Agronomlacolombiana, 1994. VolumenX!No.2;pág 118-130 INFLUENCIA DEL TIPO DE PLANTA, RESPUESTA DEL HOSPEDANTE A LA INFECCION Y TRATAMIENTO DEL SUELO SOBRE LA DINAMICA DE LA POBLACION DE Fusadumo.xysporumf. sp. dianthí, EN UN SUELO COLOMBIANO Effect of plant type, hos~ response to infection and soil treatment on population dynamics of Fusarium o.xysporum f. sp. dianthi in a Colombian soil Oliverio Camargo 1 , Juan Carlos Sanabria 1 , Germán Arbeláez2 y Juan Ospina3 RESUMEN. Este estudio se condujo para determinar la in- fluencia de dos tipos de plantas (cultivares están- dar y miniatura), dos respuestas del hospedante a la infección (resistencia y susceptibilidad), dos tratamientos al suelo con fumigantes (Dazomet y Formol) y dos tipos de testigos {Absoluto [parce- las sin aplicación de fumigantes y sin plantas en- fermas, TA] y Relativo [parcelas sin aplicación de fumigantes y con plantas enfermas, T R]) sobre la densidad de la población de Fusarium oxyspo- rumf.sp. dianthíy la incidencia de la enfermedad en un suelo de un cultivo comercial de clavel, lo- calizado en el municipio de Gachancipá, Cundi- namarca. El diseño experimental utilizado fué completamente_ al azar en un arreglo factorial2 x 2 x 4, con cuatro replicaciones, para un total de 118 Ingeniero Agrónomo, Facultad de Agronomía. Uni- versidad Nacional de Colombia, AA 14490, Santa- té de Bogotá D.C. Profesor Titular, Facultad de Agronomía, Universi- dad Nacional de Colombia, A.A. 14490, Santafé de BogotáD.C. Profesor Asistente. Facultad de Agronomía, Univer- sidad Nacional de Colombia, AA 14490, Santafé de Bogotá D.C. 16 tratamientos. El procedimiento consistió en el conteo de unidades formadoras de colonias del hongo a partir de muestras de suelo tomadas bi- mensualmente de la rizósfera de las plantas. El muestreo del suelo se desarrolló en tres áreas: planta foco (F) o planta infectada (o una planta al azar en caso de T A), plantas adyacentes 1 o plantas inmediatamente vecinas a la planta foco (At) y plantas adyacentes 2 (A2) o plantas inme- diatamente vecinas a las plantas A1. Las pobla- ciones del hongo en el suelo fueron similares en los dos tratamientos al suelo y en los dos testigos utilizados, pero descendieron durante el tiempo de muestreo. Las poblaciones mas altas del hon- go se presentaron, inicialmente, en las parcelas asignadas a los tratamientos con Formol y Dazo- met y las poblaciones mas bajas se observaron en los testigos absoluto y relativo. La mayor tasa de descenso de la población se presentó en el tratamiento con formol al suelo. De acuerdo con el tipo de cultivar, la población mas alta del hon- go se presentó en los cultivares estándar y la menor población, en los cultivares miniatura. La mayor población del hongo en el suelo se pre- sentó en los cultivares resistentes y la menor po- blación se encontró en los cultivares suscepti- bles. La población del hongo en el suelo no presentó un gradiente espacial consistente entre las áreas Foco. At y A2. En las pruebas de pato- genicidad, en donde se inocularon 90 aislamien- tos del hongo, solo 18 de ellos fueron capaces de ocasionar enfermedad en plantas de clavel. Este resultado muestra la abundancia de formas no patógenas de Fusadum oxysporum en cultivos de clavel. Palabras claves: clavel, Dianthus caryophyllus, marchitamiento vascular, epidemiología. SUMMARY This study was conducted to assess changas in density of Fusadum oxysporum f.sp. dianthi and disease incidence in the soil of a camation crop in Gachancipá, Cundinamarca, Colombia, effected by ptant type (standard vs. miniatura), host respon- se to infection (resistant vs. susceptible), and soil treatment (dazomet vs. formaline) vs. "absoluta control" (non-fumigated plots without disease plants, TA) vs. "relativa control" (non-fumigated plots with disease plants, T R). The experiment con- sisted of sixteen treatments arranged as 2 x 2 x 4 factorial with four replications in a completely ran- domized design. The procedure was to count co- lony forming units (cfu) of the fungus from soil sam- ples taken bimontly from the rhizosphere of ptants. Sampling areas within each experimental plot we- re defined as disease progressed, with the view to allow the establishment of three sampling units: at site F, an infectad plant (or at random plant in the case of TA), at site A1, an ímmediate neighbor plant taken at random, and at site A2, one plant taken at random from the