Microsoft Word - 12Agra_11264.doc 609 Original Article Biosci. J., Uberlândia, v. 27, n. 4, p. 609-618, July/Aug. 2011 TOXICIDADE DE ÓLEOS ESSENCIAIS DE EUCALIPTO E CITRONELA SOBRE Sitophilus zeamais MOTSCHULSKY (Coleoptera: Curculionidae) TOXICITY OF ESSENTIAL OILS OF EUCALYPTUS AND CITRONELLA ON Sitophilus zeamais Motschulsky (Coleoptera: Curculionidae) Marcio Akio OOTANI1; Raimundo Wagner de Souza AGUIAR2; Aurélio Vaz de MELLO1; Julcemar DIDONET2; Augustus Caeser Franke PORTELLA2; Ildon Rodrigues do NASCIMENTO2 1. Engenheiro Agrônomo, Mestre em produção vegetal. ootani667@hotmail.com ; 2. Professor, Doutor, Universidade Federal do Tocantins, Campus Universitário de Gurupi, TO, Brasil. rwsa@uft.edu.br RESUMO: As análises realizadas por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas CG/EM apresentou o citronelal como o principal fitoconstituinte dos óleos essenciais de Corymbia citriodora Hill & Johnson, e Cymbopogon nardus (L.), com 61,78 e 36,53%, respectivamente. A toxicidade dos óleos essenciais e do citronelal foi verificada para Sitophilus zeamais por meio das estimativas das curvas de concentrações resposta e tempos de exposição letais para 50 e 95% dos insetos (CL50, CL95, TL50 e TL95). A toxicidade do citronelal foi maior para S. zeamais, com CL50 e CL95 de 0,340 e 0,820µ L/cm 2 e TL50 e TL95 de 11,89 e 59,50h, respectivamente. A repelência de S. zeamais foi maior para os óleos essenciais de C. nardus e C. citriodora nas concentrações de 0,660; 0,881; 1,101 e 1,321µ L/cm2 com 86,6 a 98,8%. O número de insetos emergidos dos grãos pulverizados com os óleos essenciais foi maior para o citronelal nas concentrações de 0,330; 0,440; 0,550, e 0,660µ L/cm2. A redução da massa de grãos foi menor para aqueles grãos tratados com C. citriodora e C. nardus. Óleos essenciais de C. citriodora e C. nardus podem proteger produtos armazenados pelo dano causado por S. zeamais. PALAVRAS - CHAVE: Gorgulho do milho. Grãos armazenados. Inseticidas botânicos. INTRODUÇÃO Preocupações com a saúde humana e os problemas ambientais causados pelos inseticidas sintéticos usados na agricultura, intensificaram estudos para se encontrar alternativas seguras, eficientes e viáveis no controle de insetos-praga. Plantas com propriedades inseticidas apresentaram menor toxicidade para o homem e maior biodegradabilidade comparados aos inseticidas sintéticos e, por isto, as mesmas foram consideradas apropriadas para serem usadas por pequenos agricultores na proteção dos produtos armazenados (DAYAN et al., 2009). A proteção de grãos armazenados pelos danos causados por insetos pode ser realizada com o uso de produtos vegetais, como o extrato de folhas secas de nim (Azadirachta indica), misturado aos grãos ou aplicação direta desses produtos sobre a massa de grãos. Os efeitos tóxicos dos extratos botânicos podem ser devidos à presença de metabólitos secundários que afetam o desenvolvimento dos insetos praga presentes na massa de grãos (MICHAELRAJ; SHARMA, 2006). Esses metabólitos podem apresentar propriedades lipofílicas, que inibem os processos fisiológicos e bioquímicos (NERIO et al., 2009; BATISH et al., 2008; PAPACHRISTOS; STAMOPOULOS, 2004; PARK et al.,2003) A toxicidade dos óleos essenciais de Corymbia citriodora Hill e Johnson (Eucalyptus citriodora Hook) e Cymbopogon nardus (L.), tem sido verificada para o controle de Sitophilus oryzae Lin. (Coleoptera: Curculionidae), Callosobruchus chinensis L. (Coleoptera: Bruchidae), devido à presença de monoterpenos e sesquiterpenos (ISMAN, 2006; TINKEU et al., 2004). A produção de metabólitos secundários pode variar com as relações ecológica e genética da planta e estímulos bióticos e abióticos proporcionado pelo meio ambiente, que podem ativar genes biossintéticos que sintetizam substâncias de defesa após injúria