخذاَ اٌزبوبرٛص وجذ٠ً ػٓ ( Marzur ،1989 )اٌغىشٚص ٕ٘بن ػذح ؽشق و١ّ١بئ١خ اعزخذِذ ٌزظ١ٕغ اٌزبوبرٛص ، رؼّٕذ أزبعٗ ِٓ رؾًٍ اٌالوزٛص الٔزبط وؼبًِ Ca(OH)2اٌىبٌىزٛص اٚال ، صُ ٠زُ رؾ٠ًٛ االخ١ش اٌٝ اٌزبوبرٛص ٚثّغبػذح ١٘ذسٚوغ١ذ اٌىبٌغ١َٛ ، ٌٚىٓ ٠شافك اٌطشائك اٌى١ّ١ب٠ٚخ ثؼغ اٌّغبٚئ ثغجت رىْٛ ( 1992 ٚآخشْٚ ، Beadle )ِغبػذ ٌزٌه ارغٙذ .ثؼغ اٌّؼمذاد اٌى١ّ١ب٠ٚخ اٌزٟ رزطٍت خطٛاد رٕم١خ أػبف١خ ٌٍزخٍض ِٓ إٌٛارظ اٌؼشػ١خ . عٙٛد اٌجبؽض١ٓ ال٠غبد أض٠ّبد خبطخ ِٓ ِظبدس ١ِىشٚث١خ الٔزبط اٌزبوبرٛص اٌٝ أزبط اٌزبوبرٛص ثٛاعطخ Izumori ٚ Tsuzak ( 1988 ) اشبس ِٚٓ ث١ٓ رٍه اٌذساعبد اٚ ِٓ Mycobactrium smegmatis اٌزٞ ثٕزظ ِٓ ثىزش٠ب dehydrogenase galactitol أض٠ُ أٚ ِٓ ثىزش٠ب ( 1994 ٚآخشْٚ ، Muniruzzaman ) – Enterobacter agglomeransثىزش٠ب Arthrobacter globiformis ( Izumori ، ْٚ1984 ٚآخش ) ًار ٠مَٛ ٘زا االٔض٠ُ ٠زؾ٠ٛ وّب . اٌٝ اٌزبوبرٛص ٠ٚؼزجش أزبط االخ١ش ِٓ ٘زٖ اٌّظبدس ِىٍف ٔغج١ب ( galactitol )اٌىبٌىز١زٛي اللذ اٌؼ١ٍّبد اٌجب٠ٌٛٛع١خ الٔزبط اٌزبوبرٛص ثبعزخذاَ أض٠ُ االساث١ٕٛص ا٠ض١ِش٠ض فٟ اٌغٕٛاد االخ١شح ا٘زّبِب وج١شا ٚرٌه ٌىضشح اٌّظبدس ا١ٌّىشٚث١خ إٌّزغخ ٌٙزا االٔض٠ُ ، فؼال ػٓ اعشاء اٌؼذ٠ذ ِٓ ػ١ٍّبد اٌىٍٛٔخ اٌزٟ اعش٠ذ ٌٙزا االٔض٠ُ ثٕمً اٌغ١ٓ اٌزٞ ٠شفش الٔزبعخ ِٓ اٌؼذ٠ذ ِٓ أٛاع اٌجىزش٠ب ٚرز١ّض اٌطشائك االٔض١ّ٠خ Escherichia coli (Patrick ٚLee ، 1968 )إٌّزغخ ٌٗ اٌٝ ثىزش٠ـــب . ٘ب ٔٛارظ أوضش ٔمبٚح ِمبسٔخ ثبٌطشائك اٌى١ّ١ب٠ٚخ ئثبػطب ٚدساعخ رٙذف اٌذساعخ اٌؾب١ٌخ اٌؾظٛي ػٍٝ ػضٌخ ِؾ١ٍخ لبدسح ػٍٝ أزبط أض٠ُ أساث١ٕٛص ا٠ض١ِٚش٠ض اٌظشٚف اٌّضٍٝ الٔزبعخ ، خظٛطب رٍه اٌّزؼٍمخ ثبٌّظبدس اٌىبسث١ٔٛخ ٚإٌزشٚع١ٕ١خ ٚاال٠ٛٔبد اٌّؼذ١ٔخ . ِٚذح اٌزخ١ّش pH ) )ٚظشٚف دسعخ ؽشاسح اٌؾؼٓ ٚاٌشلُ ا١ٌٙذسٚع١ٕٟ انًىاد وطزائق انبحث يظبدر انعشل – أوال ػ١ٕخ ِٓ اٌزشثخ رُ اٌؾظٛي ػ١ٍٙب ِٓ ؽمٛي اٌّضاسع اٌّخزٍفخ فٟ و١ٍخ 40 اشزٍّذ ِظبدس اٌؼضي ػٍٝ . عبِؼخ ثغذاد / اٌضساػخ : -شٍّذ االٚعبؽ اٌضسػ١خ ػٍٝ : - انشرعٍتاألوسبط- ثبٍَب انىسظ االسبص انظهب -1 ، خالطخ ٌؾُ ( غُ .50) ، اٌزشثزْٛ ( غُ 0.15) ، االساث١ٕٛص ( غُ 1 )اٌى١ٍغشٚي : ٠ٚزبٌف ِٓ ار٠جذ اٌّٛاد فٟ و١ّخ ِٓ اٌّبء اٌّمطش ٚػذي اٌشلُ ا١ٌٙذسٚع١ٕٟ .( غُ 1.5)، ا٢وش ( غُ .30 )اٌجمش َْ ِذح 121 ًِ ثبٌّبء اٌّمطش ، ٚػمُ ثبٌّؤطذح ػٍٝ دسعخ 100 ٚاوًّ اٌؾغُ اٌٝ 7ٌٍٛعؾ اٌٝ أظ/ ثبٚٔذ 15 دل١مخ ٚثؼغؾ ثخبسٞ ٠ؼبدي 15 2 ثبعزضزبء اٌى١ٍغشٚي ٚاالساث١ٕٛص ار ػمّب ػٍٝ أفشاد . ٚ Givry)صُ اػ١فب اٌٝ ِىٛٔبد اٌٛعؾ ثؼذ اٌزؼم١ُ ٚاعزؼًّ ٘ز ا اٌٛعؾ فٟ ِشؽٍخ اٌغشثٍخ اال١ٌٚخ Duchiron ، 2008 ) . : انىسظ االسبص انسبئم - 2 ِغ اعشاء ثؼغ اٌزؾ٠ٛشاد ٚ ( 2001 ) ٚآخشْٚ Deok-Kunؽؼش ٘زا اٌٛعؾ ٚفك ِبروشٖ ، خالطخ ٌؾُ (غُ 0.5)،خالطخ اٌخ١ّشح ( غُ 0.15 )، االساث١ٕٛص (اغُ )٠زىْٛ ِٓ اٌى١ٍغشٚي ، فٛعفبد اٌجٛربع١َٛ ( غُ 1.5فٛعفبد اٌجٛربع١َٛ اٌمبػذ٠خ ( غُ 1)،اٌىبص٠ٓ (غ0.5ُ)اٌجمش ار٠جذ اٌّٛاد فٟ و١ّخ . ( غُ (0.15ٚوجش٠زبد اٌّغ١ٕغ١َٛ اٌغجبػ١خ اٌز١ّؤ ( غُ (0.25اٌؾبِؼ١خ عجش 2012 ، 41 - 26 :( 1 ) 4ِغٍخ د٠بٌٝ ٌٍؼٍَٛ اٌضساػ١خ ، 28 . ًِ ثبٌّبء اٌّمطش 100 ٚاوًّ اٌؾغُ اٌٝ 7ِٓ اٌّبء اٌّمطش ٚػذي اٌشلُ ا١ٌٙذسٚع١ٕٟ ٌٍٛعؾ اٌٝ َْ ِذح 121ػمُ اٌٛعؾ ثبٌّؤطذح ػٍٝ دسعخ أظ/ ثبٚٔذ 15 دل١مخ ٚثؼغؾ ثخبسٞ ٠ؼبدي 15 2 ثبعزضزبء . اٌى١ٍغشٚي ٚاالساث١ٕٛص رُ رؼم١ّّٙبػٍٝ أفشاد صُ اػ١فب اٌٝ ِىٛٔبد اٌٛعؾ ثؼذ اٌزؼم١ُ ٚاعزؼًّ ٘زا . اٌٛعؾ فٟ ِشؽٍخ اٌغشثٍخ اٌضب٠ٛٔخ انعشل وانعشٌهت االونٍت : ثبنثب ًِ ِبء ِمطش، ػٍِٛذ ّٔبرط 100 غُ ِٓ أّٛرط اٌزشثخ ثؼذ غشثٍزٗ ٚاصاٌٗ االػشبة ِٕٗ فٟ 15ػٍك دل١مخ ٚؽؼشد رخبف١ف ػشش٠خ ثّبء اٌججزْٛ اٌّؼمُ ٚاٌّؾؼش 15 َ ٌّذح 80اٌزشثخ ثبٌؾشاسح ػٍٝ دسعخ ًِ ِٓ اٌزخف١فبد إٌّبعجخ اٌٝ اؽجبق ثزشٞ 0.1ٔمً . ًِ ِبء ِمطش 100 غُ ِٓ اٌججزْٛ فٟ 0.1ثبراثخ صُ اعش٠ذ ػ١ٍّخ ٔشش االّٔٛرط ػٍٝ . Nutrient agar ِؼمّخ رؾزٛٞ ػٍٝ ٚعؾ طٍت ِؼمُ ِٓ اٌـ ؽؼٕذ االؽجبق . ( 1988اٌذ١ٌّٟ ، ) L-shap ٚإٌبشش streakingعطؼ اٌٛعؾ اٌظٍت ثطش٠مخ َْ ِغ ِزبثؼخ إٌّٛ ١ِٛ٠ب ٌّٚذح 55ػٍٝ دسعخ اٌؾشاسح اٌزمطذ ِغزؼّشاد اٌجىزش٠ب إٌب١ِخ . ٠َٛ 3– 2 ٍ ٚاٌؾبٚٞ ػٍٝ االساث١ٕٛص وٛٔٗ ثظٛسح ِفشدح ٚاػ١ذ صساػزٙب ػٍٝ اٌٛعؾ االعبط اٌظٍت اٌّزوٛس أٔفبِ ِبدح ؽبصخ الٔزبط أض٠ُ االساث١ٕٛص ا٠ض١ِٚش٠ض ثطش٠مخ اٌزخط١ؾ صُ وشسد اٌؼ١ٍّخ الوضش ِٓ ِشح ثٙذف اٌؾظٛي ػٍٝ ػضالد ٔم١خ ِغ ِالؽظخ وضبفخ إٌّٛرط فٟ وً ِشح ٚفؾظذ رؾذ اٌّغٙش ٌٍزبوذ ِٓ ٔمبٚح . اٌؼضٌخ انغزبهت انثبَىٌـــت : رابعب ؽؼش ػبٌك اٌؼضالد اٌزٟ ر١ّضد ثّؼذالد ػب١ٌخ ِٓ إٌّٛ فٟ ِشؽٍخ اٌغشثٍخ اال١ٌٚخ ٚرٌه ثٕمً ػشٚر١ٓ ًِ ِٓ اٌّبء اٌّمطش اٌّؼمُ ٚسعذ 5اٌٝ أجٛثخ اخزجبس ؽب٠ٚخ ػٍٝ loopfull ِٕٙب ثبثشح اٌزٍم١ؼ ثؼذ٘ب ؽؼشد اٌزخف١فبد اٌالصِخ ٌٍؾظٛي ػٍٝ . ًِ / االٔجٛثخ ع١ذا صُ رُ اؽزغبة ػذد اٌّغزؼّشاد اعزخذِذ ؽش٠مخ اٌّضاسع اٌّغّٛسح ثبعزؼّبي ؽبػٕخ ٘ضاصح .