next-to-i11mediate row or column in the plant grid. The largest initial cfu densities we- re observad in plots assigned to dazomet and for- maline, and the smallest in plots assigned to con- trol treatments. Cfu vatues decreased over time in the treatments with dazomet and forrnaline. Regar- ding host factors, the largest densities of the fun- gus in the soil ocurred around resistant ptants. No consistent spatial gradient in cfu density could be discemed among sampling sites F, At and A2. Pat- hogenicity tests using 90 isolates of Fusatium oxyspolllm revealed that only 18 were capable of infecting carnation. This result points at the relatíve abundance of non-pathogenic forms of Fusarium oxyspolllm in camation farms. Keywords carnation, Dianthus caryophyllus, vascular wilt, epidemiology. INTRODUCCION El marchitamiento vascular del clavel, causado por el hongo Fusarium oxysporum f.sp. dianthi, constituye un factor limitante en la producción y causa pérdidas muy importantes en el cultivo del clavel en Colombia. El conocimiento del compor- tamiento de la población del hongo en el suelo es de primordial importancia para lograr un manejo adecuado de la enfermedad. La mayoría de las empresas productoras de cla- vel estándar y miniatura, localizadas en la Saba- na de Bogotá, se encuentran afectadas por la en- fermedad en mayor o menor grado. Muchas de las medidas de control aplicadas no han resulta- do efectivas en el pais, debido al sistema de cul- tivo utilizado, a las variadas formas de disemina- ción del patógeno y a su alta persistencia en el suelo (Arbeláez et al, 1993). La incidencia de la enfermedad depende de la concentración de inóculo del patógeno en el sue- lo, presentándose una relación directa entre su densidad en el suelo antes de la siembra y la incidencia posterior de la enfermedad (Parra, 1988); dicha incidencia puede modificarse, tam- bién, por las condiciones ambientales {Vander- plank, 1963). La estimación periódica de la población del hon- go en el suelo permite predecir la futura inciden- cia de la enfermedad en un área determinada y, además, permite tomar decisiones sobre las me- didas de control para aplicar. El hongo Fusarium oxysporum f.sp. dianthipue- de diseminarse, principalmente, por esquejes in- fectados, por movimiento de suelo infestado de un área a otra a través de maquinaria, herra- mientas y equipos de labranza, mangueras de riego y fumigación, de los trabajadores y por el agua de riego (Baker, 1980; Rattink, 1977). El estudio epidemiológico de la enfermedad per- mite conocer la interacción de las poblacipnes del patógeno en el suelo con las poblaciones de 119 la planta hospedante para entender el comporta- miento de la enfermedad en el tiempo y en el espacio y, así, aplicar las medidas más conve- nientes para la reducción de la cantidad de inó- culo inicial y de la tasa de desarrollo de la enfer- medad (Berger, 1977; Zadoks y Schein, 1979). Los objetivos del trabajo fueron: 1. Estimar la densidad de población de Fusa- rium oxysporum en el suelo donde se pre- sentó la enfermedad y en la zona de erradi- cación de las plantas afectadas, en donde, previamente, se realizaron tratamientos para reducir el inóculo del patógeno. 2. Determinar la patogenicidad de 90 aisla- mientos de Fusarium oxysporum obtenidos de diversas muestras de suelo. 3. Estudiar la dinámica de la enfermedad en el tiempo y en el espacio de un bloque comer- cial de clavel. MATERIALES Y METODOS El trabajo, en su parte de campo se llevó a cabo en la finca de la Empresa Queen's Flowers de Colombia, localizada en el municipio de Gachan- cipá, Cundinamarca. La determinación de las po- blaciones del hongo en el suelo se hizo en el La- boratorio de Microbiología de la Facultad de Agronomía de la Universidad Nacional de Co- lombia, en Santafé de Bogotá. Estimación de las poblaciones de Fusarium oxysporum en el suelo Las muestras de suelo para el análisis de la po- blación de Fusarium oxysporum se tomaron en 96 sitios seleccionados de acuerdo con los trata- mientos previamente realizados al suelo con for- mol y con Dazomet. También, se tomaron mues- tras de las plantas donde recientemente se había detectado la enfermedad, o sea, un foco nuevo. y a las cuales no se realizó tratamiento alguno (Testigo Relativo, TR).Igualmente, se ob- tuvieron muestras de plantas aparentemente sa- nas y que no presentaron algún síntoma de la enfermedad y sin aplicación de fumigantes (Tes- tigo Absoluto, TA). 