causada por microrganismos ou insetos e mudanças sazonais (CASTRO et al., 2010; MARCO et al., 2007). O objetivo deste trabalho foi avaliar a toxicidade dos óleos essenciais de Citronela C. nardus e Eucalipto C. citriodora e do composto majoritário citronelal sobre S. zeamais. MATERIAL E MÉTODOS Criação de Sitophilus zeamais A população de S. zeamais foi obtida de armazém no município de Gurupi em Tocantins e Received: 07/12/10 Accepted: 05/05/11 610 Toxicidade de óleos... OOTANI, M. A. et al. Biosci. J., Uberlândia, v. 27, n. 4, p. 609-618, July/Aug. 2011 deixada por quatro gerações ate o começo dos bioensaios. Esses insetos foram mantidos em grãos de milho EMBRAPA-CNPM BRS 3060, que foram obtidos das plantações orgânicas da Universidade Federal do Tocantins. Os bioensaios foram realizados no laboratório de Manejo Integrado de Pragas em câmara do tipo B.O.D (Biochemical oxygen demand) com temperatura de 28,7 ± 1,12ºC, umidade relativa do ar de 61,3 ± 2,6% e fotoperíodo de 12 horas, em recipientes de vidro fechados com tampa de plástico perfurada e revestida, internamente, com tecido do tipo nylon para aeração. O confinamento dos insetos foi realizado durante 15 dias para os mesmos colocarem posturas. Posteriormente, esses insetos foram retirados e os recipientes estocados até a emergência da geração F1. Esse procedimento foi realizado por sucessivas gerações para obtenção do número suficiente de adultos. Obtenção dos óleos essenciais de Corymbia citriodora e Cymbopogon nardus Plantas de C. nardus foram colhidas na horta de plantas medicinais no Campus Universitário de Gurupi em Tocantins em setembro de 2009 e C. citriodora na empresa JAMP Agropecuária, Reflorestamento, Indústria e Comércio Ltda em Gurupi, Gurupi/TO. O óleo essencial de citronela foi extraído de 300g de folhas picadas, acondicionadas em um hidrodestilador modelo do tipo Clevenger de volume de 1L. O composto majoritário citronelal usado nos bioensaios foi obtido da empresa Sigma-Aldrich do Brasil Ltda situada em São Paulo com 85% de grau de pureza, em frasco de 100 mL. Identificação por Cromatografia Gasosa e Espectrometria de Massa (CG/EM) A identificação dos óleos essenciais foi realizada com Hewlett Packard 5890 SERIES equipado com detector de ionização (FID) e J & W Scientific DB-5. O índice de retenção foi obtido após aplicação de amostra de óleo essencial com mistura de hidrocarbonetos lineares C11-C24 (índice de retenção variando de 900 a 1099 obtido por extrapolação). Análise dos óleos essenciais por CG/EM foi realizada com aparelho Shimadzu QP5050 quadrupole com coluna de capilaridade com sílica (30m x 0,25mm x 0,25µm). Programou-se a temperatura da coluna para 40°C por 2 min, variando de 220°C min-1, aumentando para 280°C à 20°C min-1 para integração. As temperaturas do injetor e detector foram de 250°C e 280°C, respectivamente, O hélio foi utilizado como carreador gasoso e fluxo de 1,50mL min-1, (1:50). O espectro de massa foi obtido a 70 eV e a velocidade de leitura foi 0,50scan s-1de m/z 40 à 650. A identificação dos constituintes foi realizada por comparação dos índices de retenção (VANDENDOLL; KRATZ, 1963) e por comparação computadorizada do espectro de massa obtido com aqueles da biblioteca de espectro de massas do NIST do banco de dados GC/EM (ADAMS, 2007). Bioensaios de concentração resposta Bioensaios de concentração resposta foram realizados em frasco cilíndrico de vidro transparente de 20 mL de volume, com área interna de 27cm2. Para se determinar a CL50 e CL95 dos óleos essenciais de C. citriodora e C. nardus e do constituinte majoritário citronelal, os mesmos foram diluídos em acetona, nas concentrações de 0,185; 0,370; 0,555; 0,740; 0,925; 1,111 e 1,296 µ L/cm2, com quatro repetições com 20 insetos adultos para cada concentração mais testemunha