Conseguences of soil crude oil pollution on some wood properties of olive trees الكيمياء |400 7312( عام 1العدد ) 03مجلة إبن الهيثم للعلوم الصرفة والتطبيقية المجلد Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 30 (1) 2017 تتراسايكلين هيدروكلوريد بصورته النقية وفي مستحضرات للالتقدير الطيفي قتران مع حامض االنثرانلك المؤزوتصيدالنية باال مريم محسن عبد سرمد بهجت ديكران علي خليل محمود التربية للعلوم الصرفة )ابن الهيثم(/ جامعة بغدادقسم الكيمياء/ كلية 6102/حزيران/5قبل في: ،6102/أيار/8استلم في: الخالصة بعض تتراسايكلين هيدروكلوريد في عيناته النقية وفي دواء لتقدير ةوحساس ةوسريع ةطريقه طيفيه سهلتم استعمال مع حامض االنثرانلك المؤزوت لتكوين اعاله لمضاد الحيويلاقتران تفاعل حضرات الصيدالنية. تعتمد الطريقه علىتالمس طريقة المتغيرات عملتاستاذ نانوميتر، 914عطت اعلى امتصاص عند الطول الموجي صفراء اللون أزو مستقرة آصبغه خطية تراوحت )تصميم التراكم المركزي( عطت طريقة المتغيرات المتعددةأ االحادية والمتعددة لضبط ظروف التجربة. وبحد كشف يساوي 1-.سنتيمتر1-لتر.مول 19014وامتصاصية مولية مقدارها 1-ملليتر.( ميكروغرام03-3.0) بين المستحضرات بعض . تم تطبيق الطريقه بنجاح في تقدير تتراسايكلين هيدروكلوريد في 1-رملليت.ميكروغرام 3.7210 من المتداخالت المتواجدة في تلك المستحضرات.وبدون تأثير يذكر على قيم االمتصاص ةالصيدالني زو، المتغيرات االحادية والمتعددة.آطيفية، تتراسايكلين هيدروكلوريد، :الكلمات المفتاحية الكيمياء |401 7312( عام 1العدد ) 03مجلة إبن الهيثم للعلوم الصرفة والتطبيقية المجلد Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 30 (1) 2017 المقدمة الكيميائية الصيغةيمتلك الحلقةتتراسايكلين هيدروكلوريد هو اسم لمركب هيدروكاربوني رباعي .HCl8O2N24H22C[1] االلتهابات الناتجة من البكتريا الموجبة في معالجة الكثير منيستعمل مضاد حيوي فعال وهو الناتجة عن الجروح والحروق وحب الشباب والتهابات العين االلتهابات مثل ،]7،0[ والسالبة تجاه صبغة الغرام وساطةتتراسايكلين هيدروكلوريد ب امتصاص يقل .]0[كذلك يستعمل العقار اعاله في معالجة مرض الكوليرا .]0،9[للثةاو من الممكن ان تكون معقدات غير قابله للذوبان مع الكالسيوم والمغنيسيوم والحديد ألنهاوالحليب الحموضةمضادات ] 1[يوضح الصيغة التركيبية للعقار اعاله.( 1مخطط ) [.0،0] (0مخطط ) ، االدمصاص الفولتامتري ]HPLC ،RHPLC [8] ،LC ],4[7,6] تترااسايكلين مثل عقارعدة طرائق لتقدير ستعملتا ةعلمي ة[ وعلى اية حال تتطلب هذه الطرائق معدات غالية الثمن ومهار10-11[ و الحقن الجرياني ]13] [ ،االزدواج 19معقدات لهذا العقار مع الحديد ]، هي االكثر انتشارآ لتقدير تتراسايكلين مثل تكوين الطيفيةلطرائق ا [ .12الطرائق الطيفيه الحركيه ]و[ 12معقدات انتقال الشحنه ] [،10ازدواج ديازو] [،10التأكسدي ] النقية وفي المستحضرات بصورتهتتراسايكلين هيدروكلوريد عقار يتضمن العمل اقتراح طريقة طيفية جديدة لتقدير اصفر اللون.