ReSUMeN ABStRAct Phytoseiulus persimilis ha sido utilizado en programas de ma- nejo integrado de plagas como alternativa al uso de acaricidas para el manejo de Tetranychus urticae. Los daños ocasionados por T. urticae generan un costo de manejo cercano a los 4.500 dólares por hectárea, esta cifra corresponde aproximadamen- te al 30% del costo de los plaguicidas (Ceniflores, 2008). La implementación de esta estrategia de manejo debe considerar criterios de liberación basados en los niveles de población de T. urticae del cultivo, estimados a partir de una metodología de muestreo apropiada. En el presente trabajo, se propuso una metodología para estimar el nivel de infestación de T. urticae, para conocer la cantidad de P. persimilis a liberar en el cultivo de rosa y se evaluó la efectividad del control ejercido por P. persimilis. En el área experimental se tomaron 81 cuadros, en cada uno de ellos se muestrearon al azar tres plantas de rosa y se contó el número de individuos en tres hojas de cada tercio de la planta. Así mismo, se determinó el número óptimo de muestras para un muestreo bietápico. Se tuvo en cuenta la respuesta funcional como criterio de liberación de P. persimilis. La población de T. urticae estimada después de la liberación se dividió entre la población previa a la liberación para obtener un índice de control, el cual se comparó entre las estrategias de manejo. Con el control biológico se obtuvo una mayor re- ducción de la población de la plaga y una menor fluctuación de esta a través del tiempo. Phytoseiulus persimilis has been used in IPM programs as alternative to the use of acaricides in order to control the phytophagous mite Tetranychus urticae. The damages caused by T. urticae generate the cost of management about 4,500 dollars per hectare, which corresponds approximately to 30% of pesticide cost (Ceniflores, 2008). The implementation of this management strategy must consider the release criteria based upon the population levels of T. urticae in the crop estimated by means of appropriate sampling methods. In this research, a methodology for estimating the population density of T. urticae is proposed, in order to assess the quantity of P. persimilis to be released in the rose crop, and the effectiveness of control exerted by P. persimilis was evaluated. In the experimental area, 81 squares were taken, at each of them three rose plants were randomly selected and the number of individuals were counted were counted taken three leaves on the stratum on the plant. The optimum number of sampling units for a bietapic sampling was assessed. The functional response was assumed as a criterion to set the release of P. persimilis. The population density of T. urticae after each release was divided by the population prior to the release, in order to obtain an index control, which was compared between the management strategies. By means of the biological control a greater reduction in the population density and its lesser variation in time were obtained. Key words: mites, biological control, sampling.Palabras clave: ácaros, control biológico, muestreo. Fecha de recepción: febrero 15 de 2008. Aceptado para publicación: abril 9 de 2008 1 Biólogas, Facultad de Ciencias, Universidad Militar Nueva Granada, Bogotá. alekus47@gmail.com; alejandra_2601@hotmail.com 2 Docentes, Programa de Biología Aplicada, Facultad de Ciencias, Universidad Militar Nueva Granada, Bogotá. ecologia@umng.edu.co Introducción Colombia es el segundo país exportador de flores de corte a nivel mundial (Flórez et al., 2000). Hoy, uno de los requi- sitos de exportación es la disminución del uso de produc- tos químicos en busca de un desarrollo ambientalmente amigable y de bajo costo tanto para el hombre como para el medio ambiente (Gómez et al., 2004). Entre las principales plagas que atacan los cultivos de ro- sas están los ácaros del género Tetranychus. Estos causan pérdida de calidad, disminución en el crecimiento de las plantas y reducción en la producción de botones (Acosta et al., 2001). Aunque se desconoce el porcentaje de pérdidas de flores a causa de T. urticae, el costo de acaricidas para el control es cercano al 30% del costo de plaguicidas (F. Acosta, comunicación personal, 14 de diciembre de 2007). Por lo general, el control de dicha plaga se ha realizado mediante el uso de plaguicidas. Sin embargo, se