EFECTO DE THIDIAZURON y CLORURO DE COLINA COMO BIORREGULADORES SOBRE EL RENDIMIENTO Y LA CALIDAD DEL FRUTO EN TRES VARIEDADES DE MANZANO (Malus domestica Borkh.) Effect ofthydiazuron and choline chloride bioregulators on yield and fruit quality ofthree apple (Malus domestica Borkh.) varieties Mauricio Benincore', Víctor Raúl Barbosa' y Gerhard Fischer' RESUMEN Con el fin de mejorar rendimiento y calidad del fruto de la manzana nacional, se evaluaron los biorreguladores Thidiazuron (TOZ) y Cloruro de Colina (CC) como supuestos estimuladores del creci- miento y desarrollo del fruto en las variedades 'Princesa', 'Golden Delicious' y 'Gala' en la zona de «La Calera» (2650 msnm). Para tal fin, se aplicaron 50, lOOY150 mg-L" de TOZ entre los 30 y45 días después de floración (ddt) Y500, 1000 Y1500 mg-L-' de CC 118ddf, bajo diseño completamente aleatorizado para 'Princesa' y 'Golden Delicious' y bloque completos al azar para 'Gala'. Thidiazuron actuó como agente químico raleante y como citoquinina, disminu- yendo en 'Golden Delicious' el número de frutos cosechados y la acidez, pero aumentando el peso promedio del fruto. En 'Gala', TOZ aumentó el número de frutos por árbol, a 150 mg-L-' aumentó la coloración mientras que disminuyó la concentración de sólidos solubles (SS). En la variedad 'Princesa', TOZ solamente incrementó el contenido de sólidos solubles. Por otra parte, en 'Gala', CC disminuyó el número de frutos por árbol, aumentando el peso, el volumen y el contenido de SS de los mismos, especialmente a 500 mg-L"; igualmente, en 'Golden Delicious' produjo frutos 'más alar- gados con mayores contenidos de SS y una menor consistencia Palabras claves: Fitohormonas, maduración, citoquininas, pos cosecha, fisiología vegetal. SUMMARY In order to improve yield and quality of Colombian apple fruits, Thydiazuron (TOZ) and Choline Chloride (CC) biorregulators were evaluated as supposed stimulants of growth and development of 'Princesa', 'Golden Delicious' y 'Gala' varieties in the «La Calera» zone (2650 masl). 50, lOOand 150 mg-L:' ofTOZ were sprayed between 30 and 45 days after blooming (dab) and 500, 1000 and 1500 mg-L-' ofCC 118 dab, using a completely randomized design for 'Princesa' and 'Golden Delicious' and a completely randomized block design for 'Gala'. TOZ showed chemical thinning and cytokinine activity, decreasing the number and acidity ofharvested fruits, but increased mean fruit weight, In 'Gala', TOZ increased the harvested fruit number per tree; with 150 mg-L:' fruit color increased while soluble solids (SS) concentration declined. On the other side, in 'Gala' apples, CC applications decreased fruit number per tree and showed higher mean weights, volume and SS content of fruits, especially with 500 mg-L:'. In 'Golden Delicious' CC produced oblong fruits with higher SS content and lower flesh firrnness. . Key words: Phytohormones, ripening, cytokiníns, postharvest, plant physiology. INTRODUCCION El cultivo del manzano en Colombia lleva varios años establecí- do, pero, a pesar de las ventajas geográficas y un gran número de microclimas que ofrece el país, aún, no se ha logrado consoli- dar una producción continua de altos rendimientos con buena calidad, debido a la falta de tecnologías adecuadas que contribu- yan a mejorar los niveles de producción y calidad actuales. Como consecuencia, se obtienen cosechas con altos porcentajes de fruta de baja calidad, siendo éste uno de los problemas más limitantes, lo cual se ve, ampliamente, reflejado en los altos nive- les de importación de fruta de otros países, como Chile, Estados Unidos y algunos de Europa. Se ha observado que el reducido tamaño, así como otros as- pectos negativos en cuanto a palatabilidad y presentación de la fruta nacional, hacen que los precios del mercado no incentiven su cultivo y, además, su exportación se hace imposible por no cumplir los requisitos internacionales de calidad. Los frutos de las variedades 'Princesa', 'Golden Delicious' y 'Gala' poseen excelentes cualidades palativas, pero, en Colombia, debido a la falta de calidad en algunas de sus propiedades físicas y químicas, tales como el reducido tamaño.del fruto que se presen- ta en un alto porcentaje de la cosecha y la desuniformidad en color, se dificultan su comercialización, por la menor aceptación en el mercado, en comparación con la fruta importada. Estudios realizados en Brasil, Japón e Italia han mostrado que, con el uso de Thidiazuron (TOZ) y Cloruro de Colina (CC), como agentes bioestimuladores del crecimiento, se pueden