( ًِ /ِغزؼّشٖ)اٌؾغُ اٌّطٍٛة ِٓ اٌٍمبػ ًِ ِٓ ٚعؾ االعبط اٌغبئً 50 ًِ ؽب٠ٚخ ػٍٝ 300ار ٌمؾذ دٚاسق صعبع١خ عؼخ . الٔزبط االٔض٠ُ ٍٍ ٚثٛالغ 1 ًِ ِٓ ػبٌك اٌؼضٌخ ثؾ١ش ٠ىْٛ ؽغُ اٌٍمبػ فٟ ٚعؾ االٔزبط ؽٛاٌٟ 1اٌّؼمُ ٚاٌّزوٛس أٔفب X 8 10 . ًِ /خ١ٍخ َْ ٌّذح 55ؽؼٕذ اٌذٚاسق ثذسعخ ؽشاسح ٌٚغشع . دل١مخ / دٚسح 200 عبػخ ٚثغشػخ رؾش٠ه 72 14000أعزخالص االٔض٠ُ فظٍذ اٌىزٍخ اٌؾ٠ٛ١خ ِٓ ٚعؾ إٌّٛ ثبٌٕجز اٌّشوضٞ اٌّجشد ػٍٝ عشػخ َ ٚعشٜ اٌزخٍض ِٓ اٌشائك اِب اٌشاعت اٌزٞ ٠ّضً 4 دل١مخ ِغ دسعخ ؽشاسح 20 دل١مخ ِذح /دٚسح ؽطّذ اٌخال٠ب 7.5اٌخال٠ب اٌىبٍِخ فمذ رُ رؼ١ٍمٙب ثّؾٍٛي ِٕظُ ِٓ فٛعفبد اٌظٛد٠َٛ ثشلُ ١٘ذسٚع١ٕٟ دل١مخ 40 ْ ٌّٚذح ( W, pulse on 1 s ; pulse off 3s 250 ) ٔٛع Ultra sonicثغٙبص اٌـ ْ َ صُ اعش٠ذ ػ١ٍّخ إٌجز اٌّشوضٞ ثبعزخذاَ ٔفظ اٌظشٚف اٌغبثمخ ؽغت 4دسعخ ؽشاسح ػٍٝ . ٌٍزخٍض ِٓ ؽطبَ اٌخال٠ب فٟ اٌغضء اٌشاعت ( 2007 ) ٚآخشْٚ Zhangاٌطش٠مخ اٌزٟ روش٘ب .اِب اٌشائك فؼذ اٌّغزخٍض اٌخبَ ٌالٔض٠ُ حقذٌز انفعبنٍت االَشًٌٍت : خبيسب ِغ ثؼغ اٌزؾ٠ٛشاد ٚرٌه ثزمذ٠ش (2007) ٚآخشْٚ Zhang لذسد اٌفؼب١ٌخ االٔض١ّ٠خ ٚفك ِب روشٖ D - galactose) )ٚثبعزؼّبي عىش اٌىبٌىزٛص (وغىش وز١ٟٛٔ ) اٌّزىْٛ D-tagatose) )اٌزبوبرٛص ًِ ِٓ 0.5 ًِ ِٓ ِغزخٍض االٔض٠ُ اٌٝ ِؾٍٛي اٌزفبػً اٌّزىْٛ ِٓ 0.1ؽ١ش اػ١ف . وّبدح اعبط ًِ ِٓ ِؾٍٛي 0.2، ٚ ( 7 ٌٗ ٠ؼبدي pH ) ١ٍِّٛي 200ِؾٍٛي داسٜ ء فٛعفبد اٌجٛربع١َٛ رشو١ضٖ َْ 50 دل١مخ ػٍٝ ؽشاسح 60، ؽؼٓ اٌّض٠ظ ٌّذح (وّبدح اعبط ) ١ٍِّٛي 50اٌىبٌىزٛص رشو١ضٖ . . ِٛالسٞ 0.5رشو١ضٖ ( HClO4 ) ًِ ِٓ ِؾٍٛي ؽبِغ اٌج١ش وٍٛس٠ه 1صُ اٚلف اٌزفبػً ثبػبفخ Dische ٚ Borenfreund ٚاعشٞ اٌىشف ػٓ اٌزبوبرٛص اٌّزىْٛ ثؾغت اٌطش٠مخ اٌزٟ روش٘ب ٚ % 1.5 رشو١ضٖ Cysteine – Hydrochloride ًِ ِٓ ِؾٍٛي 0.2ٚرٌه ثبػبفخ ( 1951 ) % ًِ ِٓ ِؾٍٛي اٌىبسثبصٚي رشو١ضٖ 0.2ٚ % 70 ًِ ِٓ ِؾٍٛي ؽبِغ اٌىجش٠ز١ه رشو١ضٖ 6 عجش 2012 ، 41 - 26 :( 1 ) 4ِغٍخ د٠بٌٝ ٌٍؼٍَٛ اٌضساػ١خ ، 29 . Vortex ِؾؼش ثبال٠ضبٔٛي اٌٝ ِؾٍٛي اٌزفبػً ِٚضط اٌخ١ٍؾ ع١ذا ثبعزؼّبي ِبصط االٔبث١ت 0.12 ِغٙض ِٓ 4050UV/ Visible ٔب١ِٛٔز١ش فٟ عٙبص ٔٛع 560ل١غذ االِزظبط١خ ػٍٝ ؽٛي ِٛعٟ اٌزٞ رُ رؾؼ١شٖ ثبرجبع اٌخطٛاد اٌّزوٛسح ( Blank ) ِمبثً ِؾٍٛي وفء اٌغ٠ٛذ٠خ LKBششوخ . اػالٖ ِغ ِشاػبح أػبفخ االٔض٠ُ اٌٝ ِؾٍٛي اٌزفبػً ثؼذ ا٠مبف اٌزفبػً ثبعزؼّبي ؽبِغ اٌج١شوٍٛس٠ه أعزخشط رشو١ض اٌزبوبرٛص اٌّزؾشس ثفؼً االٔض٠ُ ػٍٝ اٌّبدح االعبط اٌىبٌىزٛص ثبالعزؼبٔخ ثبٌّٕؾٕٝ اٌم١بعٟ ثبٔٙب و١ّخ االٔض٠ُ اٌزٟ ( Unit)ٚػشفذ ٚؽذح فؼب١ٌخ االٔض٠ُ . ٌّؾٍٛي اٌزبوبرٛص اٌّّؼذ ٌٙزا اٌغشع . رؾشس ِب٠ىشسِٚٛال ٚاؽذا ِٓ اٌزبوبرٛص فٟ اٌذل١مخ اٌٛاؽذح رؾذ ظشٚف اٌزغشثخ حشخٍض انعشنت : سبدسب اٌزٟ ر١ّضد ثىفبئزٙب الٔزبط أض٠ُ أساث١ٕٛص ا٠ض١١ِٚش٠ض حاعش٠ذ ِغّٛػخ ِٓ االخزجبساد ٌزشخ١ض اٌؼضي : - ٚشٍّذ رٍه االخزجبساد ػٍٝ . ِٓ خالي ِشؽٍزٟ اٌغشثٍخ اال١ٌٚخ ٚاٌضب٠ٛٔخ .شىً اٌّغزؼّشاد ػٍٝ اٌٛعؾ اٌظٍت ٚاؽغبِٙب ٚاٌٛأٙب ٚؽبفبرٙب: اٌفؾٛطبد اٌّظٙش٠خ (1 فؾظذ اٌخال٠ب اٌخؼش٠خ ِغٙش٠ب ٌٍزؼشف ػٍٝ شىٍٙب ٌّٚؼشفخ ِذٜ :اٌفؾٛطبد اٌّغٙش٠خ (2 أعزغبثزٙب ٌظجغخ وشاَ ٚاؽزٛائٙب ػٍٝ اٌغجٛساد ثطش٠مخ اٌزظج١غ ثبعزخذاَ طجغخ Malachite green ِٚٛلغ ٘زح اٌغجٛساد داخً اٌخال٠ب اٌخؼش٠خ (Fischer ، 1974 ) شٍّذ ٘زٖ اٌفؾٛطبد دساعخ رخّش اٌىٍٛوٛص ٚأزبط اٌؾبِغ : اٌفؾٛطبد اٌفغٍغ١خ ٚاٌى١ّٛؽ٠ٛ١خ (3 ، ٚرؾًٍ إٌشأ ػٍٝ ٚعؾ casein agar ٚاخزجبس رؾًٍ اٌىبص٠ٓ ػٍٝ ٚعؾ Acetoinاٚ اٌغبص اٚ اٌـ starch agar ٚاخزجبس رؾًٍ اٌغالر١ٓ ػٍٝ ٚعؾ Nutrient gelatin broth ٌّٕٛٚفؾض ا َْ ٚ 20ثذسعبد ؽشاسح َْ ٚإٌّٛ ثظشٚف ال ٘ٛائ١خ ػٍٝ ٚعؾ 65 Nutrient agar ٞٚؽب sabouraud dextroseٌزش ، ٚإٌّٛ ػٍٝ ٚعؾ / غُ 0.5 ثزشو١ض Na-thioglycolateػٍٝ agar ٌزش ، ٚإٌّٛ ػٍٝ ٚعؾ /غُ 66 ثزشو١ض Nutrient agar 0.02ثٛعٛد االصا٠ذ ثزشو١ض % ٚفؾض اٌغزشاد ٌالعزفبدح ِٕٗ وّظذس ٌٍطبلخ اعش٠ذ رٍه اٌفؾٛطبد ؽغت اٌطشق اٌّزوٛسح ِٓ . ( 1981) ٚآخشْٚ Harrigan ٚ Mac Cance ( 1976 ) ٚHarryلجً : حعٍٍٍ انظزوف انًثهى الَخبج االَشٌى وانخً شًهج عهى: سببعب ً ححذٌذ يظذر انكبربىٌ االيثم – 1 دسط ربص١ش ػذد ِٓ ِظبدس اٌىبسثْٛ فٟ أزبط االٔض٠ُ أشزٍّذ ػٍٝ اٌى١ٍغشٚي ٚاٌىٍٛوٛص ٚاٌىبٌىزٛص ثطش٠مخ اٌّضاسع اٌّغّٛسح ِغ اعزخذاَ االساث١ٕٛص فٟ وً اٌزغبسة وٛٔٗ ِبدح ؽبصخ الٔزبط ٚرُ اعزخالص االٔض٠ُ ٚرمذ٠ش فؼب١ٌزخ . ( 2007 ٚآخشْٚ ، Zhang ؛Maharani ، 1970 )االٔض٠ُ . ثٕفظ اٌطش٠مخ اٌزٟ روشد عبثمب ححذٌذ انخزكٍش االيثم نهكسٍزول - 