han de- sarrollado diferentes estrategias de control que permiten mantener infestaciones por Tetranychus sp. a niveles tales que no representen pérdidas económicas ni problemas criterios para la liberación de Phytoseiulus persimilis Athias Henriot (Parasitiformes: Phytoseiidae) en cultivo de rosa Criteria for the release of Phytoseiulus persimilis Athias Henriot (Parasitiformes: Phytoseiidae) in rose culture Alejandra Hilarión1, Angie Niño1, Fernando cantor2, daniel Rodríguez2 y José Ricardo cure2 Agronomía Colombiana 26(1), 68-77, 2008 69 ecológicos, como es el caso del control biológico (Mendoza et al., 2001). Uno de los controladores más efectivos de T. urticae es el ácaro depredador P. persimilis, el cual presenta una alta capacidad de búsqueda y voracidad (Acosta, 2000), un ciclo de desarrollo menor que el de su presa y, junto con la proporción de sexos (4 hembras/1 macho), el desarrollo de las poblaciones es más rápido (Barreto, 2004). Para la implementación de P. persimilis en un programa MIP, que permita reducir la aplicación de acaricidas, es necesario realizar ensayos previos para determinar la distribución de T. urticae dentro del área de muestreo y posteriormente, tomar decisiones de manejo. Además es necesario tener en cuenta que P. persimilis, después de varias semanas de liberación, puede llegar a establecerse dentro del cultivo (Casey et al., 2007). En función de conocer la densidad de T. urticae y la me- todología de liberación de P. persimilis, el presente trabajo tuvo como objetivos determinar algunos criterios para la liberación de P. persimilis como controlador biológico de T. urticae en cultivo de rosa, variedad Versilia bajo inver- nadero, mediante el establecimiento de una metodología de muestreo directo. Este muestreo permitirá estimar la población de T. urticae susceptible de ser consumida y, a partir de esa información, aplicar el concepto de respuesta funcional de P. persimilis como criterio de liberación. Así mismo, evaluar la efecti- vidad de esta metodología mediante la comparación con la eficacia del control convencional utilizado en los cultivos de rosa e identificar el tipo de sustrato que facilita la dispersión de P. persimilis en campo y aumentar la sobrevivencia en el empaque de transporte del ácaro depredador al lugar de liberación en el cultivo y, por último, cuantificar el costo de liberaciones de P. persimilis como un sistema alterna- tivo al convencional para el manejo de poblaciones de T. urticae en rosa. Materiales y métodos Área de estudio El trabajo se realizó en un cultivo comercial de rosa, bajo condiciones de invernadero, ubicado en el municipio de Tenjo (Cundinamarca), durante los meses de marzo a diciembre de 2006. Se seleccionaron plantas de rosa de variedad Versilia de aproximadamente 2,5 años, sembradas en 162 camas de 32 m de longitud y 0,80 m de ancho, loca- lizadas en 32 naves de 476 m2 cada una en un invernadero de 15.232 m2, cuyas temperaturas alcanzaron los 4 ºC y 30 ºC. Las plantas sembradas en cada cama están dispuestas en dobles surcos, con una distancia de 15 cm entre ellos y de 15 cm entre plantas. El cultivo presenta una producción continua y un sistema de formación de plantas tipo agobio. El control químico consistió en aplicar esporádicamente Diafentiurion, con una concentración de 1,5 g·L-1, el cual fue aplicado cuatro veces durante el ensayo, y Bifenazate, con una concentración de 0,25 g·L-1, el cual fue aplicado una vez a lo largo del ensayo. determinación de la distribución espacial de T. urticae en cultivo comercial de rosa Cada cama de 32 m de longitud se dividió en ocho cuadros, los cuales se tomaron como unidad de evaluación. Cada cuadro estaba conformado por un total de 54 plantas y en cada muestreo se evaluó un promedio de 81 cuadros, cada uno de los cuales se escogió al azar de cada tercera cama del invernadero, con el fin de que no se presentara interferencia entre los tratamientos: control biológico y control químico. En cada cuadro se contaba el número de individuos de todos los estados de desarrollo de T. urticae presentes en tres hojas de cada tercio de la planta. Para determinar la distribución espacial del ácaro fitófago se calculó la relación varianza-media (ID), a partir de la cual se puede establecer si la distribución es agregada (S2/x > 1), uniforme (S2/x < 1) o al azar (S2/x = 1) (Pedigo y Buntin, 