120 Las muestras de suelo se tomaron con un barreno holandés, desinfestado con formol al 5% y se ob- tuvieron alrededor de la rizósfera de las plantas a una profundidad no mayor de diez centímetros. Para la toma de las muestras de suelo se consí- "deraron tres áreas de muestreo, de la manera siguiente (Figura 1 ): X X X X A2 X X X X ~~X X X 1 1 X X X X X X -- X X X X X X callo X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X Figura 1. Esquema de la distribución de las áreas de muestreo [en las camas]. X = representa la planta de clavel. F= planta afectada por la enfermedad (planta foco). A 1 =plantas vecinas a la planta foco. A2 =plantas vecinas a las plantas adyacentes 1. Planta foco: planta afectada por la enferme- dad (F). 2. Plantas adyacentes 1: plantas vecinas a la planta foco (A1). 3. Plantas adyacentes 2: plantas vecinas a las plantas adyacentes 1 (A2). El muestreo de suelo se efectuó tres veces, a los 11, 13 y 15 meses de edad de las plantas. Para las plantas foco, se tomó un cuarto muestreo a los 17 meses de edad de las mismas. El mues- treo se realizó en plantas de variedades de clavel estándar y de clavel miniatura, las cuales pre- sentaban diferentes respuestas de resistencia o susceptibilidad a la enfermedad. El tratamiento con formol se hizo en la planta fo- co y en las 29 plantas aledañas a la misma, es decir, por cada planta enferma se trataron ésta y las plantas de los dobles surcos vecinos, o sea, se trataron 30 plantas de los tres dobles surcos; estas plantas recibieron formol a razón de 30 cm. por planta, se cortaron por la base y el suelo se tapó con polietileno negro; las muestras se toma- ron a los siete meses de haber realizado el trata- miento descrito. Otras muestras se tomaron de los sitios donde previamente se habían detectado plantas enfer- mas y, después de su arranque, se trataron con Dazomet en dosis de 70 g/m 2 antes de la siem- bra del nuevo cultivo de clavel. La población del hongo se determinó mediante el método de las diluciones decimales, utilizando el medio selectivo para Fusarium oxysporum de Komada (1975). El diseño experimental empleado fué completa- mente al azar en un arreglo factorial de 2 x 2 x 4, con cuatro repeticiones y cuatro épocas de muestreo. Las variables estudiadas fueron dos tipos de cultivares de clavel {estándar y miniatu- ra), dos niveles de respuesta de los cultivares a la infección (resistente y susceptible), dos trata- mientos al suelo con fumigan tes (Dazomet y For- mol) y dos tipos de testigos (Absoluto y Relativo). Pruebas de Patogenicidad Para determinar la patogenicidad de los aisla- mientos de Fusarium oxysporum obtenidos del suelo, se inocularon 90 aislamientos en la varie- dad de clavel estándar U Conn., la cual es sus- ceptible a las razas 2 y 4 del patógeno. De los 90 aislamientos seleccionados, 15 correspondieron a tratamientos con formol, 28 a tratamientos con Dazomet, 17 al Testigo Relativo y 30 al Testigo Absoluto. La inoculación de cada aislamiento a probar se hizo mediante la inmersión de las raíces de los esquejes en una suspensión de un millón de es- poras por mililitro, durante 15 segundos. Los es- quejes se sembraron individualmente en bolsas de polietiteno que contenían un kilogramo de suelo esterilizado y se mantuvieron en un inver- nadero de vidrio durante 16 semanas; observa- ciones semanales para registrar los síntomas de la enfermedad se hicieron hasta la finalización del experimento. Cada aislamiento se inoculó en cinco plantas de clavel. Estudio Epidemiológico El área de estudio se localizó en el Bloque 5 de la finca en donde se realizó la investigación, por pre- sentar una infestación alta de la enfennedad y un gran número de focos de plantas enfermas en las dos siembras de clavel realizadas anteriormente. Los muestreos para la observación de las plantas enfermas se hicieron cada 15 días, al igual que la determinación del avance de los focos de plantas enfermas; para el efecto se realizaron mapas y, mediante un estudio epidemiológico, se realizó un diagnóstico de la dinámica de la enfermedad en el campo, con la estimación de la tasa de incremento y de la dispersión de la enfennedad. Los modelos matemáticos seguidos fueron el monomolecular, el logístico y el de Gompertz. Los datos se transformaron para determinar el modelo o modelos que se ajustaron a la prueba estadística. Los parámetros epidemiológicos, dentro de