com acetona, aplicados nos recipientes de vidro e submetidos à rotação até volatilização da acetona para a impregnação uniforme dos óleos essenciais na parte interna do frasco. Em seguida, 20 insetos adultos não sexados de S. zeamais foram colocados nesses frascos e tampados com tecido de nylon para deixar a troca gasosa. Avaliações de mortalidade de insetos foram realizadas após 12 e 24 horas de exposição aos óleos essenciais. Bioensaios de tempo de resposta Os bioensaios de tempo de resposta foram realizados com aplicação direta dos óleos essenciais em 50g de milho em potes de 227cm2 com 50 insetos com o tempo de exposição (12, 24, 36, 48, 60, 72, 84, 96 e 120h), para cada concentração dos óleos essenciais, sendo para C. nardus e C. citriodora (0,660; 0,881; 1,101 e 1,321µ L/cm2), respectivamente. Os tempos de exposição para o composto citronelal (1, 6, 12, 18, 24, 30, 36h) e as concentrações (0,330; 0,440; 0,550 e 0,660µ L/cm2) com quatro repetições, com 20 insetos adultos para cada concentração mais testemunha (água) respectivamente. Os biensaios foram realizados em câmaras de incubação com fotoperíodo de 10h de escuro e 14h de luz a temperatura de 28 oC. Dados dos biensaios de concentração resposta (CL50 e CL95) e tempo resposta (TL50 e TL95) foram submetidos à análise de Probit (probit analisys), usando o programa Pólo Plus 2.0, o que gerou as curvas de concentração-resposta e tempo- resposta. 611 Toxicidade de óleos... OOTANI, M. A. et al. Biosci. J., Uberlândia, v. 27, n. 4, p. 609-618, July/Aug. 2011 Bioensaios de Repelência Os bioensaios de repelência de S. zeamais foram realizados com os óleos essenciais de C. citriodora e C. nardus (1,101; 1,321 e 0,660; 0,881µ L/cm2), respectivamente e citronelal (0,330; 0,440; 0,550 e 0,660µ L/cm2). Cinquenta insetos foram liberados em teste de chance de escolha, e o percentual de repelência foi calculado com modelo matemático (NERIO et al., 2009). O percentual de repelência pelos óleos essenciais foram avaliados após 24h de avaliação e esses dados foram submetidos a análise de média e comparados com o teste de Tukey a 5% de probabilidade com o programa computacional SAS 9.1.3. Outros procedimentos experimentais O teste da emergência de S. zeamais foi realizado em grãos de milho da variedade BRS 3060 em potes de 227cm2, com 50g de milho pulverizados com óleos essências de C. citriodora e C. nardus nas concentrações 0,660; 0,881; 1,101 e 1,321 µ L/cm2 e citronelal nas concentrações 0,330; 0,440; 0,550 e 0,660 µL/cm2. Enquanto para a análise de redução da massa de grãos, foram utilizados os mesmos procedimentos descritos anteriormente, com pulverização dos óleos essenciais de C. citriodora e C. nardus nas concentrações 0,066 e 0,132 µ L/cm2 . Todos os experimentos consistiram de quatro repetições contendo 50 insetos adultos não sexados mais testemunha (1000 µ L de água). O número de insetos emergidos foi avaliado após 21, 42 e 63 dias do tratamento e a redução da massa de grãos foi avaliada após 35 e 45 dias da aplicação dos óleos essenciais. Os dados foram submetidos a analise de média comparado pelo teste de Tukey a 95% de significância com o programa computacional SAS. 9.1.3. RESULTADOS E DISCUSSÃO As análises dos óleos essenciais feitas por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas indicaram os prováveis fitoconstituintes e seus respectivos percentuais na composição dos óleos essenciais de C. citriodora e C. nardus (Tabela 1). Tabela 1. Composição química, concentrações (%) e índices de Kovats (calculado e tabelado) para os óleos essenciais de Cymbopogon nardus e Corymbia citriodora Concentrações (%) Índices de Kovats Composto químico Cymbopogon nardus Corymbia citriodora IKtab IKcalc β-pineno - 2,83 980 980 1,8-Cineol - 3,44 1033 1027 Isopulegol 1,40 15,54 1146 1144 