1994). Este ensayo se realizó durante los meses de marzo y abril de 2006, tiempo durante el que se realizaron cinco repeticiones del muestreo. determinación de la distribución espacial de T. urticae en plantas y hojas de rosa De cada cuadro se tomaron tres plantas al azar y cada plan- ta se dividió en tres tercios: el primer tercio conformado por el agobio; el segundo, del agobio al punto de corte y el tercero, del punto de corte al botón floral. Se muestrearon tres hojas de cada tercio para determinar la distribución de los individuos en la planta y el porcentaje de estos en cada tercio. Para establecer la distribución de la plaga en las hojas, se tuvo en cuenta la cantidad de individuos presentes en cada foliolo, se hicieron cinco muestreos durante el periodo de evaluación. En cada muestra se contó el total de huevos y de individuos móviles. A través del software estadístico R se realizó un análisis de varianza, en el que se tomaron como factores los tercios, con el fin de determinar si existían o no diferencias en el número de individuos y la proporción de estos en cada tercio. La diferencia en el número de in- dividuos se determinó comparando el número de estos, ya 2008 Hilarión, Niño, Cantor, Rodríguez y Cure: Criterios para la liberación de Phytoseiulus persimilis Athias Henriot... 70 Agron. Colomb. 26(1) 2008 que el promedio de individuos por hoja varía, al igual que el promedio de estos por tercio. Además, se realizó otro análisis de varianza y una prueba de Tukey con foliolos como tratamiento para establecer la distribución de los individuos en la hoja. El Anova se realizó con el número de individuos y, al encontrar di- ferencias, se sacaron las proporciones. Los datos fueron transformados por medio Box Cox (Gómez, 1999), para mejorar la aproximación de los conteos a una distribución normal. Para cada proporción se calculó un intervalo de confianza, con el propósito de comparar las proporciones de los individuos en los tres tercios de la planta. determinación del tamaño de muestra para las diferentes unidades de muestreo Se propone utilizar la distribución binomial negativa, que se usa para estimar el tamaño de muestra cuando la pobla- ción presenta una distribución agregada. En este modelo se incluye el parámetro k (factor de agregación). Sin embargo, el valor de k generalmente varía con la densidad media, de forma que el tamaño de la unidad de muestra estimado cambiaría a través del tiempo conforme a la densidad de la población (Pedigo y Buntin, 1994). Como consecuencia se han utilizado índices para desa- rrollar planes secuenciales de clasificación o estimación basados en la relación entre la varianza y la media, como es el caso de la Ley de Poder de Taylor (LPT) (ecuaciones 34 y 35 que se encuentran en Pedigo y Buntin, 1994). Las fórmulas para adaptar o aplicar el muestreo trietápico para la Ley de Taylor sugiere que el intercepto (a) no tiene una significancia biológica y varía con la técnica de muestreo empleada; mientras que la pendiente (b) es una constante que depende del comportamiento de la especie o el ambien- te. Este parámetro puede ser utilizado para determinar el patrón de distribución (Shelton y Trumble, 1986; Pedigo y Buntin, 1994). La metodología para el muestreo en etapas se basó en lo propuesto por Gómez (1999) (tabla 1) y la estimación de tamaños de muestra se realizó mediante la aplicación de la Ley de Poder de Taylor al muestreo en etapas como lo plantean Shelton y Trumble (1986). Con el fin de establecer las unidades de muestreo que se deben seleccionar, se tomaron como unidades primarias los cuadros (a), como unidades secundarias las plantas dentro del cuadro (b) y como unidades terciarias las hojas dentro de la planta (r). A dichas muestras se les realizó un análisis de varianza para un muestreo en etapas. Una vez se obtuvieron los componentes de varianza para cada etapa, se estimó la proporción de cada varianza sobre el total, para determinar si era necesario considerar las tres unidades de muestreo (hojas, plantas y cuadros). Posteriormente, se estimaron los parámetros de pendiente e intercepto necesa- rios para aplicar la Ley de Poder de Taylor (LPT) mediante una regresión lineal. A través de la LPT se estimó el tama- ño de muestra para aquellas unidades donde la varianza cambia en función de la densidad. Mientras que, para las unidades donde