obtener fru- tos de mayor tamaño y peso y con una mejor palatabilidad. El TDZ (N-Phenyl-N' -1,2,3,-thidiazol-5-ylurea) es un compuesto nitrogenado, que pertenece al grupo de las fenilúreas sustituidas, al igual que otros compuestos, como las citoquininas (Yang el al., Ingenieros Agrónomos, Facultad de Agronomía, Universidad Nacional de Colombia, Bogotá Profesor Asociado, Facultad de Agronomía, Universidad Nacional de Colombia. Bogotá. E-mail: gerfis@impsat.net.co Agronomía Colombiana, 2000.17: 91-98 92 Agronomía Colombiana Vol. 17 1992; Greene, 1995; Reynolds etal., 1992; Itai etal., 1995). Enkiwi tActinidia deliciosa), aplicando TDZ 20 días después de la flora- ción, se encontró que el peso de los frutos aumentó entre un 50 y un 60 %, a su vez, TDZ mostró efectos en la maduración del fruto, lo cual se refleja en una menor consistencia de la pulpa y acidez titulable y Un mayor contenido de sólidos solubles (Famiani et al., 1990). Resultados obtenidas en Brasil (Anónimo, s.f.) en manzano, variedades 'Gala' y 'Golden Delicious', aplicando el TDZ en con- centraciones a partir de 50 mg-L: y en la época de la caída de pétalos, mostraron efectos sobre la formación de frutos. En la va- riedad 'Gala', el tamaño del fruto aumentó notablemente. A dosis más altas (500 mg-L") se encontraron deformaciones y hundimien- to en el área de los pétalos; las frutas mostraron mayor consisten- cia, una coloración roja más profunda, aunque ningún efecto en el sabor. La variedad 'Golden Delicious' mostró hábito similar, aun- que más débil en respuesta que 'Gala'. El Cloruro de Colina (HOCH2CH2N(CH3)3Cl) es una molécula, ampliamente, reportada como suplemento alimenticio en dietas nutricionales de animales (LIayel, 1982). Como regulador de creci- miento en plantas, ha sido usado en hortalizas, cultivos de tierras altas y frutales en japón. Enbatatas, se aplica de 1000 a 1500 mg'L-', 30 a 50 días después del trasplante parapromover engrosamiento; es usado, también, en cebolla y ajo, con el mismo fin. El CC mejora el enraizamiento y engrosamiento del tubérculo al estimular la ac- tividad de la amilasa en la parte basal del tallo. Se ha observado, además, que el CC promueve la tasa fotosintética y acelera la translocación de los fotoasimilados en el tubérculo. En frutas, aun- que, aún, el modo de acción de CC no es claro, se ha observado que es efectivo para mejorar el color, incrementan los contenidos de sacarosa y promover el. engrosamiento del fruto, en cerezas, ciruelos, manzanas y duraznos. En estos dos últimos, se ha reco- mendado aplicarlo un mes antes de la cosecha (Takeshita, 1990). Considerando las experiencias descritas anteriormente, se plan- teó este trabajo de investigación, con el objetivo de evaluar la respuesta de distintas concentraciones de TDZ y CC, para manza- no (Malus domestica), en las variedades 'Princesa', 'Golden Delicious' y 'Gala', en condiciones de la zona alta de Colombia, con el fin de mejorar la calidad comercial del fruto. MATERIALES Y METODOS El estudio de campo se realizó en la finca «Frutos de Chinzaco», en el municipio de La Calera, Cundinamarca, a una altura de 2650 msnm, con una precipitación pluvial media de 900 mm/año, tempe- ratura media de 13°C y humedad relativa del 70%, según datos del IDEAM para la zona. - La 'metodología utilizada fue diseñada con base en observacio- nes hechas en la finca, considerando la distribución y disponibili- dad de árboles para cada variedad, razón por la cual fueron deter- minados tres experimentos independientes entre si, uno para cada variedad. Se aplicó un diseño completamente aleatorizado (D.C.A) para las variedades 'Princesa' y 'Golden Delicious' con tres repe- ticiones; para la variedad' y bloques completos al azar (B.C.A), también con tres repeticiones, para la variedad 'Gala'. Como uni- dad experimental se tomó un árbol para las variedades 'Gala' y 'Princesa' y dos árboles para 'Golden Delicious', para un total de 84 árboles evaluados. Estos árboles tenían entre cinco y ocho años de edad, con producción estable Los tratamientos se descri- ben en el cuadro l. Para la variedad 'Princesa', sólo, se evaluó el efecto de TDZ, debido a la insuficiencia de árboles, En todas las variedades, los árboles fueron escogidos, aÍeatoriamente, dentro de lotes homo- géneos. Las aplicaciones se efectuaron en diferentes épocas, como muestra el cuadro 2. Para la época de aplicación de TDZ, se consi- deró que una importante tasa de división celular ocurre entre los 20 y 40 días después de la floración en manzano (Grange, 