2 دسط ربص١ش رشاو١ض ِخزٍفخ ِٓ اٌى١ٍغشٚي ثبػزجبسٖ افؼً ِظذس ٌٍىبسثْٛ أٔزخت ِٓ اٌزغشثخ – 1اٌغبثمخ فٟ اٌٛعؾ االعبعٟ اٌغبئً اٌّغزؼًّ الٔزبط االٔض٠ُ ٚشٍّذ رٍه اٌزشاو١ض ػٍٝ إٌغت ِٓ 2.5 . % ححذٌذ يظذر انُخزوخٍٍ االيثم الَخبج االَشٌى - 3 فٟ أزبط االٔض٠ُ ٚاٌّزّضً % 1اعزجذي ِظذس إٌزشٚع١ٓ فٟ اٌٛعؾ اٌغبئً اٌّغزخذَ ثزشو١ض ثّظبدس ٔزشٚع١ٓ شٍّذ ػٍٝ اٌىبص٠ٓ أٚ خالطخ اٌخ١ّشح أٚ خالطخ ٌؾُ اٌجمش أٚ خ١ٍؾ ِزغبٚٞ ِّٕٙب اػ١فذ اٌّظبدس اٌّزوٛسح اٌٝ . أٚ ا١ٌٛس٠ب وّظبدس ػؼ٠ٛخ ٚوجش٠زبد اال١َِٔٛٛ وّظبدس ال ػؼ٠ٛخ ِغ االخز ثٕظش االػزجبس اعزؼّبي اٌزشو١ض االِضً ِٓ اٌّظذس اٌىبسثٟٛٔ ٚاٌزٞ % 1ٚعؾ االٔزبط ثزشو١ض . أػالٖ 2 ٚ 1رُ رؾذ٠ذٖ ٚفك اٌفمشح االيثم نالَخبج ( pH )ححذٌذ انزقى انهٍذروخًٍُ – 4 ٚاعزخذَ ( % 1.5 )اعزؼًّ اٌٛعؾ اٌغبئً الٔزبط االٔض٠ُ ِغ رؼذ٠ً ٔغجخ اٌى١ٍغشٚي اٌٝ اٌىبص٠ٓ ِغ خالطخ اٌٍؾُ ٚاٌخ١ّشح وّظذس ٌٍٕزشٚع١ٓ ثذال ِٓ اٌّظبدس إٌزشٚع١ٕ١خ اٌؼؼ٠ٛخ ٚغ١ش عجش 2012 ، 41 - 26 :( 1 ) 4ِغٍخ د٠بٌٝ ٌٍؼٍَٛ اٌضساػ١خ ، 30 اٌؼؼ٠ٛخ االخشٜ ثٕبء ػٍٝ ٔزبئظ رؾذ٠ذ ِظذس اٌىبسثْٛ ٚإٌزشٚع١ٓ اٌّزوٛسح أفبَ ، إر ؽؼش اٌٛعؾ ثفبسق ٔظف دسعخ ِٓ ٚعؾ الخش ٌزؾذ٠ذ اٌشلُ ا١ٌٙذسٚع١ٕٟ 8 – 6ثبسلبَ ١٘ذسٚع١ٕ١خ رشاٚؽذ ث١ٓ . االِضً الٔزبط االٔض٠ُ ححذٌذ درخت انحزارة انًثهى - 5 َْ 65 – 45ؽؼٓ ٚعؾ االٔزبط اٌٍّمؼ ثخال٠ب اٌجىزش٠ب ثذسعبد ؽشاسح ِخزٍفخ رشاٚؽذ ِٓ عبػخ ٌزؾذ٠ذ دسعخاٌؾشاسح اٌّضٍٝ الٔزبط 72ٚثفبسق خّظ دسعبد ؽشاس٠خ ِٓ ٚعؾ الخش ٌّٚذح . االٔض٠ُ ِغ ِشاػبح اٌظشٚف اٌّضٍٝ اٌّزؾممخ فٟ اٌزغبسة اٌغبثمخ : ححذٌذ حبثٍز يظبدر االٌىَبث انًعذٍَت انًثهى الَخبج االَشٌى - 6 % 0.15اعزجذٌذ ا٠ٛٔبد اٌّغ١ٕغ١َٛ اٌّغزخذَ فٟ ٚعؾ االٔزبط ثّظبدس ِؼذ١ٔخ ِخزٍفخ ثزشو١ض ٚخ١ٍؾ ِٓ اِالػ اٌّغ١ٕغ١َٛ ثزشو١ض Mg 2+ ٚاٌـ Co +2 ٚاٌـMn+2 ِٓ اٞ ِّٕٙب ٚاشزٍّذ ػٍٝ فٟ ؽ١ٓ رشوذ ِؼبٍِخ اخشٜ ِٓ دْٚ اػبفخ ٌال٠ٛٔبد اٌّؼذ١ٔخ % 0.02ٚإٌّغ١ٕض ثزشو١ض % 0.15 . ِغ االخز ثٕظش االػزجبس اٌظشٚف اٌّضٍٝ وبفخ اٌّزؾممخ فٟ اٌزغبسة اٌغبثمخ : ححذٌذ يذة انحضبَت انًثهى الَخبج اَشٌى - 7 رّذ ِزبثؼخ أزبط االٔض٠ُ ِٓ لجً اٌجىزش٠ب ل١ذ اٌذساعخ فٟ اٌظشٚف اٌّضٍٝ اٌّؾذدح فٟ ػٛء عبػخ ِٓ ؽ١ش اٌىزٍخ 24 َْ ٚثٛالغ 55 عبػخ ِٓ اٌؾؼٓ فٟ 96اٌزغبسة اٌّزوٛسٖ آٔفبَ ٚػٍٝ ِذٜ . اٌؾ٠ٛ١خ ٚاٌفؼب١ٌخ ااالٔض١ّ٠خ ٚاٌفؼب١ٌخ إٌٛػ١خ حقذٌز انبزوحٍٍ :ثبيُب ٌزمذ٠شرشو١ض اٌجشٚر١ٓ ار ؽؼش إٌّؾٕٝ اٌم١بعٟ ( 1951)ْ ٞ ٚآخش Lowery ارجؼذ ؽش٠مخ ِٓ Bovine serum albumin ( BSA ) ِٓ ٍِغُ 2 اٌٝ 0 ثزشاو١ض ِزذسعخ رشاٚؽذ / ًِ ٚاعزخذَ إٌّؾٕٝ اٌم١بعٟ ٌؾغبة رشو١ض اٌجشٚر١ٓ فٟ اٌّغزخٍض االٔض٠ّٟ إٌّزظ ثؼذ ِؼبٍِزٗ ثٕفظ . ظشٚف اٌّؾٍٛي اٌجشٚر١ٕٟ اٌم١بعٟ حقذٌز انكخهت انحٍىٌت : حبسعب ٌزمذ٠ش اٌىزٍخ اٌؾ٠ٛ١خ ؽ١ش عّؼذ Lobanok ( 1998 ) ارجؼذ اٌطش٠مخ اٌّزوٛسح ِٓ لجً دل١مخ 15دل١مخ ِذح / دٚسح 15000اٌىزٍخ اٌؾ٠ٛ١خ ثؼذ أزٙبء ِذح اٌزخّش ثبٌٕجز اٌّشوضٞ ػٍٝ عشػخ َْ ٚغغٍذ اٌخال٠ب ثبٌّبء اٌّمطش ِشر١ٓ ِغ إٌجز اٌّشوضٞ رؾذ ٔفظ اٌظشٚف صُ عففذ 4ٚػٍٝ دسعخ . ًِ / عبػخ ٚاؽزغت ٚصْ اٌّبدح اٌغبفخ ػٍٝ اعبط غُ 24َْ ٌّذح 105ثذسعخ اٌؾشاسح انُخبئح وانًُبقشت ػضٌٗ رُ اٌؾظٛي ػ١ٍٙب 40 ػضٌخ ِٓ اٌجىزش٠ب ِٓ ث١ٓ 12 فٟ ٘زٖ اٌذساعخ اٌؾظٛي ػٍٝ أِىٓ ٚر١ّضد ٘زٖ اٌؼضالد ثزى٠ٕٛٙب . اثٛ غش٠ت / ِٓ ِظبدسِخزٍفخ ِٓ رشة ػشال١خ ِٓ و١ٍخ اٌضساػخ ٚػٕذ ر١ّٕخ ٘زٖ . ِغزؼّشاد ٚاػؾخ ٚشفبفخ ٚاؽ١بٔب غ١ششفبفخ ٚغ١ش ِٕزظّخ ػٍٝ االٚعبؽ اٌظٍجخ اٌظٍت ٚاٌؾبٚٞ ػٍٝ االساث١ٕٛص وٛٔٗ ِبدح ؽبصخ الٔزبط أض٠ُ ٞاٌؼضالد ػٍٝ اٌٛعؾ االعبط وبٔذ عذ ػضالد ِٕٙب ( 2007 ٚاخشْٚ ، Maharani ، 1970 ٚ Zhang)اساث١ٕٛصا٠ض١ِٚش٠ض ٟ٘ٚ A1، A3 ، ٍِ B3 ،B4 ، B5 ، B6 راد ّٔٛ وض١ف ٟٚ٘ خبط١خ ارخزد ِؼ١بسا ٌزٌه فمذ ٚلغ االخز١بس ػٍٝ ٘زٖ اٌؼضالد الخؼبػٙب . (1عذٚي )ٌٍؼضي فٟ ِشؽٍخ اٌغشثٍخ اال١ٌٚخ عبئً ٠ؾزٛٞ ػٍٝ ٌٍٞغشثٍخ اٌضب٠ٛٔخ ، ٚرُ ؽغبة اٌفؼب١ٌخ االٔض١ّ٠خ ثؼذ ر١ّٕزٙب ػٍٝ ٚعؾ اعبط ٔزبئظ اٌغشثٍخ (1)االساث١ٕٛص وّبدح ؽبصخ الٔزبط االٔض٠ُ ثطش٠مخ اٌّضاسع اٌّغّٛسح ٠ٚٛػؼ اٌشىً ثبٔزبع١زٙب ٌالٔض٠ُ ِمبسٔٗ ِغ ثم١خ اٌؼضالد ل١ذ اٌذساعخ ار ثٍغذ B4ار ٠الؽع رفٛق اٌؼضٌخ . اٌضب٠ٛٔخ 30 – 18 ِمبسٔٗ ثجم١خ اٌؼضالد اٌزٟ رشاٚؽذ فؼب١ٌزٙب ث١ٓ B4ًِ ٌٍؼضٌخ / ٚؽذح35فؼب١ٌخ االٔض٠ُ ٌزٌه ٚلغ B5رمش٠جب ِغ أزبع١خ ألشة اٌؼضالد ٌٙب ٟٚ٘ اٌؼضٌخ % 15ًِ اٞ ثض٠بدح رؼبدي /ٚؽذح . الوّبي اٌذساعخ ػ١ٍٙب B4االخز١بس ػٍٝ اٌؼضٌخ عجش 2012 ، 41 - 26 :( 1 ) 4ِغٍخ د٠بٌٝ ٌٍؼٍَٛ اٌضساػ١خ ، 31 فً يزحهت انغزبهت االونٍت عهى L- arabinose isomeraseكثبفت انًُى نعشالث انبكخزٌب انًُخدت الَشٌى . 