no hay una relación entre la varianza y la media el tamaño de muestra se estimó mediante el mues- treo por etapas propuesto por Gómez (1999). comparación de la efectividad de P. persimilis para el control de poblaciones de T. urticae, en función de la respuesta funcional como criterio de liberación, y del control convencional Para comparar la efectividad de dos métodos de control para el manejo de T. urticae en rosa, se definieron dos trata- mientos: (1) liberación semanal de P. persimilis en relación a la respuesta funcional y (2) aplicaciones semanales por aspersión de acaricidas. Para esta evaluación se seleccionaron dos naves del inver- nadero, cada una con un tamaño de 476 m2 y en las que se tomaron cuatro camas a las cuales se les aplicó un determi- nado tratamiento. Los tratamientos se implementaron en campo, bajo un diseño completamente al azar con cuatro repeticiones. Para el caso del control biológico la densidad a liberar variaba semanalmente, pero se mantenía cons- tante la proporción predador-presa, la cual dependía del σ2 = varianza de unidades terciarias a = número de unidades primarias muestreadas σ2S/P = varianza de unidades secundarias b = número de unidades secundarias muestreadas σ2P = varianza de unidades primarias r = número de unidades terciarias muestreadas Fuentes de variación G.L. Sumas de cuadrados cuadrado medio esperanza del cuadrado medio Unidades primarias a-1 S.C. (P) S.C.(P)/a-1 σ2+rσ2S/P+rbσ 2 P Unidades secundarias a (b-1) S.C.(S/P) S.C.(S/P)/a(b-1) σ2+rσ2S/P Unidades terciarias ab(r-1) S.C.(T/S) S.C.(T/S)/ab(r-1) σ2 Total (abr-1) S.C. (T) tABLA 1. Análisis de varianza para un muestreo en tres etapas, según Gómez (1999). 71 número de individuos-plaga presentes para cada muestreo. En el caso del control químico se tuvo en cuenta el plan de aplicaciones que llevaba la finca durante el tiempo del ensayo, el cual consistió en aplicar los productos Diafen- tiurion y Bifenazate. El primero se aplicó cuatro veces y el segundo una vez, durante la evaluación de los diferentes tratamientos de control. Se realizaron liberaciones P. persimilis de acuerdo con la densidad de la población de T. urticae y a la respuesta fun- cional de P. persimilis (Fernando y Hassell, 1980). La den- sidad del depredador se ajustó multiplicando la densidad a liberar, la cual es la relación predador-presa determinada mediante la tasa máxima de consumo de la respuesta fun- cional, por el porcentaje de mortalidad (7%), de forma que se compensó la cantidad de depredadores que posiblemente murieran por causa del sustrato y el transporte. Los ácaros eran adultos con una edad promedio de siete días, se liberaron en el primer tercio de las camas a las 3:00 p.m., luego de la cosecha. Después de 24 h de la liberación se realizaba un muestreo en los mismos cuadros que fue- ron evaluados previamente a la liberación. Este muestreo consistió en tomar dos cuadros por cama, de cada cuadro se muestreaban dos hojas del tercio inferior y se contaban los cuatro primeros foliolos de la misma que van desde el foliolo apical hacia abajo y se contaban tanto huevos como estados móviles de T. urticae de P. persimilis, para evaluar la presencia de P. persimilis y el nivel de control obtenido. El análisis de datos contempló únicamente los estados de huevo y larva de T. urticae, considerados como los estados preferidos por P. persimilis (Fernando y Hassell, 1980). A pesar de que solo se tienen en cuenta estos estados para la liberación de P. persimilis y los adultos son los que causan el principal daño en la planta, lo que se busca es causar un rompimiento en la dinámica poblacional. El control químico o convencional se realizó mediante la aplicación de los productos Diafentiurion con una con- centración de 1,5 g·L-1, el cual fue aplicado cuatro veces durante el ensayo, y Bifenazate con una concentración de 0,25 g·L-1 aplicado una vez a lo largo del ensayo. Registro de variables en campo y análisis Se registraron cambios en el número de huevos e indivi- duos móviles durante el muestreo previo y posterior a la liberación o aplicación del control convencional y con estos datos se evaluó el nivel de control. Se realizó un análisis de varianza a los índices de efectividad, para establecer si, en ese sentido, había diferencias entre los tratamientos de con- trol. Adicionalmente, se determinó el efecto de ambos