los modelos, se usaron para el análisis del comportamiento de la enfermedad en el tiem- po. El estudio espacial se hizo a nivel descriptivo, mediante el método de la varianza del cuadran- te, el cual determinar el patrón seguido por el en el espacio. Los datos se pro- cesaron con el paquete estadístico SAS. RESULTADOS Y DISCUSION Dinámica poblacional de Fusariumoxysporumen la rizósfera de cultivares estandar y miniatura Las poblaciones iniciales de Fusarium oxyspo- rumen la rizósfera de las plantas aparentemente sanas (Testigo Absoluto) mostraron un deseen-. so en su densidad y fluctuaron entre 1.490 y 2.700 ufc/g de suelo para los cultivares miniatura 121 resistentes y, para los cultivares estándar resis- tentes, variaron entre 1.970 y 3.600 ufc/g de sue- lo. la tasa de descenso de la población del hon- go fué de -31 O ufc/mes para los cultivares miniatura resistentes y de -413 ufc/mes para los cultivares estándar resistentes (Figura 2). Meses Después de Siembro -x- Est. Resistentes -A.- Min. Resisten les Figura 2. Dinámica poblacional de Fusarium oxysporum en el área de influencia de la planta Foco para los cultivares de clavel estándar resistentes y Miniatura resisten- tes, en el Tratamiento Testigo Absoluto. O Estondor Eil Minio1ura Figura 3. Población de Fusarium oxysporum en la rizosfera de las plantas Foco, Adya- centes 1 y Adyacentes 2, de acuerdo con el tipo de cultivar en el Testigo Relativo a los 13 meses después de la siembra. 122 .. se presentaron diferencias altamente sig- nificativas entre los dos cultivares. En cuanto el tipo de cultivar, los cultivares están- dar, que son los más susceptibles a la enferme- dad, presentaron una mayor población del hon- go a nivel de la rizósfera que los cultivares miniatura (Cuadro 1 y Figura 3). Cuadro 1. Población de Fusarium oxysporum para el tratamiento Testigo Absoluto, ex- presado en unidades formadoras de colo- nías por gramo de suelo, de acuerdo con el tipo de cultivar de clave. en las tres fechas de muestreo. 3 meses de edad del cultivo Están Minia t. Están dar dar Foco 3289+ 3004 3505 Adyac ·3477 3015 3100 entes 1' 1 Adyac 3184 3206 2935 entes 2 Miniat. 1767 15 meses de edad del cultivo Están Miniat. dar 1989 1704 +=cada dato es el promedio de cuatro repli- caciones por área de muestreo. ** = se presentaron diferencias altamente significativas entre los dos cultivares. la comparación de las curvas de densidad de población del hongo en el tiempo, de acuerdo con el tipo de cultivar, presentó una respuesta de tipo lineal. En los cultivares estándar, la pobla- ción del hongo tendió, inicialmente, a mantener- se constante en el curso de las dos primeras fe- chas de muestreo, pero, luego, mostró un descenso marcado. Estos mismos cultivares presentaron las poblaciones más altas del hongo en las tres fechas de muestreo {Cuadro 2 y Figu- ra 4). Este hecho parece deberse a que los culti- va res estándar producen mayor cantidad de exu- dados en sus raíces, los cuales estimulan un aumento en la población del hongo y, además, producen un mayor volumen de raíces que los cultivares miniatura. Al comparar las tasas de la población del hongo, los cultivares miniatura mostraron un descenso más rápido (b=-343 ufc/mes}, que los cultivares estándar (b=-331 ufc/mes) (Figura 4). Meses después de Siembra Eslóndar ··X··Minioluto FIGURA 4. Dinámica poblacional de Fusa- rium oxysporum en el tiempo para los culti- vares Estándar y Miniatura, en el Tramien- to Testigo Absoluto. La población del hongo en la rízósfera de los cul- tivares estándar resistentes, después de haber- se registrado una planta enferma nueva, aumen- tó en los dos meses subsiguientes (11 a 13 meses) y, luego, descendió rapidamente con una tasa de -376 ufc/mes. En los cultivares es- tándar susceptibles, la población del hongo, des- de el momento en que la planta manifestó los 15 Meses después de Siembra ·X- Est. Resisfent --.1..-- Esf. Suscept ·{1--Mín. Resisten!. ·-0-- mín. Suscep!. FIGURA 5. Dinámica poblacional de Fusa- rium oxysporum en el área de influencia de la planta Foco para los cultivares Estándar y Miniatura, de acuerdo con el tipo de res- puesta diferencia de resistencia o suscep- tibilidad al hongo en el Tratamiento Testigo Relativo. síntomas de la enfermedad, comenzó a descen- der lentamente con una tasa de -337 ufc/mes. El descenso en la población del hongo en los culti- vares miniatura no fue tan pronunciado. La tasa de descenso de la población del hongo para los cultivares miniatura resistentes y susceptibles fue de -283 y 89 ufc/mes, respectivamente {Cua- dro 2 y Figura 5). Cuadro 2. Población de Fusaríumoxysporumpara el tratamiento Testigo Relativo, expresada en uni- dades formadoras de colonias por gramo de suelo, de acuerdo con el tipo de cultivar, en las cuatro fechas de muestreo. meses de edad del 15 meses de edad del cultivo cultivo Estándar Miniatura Estándar Miniatura Estándar Miniatura Foco 3727+ 2352 3910. 