1خذول ْو 50وسظ حبوي عهى انكهٍسزول كًظذر نهكبربىٌ واالرابٍخىس كًبدة حبثت الَخبج اَشٌى و بذرخت كثبفت انًُى* ريش انعشنت انخسهسم 1 A1 +++ 2 A2 ++ 3 A3 +++ 4 A4 + 5 A5 ++ 6 A6 + 7 B1 ++ 8 B2 ++ 9 B3 ++++ 10 B4 +++ 11 B5 ++++ 12 B6 +++ ّٔٛ وض١ش ، (+++)ّٔٛ ِزٛعؾ ، (++)ّٔٛ ل١ًٍ ، (+)وضبفخ ّٔٛ اٌؼضالد ػٍٝ ٚعؾ اٌؼض٠ٍخ اال١ٌٚخ ؽ١ش رّضً * . ّٔٛ وض١ف (++++) وانُسبت (يم / وحذة )يقبرَت كفبءة انعشالث انًُخدت الَشٌى ارابٍُىس اٌشويٍزٌش يٍ حٍث انفعبنٍت االَشًٌٍت . 1شكم . فً يزحهت انغزبهت انثبَىٌت ( % )انًئىٌت نهفعبنٍت B4حشخٍض انعشنت إٌّزغخ ٌالٔض٠ُ ِٓ ِشؽٍزٟ اٌؼض٠ٍخ اال١ٌٚخ ٚاٌضب٠ٛٔخ اٌٝ ِغّٛػخ ِٓ B4اخؼؼذ اٌؼضٌخ . االخزجبساد اٌّظٙش٠خ ٚاٌضسػ١خ فؼال ػٓ ثؼغ االخزجبساد اٌفغٍغ١خ ٚاٌى١ّٛؽ٠ٛ١خ اظٙشد االخزجبساد اٌّظٙش٠خ ٌٍّغزؼّشاد ثبٔٙب ِغزؼّشاد ٚاػؾخ ٚشفبفخ ٚثؼغ االؽ١بْ وّب . ٍُِ رمش٠جب 3غ١ش شفبفخ ٚٔبػّخ ٚراد ؽبفبد اٚٔٙب٠بد وبٍِخ ٚالرزغبٚص ِؼذي الطبس٘ب ػٓ . اظٙشد اٌفؾٛطبد اٌّغٙش٠خ اْ اٌجىزش٠ب ػظ٠ٛخ ِىٛٔخ ٌٍغجٛساد اٌطشف١خ ِٚٛعجخ ٌظجغخ وشاَ ٌٙب اٌمبث١ٍخ ػٍٝ أزبط B4اْ اٌؼضٌخ (2)ٚث١ٕذ اٌفؾٛطبد اٌى١ّٛؽ٠ٛ١خ اٌّٛػؾخ فٟ اٌغذٚي االٔض٠ّبد اٌّؾٍٍخ ٌٍغالر١ٓ ٚاٌىبص٠ٓ ٚإٌشأ فٟ ؽ١ٓ وبٔذ غ١ش لبدسح ػٍٝ االعزفبدح ِٓ اٌغزشاد عجش 2012 ، 41 - 26 :( 1 ) 4ِغٍخ د٠بٌٝ ٌٍؼٍَٛ اٌضساػ١خ ، 32 َْ ٚػذَ إٌّٛ فٟ دسعخ اٌؾشاسح 65 – 55وّظذس ٌىبسثْٛ وّب أٙب ر١ّضد ثّٕٛ٘ب ثذسعبد ؽشاسح ث١ٓ َْ اٚ فٟ اٌظشٚف اٌال٘ٛائ١خ اٚ ػٍٝ ٚعؾ 20 Saubourd dextrose agar L –arabinose isomeraseانًُخدت الَشٌى B4 انخىاص انكًٍىحٍىٌت نهعشنت . 2خذول انُخٍدت* انفحـــــض + وْ 65- 55انًُى بذرخت حزارة - وْ 20انًُى بذرخت حزارة - انًُى فً ظزوف ال هىائٍت - sabaured agarانًُى عهى وسظ - %0.02 بخزكٍشazideانًُى عهى وسظ ٌحىي عهى أنـ + اَخبج انحبيض يٍ انكهىكىس - اَخبج انغبس يٍ انكهىكىس - اَخبج االسٍخىٌ يٍ انكهىكىس + ححهم انُشب + ححهم اندالحٍٍ + ححهم انكبسٌٍ - citrateاالسخفبدة يٍ انـ عذو وخىد ًَى ( - )وخىد ًَى ، ( + ) * ٚػٕذ ِمبسٔخ ٔزبئظ ٘زٖ االخزجبساد ِغ %. 0.02وّب رج١ٓ أٙب ؽغبعخ ٌٛعٛد أص٠ذ اٌظٛد٠َٛ ثزشو١ض ٚ Fischer ، 1974 ٚ Harrigan)ِبرزٛفش ِٓ اٌّشاعغ اٌؼ١ٍّخ اٌخبطخ ثزظ١ٕف االؽ١بء اٌّغٙش٠خ Mc Cance ، 1976 ) ارؼؼ اْ اٌؼضٌخ رؼٛد اٌٝ اٌجىزش٠بstearothemophilus Bacillus ٚسِض . ر١ّضا ٌٙب ٚرؼش٠فب HB4ٌٙب دراست وححذٌذ انظزوف انًثهى الَخبج االَشٌى ححذٌذ يظذر انكبربىٌ االيثم – 1 ٚعذ اْ افؼً اٌّظبدس اٌىبسث١ٔٛخ اٌّغزؼٍّخ ٘ٛ اٌى١ٍغشٚي ِغ ٚعٛد االساث١ٕٛص وّبدح ؽبصخ ٍِغُ / ٚؽذح 14.57 ًِ ٚاٌفؼب١ٌخ إٌٛػ١خ / ٚؽذح 25.5ػٍٝ أزبط االٔض٠ُ ار ثٍغذ اٌفؼب١ٌخ االٔض١ّ٠خ ١ٍ٠ٗ اٌىبٌىزٛص ِغ االساث١ٕٛص صُ اٌى١ٍغشٚي ٚاٌىبٌىزٛص ٚاٌىٍٛوٛص ( 2شىً )ًِ / غُ 0.4ٚاٌىزٍخ اٌؾ٠ٛ١خ ٚثٕبء ػٍٝ ٘زٖ إٌزبئظ فمذ اعزؼًّ . وال ػٍٝ افشاد ٚأخ١شا ااٌىٍٛوٛص ٚاالساث١ٕٛص صُ االساث١ٕٛص ٌٛؽذٖ اٌى١ٍغشٚي ثٛطفٗ ِظذسا ٌٍىبسثْٛ فٟ ٚعؾ أزبط االٔض٠ُ ػالٖٚ ػٍٝ ٚعٛد االساث١ٕٛص وّبدح ؽبصخ ػٍٝ ٚآخشْٚ Baek ٚ ( 2003) ٚآخشْٚ Yoonأزبط االٔض٠ُ ٚرزفك ٘زٖ إٌزبئظ ِغ ِب ٚعذٖ وً ِٓ إٌز٠ٓ أشبسٚا اٌٝ اعزخذاَ اٌى١ٍغشٚي وّظذس ٌٍىبسثْٛ فٟ أزبط أض٠ُ االساث١ٕٛص ( 2004 ) ػٍٝ اٌزٛاٌٟ ، وّب Geobacillus thermodenitrificans ٚثىزش٠ب E. coli ا٠ض١ِٚش٠ض ِٓ ثىزش٠ب اٌٝ اْ اعزخذاَ اٌى١ٍغشٚي وّظذس ٌٍىبسثْٛ ٚاالساث١ٕٛص وّبدح ؽبصخ Maharani (1970 )اشبس فٟ أزبط أض٠ُ االساث١ٕٛص ا٠ض١ِٚش٠ض وبْ افؼً ِٓ اعزخذاَ اٌىٍٛوٛص ٚاالسث١ٕٛص ، فٟ ؽ١ٓ ااعزخذَ Roh ْٚاٌىٍٛوٛص وّظذس ٌٍىبسثْٛ الٔزبط االٔض٠ُ ِٓ ثىزش٠ب ( 2000) ٚآخشE. coli ٚلذ . ا٠ؼب رؼٛد رٍه االخزالفبد فٟ رؾذ٠ذ افؼً اٌّظبدس اٌٝ اخزالف اٌىبئٓ اٌّغٙشٞ اٌّغزخذَ فٟ أزبط االٔض٠ُ .ِٚب ٠ّزٍىٗ ِٓ ٔظُ أض١ّ٠خ العزٙالن اٞ ِٓ ِظبدس اٌىبسثْٛ دْٚ االخش عجش 2012 ، 41 - 26 :( 1 ) 4ِغٍخ د٠بٌٝ ٌٍؼٍَٛ اٌضساػ١خ ، 33 Bacillus stearothermophillus حبثٍز يظذر انكبربىٌ فً اَخبج اَشٌى ارابٍُىس اٌشويٍزٌش يٍ انبكخزٌب . 2شكم HB4 كًبدة حبثت الَخبج االَشٌى % 0.15 يع وخىد االرابٍُىس بخزكٍش. : ححذٌذ انخزكٍش االيثم يٍ انكهسٍزول – 2 اْ افؼً رشو١ض ٌٍى١ٍغشٚي ٌغشع أزبط االٔض٠ُ ٘ٛ (3)رج١ٓ إٌزبئظ اٌّٛػؾخ فٟ اٌشىً ٍِغُ ػٍٝ / ٚؽذح 19.4 ًِ ٚ / ٚؽذح 34ؽ١ش اْ اٌفؼب١ٌخ االٔض١ّ٠خ ٚاٌفؼب١ٌخ إٌٛػ١خ وبٔذ % 1.5 ٚعبءد ٘زٖ إٌزبئظ ِزٛافمخ ِغ ص٠بدح % . 2.5 – 1اٌزٛاٌٟ ، ٟٚ٘ اػٍٝ ِٓ ل١ّٙب ػٕذ اٌزشاو١ض ِٓ ًِ ٟٚ٘ اػٍٝ ِٓ 100 / غُ 0.5ار ثٍغذ اٌىزٍخ اٌؾ٠ٛ١خ % 1.5اٌىزٍخ اٌؾ٠ٛ١خ ػٕذ رشو١ض اٌى١ٍغشٚي ِّب ٠ش١ش اٌٝ اْ % 2.5 – 1ل١ُ اٌىزٍخ اٌؾ٠ٛ١خ ٌجم١خ اٌّؼبِالد اٌزٟ رشاٚػ رشو١ض اٌى١ٍغشٚي ف١ٙب ِٓ %2.5 ; %2 ; %1)ثبٌّمبسٔخ ِغ ثم١خ اٌزشاو١ض% 1.5اٌى١ٍغشٚي ٘ٛ افؼً ِظذس ٌٍىبسثْٛ ٚثزشو١ض اٌز٠ٓ اعزخذِٛا ٚعؾ أزبط أض٠ُ ( 2001)ٚآخشْٚ Deok- Kum ٚ٘زا ٠زفك ِغ ِب ٚعذٖ ( . ِٓ اٌى١ٍغشٚي ِظذسا ٌٍىبسثْٛ % 1.5االساث١ٕٛص ا٠ض١ِٚش٠ض ٠ؾزٛٞ ػٍٝ فٟ ٚعؾ اٌز١ّٕخ % 0.5اْ اعزخذاَ اٌىبٌىزٛص ثزشو١ض ( Zakaria 2001 ( فٟ ؽ١ٓ اشبس اػطٝ اػٍٝ فؼب١ٌخ Mycobacterium smegmatisالٔزبط أض٠ُ االساث١ٕٛص ا٠ض١ِٚش٠ض ِٓ ثىزش٠ب .