1996); mientras que para el caso de CC se observa un aumento en la tasa de tras locación de carbohidratos hacia el fruto 30 días antes de la cosecha. Las aplicaciones se hicieron usando una bomba de es- palda de 20 L, con lanza japonesa. Todos los árboles fueron asperjados mojando completamente el follaje y sin mezcla de adyuvantes. El raleo de frutos se hizo según el manejo comercial de la finca, haciendo un pase manual entre los 65 y 70 días des- pués de floración, Cuadro J. Descripción de tratamientos de las tres variedades en estudio, usando Thidiazuron (TDZ) y Cloruro de Colina (CC) como biorreguladores de crecimiento. Variedad Tratamiento Producto Dosisfmg-L") I TDZ 50 'Princesa' 2 TDZ 100 3 TDZ 150 4 Testigo Sin aplicación I TDZ 50 2 TDZ 100 3 TDZ 150 'Golden De1icious' y'Oala' , 4 CC 500 5 CC 1000 6 CC 1500 7 Testigo Sin aplicación Cosecha: Una vez alcanzado el punto de cosecha, se recolec- taron los frutos por separado para cada tratamiento, para cuantifi- car el rendimiento de los árboles y número de frutos, así como la cantidad de fnitos que alcanzaron la madurez: Evaluación de la calidad de los frutos cosechados: De los fru- tos medidos en campó, se tomó una muestra representativa de 10 frutos por cada tratamiento y se midieron las siguientes variables en el Laboratorio de Fisiología Vegetal de la Facultad de Agrono- mía: diámetros ecuatorial y polar, peso fresco, volumen, color, con- sistencia, contenido de sólidos solubles y acidez titulable. Cuadro 2. Epocas de aplicación de los biorreguladores Thidiazuron y Cloruro de Colina para los diferentes tratamientos en tres variedades de manzano. Producto Dosis (mg-L") Días después de floración Golden 'Princesa Gala Delicious TDZ 50 30 45 30 TDZ 100 30 45 30 TDZ 150 30 45 ,30 CC 500 118 - 100 CC 1000 118 - 100 CC 1500 118 - 100 El volumen se determinó calculando la cantidad de agua des- plazada por los frutos al sumergirlos en un recipiente volumétrico de boca ancha de 1 L de capacidad. Para determinar el color, se utilizó tabla de color RHS Colour Chart (1995) de cuatro abanicos, precisando el porcentaje de color predominante. 2000 Benincore et al.: Efecto de thidiazuron y cloruro de colina ... 93 150 120 ,..\ 140 ,.....110 f \ __. I ~ ;:¡ 130 I100 I ., ..----- .. ,I , 1\/ g 120 '"~ 90 I • e ' ..I .. 110 e 80 .. .0 E., a" e 100 ~ ~ .. 70 0.-.13'" c;"" ;;.. 90 (360 ~50 80 40 70 La consistencia se midió retirando la corteza en los extremos ecuatoriales de cada fruto y midiendo Con un penetrómetro «Balauf», con precisión de 1/2 psi y para el contenido de sólidos solubles, se empleó un refractómetro «Atago 0-90». Para determi- nar la acidez titulable se utilizó el método de titulación con una solución de hidróxido de sodio 0,1 N. Diseño experimental: El diseño experimental utilizado fue com- pletamente al azar, con tres repeticiones para las variedades 'Prin- cesa' 'Golden Delicious' y bloques completos al azar, con tres repeticiones para la variedad 'Gala', considerando la distribu- ción de los árboles en la finca. Como unidad experimental, se tomó un árbol para los experimentos en 'Gala' y 'Princesa' y dos árboles en 'Golden Delicious'. RESULTADOS Rendimiento, peso promedio y número de frutos por árbol Efecto de tratamientos en la variedad 'Princesa' no se detectó. En 'Golden Delicious', a medida que aumentan las dosis de TDZ, se 35 30 25 ..........".-. .... CIl ....... ~ 20 o '" 15 ~ .. 11. 10 5 Q"'O' __Q'_'O O j- .......-GOLDEN D. ----lt--GALA ... 0- .. PRINCESAI Figura 1. Efecto de TDZ y ce sobre el rendimiento, por árbol, en tres variedades de manzano. I-.....-GOLDEN D. ----A--GALA ... 0- .. PR1NCESAI Figura 3. Efecto de TDZ y ce sobre el peso del fruto en tres variedades de manzano. obtienen menores rendimientos y, por lo tanto, un menor número de frutos, con un peso promedio de fruto máximo de 113 g para la dosis de 50 mg- L·1 y mínimo de 80 g para el testigo; mientras que, con CC, se obtiene un máximo rendimiento y peso promedio de fruto, usan- do 500 mg' L·I, aunque el número de frutos no es mayor, por el con- trario, disminuye progresivamente al aumentar las dosis. Por último, tanto el rendimiento promedio de los árboles de 'Gala', como el número de frutos, es mayor al usar TDZ, pero, se observa una res- puesta a las dosis muy irregular; sin embargo, en todos los casos el rendimiento del testigo es menor. Con CC, se observó una disminu- ción en estas dos variables al aumentar las dosis, siendo el testigo el que mayores valores presenta. Con respecto al número de frutos, se encuentra que a mayor número de frutos por árbol, menor es el peso promedio por fruto (Figuras 1,2 Y3). En general, el peso promedio del fruto en las variedades 'Golden Delicious' y 'Gala' fue superior al testigo en todos los tratamien- tos los autores suponen como posibles causas las siguientes: 1. El efectoraleante de TDZ en la variedad 'GoldenDelicious', lo cual genera frutos de mayor calidad; 700 600 r:Jo... 500=.:.. 