tra- tamientos sobre la proporción de individuos de cada estado. cuantificación del costo de liberaciones de P. persimilis como un sistema alternativo al convencional para el manejo de poblaciones de T. urticae en cultivo comercial de rosa Se realizó una comparación del costo (en pesos por área de evaluación (4 camas)) de muestreo y liberación de individuos del ácaro depredador para el control biológico con el costo de la implementación del control convencio- nal. Por lo anterior, fue necesario registrar el número de ácaros depredadores liberados, así como la frecuencia de aplicación de ambos métodos de control. Para estos dos tratamientos se realizó el mismo tipo de muestreo y, al final, una comparación de costos entre ambos. Resultados y discusión distribución espacial de T. urticae en cultivo comercial de rosa El índice de relación varianza-media (ID) para la población de T. urticae presenta valores mayores a uno. Por lo anterior se puede afirmar que la población de T. urticae presenta una distribución de tipo agregado. Esta clase de distribución caracteriza las poblaciones de T. urticae, las cuales tienden a alcanzar altas densidades poblacionales al formar focos. Este resultado concuerda con trabajos realizados por Na- chman (1981), Zhang y Sanderson (1995), entre otros. distribución de T. urticae en plantas de rosa variedad Versilia Se puede establecer que la mayor población se encuentra en la hoja del tercio inferior (alrededor del 72%), mientras que en las hojas del tercio medio y superior se encuentra alrededor del 22% y 6% de la población, respectivamente (figura 1). La preferencia de los ácaros por el tercio inferior en rosa puede estar atribuido a que en esta zona se atenúan los cambios de temperatura fuertes (Salas, 2001; Cifuentes y Vanegas, 1987). Adicional a esto, la plaga puede encontrar hojas frescas de rosa debido al sistema de formación tipo agobio, el cual permite un aumento en el número de ho- jas, de manera que obtiene los recursos preferidos para la oviposición (Santamaría et al., 2002). distribución de T. urticae en hojas de rosa variedad Versilia Se presentaba una distribución heterogénea de T. urticae en los diferentes foliolos de la hoja (P = 2,2e-16) (figura 2). Se encuentra la mayor proporción de ácaros en el foliolo 2008 Hilarión, Niño, Cantor, Rodríguez y Cure: Criterios para la liberación de Phytoseiulus persimilis Athias Henriot... 72 Agron. Colomb. 26(1) 2008 apical y la densidad disminuye a medida que los foliolos se alejan del mismo. Sin embargo, no se presentaron dife- rencias significativas entre los foliolos opuestos (2-3, 4-5 y 6-7) (P = 0,629). Esta tendencia también fue registrada por Cifuentes y Vanegas (1987) y Acosta (2003) en cultivo de rosa con T. urticae. La preferencia por dicho foliolo se puede atribuir a que este presenta una mayor área, tiene mejores condiciones de iluminación por estar más alejado del tallo y además tiene un mayor contacto con las corrientes de aire (Cifuentes y Vanegas, 1987). Al determinar la distribución de los individuos en la hoja se puede reducir el tiempo de evaluación de la unidad, de manera que no se evalúe toda la hoja, sino una parte de la misma. Se recomienda contar el total de individuos presen- tes en los primeros cuatro foliolos de la hoja, ya que en estos se ve representado aproximadamente el 75% del total de individuos de la hoja, por lo cual se requiere estimar solo el 25% de la población de la misma, en cambio, si se cuentan dos o tres foliolos, el error estándar es aproximadamente el 13% mayor que si se cuentan los cuatro sugeridos y, en el caso de contar cinco o seis foliolos, el error estándar es menor, pero no existiría un ahorro en el tiempo que es lo que se busca con este muestreo. tamaño de muestra para las diferentes unidades de muestreo Los porcentajes fluctuaban debido a que los porcentajes de varianza para cada una de las etapas fueron altos, lo que indica que no se puede omitir ninguna de las etapas, ya que cada una tiene un efecto importante sobre la varianza total (tabla 3). Se encontró que la distribución espacial en las hojas no cambia en función de la densidad de individuos, por lo que no es necesario emplear la LPT para estimar el tamaño de muestra para dicha etapa (tabla 2). El tamaño de muestra para hojas se estimó mediante el muestreo en etapas pro- puesto por Gómez (1999) y se