2198 2453 1849 1831 259 Adyacentes 2 3496 2266 3508 2479 3089 1675 tes 1 4683 3508 4592. 2116 •• 1861 2278 + == cada dato es el promedio de cuatro replicaciones por área de muestreo. • y ... = se presentaron diferencias significativas y allamente significativas entre los dos cultivares. 123 Tanto en el grupo de cultivares estándar. como en el de cultivares miníatura. la población del hongo en la rizósfera de los cultivares resistentes fue mayor que aquélla de los cultivares suscep- tibles. Este fenómeno lo explica Baayen (1988). quien observó que la resistencia del clavel a Fu- sarium oxysporum f.sp. dianthi se fundamenta en la localización física del patógeno dentro de las raíces y tallos de la planta y en la producción de fitoalexinas. Las poblaciones del hongo Fusarium oxysporum en la rizósfera de los dos cultivares de clavel, en las tres áreas de muestreo, no presentaron dife- rencias significativas (Cuadro 2}. Por consiguien- te, se puede observar que, a partir de la planta foco. no se encontró un gradiente espacíal de au- mento en la población del hongo hacía las áreas vecinas (Figura 6). Las plantas situadas en las áreas adyacentes 1 y adyacentes 2 se mantuvie- ron aparentemente libres de la enfermedad, o sea. que no presentaron algún tipo de síntoma de la enfermedad. e ~C':O íi ¡;z.::.u:J u= '-:>.m " '3ZDJ Estondor ~ FIGURA 6. Población de Fusaríum oxyspo- 124 rum en la rizosfera de la Foco, Ad- yacentes 1 y a los 13 meses de edad del de acuerdo con el tipo de cultivar en el Tratamiento Testigo Rela- tivo. *y** se presentaron diferencias significali- vas y altamente signíficativas entre los dos cultivares. En general, la dinámica de la población para el T esligo Relativo fue similar a los otros tratamien- tos observados. En la primera fecha de mues- treo, se observó una población alta (2.936 ufc/g de suelo). la cual continuó su aumento. alcan- zando, en la segunda fecha de muestreo, 3.117 ufc/g de suelo; a partir de la segunda fecha (13 meses), la población comenzó a descender, de- bido. posiblemente, al agotamiento de los patios de infección. La tasa de descenso del hongo fué de -252 ufc/mes (Figura 7}. .. =·-··--· .9 :[0: w:n 11 IJ 15 11 Meses después de Siembra FIGURA 7. Dinámica poblacional de Fusa- ríumoxysporumen el tiempo para el Trata- miento Testigo Relativo. Los muestreos para la determinación de la po- blación del hongo se iniciaron a los 11 meses de edad del cultivo y la aplicación de Formol se hizo siete meses antes de comenzar el muestreo. Es decir. que las plantas tenían cuatro meses de edad cuando expresaron los primeros síntomas de la enfermedad. Para este tratamiento, los cul- tivares estándar resistentes mostraron una po- blación inicial de 5.209 ufc/g de suelo a los 11 meses, la cual descendió hasta 1.792 ufc/g de suelo a los 17 meses de edad del cultivo. La po- blación inicial registrada para los cultivares mi- niatura resistentes fue de 4.363 ufc/g de suelo y la población final, a 17 meses de edad del culti- vo, fué de 1.832 ufc/g de suelo (Figura 8). la tasa de descenso de la población para los cultivares estándar resistentes fue de -663 ufc/mes y la misma, para los cultivares miniatura resistentes, fue de -455 ufc/mes. ~~~~------~----~------~~ H 13 Hl 11 Mesas después de Síembro ·X· Estóndor Resistente ·A.· Minia furo Res!stenle FIGURA 8. Dinámica poblacional de Fusa- rium oxysporumen el área de influencia de la planta Foco para los cultivares Estándar y Miniatura resistentes en el Tratamiento con Formol. ~.-------------------------~ OOOOi----~~ ------------------~ S~i--~~~~--~~~ -------- ~~1---~------~:~~--------------~ 11 13 15 IT Mesas después de Síeml:xo ·X· Est. Res. Formol ··X·· Mn. Res. Formol ··1·· Est. Res. Tes. Rebtlvo .(J- Min. Res. Tes. Rebt. ···X··· Est.Res. Tes Absolut ··.