400"o 300 ~ .... El 200 ......-....-..=z .. 100 O G· .• o. __l)' - •o !- ..... -GOLDEN D. ----A--GALA ... 0- .. PRINCESA! Figura 2. Efecto de TDZ y ce sobre el número de frutos, por árbol, en tres variedades de manzano !- ..... -GOLDEN D. ---Ó--GALA···O-·· PRINCESAI Figura 4. Efecto de TDZ y ce sobre el volumen del fruto en tres variedades de manzano. 94 Agronomía Colombiana Vol. 17 2. El efecto que TDZ tuvo sobre la división celular, ya que los frutos que pesan más tienen un menor volumen, como se expli- cará más adelante y 3. El efecto de CC, como posible raleante en las variedades 'Golden Delicious' y 'Gala' y/o sobre la traslocación de azúcares desde las hojas hacia el fruto, incrementando su peso. l. Las experiencias obtenidas, con TDZ como agente químico raleante reportan en manzano, que, al aumentar la concentración de esta molécula, disminuye, progresivamente, el porcentaje de cuajamiento de frutos, especialmente, si es aplicada en plena etapa de crecimiento del fruto (18 días después de la floración (Greene, 1995». Sin embargo, en este experimento, se observa que, en la variedad 'Gala', al aumentar la dosis de TDZ, el núme- ro de frutos cosechados tiende, también, a ser mayor. Aunque se ha dicho que la maduración del fruto puede ser considerada como un fenómeno de senescencia (Ludford, 1995), los autores suponen que, con las distintas concentraciones uti- lizadas de esta fenilúrea, la cual puede tener alguna actividad como citoquinina (Taiz et al., 1991), se pudo haber contrarresta- do el proceso de abscisión, evitando la caída de frutos en la variedad 'Gala' por su efecto' antisenescente (Hobson, 1996), aunque se considera, también, un posible efecto varietal (Durán, 1993), teniendo en cuenta la respuesta en 'Golden Delicious' y 'Princesa', cuyos resultados concuerdan con el efecto raleante de TDZ descrito por Greene (1995), aunque no se presenta efec- to significativo de los tratamientos. 2. Como se anotó anteriormente, el TDZ puede tener propieda- des, tanto raleantes, como citoquininas. Si se considera que, cuando se aplican agentes químicos raleantes en época tem- prana, se disminuye el tamaño de las células, pero se aumenta el número, según lo descrito por Westwood (1993) y, además, que, aplicando fenilúreas, se promueve la división celular en el fruto, se puede concluir que aumenta el peso promedio sin que ésto signifique un aumento en el volumen, lo cual se ve refleja- do en los resultados obtenidos para la variedad 'Golden Delicious' (Figuras 3 y 4). 3. Al usar CC en la variedad 'Golden Delicious', al aumentar la dosis, se observa una disminución progresiva en el número total de frutos, lo cual hace pensar que esta molécula posee, también, propiedades raleantes. Si bien, la aplicación de agentes quími- cos raleantes produce una fuerte selección de frutos (Grange, 1995), es posible, que al aplicar CC, se haya ejercido una selec- ción sobre los frutos con un mayor número de células y, por consiguiente, para el caso de CC a 500 mg-L'!, se obtienen me- nos frutos pequeños, aumentando el peso promedio de los que quedan y, por lo tanto, un mayor rendimiento por árbol. En el caso de 'Gala', como el número de frutos de los tratamientos con CC es significativamente menor que en el testigo, aunque el peso promedio es mayor, el rendimiento por árbol no llega a ser superior. Por otra parte, Takeshita (1990) reporta en batatas, efec- tos de CC sobre la enzima amilasa en la parte basal del tallo en batata al promover una mayor traslocación de azúcares hacia los tubérculos, aumentando el peso final en la cosecha; los autores sugieren que al aplicar CC hacia del fmal el proceso de formación del fruto, se haya estimulado, también, la arnilasa, degradando el almidón presente en las hojas, promoviendo una mayor tras locación de azúcares hacia el fruto, aumentando el peso. Forma del fruto: diámetros ecuatorial (D.E.) y polar (D.P.) Para la variedad 'Princesa' no se reporta diferencia significativa entre los tratamientos, aunque cabe anotar que, al aumentar la dosis de TDZ a 100 mg-L-!, el fruto tiende a ser algo más redondea- do; por otra parte, al aumentar la dosis, se