Citronelal 36,53 61,78 1153 1152 β-citronelol 13,10 7,90 1228 1229 (Z)-Carriofileno - 2,13 1404 1399 Geraniol 25,56 - 1255 1249 Acetato citroneliol 2,22 - 1354 1351 Acetato de geraniol 1,51 - 1383 1386 Germacreno-D 0,69 - 1480 1489 Delta cadileno 1,09 - 1524 1516 Elemol 8,24 - 1549 1548 Germecreno-D-4-ol 1,64 - 1574 1573 Total 91,98 93,62 - - IKtab = índice de Kovats tabelado / IKcal = índice de Kovats calculado (ADAMS, 1995) Treze constituintes foram encontrados em concentrações acima de 1%. O citronelal foi o composto majoritário no óleo essencial de C. citriodora com 61,78%, seguido do isopolegol com 15,58%. Por outro lado, o citronelal foi composto predominante no óleo essencial de C. nardus com 36,53%, seguido do geraniol com 25,56% e β- citronelol com 13,10% (Tabela 1). Esses óleos essenciais tiveram mais de 80 substâncias identificadas, mas o citronelal, citronelol, geraniol e ésteres foram os predominantes em C. nardus (MARCO et al., 2007). A concentração resposta dos óleos essenciais para S. zeamais mostrou maior expressividade para o constituinte citronelal, com CL50 e CL95 de 0,340 e 0,820 µ L/cm 2, respectivamente diferindo-se em mais 40% da CL50 e CL95 dos óleos essenciais de C. nardus e C. citriodora (Tabela 1). Desse modo, observa-se que na analise estatística realizada com citronelal, 612 Toxicidade de óleos... OOTANI, M. A. et al. Biosci. J., Uberlândia, v. 27, n. 4, p. 609-618, July/Aug. 2011 verifica-se que os intervalos fundiciais dos CL50 e CL95 para S. zeamais não se sobrepuseram aos resultados dos intervalos fundiciais dos demais óleos essenciais; então, S. zeamais apresentou maior susceptibilidade ao constituinte citronelal isoladamente. A diferença entre óleos essenciais na toxicidade de S. zeamais pode estar associada à concentração dos constituintes. No entanto, a bioatividade está relacionada com a concentração e a predominância dos constituintes. A concentração dos constituintes pode ser atribuída ao efeito tóxico, que em menores concentrações, como limoneno possui efeito tóxico para C. chinensis e S. (PARK et al., 2003). Conforme os resultados obtidos demonstram que a toxicidade dos óleos essenciais de C. citriodora e C. nardus apresentadas para S. zeamais está associado ao constituinte citronelal, diferindo assim, na concentração e na toxicidade dos óleos (Tabela 1 e 2). Estudos demonstram que o citronelal foi constituinte determinante na toxicidade de C. citriodora para S. zeamais (TINKEU et al., 2004). Tabela 2. Concentração letal necessária para se controlar 50% e 95% da população de Sitophilus zeamais submetido ao efeito dos óleos essenciais de Cymbopogon nardus e Corymbia citriodora e do constituinte citronelal Óleos essenciais Inclinação ± EPM CL50 (µ L/cm2) IF (CL50) CL95 IF (CL95) X 2 P C. citriodora 38,070 ± 5,120 0,740* 0,918-0,809 1,180* 1,080-1,320 4,37 0,0500 C. nardus 30,964 ± 4,379 0,820** 0,749-0,900 1,349** 1,229-1,540 1,60 0,0001 Citronelal 38,014 ± 5,288 0,340* 0,289-0,600 0,800* 0,680-1,109 2,56 0,0550 EPM = Erro padrão da média; CL = concentração letal (µL/cm2); IF = Intervalo Finducial a 95% de probabilidade; X2 = Qui-quadrado; P = Probabilidade. O tempo resposta (TL50 e TL95) para S. zeamais referente aos óleos essenciais de C. nardus e C. citriodora são apresentados na Tabela 3. Observou-se que o TL50 de C. citriodora para as concentrações 0,660; 0,881; 1,101 e 1,321 µ L/cm2, variaram de 9,22 a 49,22 horas. Enquanto, o TL50 de C. nardus, variou de 12,77 a 51,94 horas. Comparativamente, o TL50 do constituinte citronelal para as concentrações de 0,330; 0,440; 0,550 e 0,660 µ L/cm2; variaram de 1,39 a 11,89 horas. Os TL95 foram de 44,49 a 131,21 horas para C. nardus e de 41,11 a 129,180 horas para C. citriodora e de 7,81 a 59,50 horas para citronelal, nas respectivas concentrações