obtuvo que la unidad mínima de muestreo es una hoja/planta. Por otro lado, se observó una relación entre la varianza y la media para las unidades de cuadros y plantas, de forma que la cantidad de unidades a muestrear dependerá del promedio de individuos encontrados en una hoja (figuras 3 y 4), como lo establece la LPT. El tamaño de muestras para plantas estará comprendido entre una y cuatro plantas por cuadro, mientras que para cuadros no solo variará de acuerdo al promedio de indivi- duos por hoja, sino que además dependerá del coeficiente de variación que se desee manejar (figura 4). tABLA 2. Valores de parámetros para las unidades de muestreo, obteni- dos mediante regresión lineal, los cuales son la pendiente y la signifi- cancia de cada una de estas etapas. b = pendiente; se asume pendiente significativa si P<0,05. Unidad b P Hojas 0,84 0,11 Plantas 1,28 0,02 Cuadros 1,07 0,07 FIGURA 1. Distribución vertical de la población de T. urticae en una hoja de los diferentes tercios altitudinales de plantas de rosa variedad Versilia. FIGURA 2. Distribución porcentual de T. urticae en foliolos de una hoja de rosa variedad Versilia. 73 Para estimar la densidad de huevos y larvas de T. urticae con el fin de utilizar dicha información junto con la respuesta funcional como criterio de liberación de P. persimilis, se propone el siguiente protocolo: 1. Realizar un muestreo piloto, en el cual se escogen cinco plantas al azar, tomar una hoja por planta y contar el total de individuos en la hoja. 2. Estimar el promedio de individuos por hoja. Sumar el total de individuos de todas las hojas y dividirlo en el número de hojas muestreadas (5). FIGURA 4. Número de cuadros del área de cultivo a muestrear basado en el promedio de individuos de T. urticae por hoja. Incluye costo de muestreo. FIGURA 3. Número de plantas de rosa a muestrear basado en el prome- dio de individuos de T. urticae por hoja. tABLA 3. Valores y porcentajes de varianza de cada etapa para los dife- rentes muestreos. Monitoreo etapa Varianza Porcentaje 1 Hoja 1621 0,72409172 Planta 412 0,18403812 Cuadro 205,666667 0,09187016 2 Hoja 3425 0,47447165 Planta 2623,66667 0,36346145 Cuadro 1169,88889 0,162 0 6 6 9 3 Hoja 1735 0,34247176 Planta 1568,66667 0,30963921 Cuadro 1762,44444 0,34788902 4 Hoja 740 0,28273051 Planta 518,000 0,19791136 Cuadro 1359,33333 0,51935813 5 Hoja 902 0,51305062 Planta 364 0,20704038 Cuadro 492,111111 0,27990899 2008 Hilarión, Niño, Cantor, Rodríguez y Cure: Criterios para la liberación de Phytoseiulus persimilis Athias Henriot... 74 Agron. Colomb. 26(1) 2008 3. A partir del promedio de individuos obtenido, deter- minar el tamaño de muestra para cuadros por área de muestreo (figura 4). El total de cuadros por área varía según el coeficiente de variación (CV) con el que se desee trabajar (5%, 10%, 25%): entre más alto sea el porcen- taje de variación que se tome, disminuye el costo, ya que para un CV del 25% se va a muestrear un menor número de cuadros en comparación si se toma un CV del 5%. Los cuadros a muestrear se escogen de forma aleatoria en toda el área de muestreo. 4. El número de plantas por cuadro a muestrear también se determinará según el promedio de individuos por hoja (fi- gura 3). Las plantas se escogen al azar dentro de los cuadros. 5. El tamaño de muestra para hojas es constante (una hoja por planta). Escoger al azar una hoja del tercio inferior. 6. Contar el total de individuos en estado de huevo y larva presentes en los primeros cuatro foliolos de la hoja. 7. Contar el total de hojas por tercio de las plantas que se muestrearán por cuadro, según el promedio de indi- viduos por hoja A partir de esta información, sacar el promedio del número de hojas presentes por cada tercio. 8. Sumar para cada hoja el total de huevos y larvas pre- sentes en los cuatro foliolos muestreados. Calcular el promedio de individuos para las diferentes hojas mues- treadas en el cuadro (el número de hojas por cuadro dependerá del tamaño de muestra para plantas). 9. El valor promedio obtenido anteriormente se debe multiplicar por 1,35 para estimar el número de huevos o larvas presentes en una hoja del primer tercio. 10. El número de huevos o larvas presentes en una hoja del tercio inferior es multiplicado por 0,4 para estimar el total de individuos que se encuentran en una hoja, tanto del tercio medio como del superior. 