أض١ّ٠خ رؾذ ظشٚف اٌز١ّٕخ اٌّغزخذِخ فٟ رٍه اٌذساعخ ححذٌذ يظذر انُخزوخٍٍ االيثم - 3 اْ افؼً اٌّظبدس إٌزشٚع١ٕ١خ الٔزبط أض٠ُ أساث١ٕٛص ( 4 )رش١ش إٌزبئظ اٌّٛػؾخ فٟ اٌشىً ٘ٛ ثبعزخذاَ اٌىبص٠ٓ Bacillus stearothermophilus HB4ا٠ض١ِٚش٠ض ِٓ اٌؼضٌٗ اٌّؾ١ٍخ ًِ ٚاٌفؼب١ٌخ / ٚؽذح 45ار ثٍغذ اٌفؼب١ٌخ االٔض٠ُ % 1ٚخالطخ اٌخ١ّشح ٚخالطخ ٌؾُ اٌجمش ثزشو١ض 30- 18 ًِ ِمبسٔخ ِغ ثم١خ اٌّؼبِالد اٌزٟ رشاٚؽذ ف١ٙب اٌفؼب١ٌخ االٔض١ّ٠خ ث١ٓ / ٍِغُ 25.71إٌٛػ١خ اِب ػٓ اٌىزٍخ اٌؾ٠ٛ١خ فمذ ٌٛؽع ا٠ؼب . ًِ / ٍِغُ 17.14 – 10.28 ًِ ٚاٌفؼب١ٌخ إٌٛػ١خ ث١ٓ /ٚؽذح ص٠بدرٙب ثبعزخذاَ وً ِٓ اٌىبص٠ٓ ٚخالطخ اٌخ١ّشح ٌٚؾُ اٌجمش ثبٌّمبسٔخ ِغ ِظبدسإٌزشٚع١ٓ االخشٜ ًِ ثبٌّمبسٔخ ِغ ثم١خ اٌّؼبِالد اٌزٟ 100 / غُ 0.5اٌؼؼ٠ٛخ ٚغ١ش اٌؼؼ٠ٛخ ؽ١ش ثٍغذ فٟ ٘زٖ اٌؾبٌخ . ًِ 100 / غُ 0.45 – 0.2رشاٚؽذ ف١ٙب اٌىزٍخ اٌؾ٠ٛ١خ ث١ٓ عجش 2012 ، 41 - 26 :( 1 ) 4ِغٍخ د٠بٌٝ ٌٍؼٍَٛ اٌضساػ١خ ، 34 ححذٌذ انخزكٍش االيثم يٍ انكهٍسزول الَخبج اَشٌى ارابٍُىس اٌشويٍزٌش يٍ عشنت يحهٍت يٍ بكخزٌب . 3شكم Bacillus stearothermophilus HB 4 كًبدة حبثت الَخبج االَشٌى % 0.15 يع وخىداالرابٍُىس بخزكٍش. لذ ٠ؼٛد اسرفبع ل١ُ اٌىزٍخ اٌؾ٠ٛ١خ ٚاٌفؼب١ٌخ االٔض١ّ٠خ ٚاٌفؼب١ٌخ إٌٛػ١خ ػٕذ اعزخذاَ اٌىبص٠ٓ ٚخالطخ اٌخ١ّشٖ ٚاٌٍؾُ اٌجمشٞ اٌٝ اْ اٌجىزش٠ب إٌّزغخ اٌالٔض٠ُ ل١ذ اٌذساعخ أٙب ِٓ اٌجىزش٠ب اٌزٟ رزطٍت رٛفش ِظبدس ثشٚر١ٕ١خ غ١ٕخ ثبالؽّبع اال١ٕ١ِخ االعبع١خ وبٌىبص٠ٓ ٚخالطخ اٌخ١ّشٖ ٚاٌٍؾُ ، ٌزا فبْ ٚعٛد ِضً ٘زٖ اٌّظبدس إٌزشٚع١ٕخ ٠غفض٘ب ػٍٝ إٌّٛ ٚأزبط االٔض٠ُ ثّغزٜٛ اػٍٝ ِمبسٔٗ ثجم١خ ِظبدس اٌز٠ٓ أشبسٚا اٌٝ اْ اٌغالٌخ Givry ٚ Duchiron ( 2008 )إٌزشٚع١ٓ ، ػٍٝ خالف ِبروشٖ رزطٍت اؽزٛاء ٚعؾ Lactobacillus bifermentansإٌّزغخ الٔض٠ُ اساث١ٕٛص ا٠ض١ِٚش٠ض ِٓ ثىزش٠ب 9.4أزبط االٔض٠ُ ػٍٝ ِظذس ٔزشٚع١ٕٟ الػؼٛٞ ِضً عزشاد اال١َِٔٛٛ ؽ١ش ثٍغذ اٌفؼب١ٌخ االٔضث١ّخ . ٌٍز١ّٕخ MRS ِشح ِمبسٔخ ثبعزخذاَ ٚعؾ 1.6ًِ ٚوبٔذ اوضش ثّب ٠ؼبدي / ٚؽذح االيثم PH ححذٌذ انـ - 4 ( pH )اعزخذِذ فٟ ٘زٖ اٌذساعخ ِغّٛػخ ِٓ اٌّؾب١ًٌ اٌزٟ رشاٚؽذ ل١ُ اٌـشلُ ا١ٌٙذسٚع١ٕٟ ٌغشع أزبط االٔض٠ُ ؽ١ش ٌٛؽع اْ ص٠بدح اٌىزٍخ اٌؾ٠ٛ١خ رش١ش اٌٝ ص٠بدح ( 5شىً ) 8 – 6ف١ٙب ث١ٓ اٌى١ّخ إٌّزغخ ِٓ االٔض٠ُ ٚوزٌه ص٠بدح اٌفؼب١ٌخ االٔض١ّ٠خ ٚإٌٛػ١خ فٟ اٌظشٚف اٌمبػذ٠خ اٌزٟ رشاٚؽذ فٟ ؽ١ٓ أخفؼذ وال ِٓ اٌىزٍخ اٌؾ٠ٛ١خ ٚاٌفؼب١ٌخ االٔض١ّ٠خ . 8 – 7.5ف١ٙب االسلبَ ا١ٌٙذسٚع١ٕ١خ ث١ٓ ػٕذ اٌظشٚف اٌؾبِؼ١خ ِّب ٠ش١ش اٌٝ لذسح اٌؼضٌخ ػٍٝ أزبط أساث١ٕٛصا٠ض١ِٚش٠ض فٟ اٌظشٚف اٌمبػذ٠خ اٌز٠ٓ اشبسٚا اٌٝ اْ الظٝ (( 2004ٚآخشْٚ Zakaria 2001 ) ٚ Lee (ٚ٘زا ٠زفك ِغ ِب ٚعذٖ Manjasetty ٚ Chance ، وّب اشبس 8.5 ٚ 7.5أزبع١خ ٌالٔض٠ُ رزؾمك ِب ث١ٓ اٌشلُ ا١ٌٙذسٚع١ٕٟ فٟ ؽ١ٓ E . coli ٛ٘ 7. 4 اٌٝ اْ اٌشلُ ا١ٌٙذسٚع١ٕٟ االِضً ٌٛعؾ أزبط االٔض٠ُ ِٓ ثىزش٠ب (2006) اٌٝ اْ اٌشلُ ا١ٌٙذسٚع١ٕٟ االِضً الٔزبط االٔض٠ُ ِٓ ثىزش٠ب ( 2004) ٚآخشْٚ Baek اشبس Geobacillus thermodenitrificans ٛ٘ 6.8 . اٌٝ اْ أزبط االٔض٠ُ ِٓ ثىزش٠ب ( 2005 ) ٚأخشْٚ Leeٚػٍٝ خالف رٌه فمذ اشبس Alicyclobacillus acidocaldarius 5 ٠زطٍت اْ ٠ىْٛ اٌشلُ ا١ٌٙذسٚع١ٕٟ ؽبِؼٟ فٟ ؽذٚد . عجش 2012 ، 41 - 26 :( 1 ) 4ِغٍخ د٠بٌٝ ٌٍؼٍَٛ اٌضساػ١خ ، 35 Bacillus strearothermophilusحبثٍز يظذر انُخزوخٍٍ فً اَخبج اَشٌى ارابٍُىس اٌشيٍزٌش يٍ بكخزٌب . 4شكم HB4 كًبدة حبثت الَخبج % 0.15 يظذرا نهكبربىٌ يع وخىد االرابٍُىس بخزكٍش %1.5وببسخعًبل انكهٍسزول بخزكٍش . االَشٌى Bacillus strearothermophilusحأثٍزانزقى انهٍذروخًٍُ فً اَخبج اَشٌى الرابٍُىس اٌشويٍزرٌشيٍ بكخزٌب . 5 شكم HB4 كًبدة حبثت الَخبج % 0.15يظذرا نهكبربىٌ يع وخى االرابٍُىس بخزكٍش % 1.5 وببسخعًبل انكهٍسزول بخزكٍش . يظذرا نهُخزوخٍٍ % 1االَشٌى وخهٍظ يخسبو يٍ انكبسٌٍ وخالطت انهحى وانخًٍزة بخزكش : ححذٌذ درخت انحزارة انًثهى - 5 َْ ار 55اْ دسعخ اٌؾشاسح اٌّضٍٝ الٔزبط االٔض٠ُ ٟ٘ ( 6) اظٙشد إٌزبئظ اٌّٛػؾخ فٟ اٌشىً ًِ ٚاٌفؼب١ٌخ / ٚؽذح 50ًِ فٟ ؽ١ٓ ثٍغذ اٌفؼب١ٌخ االٔض١ّ٠خ 100 / غُ 0.57ثٍغذ اٌىزٍخ اٌؾ٠ٛ١خ ٚأخفؼذ اٌىزٍخ اٌؾ٠ٛ١خ ٚاٌفؼب١ٌخ االٔض١ّ٠خ ٚاٌفؼب١ٌخ إٌٛػ١خ ػٕذ دسعبد . ًِ / ٍِغُ 28.5إٌٛػ١خ َ ْ ثغجت لذ ٠ؼٛد اٌٝ وْٛ ٘زا اٌّذٜ ِٓ اٌذسعبد اٌؾشاس٠خ ال٠ّضً اٌؾذ االِضً ٌّٕٛ 45- 35اٌؾشاسح ٚاٌّغزخذِخ فٟ ٘زٖ اٌزغشثخ ٚثبٌزبٌٟ فبْ أخفبع ِؼذي Bacillus stearothermophilusثىزش٠ب