descritas anteriormente. Tabela 3. Tempo (h) necessário para se controlar 50% e 95% da população sobre o efeito dos diferentes óleos essenciais Cymbopogon nardus e Corymbia citriodora e do constituinte citronelal na mortalidade de Sitophilus zeamais. Óleos essenciais Conc. (µ L/cm2) Inclinação ±EPM TL50 (horas) IF (TL50) TL95 (horas) IF (TL95) X2 P C. citriodora 0,660 3,92 ± 0,43 49,22 32,9-64,40 129,18 91,0-330,2 3,03 0,100 0,881 2,81 ± 0,42 24,75 17,6-30,50 95,17 76,3-136,0 2,54 0,325 1,101 3,85 ± 0,64 23,98 18,3-28,30 63,99 52,7-89,1 1,16 0,199 1,321 2,53 ± 0,74 9,22 1,30-16,00 41,11 30,1-63,4 0,70 0,236 C. nardus 0,660 4,08 ±0,44 51,94 36,3-66,90 131,21 94,0-310,5 5,09 0,987 0,881 4,77 ± 0,62 27,95 17,1-36,20 61,80 46,4-125,5 0,54 0,181 1,101 3,55 ± 0,48 27,28 21,6-32,00 79,17 67,798,6 0,42 0,140 1,321 3,03 ± 0,74 12,77 6,1-17,80 44,49 35,2-65,6 0,74 0,249 Citronelal 0,330 1,27 ± 0,14 11,89 6,4-19,4 59,50 56,61-114,05 1,69 0,424 0,440 1,13 ± 0,13 5,63 2,40-9,50 32,13 18,54-59,33 3,18 0,795 0,550 0,88 ± 0,13 1,38 0,20-3,00 7,81 4,85-9,22 2,03 0,508 Conc.=Concentração; EPM = erro padrão da media; TL = Tempo letal (horas); IF = Intervalo Fiducial a 95% de probabilidade; X2 = Qui-quadrado; P = Probabilidade. 613 Toxicidade de óleos... OOTANI, M. A. et al. Biosci. J., Uberlândia, v. 27, n. 4, p. 609-618, July/Aug. 2011 Em todos os bioensaios verificou-se que o tempo de exposição foi altamente dependente das concentrações dos óleos essenciais, sendo mais expressivo para o constituinte citronelal purificado, com menos da metade do tempo e da concentração para proporcionar o mesmo efeito dos óleos de C. nardus e C. citriodora. De acordo com os resultados obtidos da cromatografia (Tabela 1), observa-se que o citronelal é o principal constituinte dos óleos essenciais de C. citriodora e C. nardus. Justificando assim, a alta toxicidade dos óleos essenciais para S. zeamais no presente trabalho. Kim et al. (2003) destacaram que destilados das folhas de C. nardus (rico em citronelal) foi altamente tóxicos para o acaro Tyrophagus putrescentiae Schrank (Astigmata: Acaridae) de produtos alimentícios. Enquanto, Calderone et al. (1997) observaram que o constituinte timol com citronelal foi a mais ativa contra o ácaro Varroa jacobsoni Oudemans (Acari: Mesostigmata: Varroidae). Com relação à toxicidade de citrolelal foi verificada para Aedes albopictus (Diptera: Culicidae) mortalidade de 85,5-94,5% no período de 48 horas (HAO et al.,2008; JAENSON et al., 2006; PARK et al., 2005; YANG et al., 2004; TINKEU et al., 2004), estes resultados corroboram com os resultados obtidos neste trabalho, que demonstram alta toxicidade do constituinte citronelal para S. zeamais. A repelência do S. zeamais promovida pelos óleos essenciais de C. nardus e C. citriodora foram semelhantes estatisticamente (P<0,05) nas concentrações de 0,660; 0,881; 1,101 e 1,321 µ L/cm2; com porcentagem de repelência de 86,6 a 98,8%. O constituinte citronelal foi o menos expressivo com repelência de 67,6 a 95,3 % para as concentrações de 0,330 a 0,660 µ L/cm2, diferindo estatisticamente (P<0,05) dos demais tratamentos (Figura 1). Esses resultados são semelhantes aos encontrados por Nerio et al. (2009). Observou-se que a repelência de S. zeamais para os óleos essenciais de C. citriodora e C. citratus é dependente da concentração dosóleos, com mais de 90% de repelência dos insetos para a concentração de 0,503 µl/cm2. A A B Porcentagem de Repelência 0 25 50 75 100 Ó le os E ss en ci ai s Citronelal Eucalipto Citronela Testemunha A A B B b Conc.: 0,330 µL/cm 2 Testemunha Conc.: 0,440 µL/cm2 Conc.: 0,550 µL/cm 2 Conc.: 0,660 µL/cm2 Conc.: 0,660 µL/cm2 Conc.: 0,881 µL/cm2 Conc.: 1,101 µL/cm2 Conc.: 1,321 µL/cm2 a a a b a a a a a a b b Figura 1. Efeito de repelência dos óleos essenciais de Cymbopogon nardus e Corymbia citriodora e do composto Citronelal sobre Sitophilus zeamais em teste de livre escolha após um período de 24 horas de exposição dos insetos. Media seguida da mesma letra, Maiúscula entre óleos, minúscula entre concentrações, não diferem, entre si pelo teste de Tukey (P<0,05). 