&. •• Min.Res. Tes. Absolut FIGURA 9. Comparación de la dinámica po- blacional de Fusarium oxysporum en el área de influencia de la planta Foco para los cultivares Estándar y Miniatura resis- tentes en los Tratamientos Formol, Testigo Relativo y Testigo Absoluto. La población de Fusarium oxysporumen el trata- miento con Formol comparada con aquellas po- blaciones encontradas en los tratamientos Testi- go Absoluto y Testigo Relativo en los cultivares resistentes fué más alta al iniciar los muestreos {Figura 9). En general, en el tratamiento con Formol, se en- contró una población inicial más alta, alcanzando 4.115 ufc/g de suelo y, a partir de este dato, co- menzó el descenso de la población, el cual fuá más apreciable entre los 13 y 15 meses de edad; lo anterior permitió que la tasa de aumento fuera la mayor, en comparación con los tres tratamien- tos en estudio; la tasa de descenso de población para el tratamiento con Formol fué de -463 ufc/mes y, para el Testigo Relativo, fué de -252 ufc/mes (Figura 10}. .._ 1 111 ' ~ \t.=-463 .. '1 \ ~ 1 ~ 11 13 ltl 11 Mesas aespués de Sleml:xa FIGIURA 10. Dinámica poblacional de Fuso- rium oxysporum en el tiempo pasra el tra- tamiento con Formol al suelo. Las poblaciones de Fusarium oxysporum en la rizósfera de los cultivares resistentes y suscepti- bles para las tres áreas de muestreo no presen- taron diferencias significativas (Cuadro 3). Por consiguiente, no se observó un gradiente de au- mento de la población del hongo a partir del sitio donde estuvo La planta foco hacía las áreas ve- cinas {Figura 11). 125 De acuerdo con el tipo de cultivar, tampoco, se presentaron diferencias, por b cual, no se observó un gradiente espacial de aumento de la población del hongo a partir de la planta foco (Cuadro 4}. En la mayoría de los casos, al comparar las poblacio- nes entre los cultivares estándar y miniatura, la t: -]a--~1·.1---_,ILD-----l .. ;' ':s:oo - ,, r----~,-------i ;: = ¡¡----~:,-----f'i ------i NJ'(.J N:Tf.2 lWJ Cult. Resls!ente 1 Cult. SUsceptible FIGURA 11. Población de Fusariumoxyspo- rumen el Tratamiento con Formol al suelo de acuerdo con el tipo de respuesta dife- rencial de resistencia o susceptibilidad al ho"ngo en las tres áreas de muestreo, a los 11 meses de edad del cultivo. *se presentaron diferencias significativas entre los dos cultivares. densidad más alta se obtuvo en los cultivares es- tándar. En el tratamiento con Formol, este fenó- meno, también, se observó en las evaluaciones efectuadas a los los 11 y a los 13 meses de edad del cultivo (Cuadro 4), excepto para el muestreo realizado a los 15 meses (Agura 12). m Stóndor 0 Mlniafi.No FIGURA 12. Población de Fusariumoxyspo- rum en el Tratamiento con Formol al suelo de acuerdo con el tipo de cultivar en las tres áreas de muestreo, a los 15 meses de edad del cultivo. *se presentaron diferencias significativas entre los dos cultivares. Cuadro 3. Población de Fusarium oxysporumpara el tratamiento con Formol al suelo, expresada en unidades formadoras de colonias por gramo de suelo, de acuerdo con el tipo de respuesta diferencial de resistencia o susceptibilidad al hongo, en las cuatro fechas de muestreo (meses de edad del cultivo) 11 meses de edad del 13 meses de edad del 15 meses de edad del cultivo cultivo cultivo Resistente Susceptible Resistente Susceptible Resistente Susceptible Foco 4786+ 3278 4396" 2914 2129 2342 Adyacentes 2 5050 3569 4683 3323 1686 2551 Adyacentes 1 4683 3323 4205"" 3002 1573 2350 + = cada dato es el promedio de cuatro replicaciones por área de muestreo. • se presentaron diferencias significativas entre los dos cultivares. 126 17 meses de edad del cultivo Resislente !susceptible • 1812 1352 Cuadro 4. Población de FusaniJm oxysporumpara el tratamiento con Formol al suelo, expresada en unidades formadoras de colonias por gramo de suelo, de acuerdo con el tipo de cultivar, en las cuatro fechas de muestreo (meses de edad del cultivo) 11 meses de edad del 13 meses de edad del 15 meses de edad del 17 meses de edad del cultivo cultivo cultivo cultivo Estándar Miniatura Estándar IMiniatura Estándar Miniatura Estándar ~atura Foco 4377+ 3686 4204 * 3106 2007 2464 1380 1784 Adyacentes 1 4376 4243 4584 3421 1602. 2635 Adyacentes 2 4584 3421 4216*" 2989*" 2233 1689 + = cada dato es el promedio de cuatro replicaciones por área de muestreo. • se presentaron diferencias significativas entre los dos cultivares. El tratamiento con Dazomet al suelo, efectuado antes de la siembra de los cultivares de clavel, pretendió reducir significativamente el inóculo del patógeno, formado en el ciclo anterior de pro· ducción de clavel. La población promedia de Fusaríum oxysporum registrada en el área de la rizósfera fue dex 3.749 ufc/g de suelo en la primera fecha de muestreo para los cultivares miniatura suscepti- bles y de 3.393 ufc/g de suelo para los cultivares estándar susceptibles (Figura 13). 