11. Multiplicar el promedio de hojas del tercio inferior cal- culado en el numeral cinco, por el número de huevos o larvas presentes en una hoja del tercio inferior, estimado en el numeral nueve. Esto permitirá calcular el número de individuos que se encuentran en el tercio inferior. 12. Para estimar el número de individuos presentes en el tercio medio y superior, multiplicar el promedio de hojas del tercio medio y superior calculado en el punto siete por el número de huevos o larvas presentes en una hoja del tercio medio y superior estimado en el punto diez. 13. Al sumar los valores obtenidos para cada tercio de la planta (puntos 11 y 12) se obtendrá el número total de individuos de la plaga por planta. 14. Este resultado se debe multiplicar por el total de plantas presentes en el área de muestreo. 15. Finalmente, a partir del resultado obtenido en el pun- to 14 y al tener en cuenta la respuesta funcional de P. persimilis, se podrá determinar el número de ácaros depredadores a liberar. comparación de la efectividad de los diferentes métodos de control con base en el índice de efectividad En la figura 5 se puede observar la comparación de los ín- dices de efectividad que se alcanzaron con los métodos de control utilizados para el manejo de las poblaciones de T. urticae. Las liberaciones se realizaron teniendo en cuenta la relación predador-presa, las cuales variaban en cada uno de los muestreos. Aunque no se presentaron diferencias significativas en- tre los tratamientos para huevos (P = 0,07), para larvas (P = 0,38) y para ninfas (P = 0,09), se observa que en el tratamiento con control biológico no se logró un control efectivo al iniciar las liberaciones, pero en los monitoreos posteriores la tendencia general del índice es a disminuir, ya que, a medida que se acerca a cero, se está indicando que el control se hace más efectivo en el caso del control bioló- gico. Es decir que el control biológico al principio resulta poco efectivo, pero a medida que el tiempo transcurre, la efectividad se incrementa, posiblemente como resultado del establecimiento de los ácaros depredadores. Según Andrews et al. (1989) y Barreto (2004), el control biológico puede ser mejor que el químico pero la diferencia solo es evidente en un plazo prolongado. FIGURA 5. Comparación de índices de efectividad del control biológico y el control químico de T. urticae en cultivo de rosa. 75 Por otro lado, con el control químico se obtuvieron valores superiores o iguales a uno, lo que indicaría que en la mayo- ría de casos no hubo efecto sobre la densidad de población o, por el contrario, la población aumentó después de la aplicación. Este comportamiento frente al control químico puede ser atribuido a la resistencia previa que presentaban los T. urticae, ya que esta se puede presentar en algunas especies debido a la selección de poblaciones genética- mente resistentes (Malais y Ravensber, 1991); resistencia que, en muchos casos, es favorecida por uso de acaricidas con composición química similar y la alta frecuencia de aplicación (Criollo y Duarte, 2004; Marín, 2002). Esta última aumenta debido a que no todas las fases del ciclo requieren del mismo tipo de acaricida, lo que favorece el desarrollo de numerosas y superpuestas poblaciones en corto tiempo (Marín, 2002), de forma que productos que antes eran efectivos para controlar ciertas plagas pierden efectividad (Andrews et al., 1989). efecto de los métodos de control sobre la proporción de individuos de cada estado Para el control biológico, como se observa en la figura 6, se obtuvo una disminución en la densidad de huevos y larvas después de la liberación. La depredación sobre los estados más jóvenes de la plaga puede ser atribuida a la preferencia de P. persimilis sobre huevos y larvas (Fernando y Hassell, 1980). Sin embargo, se esperaba un control total de dichos estados porque la densidad de depredadores liberados se estimó a partir de la respuesta funcional, de forma que la cantidad liberada sería suficiente para consumir el total de individuos de T. urticae pertenecientes a los estados susceptibles a la depredación. Para el caso del control convencional, en la mayoría de los casos no se ve un efecto en la proporción de los diferentes es- tados (figura 7). Esto puede explicarse mediante las caracte- rísticas de los productos aplicados, los cuales afectan todos los estados