اِب اسرفبع اٌؾشاسح . ّٔٛ٘ب ٠ش١ش اٌٝ ٘جٛؽ اٌىزٍخ اٌؾ١ٛثخ ٚأخفبع اٌفؼب١ٌخ االٔض١ّ٠خ ٚاٌفؼب١ٌخ إٌٛػ١خ َْ فمذ ٠ؤصش ٘ٛ االخش ػٍٝ أخفبع ِؼذالد إٌّٛ ٌٍجىزش٠ب ٚثبٌزبٌٟ ٠ؤصش ػٍٝ أزبط االٔض٠ُ 60اٌٝ ٚلذ رجب٠ٕذ إٌزبئظ اٌزٟ رُ اٌؾظٛي ػ١ٍٙب فٟ ٘زٖ اٌذساعخ ػٓ ٔزبئظ . ٚ٘جٛؽ فؼب١ٌزخ االٔض١ّ٠خ ٚإٌٛػ١خ عجش 2012 ، 41 - 26 :( 1 ) 4ِغٍخ د٠بٌٝ ٌٍؼٍَٛ اٌضساػ١خ ، 36 ثؼغ اٌجبؽض١ٓ اٌز٠ٓ ٚعذٚا اْ اٌؾشاسح اٌّضٍٝ الٔزبط أض٠ُ أساث١ٕٛص ا٠ض١ِٚش٠ض ِٓ اٌجىزش٠ب رزشاٚػ ث١ٓ َْ ٠ٚؼٛد ٘زا اٌزجب٠ٓ اٌٝ اخزالف ِظذس االٔض٠ُ 60 – 35 (Yoon ، ْٚ؛ 2003 ٚآخش Lee ؽ١ش ٌذسعخ اٌؾشاسح ربص١ش ٚاػؼ ػٍٝ ِؼذالد إٌّٛ ( Kim ٚ Oh ، 2005 ؛ 2004ٚآخشْٚ ، . ٚاال٠غ ٌالؽ١بء اٌّغٙش٠خ إٌّزغخ ٌالٔضثُ Bacillus strearothermophilus HB4حأثٍز درخت انحزارة فً اَخبج اَشٌى أرابٍُىس اٌشويٍزٌش يٍ بكخزٌب . 6شكم كًبدة حبثت الَخبج االَشٌى % 0.15يظذرا نهكبربىٌ يع وخى االرابٍُىس بخزكٍش % 1.5 وببسخعًبل انكهٍسزول بخزكٍش 7.5يظذرا نهُخزوخٍٍ و ببنزقى انهٍذروخًٍُ نهىسظ% 1وخهٍظ يخسبو يٍ انكبسٌٍ وخالطت انهحى وانخًٍزة بخزكش : ححذٌذ األٌىَبث انًعذٍَت فً اَخبج االَشٌى - 6 Mgرفٛق اٌّؼبٍِخ اٌزٟ اعزؼًّ ف١ٙب ا٠ٛٔبد ( 6 )٠الؽع ِٓ اٌشىً +2 ٚ Mn +2 ِؼب ػٍٝ اٌزٛاٌٟ ، ِٓ ؽ١ش اٌىزٍخ اٌؾ٠ٛ١خ ٚاٌفؼب١ٌخ االٔض١ّ٠خ ٚاٌفؼب١ٌخ % 0.02ٚ % 0.15ٚثزشو١ض ًِ ٚاٌفؼب١ٌخ 100 /غُ 0.65 ار ثٍغذ اٌىزٍخ اٌؾ٠ٛ١خ ثؾذٚد . إٌٛػ١خ ثبٌّمبسٔخ ِغ ثم١خ اٌّؼبِالد ثظٛسح ػبِخ وبْ ٌال٠ٛٔبد اٌّؼذ١ٔخ . ٍِغُ / ٚؽذح 25.7ًِ ٚاٌفؼب١ٌخ إٌٛػ١خ / ٚؽذح45االٔض١ّ٠خ اٌّخزٍفخ ربص١ش أ٠غبثٟ فٟ ص٠بدح اٌىزٍخ اٌؾ٠ٛ١خ ٚاٌفؼب١ٌخ االٔض١ّ٠خ ٚاٌفؼب١ٌخ إٌٛػ١خ ِمبسٔخ ثّؼبٍِخ اٌغ١طشح اٌزٟ ٌُ ٠غزخذَ ف١ٙب اٞ ِٓ اال٠ٛٔبد اٌّؼذ١ٔخ اٌّزوٛسح ِّب ٠ش١ش اٌٝ اْ أزبط االٔض٠ُ ٠زؾفض ٌٚىٓ ٚعذ اْ اػبفخ ا٠ٛٔبد اٌىٛثٍذ وبْ ٌٙب ربص١ش الً فٟ ص٠بدح اٌىزٍخ اٌؾ٠ٛ١خ . ثٛعٛد ٘زٖ اال٠ٛٔبد . ٚاٌفؼب١ٌخ االٔض١ّ٠خ ٚاٌفؼب١ٌخ إٌٛػ١خ ِمبسٔخ ثجم١خ اٌّؼبِالد إر اشبسٚا اٌٝ ػشٚسح اؽزٛاء ( 2007 ) ٚآخشْٚ Zhangرزفك ٘زٖ إٌزبئظ ِغ ِبٚعذٖ اٌٝ اِالػ اٌّغ١ٕغ١َٛ Lactobacillus plantarumث١ئخ أزبط أض٠ُ أساث١ٕٛص ا٠ض١ِٚش٠ض ِٓ ثىزش٠ب Givry ٚ Duchironفٟ ؽ١ٓ اشبس.ػٍٝ اٌزٛاٌٟ % 0.02ٚ % 0.2ٚاِالػ إٌّغ١ٕض ثزشو١ض ٠زطٍت اؽزٛاء اٌٛعؾ ػٍٝ Lactobacillus bifermenansاٌٝ اْ االٔزبط ِٓ ثىزش٠ب ( 2008 ) Mn ِٓ ا٠ٛٔبد إٌّغ١ٕض2.5mMِب٠مبسة ِٓ +2 ثظٛسح ػبِخ فبْ ٚعٛد اال٠ٛٔبد اٌّؼذ١ٔخ صٕبئ١خ . ، Rhimi ٚ Bejar ؛ 2005 ٚآخشْٚ ، Lee) أساث١ٕٛص ا٠ض١ِٚش٠ض اٌزىبفؤ ٠ؼَذ ػشٚس٠ب الٔزبط أض٠ُ . اال اْ اٌزجب٠ٓ فٟ ٔٛع اال٠ٛٔبد اٌّؼذ١ٔخ أّب ٠ؼٛد اٌٝ ٔٛع اٌىبئٓ اٌّغٙشٞ ٚظشٚف اٌز١ّٕخ ( 2006 عجش 2012 ، 41 - 26 :( 1 ) 4ِغٍخ د٠بٌٝ ٌٍؼٍَٛ اٌضساػ١خ ، 37 Bacillusحأثٍز االٌىَبث انًعذٍَت فً اَخبج اَشٌى أرابٍُىس اٌشويٍزٌش يٍ بكخزٌب . 7شكم strearothermophilus HB4 يظذرا نهكبربىٌ بىخىد االرابٍُىس بخزكٍش % 1.5 وببسخعًبل انكهٍسزول بخزكٍش يظذرا % 1كًبدة حبثت الَخبج االَشٌى وخهٍظ يخسبو يٍ انكبسٌٍ وخالطت انهحى وانخًٍزة بخزكش % 0.15 . ْو 55 ودرخت انحزارة 7.5نهُخزوخٍٍ و ببنزقى انهٍذروخًٍُ نهىسظ : ححذٌذ يذة انحضبَت - 7 0.67، ٚثٍغذ الظب٘ب ٟٚ٘ ( 8شىً )ٌٛؽع اْ اٌىزٍخ اٌؾ٠ٛ١خ رضداد ِغ ص٠بدح ِذح اٌؾؼبٔخ عبػخ ِٓ اٌؾؼٓ ٚوبٔذ رٍه اٌض٠بدح ِزٛافمخ ِغ ص٠بدح اٌفؼب١ٌخ االٔض١ّ٠خ 72 ًِ ثؼذ ِشٚس 100/غُ ًِ ٚاسرفؼذ اٌفؼب١ٌخ إٌٛػ١خ / ٚؽذح 55 اٌٝ 35ٚاٌفؼب١ٌخ إٌٛػ١خ ، إر اسرفؼذ اٌفؼب١ٌخ االٔض١ّ٠خ ِٓ عبػخ ، اال أٗ ؽذس 72 اٌٝ 24 ثؼذ ص٠بدح ِذح اٌؾؼٓ ِٓ ٍِغُ / ٚؽذح 31.42 اٌٝ 20ِٓ 50 عبػخ ؽ١ش ثٍغذ اٌفؼب١ٌخ االٔض١ّ٠خ 96أخفبع فٟ اٌفؼب١ٌخ االٔض١ّ٠خ ٚاٌفؼب١ٌخ إٌٛػ١خ ثؼذ ِشٚس ٍِغُ ، ٚلذ ٠ؼضٜ رٌه اٌٝ دخٛي اٌجىزش٠ب فٟ ِشؽٍخ اٌضجٛد / ٚؽذح 28.3 ًِ ٚاٌفؼب١ٌخ إٌٛػ١خ /ٚؽذح اٌؼذدٞ اٚ اٌٙالن ٚالع١ّب فٟ اٌّضاسع اٌّغٍمخ ثغجت ٔفبر ِىٛٔبد اٌٛعؾ اٚ ؽذٚس رغ١شاد فٟ ؽج١ؼخ اٌٛعؾ اٌؾبِؼ١خ ِّب ٠ؤصش عٍجب ػٍٝ أزبط االٔض٠ُ ٚرؾًٍ اٌخال٠ب ، ٚرؾظً ٘زٖ اٌؾبٌخ وض١شا ػٕذِب اٌخفبعٟ ، )٠شاد رؾف١ض أزبط االٔض٠ّبد ٚخظٛطب االٔض٠ّبد اٌذاخ١ٍخ رؾذ اٌظشٚف اٌّضب١ٌخ الٔزبعٙب ٚلذ رجب٠ٕذ اٌذساعبد فٟ رؾذ٠ذ ِذح اٌؾؼٓ اٌالصِخ الٔزبط أض٠ُ أساث١ٕٛص ا٠ض١ِٚش٠ض رجؼب . (1990 الخزالف اٌىبئٓ اٌّغٙشٞ ٚظشٚف أزبط االٔض٠ُ خظٛطب ِب ٠زؼٍك ِٕٙب ثذسعخ اٌؾشاسح ٚاٌشلُ Givryٚ 2000 ٚآخشْٚ ،Roh) عبػخ 72 – 24ا١ٌٙذسٚع١ٕٟ اال ٔٙب ثشىً ػبَ رشاٚؽذ ث١ٓ ٚDuchiron ، 2008 ). عجش 2012 ، 41 - 26 :( 1 ) 4ِغٍخ د٠بٌٝ ٌٍؼٍَٛ اٌضساػ١خ ، 38 Bacillusحأثٍز يذة انحضٍ فً اَخبج اَشٌى أرابٍُىس اٌشويٍزٌش يٍ بكخزٌب . 