1:ao~~----l 111 '~J~----~~~---------------1 i~~--------~~=-~~--~-4 J1~--------------~-~~-----4 H 13 111 t1 Meses después de S~mbro -x- Estóndar ·Susceptible ---x··· Miniatura SUsceptible FIGURA 13. Dinámica poblacional de Fusa- rium oxysporum en el tiempo en el área de influencia de la planta Foco para los culti- vares Estándar y Miniatura susceptibles en el Tratamiento con Dazomet. A pesar de las altas poblaciones del hongo en la rizósfera, en la mayoría de los casos no se re gis· traron nuevos focos de infección. Sólo, en algu· nos cultivares miniatura susceptibles, se regis- traron plantas enfermas en la última fase del muestreo. De acuerdo con lo anterior, en los dos tipos de cultivares se presentó un descenso en la pobla- ción del hongo hasta los 15 meses de edad del cultivo, cuando se registró, en los cultivares es- tándar susceptibles, 1.848 ufc/g de suelo y. en los cultivares miniatura susceptibles, 1.293 ufc/g de suelo. A partir de esta fecha, la población del hongo mostró un aumento en los dos tipos de cultivares. Los cultivares estándar susceptibles alcanzaron una población de 2.324 ufc/g de sue- lo a los 17 meses de edad del cultivo y los culti- vares miniatura susceptibles alcanzaron una densidad de 1.943 ufc/g de suelo. La mayor tasa de descenso de la población, en este caso, la presentaron los cultivares miniatura susceptibles (b= -336 ufc/mes) y la menor tasa se presentó en los cultivares estándar susceptibles (b= -175 ufc/mes). La población del hongo, registrada en el trata- miento con Dazomet, en la primera fecha de muestreo fue muy similar a la población observa- da en el tratamiento con Formol, aunque lapo- blación final sufrió un aumento en la cuarta fecha de muestreo, como consecuencia de algunas in- fecciones tardías. 127 Cuadro 5. Población de Fusarium oxysporumpara el tratamiento con Dazomet al suelo, expresada en unidades formadoras de colonias por gramo de suelo, de acuerdo con el tipo de respuesta diferencial de resistencia o susceptibilidad, en las cuatro fechas de muestreo 11 meses de edad del 13 meses de edad del 15 meses cultivo Resistente Foco 4544" 3571 1397 Adyacentes 1 4015 3990 Adyacentes 2 4381 4141 1950 2339 1393 + = cada dato es el promedio de cuatro replicaciones por área de muestreo. * =se presentaron diferencias significativas entre los dos cultivares. Las poblaciones de Fusarium oxysporum en la rizósfera, tanto en los cultivares resistentes, co- mo en la de los cultivares susceptibles, para las tres áreas de muestreo no presentaron diferen- cias significativas (Cuadro 5}. Por consiguiente, a partir de la planta foco no se observó un gra- diente de aumento de la población del hongo ha- cia las áreas adyacentes. En la comparación de las poblaciones del hongo por cultivar de clavel ~ Cull. Resistente O Cutt. Susceptible FIGURA 14. Población de Fusadum oxyspo- rumen el Tratamiento con Dazomet al sue- lo, de acuerdo con el tipo de respuesta di- ferencial de resistencia o susceptibilidad al hongo, a los 11 meses de edad del cultivo. *se presentaron diferencias signitivativas 128 resistente o susceptible, sólo se determinaron di- ferencias en el estrato foco, presentando, nueva- mente, los cultivares resistentes la mayor pobla- ción (Figura 14). De acuerdo con el tipo de cultivar y el tipo de res- puesta diferencial de resistencia o susceptibilidad al hongo, se observó que los cultivares estándar resistentes presentaron la mayor densidad del hongo en la rizósfera de la planta foco. En cuanto a los cultivares miniatura, a los 11 meses, en los estratos adyacentes 1 y 2, se presentó un resulta- do inverso, o sea, los cultivares susceptibles pre- sentaron una mayor población que los resistentes {Cuadro 6 y Figura 15). En cuanto a la compara- ción de las poblaciones del hongo dentro de estos mismos parámetros, sólo, se determinaron dife- rencias a los 11 meses de edad en los estratos Adyacentes 1 y Adyacentes 2, siendo las diferen- cias significativas en el primero y altamente signi- ficativas en el segundo (Rgura 15). La mayoría de los aislamientos de Fusarium oxysporum fueron no patogénicos en