614 Toxicidade de óleos... OOTANI, M. A. et al. Biosci. J., Uberlândia, v. 27, n. 4, p. 609-618, July/Aug. 2011 Atividades de repelência promovidas por óleos essenciais já foram verificadas para diferentes tipos de insetos de grãos armazenados como Callosobruschus maculatus Fabr. (Coleoptera: Bruchidae) (RAJENDRAN; SRIRANJINI, 2008). Sendo observado também que a constituição do óleo é um fator determinante para a repelência dos insetos, como observado o efeito de repelência promovida por timol para Tribolium confusum J. du Val (Coleoptera: Tenebrionidae) e Lasioderma serricorne Fabr. (Coleoptera: Anobiidae) (OJIMELUKWE; ADLER, 1999). A emergência de S. zeamais da massa de grãos foi altamente influenciada pelos óleos essenciais de C. citriodora e C. nardus, com diferenças significativas (P<0,05) entre as concentrações comparando com os insetos emergidos de grãos não tratados com óleo (Figuras 2AB). Observa-se que o número de insetos emergidos foi mais acentuado aos 21 dias, diminuindo gradativamente a emergência até 63 dias de avaliação (Figuras 2AB). O constituinte citronelal não apresentou efeito sobre a emergência dos insetos, não diferindo estatisticamente (P<0,05) dos grãos não tratados com óleo (Figura 2 C). N o d e in se to s em er g id o s 0 10 20 30 40 Conc.: 0,660 µL/cm 2 Conc.: 0,881 µL/cm2 Conc.: 1,101 µL/cm2 Conc.: 1,321 µL/cm 2 Testemunha A A A B B B A N o d e in se to s em er gi d o s 0 10 20 30 40 Periodo de exposição (Dias) 21 42 63 N o d e in se to s em er g id os 0 10 20 30 40 Conc.: 0,330 µL/cm2 Conc.: 0,440 µL/cm2 Conc.: 0,550 µL/cm2 Conc.: 0,660 µL/cm2 Testemunha A A A A A A B B B C B a b b b a a a bbb b b b b b a a a b b b b bb b b b bb b a a a aa a a a a a a a a aa Figura 2. (A) Grãos pulverizados com diferentes concentrações de óleo essencial de Corymbia citriodora (B) Grãos pulverizados com diferentes concentrações de óleo essencial de Cymbopogon nardus. (C) Grãos pulverizados com diferentes concentrações de citronelal. Media seguida da mesma letras, sendo maiúscula entre os tempos de exposição, minúscula para colunas de concentrações, não diferem entre si pelo teste de Tukey (P<0,05). 615 Toxicidade de óleos... OOTANI, M. A. et al. Biosci. J., Uberlândia, v. 27, n. 4, p. 609-618, July/Aug. 2011 A menor toxicidade do citronelal sobre a emergência de S. zeamais pode estar associado à hipótese de que o constituinte citronelal possui menor capacidade de penetração no grão e consequentemente não afeta o desenvolvimento do S. zeamais. Segundo Tinkeu et al. (2004) aponta como principal propriedade de um fumigante a sua capacidade de difusão na massa de grãos, pois a difusão de um gás depende principalmente de seu peso molecular e seu ponto de ebulição, quanto menores esses valores, maior é a velocidade de difusão. O efeito dos óleos essenciais de C. nardus e C. citriodora na redução da massa dos grãos foi 0,50 a 0,69 g/100g de grãos e 0,34 a 0,56 g/100g de grãos pelo S. zeamais não difere estatisticamente, o mesmo observado entre as concentrações (Figura 3). No entanto, grãos não tratados foi substancialmente significativo na redução do peso (P<0,05) (Figura 3). A atividade dos óleos essenciais C. nardus e C. citridiodora na redução da massa de grãos pode estar associada a capacidade dos vapores dos óleos em penetrar na massa de grãos e ocasionar toxicidade nas larvas endofitica de S. zeamais. Alguns estudos demonstraram que os óleos essenciais afetam diretamente o desenvolvimento embrionário dos ovos (TAPONDJOU et al., 