de la plaga (Diccionario HC Agropecuario, 2005). costo de liberación de P. persimilis como sistema alternativo al convencional para el manejo de poblaciones de T. urticae en un cultivo comercial de rosa Al comparar los dos métodos de monitoreo, se observa que el directo propuesto, aunque no permite una reducción de los costos, aporta una información más precisa sobre la po- blación de la plaga comparado con el monitoreo presencia- ausencia (tabla 4). La información sobre variabilidad y costo de la técnica es esencial para seleccionar la mejor técnica, ya que una técnica de muestreo aceptable debe maximizar la precisión mientras minimiza costos (Pedigo y Buntin, 1994). Por otro lado, aunque el control biológico involucra un mayor costo de implementación, provee otros beneficios comparados con el control químico. Este método de control tiene un carácter duradero, porque permite una estabilidad entre el enemigo natural y la plaga, no tiene efectos colaterales sobre el ambiente, puesto que no causa daños al medio por su selectividad y seguridad y aumenta la complejidad faunística del ecosistema (Andrews et al., 1989; Barreto, 2004). FIGURA 6. Proporción de cada uno de los estados de T. urticae en el tratamiento con control biológico, para el monitoreo previo (M) y posterior (E) a la liberación. 2008 Hilarión, Niño, Cantor, Rodríguez y Cure: Criterios para la liberación de Phytoseiulus persimilis Athias Henriot... 76 Agron. Colomb. 26(1) 2008 conclusiones • Para el manejo de cualquier plaga agrícola con libera- ciones de enemigos naturales es necesario establecer los criterios de liberación, con el fin de generar las condi- ciones más favorables que permitan obtener máximos índices de control. Rubro costo (pesos colombianos) Porcentaje Costo producción / invernadero $64.147.159 Costo producción / área $1.583.880 Costo acaricidas aplicados / área $142.549 9,00 Costo depredadores liberados / área $683.718 43,17 Costo muestreo presencia-ausencia / invernadero $600.000 0,94 Costo muestreo directo (26 ind / hoja) /invernadero (CV = 0,1) $324.411 0,51 Costo implementación de control químico / área $742.549 46,88 Costo implementación de control biológico / área $1.008.129 63,65 tABLA 4. Costos de implementación de distintos métodos de muestreo y de manejo de plagas durante el tiempo de evaluación en cultivo de rosa (6 meses). CV = coeficiente de variación. Área de evaluación = 4 camas. Invernadero = 162 camas. FIGURA 7. Proporción de cada uno de los estados de T. urticae en el tratamiento convencional, para el monitoreo previo (M) y posterior (E) a la aplicación. • Para el caso del control biológico de T. urticae con li- beraciones de P. persimilis en cultivo de rosa variedad Versilia, estos criterios fueron definidos así: (1) Realización de un muestreo de área vegetal afectada por T. urticae, teniendo en cuenta un muestreo por eta- pas en hojas por plantas, plantas por cuadros y cuadros por área de muestreo. El número de muestras a tomar dependerá del promedio de individuos encontrados por hoja, que se encuentren en la edad susceptible de ser consumidos por P. persimilis. Con el fin de reducir tiempo en el muestreo y obtener una estimación más precisa de la población de la plaga, el muestreo de hojas debe estar dirigido hacia el tercio inferior de la planta y se debe contar el total de individuos de cada estadio presentes en los primeros cuatro foliolos de la hoja. (2) Aplicación de la relación predador-presa, que es el máximo número de individuos que puede consumir un individuo de P. persimilis por unidad de tiempo determi- nada en 24 h para estimar el número de depredadores que se debe liberar según la población de T. urticae susceptible de ser consumida que se estimó en el muestro anterior. Agradecimientos A la Universidad Militar Nueva Granada por el apoyo financiero del proyecto identificado con el código CIAS- 2003-007, y a la empresa Flores de Tenjo por el apoyo logístico para el mismo. 77 Gómez, S., M. Pérez, C. Barreto, M. García, J. Cure y E. Torrado. 2004. Introducción del depredador Phytoseiulus persimilis como componente del manejo integrado de la arañita roja Tetranychus urticae. Asocolflores 65, 43-58. Diccionario HC Agropecuario. 2005. Vademécum de productos agropecuarios. Edición 15. HC Ediciones, Bogotá. Jiménez, L. 1997. 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