observa un leve incre- mento de tamaño, el cual tiende a ser lineal. En 'Golden Delicious', aunque no hay diferencias significativas entre tratamientos en la respuesta del diámetro ecuatorial, se observa que, con TDZ, dis- minuye dicho diámetro al aumentar la dosis, mientras que, con CC, permanece casi invariable. Respecto del diámetro polar, se obser- va, con TDZ, un comportamiento similar al descrito para el diáme- tro ecuatorial, pero, con CC, el aumento del diámetro polar es significativamente mayor que el encontrado para el diámetro ecua- torial cuando se incrementa la dosis de ambos productos, los fru- tos de 'Golden Delicious' tienden a tener una forma alargada, sien- do el efecto de CC más marcado. Para esta variable, en la variedad 'Gala', no se encontraron diferencias significativas entre tratamientos, pero el mayor tama- ño del fruto se obtuvo a la dosis de 100 ppm de TDZ, siendo ésta la única que supera al testigo. Con CC, al usar la dosis de 500 mg- L-!, se obtuvo un mayor tamaño del fruto, pero, en las dosis siguientes, desaparece el efecto. Respecto a la forma del fruto de esta variedad, no se observa una tendencia a obtener frutos alargados con el aumento en las dosis de los productos (Figuras 5,6y7). Se ha reportado que con el uso de citoquininas se obtienen frutos más alargados (Williams et al., 1969), probablemente, ésto se debe a la acción de las citoquininas sobre la división celular (Taiz et al., 1991). Como se anotó anteriormente, es posible que TDZ haya estimulado la división celular, generando, en conse- cuencia, un cambio en la forma del fruto, obteniendo frutos que se van alargando a medida que aumenta la dosis del producto (hasta 150 ppm para 'Golden Delicious' y 100 mg-L" para 'Princesa' y 'Gala'). En partes, estos resultados concuerdan con lo reportado por Greene (1995), quien manifiesta que, al aplicar TDZ en concen- traciones de lOa 50 mg-Lo!en plena floración y 22 días después de antesis, se obtiene un alargamiento del fruto en manzanas de la variedad 'McIntosh'. Los autores piensan que es posible que la débil respuesta en el alargamiento del fruto usando TDZ pudo ser causada por la aplicación tardía del producto, considerando la época de aplicación descrita por Greene (1995). Respecto a CC, el alargamiento del fruto sólo se presenta en la variedad 'Golden Delicious'. Se ha reportado que un desequilibrio hormonal en el fruto parece determinar la forma del mismo, al afectar la dirección de alargamiento de las células. Es posible que, al aplicar CC, se haya inducido una leve tendencia hacia la deformación, conside- rando que el índice de forma (relación D.P.:D.E.) fue afectado de manera creciente al incrementar la dosis de CC, ya que, en estu- dios anteriores, se ha concluido que, para la variedad 'Golden Delicious', se esperan índices cercanos a 0,9 (frutos ligeramente achatados), según Westwood (1993). Volumen del fruto Para ninguna variedad se detectó efecto significativo de los trata- mientos. Sin embargo, en la variedad 'Princesa', se observa que, al incrementar las dosis de TDZ, se presenta una ligera tendencia de aumento en el volumen del fruto, mientras que, para 'Golden Delicious', todos los frutos tratados con TDZ superan al testigo entre un 15 y un 20%, aunque se aprecia una leve disminución del volumen al incrementar las dosis. Para esta misma variedad, se observa un comportamiento similar en respuesta a las dosis de CC, aunque el aumento del volumen del fruto es, aún, mayor que 2000 Benincore et al.: Efecto de thidiazuron y cloruro de colina ... 95 60 55... ~ 01 =".. Q......... 5 :~ Q 50 45 40 +---r-~---+---+---r--~--+---r-~ I-.......-GOLDEN D. ----lr--GALA .•• Q- •• PRINCESA Figura 5. Efecto de TDZ yce sobre el diámetro ecuatorial del fruto en tres variedades de manzano. 60 ......--.-e / .."! 55 ...--...... •01 'l1---li 8. 50 ~ Q ~ !::.. 45 e 5 :~ :Q 40 I-.......-GOLDEN D. ---tr--GALA .•. Q- •• PIÚNCESAI Figura 6. Efecto de TDZ y ce sobre el diámetro polar del fruto en tres variedades de manzano. .-, 1,1~ ~ 1,05 =-: 8, 01 0,955... ~ 0,9.. "el 0,85.. ":a 0,8 =.... EGOLDEN D. ----lr--GALA·· .E> ••• PRINCESAI Figura 7. Efecto de TDZ y ce sobre la forma del fruto en tres variedades de manzano. (> 1: fruto alargado. 