plantas de clavel, encontrándose que 72 de los 90 aisla- mientos inoculados fueron no patogénícos (77%), y solamente 18 aislamientos fueron pato- génicos (23%.). Este resultado muestra la abun- dancia de aislamientos de Fusaríum oxysporum no patogénicos o de formas especiales diferen- tes a la forma dianthíen los suelos en donde se realizó la investigación. Esta alta población de Cuadro 6. Población de Fusarium oxisporum para el tratamiento con Dazomet al suelo, expresada en unidades formadoras de colonias por gramo de suelo, de acuerdo con la interacción típo clavel por tipo de respuesta diferencial de resistencia o suscectibilidad al hongo, en las cuatro fechas de mues- treo. oco dyacentes 1 11 meses de edad del cultivo 1 Estándar ! Estándar ! Miniatura Resistente j Susceptible Resisten 4379+ 3393 4349 4422 2863 3607 •• 3005 4884 dyacentes 2 1 4884 3186 3879 •• 3104 i 2138 2369 15 meses de edad del cultivo 2183 1991 'niatura Miniatura Est sistente Susceptible Res 1805 1293 1298 2095 1142 2309 795 13 meses de edad del cultivo Miniatura Estándar Miniatura Susceptible Resistente Susceptible 2145 1495 2603 3186 3879 5096 1724 1400 2176 17 meses de edad del cultivo Estándar MiniaturaiMiniatura Susceptible Resistente 1 Susceptible 2324 1495 •y"* presentaron diferencias significativas y altamente significativas entre los cuatro cultivares. +=cada dato es el promedio de cuatro replicaciones por área de muestreo. 6COO .. ]&m 10 40CO ti '-...;;oco o 'Ero)) t:t ,91ro::l o FOCO ADY.1 ADY. 2 FIGURA 15. Población de Fusarium oxysporum las tres áreas de muestreo para el tratamiento con Dazomel al suelo, a los 11 meses de edad del cultivo . .. yH se pre- sentaron diferencias significativas y altamente significativas entre los cuatro cultivares. 129 Cuadro 7. Origen, patogenicidad e incidencia de los 90 aislamientos de Fusarium oxysporuminocu- lados. Tratamiento Tratamiento Formol zomet ¡ Número y porcentaje 8-53,4% 24 85.7% 1 de aislamientos no · palogénicos , Número y porcentaje 7-46,6% 4-14,3% de aislamientos patogénicos ' Incidencia 15- 80"/o 28-60% formas no patógenas del hongo debe evaluarse más profundamente para establecer la potencia- lidad de algunos de esos aislamientos en el con- trol biológico de la enfermedad. La incidencia promedia de enfermedad fue del 65 %, coincidiendo, nuevamente, que los aisla- mientos provenientes de los sitios tratados con Formol mostraron el nivel de incidencia más alto (80 %) (Cuadro 7}. AGRADECIMIENTOS Los autores expresan su agradecimiento a la empresa Queens Flower de Colombia y a los doctores Enrique García, Alejandro Saavedra y Mauricio Hernández por el apoyo brindado a la investigación, asi como a los profesores Enrique Torres, Ernesto Guevara y Germán Tovar por sus comentarios y sugerencias. LITERATURA CITADA 1. ARBELAEZ, G., GUZMAN, S., LEON, J., GONZALEZ, M., MOLINA, J. C., PARRA, J., ANGULO, J. F., & ALVAAEZ, J. D. 1993. Control integrado del marchitamiento vascular del clavel ocasionado por Fusarium oxysporumf. sp. dianthi Agronomía Colom- biana 10: 68-89. 2. BAAYEN, A. P. 1988. Fusariumwilt of car- nation. Disease development, resistance mechanism of the host and taxonomy of pat- 130 Testígo Relativo Testigo Promedio soluto 14.82.4% 26 86,7% 77%- (85%) 3- 17,6% 4 13,3% 23%-(15%} 17 • 60"/o 30-60% 65°/o - (60)% hogen. Ph. D. Thesis. University of Utrecht, The Netherlands. 3. BAKER, R. 1980. Measures to control Fu- sariumand Phialophorawilt diseases of car- nation. Plant Dísease 64: 743-749. 4. BERGER, A. D. 1977. Application of epide- miological principies to achieve plant disease control. Annual Review of Phytopathology 15: 165-183. 5. KOMADA, H. 1975. Oevelopment of a se- lectiva medíum for quantitatíve isolation of Fusariumoxysporumfrom natural soil. Rev. Plant Protect. Res. 8: 114-125. 6. PARRA, J. 1988. Efecto de la combinación de algunos tratamientos físicos y químicos sobre Fusaríum oxysporum f. sp. dianlhi en el cultivo del clavel (Dianthus caryophylluS} en la Sabana de Bogotá. Tesis de grado. Fa- cultad de Agronomía. Universidad Nacional de Colombia, Santafé de Bogotá. 7. RATTINK, H. 1977. Spread of Fusarium spp. in carnation by means of water. Acta Horticulturas 71. 103-1 065. 8. VANDERPLANK, J. E. 1963. Plant disea- ses: epidemics and control. Academic Press, New York. 9. ZADOKS, J. C. & R. D. SCHEIN. 1979. Epí- demics and plant disease management. 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