2005; KETOK et al., 2005). Consumo em g/100g 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 O le o s e s s e n c ia is Citronela Eucalipto Testemunha b b b b B A B a 0.69 0.50 0.56 0.34 2.47 Dose: 0,066 µL/cm 2 Testemunha Dose: 0,132 µL/cm 2 Figura 3. Efeito do óleo essencial de Cymbopogon nardus e Corymbia citriodora na redução da massa de grão submetido à infestação de Sitophilus zeamais. Medias seguida da mesma letra, sendo maiúscula entre óleos essenciais, minúscula entre concentrações, não diferem entre si pelo teste de Tukey (P<0,05). A utilização de óleos essenciais pode ser uma alternativa ou adjuvante no controle de populações de insetos resistentes a inseticidas convencionais, considerando que os elevados níveis de resistência a inseticidas em insetos de produtos armazenados no Brasil (PIMENTEL et al., 2009). Uma das prerrogativas para diminuir a velocidade de estabelecimento de populações com alta freqüência de genes que conferem resistência a determinado agente de controle, é o emprego de mistura de inseticidas, uso alternado de dois ou mais inseticidas ou alteração no método de controle (SOUSA et al., 2008). A avaliação da bioatividade de cada óleo essencial C. nardus e C. citriodora em diferentes aspectos do desenvolvimento de S. zeamais é uma abordagem necessária para assegurar a redução da infestação deste inseto em condições de armazenamento e dos seus efeitos sobre outras espécies de insetos de grãos armazenados, que será útil para o estabelecimento de um programa de proteção a longo prazo de produtos armazenados e 616 Toxicidade de óleos... OOTANI, M. A. et al. Biosci. J., Uberlândia, v. 27, n. 4, p. 609-618, July/Aug. 2011 para prever se a erradicação de uma espécie pode levar à proliferação de outros menos suscetíveis que a principal praga. CONCLUSÕES A utilização dos óleos essenciais de C. citriodora e C. nardus para o controle de S. zeamais, proporciona toxicidade, repelência, redução da infestação da praga e da perda de peso de grãos de milho comparável a outros inseticidas convencionais. A toxicidade apresentada pelo constituinte citronelal, caracteriza por ser o agente tóxico presente nos óleos essenciais de C. citriodora e C. nardus para S. zeamais. AGRADECIMENTOS Ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico “CNPq” pelo suporte financeiro e bolsas concedidas. ABSTRACT: Analysis of GC / MS showed citronellal as the main phytochemicals of the essential oils of Corymbia citriodora and Cymbopogon nardus, with 61.78% and 36.53%, respectively. The toxicity of essential oils and citronellal was verified for maize weevils, through the estimates of the concentration response curves and lethal exposure times, for 50% and 95% of the adults insect (LC50, LC95, LT50 and TL95). The toxicity of citronellal was higher for Sitophilus zeamais, with LC50 and LC95 of 0.340 at 0.820 µL/cm 2, TL50 and TL95 of 11.89 and 59.50h, respectively. The repellency of S. zeamais was higher for the essential oils of C. nardus and C. citriodora, at concentrations of 1.321, 1.101, 0.881 and 0.660 µL/cm2, ranging from 86.6 to 98.8%. The number of insects emerged from grain sprayed with essential oils was lower for the citronellal, at concentrations of 0.330, 0.440, 0.550, and 0.660 µL/cm2. The reduction in grain weight was lower for those grains, treated with C. citriodora and C. nardus. Essential oils of E. citriodora and C. nardus can protect stored products from damage caused by S. zeamais. KEYWORDS: Weevil Maize. Stored Grain. Botanical Insecticides. REFERÊNCIAS ADAMS, R. P. Identification of essential oil components by gás chromatography/ mass spectrometry. Allured Publishing Corporation Carol Stream, Carol Stream, 2007. p. 804. BATISH D. R.; SINGH, H. P.; KOHLI, R. 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