1:fruto redondo. <1:fruto achatado). con TDZ, en especial a la dosis de 500 mg-L:', Para la variedad 'Gala', se notó un leve aumento del volumen del fruto, tanto con TDZ, como con CC, aunque, en ambos casos, a las dosis más altas, el valor cae por debajo del testigo. Según Grange (1996), el crecimiento en tamaño del fruto es causado por el llenado de las células, más que por la división celular Ésto concuerda con los resultados obtenidos, cuando se tiene en cuenta el posible efecto de CC como estimulante de la traslocación de azúcares hacia los vertederos (Takeshita, 1990), provocando un mayor llenado de células y, en consecuencia, un aumento en el volumen final del fruto. ' Color de la corteza del fruto En la variedad 'Princesa' no hubo efecto alguno de los tratamien- tos y el color predominante de todos los frutos fue determinado, como rojo 46-A en la tabla de colores, presentándose esta colora- ción en el 100% de la fruta. En la variedad 'Golden Delicious' se observó la mayor variabilidad en respuesta, presentándose tres coloraciones diferentes según la tabla: en primer lugar, todos los tratamientos con TDZ arrojaron frutos de color amarillo-verde 150- B, mientras que los frutos tratados con CC presentaron una colo- ración predominantemente amarillo 4-C y los frutos del testigo, verde 150-C (Figura 8). Con TDZ, el mayor porcentaje de uniformi- dad en color fue obtenido a 50 mg-L:' y es, significativamente, superior a las demás dosis, en tanto que con CC, los frutos más uniformes corresponden a la dosis de 500 mg-L:', aunque no hay efecto significativo frente a las demás dosis . En la variedad 'Gala', se presentó un solo tipo de color rojo predominante (46-A, igual que en 'Princesa') y la mayor unifor- midad de éste en frutos tratados con TDZ fue observada a 150 mg-L", en tanto que con CC, disminuyó progresivamente con el aumento de las dosis. En todos los casos, el testigo mostró una coloración rojiza menos uniforme que la de todos los demás tra- tamientos (Figura 9). 100 ) ,66 92 88.66 90 , 83 84.33 80 72 !§ 70 } 66CII ~~ E.¡;- .~ ''160 ~ ~ ~ .... ~e :- "CII 50 ~u 40 " .. f~o :t " ¡; ~ e, 30 ," , '. 11 I!20 , 10 ., '\ ~ ~ e O TDZ TDZ C.C Testigo 50ppm 150ppm 1000ppm OAmarillo-verde 150b I!!3Amarillo 4C ElVerde 150C Figura 8. Efecto de TDZ y ce sobre el color predominante en 'la variedad 'Golden Delicious'.' Normalmente, la alteración en la coloración de los frutos involucra la pérdida de clorofila así como la síntesis de .otros pigmentos, tales como carotenoides y antocianinos, entre otros; sin embargo, algunos frutos retienen su coloración verde duran- te el periodo de maduración, entre los cuales, están el kiwi y algunos cultivares de manzano (Kays, 1997). Agronomía Colombiana Vol. 1796 85.66 8 I ,66 80 15 I~ 51.33 :. :f~., '. » 90 80 1.33 69 70 CII 60.- ni- 50c:: CII u 40... o a.. 30 20 10 o TOZ 50ppm TOZ 150ppm ce 1000ppm Testigo Figura 9. Efecto de TOZ y CC sobre el color predominante (rojo 46A) en la variedad 'Gala'. El efecto de TDZ sobre el color del fruto sugiere una acción del producto en la maduración, teniendo en cuenta que el cambio de color, por la degradación de la clorofila, se presentan tonalidades amarillas y/o rojas y es una señal de maduración (Durán, 1983; Landwehr et al., 1995) y, aunque las citoquininas estimulan la ma- duración de los cloroplastos y retardan la senescencia, algunas fenilúreas sintéticas, como TDZ, pueden tener un débil efecto como citoquininas (Taiz et al., 1991). Adicionalmente, estudios realiza- dos en Brasil (Anónimo, s.f.) utilizando TDZ en las mismas varie- dades usadas en este experimento, mostraron resultados similares de aumento de la coloración, especialmente en 'Gala', usando la dosis de 50 mg-L:'. En ambas variedades, los resultados obtenidos en la coloración de los frutos tratados con CC concuerdan con los resultados repor- tados por Takeshita (1990) para CC, según los cuales es efectivo como promotor de la coloración para diferentes especies, incluyen- do el manzano, aunque, con la información disponible, no se puede establecer claramente el modo de acción de esta molécula. Días a la cosecha En las variedades 'Princesa' y 'Gala', todos los tratamientos se cosecharon el mismo día y no se detectó diferencia ocasionada por el efecto de los tratamientos sobre los días a la cosecha. En la variedad 'Golden Delicious', los tratamientos con TDZ fueron cosechados en dos pases, con siete días de diferencia entre ellos, mientras que, los tratamientos de CC fueron cosechados, en su totalidad durante el primer pase. Los pases de recolección se de- terminaron de acuerdo con los índices de cosecha que se manejan en la finca donde se realizó el estudio. Estos resultados apoyan la teoría de que CC acelera el proceso de maduración, en especial, para la variedad 'Golden Delicious'. Los porcentajes de cosecha por pase