8شكم strearothermophilus HB4 االرابٍُىس بخزكٍش ديظذرا نهكبربىٌ يع وخى % 1.5 وببسخعًبل انكهٍسزول بخزكٍش يظذرا % 1كًبدة حبثت الَخبج االَشٌى وخهٍظ يخسبو يٍ انكبسٌٍ وخالطت انهحى وانخًٍزة بخزكش % 0.15 .0ْو ، وبىخىد ايالذ انًغٍُسٍىو وانًُغٍٍُش بخزكٍش55 ودرخت انحزارة 7.5نهُخزوخٍٍ و ببنزقى انهٍذروخًٍُ نهىسظ . عهى انخىانً % 0.02و % 15 انًظـبدر عبِؼخ ثغذاد . ِطبثغ داس اٌؾىّخ ٌٍطجبػخ ٚإٌشش – اٌزم١ٕخ اٌؾ٠ٛ١خ . 1990. اٌخفبعٟ ، ص٘شح ِؾّٛد . عّٙٛس٠خ اٌؼشاق ٚصاسح اٌزؼ١ٍُ . ػٍُ االؽ١بء اٌّغٙش٠خ ٌالغز٠خ أٌغضء اٌؼٍّٟ . 1988. اٌذ١ٌّٟ ، خٍف طٛفٟ داٚد عبِؼخ اٌّٛطً . ِطبثغ داس اٌىزت ٌٍطجبػخ ٚإٌشش .اٌؼبٌٟ ٚاٌجؾش اٌؼٍّٟ Baek,D.H. , D.K. Oh , H.S. Sin and Y.J. Lee . 2004 . A new thermophile strain of Geobacillus thermodenitificans having L- arabinose isomerase activity for tagatose production J. of Microbiol. Biotechnol. 14 : 312- 316 . Beadle, J.R . , J.P Saunder and T.J. Wajad . 1992. Process for manufacturing tagatose World patent 92 / 12263. Deok-Kun O.H , H. J Kim , S.A. Ryu ,H. J. Rho and P .Kim .2001 . Development of an immobilization method of L-arabinose isomerase for industrial production of tagatose , Biotechnology letters 23 :1859 – 1862. Dische, Z. and E. Borenfreund .1951. A new spectrophotometric method for the detection and determination of keto sugars and trioses . J. Biol. chem. 192: 583-587 . Fischer I. 1974 . Family I . Bacillaceae : Bergey's manual of determinative bacteriology. 8 th ed. 529- 551 . Givry, S. and F. Duchiron .2008 .Optimization of culture medium and growth condition for production L-arabinose isomerase and D-xylose isomerase by lactobacillus bifermentans. Microbiology. 77 : 281-287 Harrigan,W.F.and E.M.Margaret . 1976 . Laboratory method in food and dairy microbiology . Academic press INC. New York . U.S.A. عجش 2012 ، 41 - 26 :( 1 ) 4ِغٍخ د٠بٌٝ ٌٍؼٍَٛ اٌضساػ١خ ، 39 Harry W. S. ,J. Paul and J. VanDemark . 1981 . Microbes in Action: A Laboratory Manual Of Microbiology , 3 rd edition . W .H. Freeman and Company . San Francisco . Izumori K. .2002. Bioproduction strategies for rare hexose sugars. Natur wissenschaften , 89:120-124. Izumori K. and K. i . Tsuzak .1988 .Production of D- tagatose from D- galactitol by Mycobactrium smegmatis . J. Ferment . Technol. 66: 225- 227. Izumori K., T. Miyoshi , S. Tokuda and K. Yamabe .1984. Production of D- tagatose from ducitol by Arthrobacter globiformis . Appl.Environ .Microbiol . 46:1055 -1057. Jorgensen f., O. Hansen and P. stougaard .2004 . Enzymatic conversion of D-galactose to D- tagatose: heterologous expression and characterization of a thermostable L- arabinose isomerase from Thermoanaerobacter mathranii . Appl Microbiol Biotechnol. 64:816 – 822. Kim B.C ; H. S. Lee., E. Choe and Y. pyun .2002. Cloning , expression and characterization of L- arabinose isomerase from Thermotoga neapolitana : bioconversion of D-galactose to D- tagatose using the enzyme .FEMS Microbiol lett. 212:121-126 Kim H.J and D.K. Oh .2005. Purification and characterization of an L- arabinose isomerase from an isolated strain of Geobacillus thermodenitrificans producing D-tagatose . J .Biotechnol. 120:162- 173 . Kim H.j ; P.u Prabh and J. Marimutha .2010. Characterization of an L- arabinose isomerase from Bacillus subtilis . Appl Microbiol Biotechnol. 85 : 1839-1847 . Lee D.W , H.g.jan , E. choe , B. Kim , S. J. Lee and S.B. Kim .2004. Characterization of a thermostable L- arabinose(D- galactose) isomerase from the Hyperthermophilic eubacterium thermotoga maritime . Appl Environ. Microbiol. 70:1397- 1404 . Lee S.J ,D. W. Lee , E. e Cho , Y. Hong , S.B Kim and Y . pyun .2005. Characterization of a themoacidophilic L- arabinose isomerase from Alicyclobacillus acidocaldarius : role of Lys-269 in pH optimum .Appl Environ .Microbiol. 71:7888- 7896. Livesey, G . and J. Brown .1996 . D-tagatose is a bulk sweetener with zero energy determined in rats . J. Nutr. 126 :1601-1609 . Lobanok , A.G. , L. I .Sapunova , Y.O. Dikhtievski , and I. O. Kazakevich .1998. Screening of Glucose isomerase producing microorganisk . World J . Microbiolo.l. and Biotechnol. 