se muestran en el cuadro 3. Consistencia de la pulpa del fruto En la variedad 'Princesa', no se detectó efecto de los tratamientos con el TDC sobre la consistencia del fruto. En 'Gala', CC arroja valores de firmeza, significativamente, menores de los de TDZ y el testigo, encontrándose el valor más bajo a 500 rng-L·I, seguido de 1500 mgL:' y 1000 mg-L:'. En el tratamiento con TDZ, se detecta un ligero aumento en la consistencia del fruto, a medida que au- mentan las dosis. El testigo presenta un valor intermedio entre CC y TDZ. El comportamiento de la consistencia en frutos de la varie- dad 'Golden Delicious' es muy similar al de la variedad 'Gala', salvo que las diferencias entre CC y TDZ son mucho más marca- das, esto es, valores más bajos de consistencia en CC (Figura 10). En estudios realizados en Brasil (Anónimo, s.f.) se ha reportado, que, usando TDZ a dosis mayores de 50 mg-Ll después de la época de la caída de pétalos se empieza a notar un aumento en la consis- tencia de la fruta en las variedades 'Gala' y 'Golden Delicious', lo cual es deseable; este efecto se observó, también, en este experi- mento, aunque es muy leve. Es posible que la época de aplicación haya sido muy tardía, dado que, como lo sugieren Taiz et al. (1991), al afirmar que el efecto de las citoquininas sintetizadas puede esti- mular la biosíntesis de las citoquininas endógenas de la planta, alcanzando éstas una alta concentración, especialmente al iniciar el desarrollo del fruto (Grange, 1996), lo cual explicaría un menor efecto de TDZ al ser aplicado más tarde. Por otra parte, se ha reportado, también, que TDZ actúa diferencialmente según la especie, en tanto que puede llegar a retrasar la maduración en ciertos cultivos, como uva y caqui (Reynolds et al., 1992), o adelantarla, como sucede en kiwi (Famiani et al., 1999). Cuadro 3. Efecto de Thidiazuron y Cloruro de Colina sobre el porcentaje de cosecha por pase en tres variedades de manzano. 'Princesa' 'Golden 'Gala' Delicious' . Tratamientos Pase Pase Pase Pase Pase Pase 1 2 1 2* 1 2 TDZ 50 mg-L" 100 - 43 57 100 - TDZ 100 mg-L" 100 - 48 52 100 - TDZ 150 mg-L" 100 - 37 63 100 - ce 500 mg-L" - - 100 - 100 - ce 1000 mg-L" - - 100 - 100 - ce 1500 mg-L" - - 100 - 100 - Testigo 100 - 45 55 100 - • 8 días después del primer pase 20 19 Q.. .0.-.0en -, 'O""a.. 18--- ~ ~ ni 17 u ..- .... - ..- .. e 16 CII- 15 \fI) \.¡¡; 14 \...~eO 13o 12 1---- - GOLOEN O. t. GALA·· ·0··· PRINCE~ Figura 10. Efecto de TOZ y CC sobre la consistencia del fruto en tres variedades de manzano. 2000 Benincore et al.: Efecto de thidiazurony cloruro de colina ... 97 En el caso de CC, como se describió en los resultados, dismi- nuyó la consistencia del fruto. Se sabe que el ablandamiento del fruto ocurre por la degradación de la pectina que cementa las célu- las y este efecto es un indicador de madurez y es usado en muchos cultivos (Landwehr y Torres, 1995). Kays (1997) ha encontrado cambios degradativos producidos por enzimas en las paredes ce- lulares de muchos frutos. Como se ha visto en este experimento, el CC ha tenido efectos que concuerdan con lo que estos autores y se establecen como indicadores de madurez, por lo cual es proba- ble que CC haya acelerado el proceso de ablandamiento al estimu- lar la acción de la enzima propectinasa (poligalacturonasa), la cual degrada la pectina (Durán, 1983), contribuyendo a la maduración de los frutos. Por otra parte, es probable que CC haya tenido tam- bién, algún efecto que pudiese disminuir la concentración de inhibidores hipotéticos de la maduración, según la teoría sobre la maduración de frutos propuesta por Grange (1993). Uno de estos inhibidores son los citoquininas, ya que se sabe que una de sus funciones es la de retardar la senescencia de los frutos (Taiz et al., 1991). Es conocido, también, que las citoquininas se pueden unir a muchos compuestos, entre ellos proteínas y de esta forma quedar desactivadas (Moore, 1979). Los autores suponen que, al usar CC como fuente de aminoácidos hacia el final del periodo de desarro- llo del fruto, se pudieron desactivar las citoquininas actuantes en el proceso de maduración, produciendo la aceleración del mismo, manifestada entre otros, por un adelanto en la cosecha de los frutos tratados con CC. Contenido de sólidos solubles (Grados Brix) en el fruto El análisis estadístico para esta variable no reportó alguna diferen- cia significativa en la variedad 'Princesa'. Para la variedad 'Gala', se observan valores considerablemente mayores en CC con res- pecto a TDZ y el testigo, siendo el valor más alto el correspon- diente a la dosis de 500 mg-L-' de CC. El tratamiento con TDZ y el testigo se comportan de manera similar. En la variedad 'Golden Delicious', se detectaron diferencias significativas a favor de CC, presentando, al aumentar las dosis un ligero aumento lineal en los sólidos solubles. En el tratamiento con TDZ al pasar de 100 mg-L- 'a 150 mg-L" se observa un claro aumento en los grados brix; la dosis correspondiente a 50 mg-L:' presenta el valor más bajo y es [- -GOLDEN D. --tr-GALA ---o··· PRINCESA[ Figura JI. Efecto de TOZ y ce sobre el contenido de sólidos solubles del fruto en tres variedades de manzano. equivalente al valor registrado en el testigo (Figura 11). Es sabido que, al llegar la maduración, el contenido de sólidos solubles del fruto aumenta, por el desdoblamiento del almidón (Durán, 1983; Landwehr el al., 1995). Dado que los frutos tratados con CC au- mentaron considerablemente el contenido de azúcares respecto del testigo, se corrobora su efecto sobre la maduración, debido, probablemente, a la mayor traslocación de azúcares de las hojas al fruto, por la estimulación de la amilasa, como lo reporta Takeshita (1990) para diferentes cultivos. El efecto de TDZ es diferente en cada variedad, aumentando los sólidos solubles en las variedades 'Golden Delicious' y 'Princesa' y disminuyéndolos en 'Gala'. Es probable que esta diferencia de resultados se deba a que la res- puesta en la aplicación de hormonas no es universal, es decir, depende, entre otros, de la especie y la variedad (Taiz el al., 1991). Acidez titulable en el fruto En la variedad 'Princesa', se registra un incremento en el porcenta- je de acidez a medida que aumentan las dosis con TDZ, sin embar- go, no superan, significativamente, el valor encontrado en el testi- go. En la variedad 'Gala', se aprecia un efecto del tratamiento con TDZ, sólo, en la dosis de 50 mg-L:', mientras que, con CC, el au- mento en acidez sigue una tendencia cuadrática, siendo la dosis de 1000 mg-L: el punto máximo de acidez alcanzado con este biorregulador; en esta variedad, las diferencias de comportamien- to de la acidez entre uno y otro producto son, estadísticamente, significativas. Para la variedad 'Golden Delicious', se encontraron diferencias significativas entre tratamientos, las cuales se ven re- flejadas al comparar el testigo contra los tratamientos y al compa- rar efectos de TDZ contra CC; estos efectos se manifiestan en una disminución progresiva del porcentaje de acidez, al aumentar las dosis en ambos casos, aunque sólo resulta ser significativamente menor con TDZ (Figura 12). En general, se considera que la acidez disminuye al avanzar el proceso de maduración (Durán, 1983); en este sentido, se observa que, desde el punto de vista de la acidez, TDZ acelera, claramente, este proceso, teniendo un efecto más marcado en 'Golden Delicious' que en 'Gala'. Una respuesta similar se puede notar al aplicar CC en 'Golden Delicious' y dado que CC promueve la ma- duración, entendida como un aumento en el contenido de sólidos 6,5 • •6 , ........__..-...... 5,5 G, "- ./?J' -'0:.e 5~ , ~ r:. ,- ..__.N 4,5 ~GI 4"Cu 3,5ce 3 2,5 2 [- - GOLDEN D. /lo GALA .. ·E). .. PRINCESA[ Figura 12. Efecto de TOZ y ce sobre la Acidez del fruto en tres variedades de manzano. 98 Agronomia Colombiana Vol. 17 solubles y la coloración (Takeshita, 1990), se puede deducir que, de acuerda a Durán (1983) Y Taiz (1991), la acidez disminuye por la estimulación de la hidrogenasa málica dentro del mismo proceso. Según Kays (1997), esta disminución se debe, ampliamente, a la utilización, durante la maduración, de ácidos orgánicos como sustrato respitatorio y como esqueletos de carbono para la sínte- sis de nuevos compuestos. Sin embargo, el hecho de que las va- riedades 'Princesa' y 'Gala' no respondan de igual manera a los tratamientos, puede explicarse como el resultado de un efecto varietal, mencionado anteriormente. LITERATURA CITADA ANONIMO. Efectode Thidiazuroncomo inductorde labrotacióny for- mación de fiutos en Manzano Malus domestica. Brasil.Sin fecha. DURAN, S. Frigoconservación de la fruta. 18 edición, Editorial AEDOS, Barcelona. 369 pp. 1983. FAMIANI, F., A BATISTELLI, S. MOSCATELLO, M. BOCO YE. ANTOGNOZZI. Thidiazuron affects fruit growth, ripening and quality of Actinidia deliciosa. Joumal ofHorticultural Science & Biotechnology 74, (3), 375-380. 1999. GRANGE, R. Crecimiento del fruto. En: AZCON-BIETO y M. TA- LON. Fisiología y bioquímica vegetal. 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