14 : 259 –262. Lowery, O.H. ,N. J. Rosebrough, A.L. Farr, and R.J. Randall . 1951 . Protein measurement with the folin phenol reagent. J. Biol. Chem. 193: 265- 275. Lu.Y. and Levin G.V. 2002.Removel and prevention of dental plaque with D- tagatose .Int.J. Cosmet. Sci. 24 :225- 234. عجش 2012 ، 41 - 26 :( 1 ) 4ِغٍخ د٠بٌٝ ٌٍؼٍَٛ اٌضساػ١خ ، 40 Maharani C. (1970) . Induction and repression of L- arabinose isomerase in Bacteriophage- infected Salmonella typhimurium . Journal of Virology. 541- 547 . Manjasetty B. and M. Chance .2006. Crystal structure of Escherichia coli L- arabinose isomerase (ECAI) , the putative target of biological tagatose production . J . Mol. Biol . 360 : 297 – 309. Marzur A. W. 1989. Functional sugar subistitutes with reduced calories . European patent 341062. Muniruzzaman S. , H . Tokunaga and K . Izumori .1994 . Isolation of Enterobacter agglomerans strain 221 e from soil , a potent D- tagatose producer from galactitol. J. ferment. Bioeng. 78:145-148 Patrick, J.W. and N. Lee . 1968 . Purification and properties of an L-arabinose isomerase from Escherichia coli. J. Biol. Chem . 243:4312-4318. Ponnandy, P. , M.K. Tiwari , J.Maramuthu and G. paramasamy .2008. Cloning and characterization of a novel L- arabinose isomerase from Bacillus licheniformis . Appl Microbiol. Biotechnol. 81 :283 – 290. Rhimi , M . and S. Bejar .2006. Cloning , purification and biochemical characterization of metallic – ions independent and thermoactive L- arabinose isomerase from the Bacillus stearothermophilus US100 strain. Biochim . Biophys. Acta . 1760: 191-199. Roh H. J. , S.H.Yoon and S.H.Kim .2000 . Preparation of L-arabinose isomerase originated from Escherichia coli as a biocatalyst for D- tagatose production Biotechnology letters . 22:197- 199 . Yoon ,S.H , P.Kim and D. K.Oh .2003. Properties of L- arabinose isomerase from Escherichia coil as biocatalyst for tagatose production . World J . Microbiol. , 19:47-51 . Zakaria A. 2001 . Production of natural and rare pentoses using microoraganism and their enzymes. Electronic J. of Biotechnol . 4 : 103 -111. Zehener L.R. .1988. D- tagatose as a low- calorie carbohydrate sugar and bulking agent . European patent 257626. Zehner, L.R , G. Levin , J. Saunders and J. Beadle .1995 . D- tagatose as anti – hyperglycemic agent . US pat 5,447, 971 . Zhang H. ; J iang B. and P. Beilei (2007) .Purification and characterization of L-arabinose isomerase from Lactobacillus Plantarum producing D- tagatose , World J. Microbiol. Biotechnol. 23:641- 646. عجش 2012 ، 41 - 26 :( 1 ) 4ِغٍخ د٠بٌٝ ٌٍؼٍَٛ اٌضساػ١خ ، 41 .OPTIMIZATION FOR L- ARABINOSE ISOMERASE PRODUCTION FROM LOCAL ISOLATE OF Bacillus stearothermophilus HB4. Hameed Abood Jabur Dept. of Food Sci. & Biotech- Coll. Of Agri.- Univ. of Baghdad. E. mail : dr_hameedm59@yahoo.com ABSTRACT In this study twelve of purred local isolate from Bacillus stearo thermophilus were obtained among 40 isolates from different sources of Iraqi soil. They were subjected to primary and secondary screening to select the isolate which produce the highest level of L- arabinose isomerase . It was found that the isolate B4 was the highest producer of the enzyme , with enzyme activity of 35 unit /ml. According to morphological and biochemical tests this isolate was identified as Bacillus stearothermophilus and designated as HB4 . The optimum conditions for production of L- arabinose isomerase from Bacillus stearothermophilus HB4 by submerged culture were achieved on broth medium containing 1.5% glycerol as carbon source and 0.15 % of L- arabinose as inducer and 1 % of mixture of casien, beef extract and yeast extract with equal quantity of each them as nitrogen source with 0. 15 % of magnesium sulfate and 0.02 % of manganese sulfate at pH of 7.5 after 72 hours of incubation at 55 C 0 . Under these conditions The enzyme activity was 55 U/ ml with increasing about 150 % comparing with same isolate before optimization. Key words :- L- arabinose isomerase ; Bacillus stearothermophilus HB4