لتكوين صبغه ازو مستقرة محلولها المؤزوت اقترانه مع حامض االنثرانلكالصيدالنية عن طريق طريقتان لضبط ظروف العمل وايجاد الظروف الفضلى لتقدير العقار اعاله وهما طريقة المتغيرات االحادية عملتاست ات المتعددة والمتمثلة بتصميم التراكم المركزي.غيروطريقة المت الجزء العملي ستعملةالم األجهزة الكوارتزخاليا من عملتواستUV-VIS 1800- SHIMADZU جهاز مطياف ذي الشعاع المزدوج نوع ستعمل ا .Labtechنوع ومسخن حراري Sartoriusنوع مراتب بعد الفارزة ةذو اربعسم، ميزان حساس 1ذات مسار ضوئي تعملةالمواد والمحاليل المس والماء المقطر في تحضير المحاليل العالية النقاوةذات الكيميائيةالمواد عمال تم است 0-ملليتر.ميكروغرام 511محلول عقار تتراسايكلين هيدروكلوريد النقية المادةمن غرام 33.30أذابة من 1-ملليتر.ميكروغرام 033حضر محلول تتراسايكلين هيدروكلوريد بتركيز من الماء المقطر واكمال الحجم الى العالمة ليترمل 13في العراق(سامراء – األدويةلصناعة العامة الشركة)مزوده من .ليترمل 133قنينة حجمية ذات سعة باستعمال محاليل الحوامض والقواعد المستعملة وهيدروكسيد البوتاسيوم ومحاليل هيدروكسيد الصوديوم موالري 0الهيدروكلوريك بتركيز حضرت محاليل لحامض موالري لكل منهم في وسط مائي 1 وهيدروكسيد الليثيوم وهيدروكسيد االمونيوم اضافة الى كاربونات الصوديوم وبتركيز واستعملت بدون معايرة. موالري 1.115محلول ملح الديازونيوم من الماء المقطر مع الرج ليترمل 03 حامض االنثرانلك فيمسحوق من رامغ 3.3020تم تحضير هذا المحلول بأذابة المزيج في . وبعد ان بردمن حامض الهيدروكلوريك المركز مع التحريك ليترمل 3.02 اضيف التامة اإلذابةوبعد ,والتسخين من نتريت رامغ 3.3090 اضيفثم ليترمل 133نقل المحلول الى قنينه حجميه معتمه سعه م( ° 0-3بحدود ) حمام ثلجي الكيمياء |402 7312( عام 1العدد ) 03مجلة إبن الهيثم للعلوم الصرفة والتطبيقية المجلد Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 30 (1) 2017 محلول الحجم الى العالمة بالماء المقطر وحفظ واكمل دقائق 0لمدة المزيج ترك لحين ذوبان الملح وورج المزيج الصوديوم .في الثالجهالمؤزوت االنثرانلك حامضملح ل المستحضرات الصيدالنيةاليمح من المستحضر ةمعين ت كميةوزن , ثم(ةكبسوالت مع بعض ) بعد وزن كل واحدة على حد 13تم خلط محتوى ملليتر من الماء المقطر ورشح 03واذيبت في من المادة الدوائية النقية. رامملغ 703 كافيءمايعلى ي تحوالصيدالني ملليتر 133بعد االذابة الى قنينة حجمية سعة ت هذه الكمية( نقل .91Whatman Noورقة ترشيح نوع ) المحلول باستخدام لى العالمة.كمل الحجم بالماء المقطر ااثم طريقة العمل االولية د مع ملح الديازونيوم المحضر، يهيدروكلور تتراسايكلينتمهيدية واولية لمعرفة امكانية اقتران عقار اجريت دراسة 1تحتوي على ليترمل 13موالري الى قنينة حجمية سعة 3.330ملليتر من ملح الديازونيوم بتركيز 3.0حيث تم اضافة ملليتر من 3.0مع الرج ثم يضاف اليه 1-ملليتر.ميكروغرام 133محلول التتراسايكلين هيدروكلوريد ذو تركيز من ليترمل موالري ويكمل الحجم الى 0ملليتر من حامض الهيدروكلوريك 3.7موالري وبعدها يضاف اليه 1 هيدروكسيد الصوديوم .1-ملليتر.ميكروغرام 13بعد التخفيف تراسايكلين هيدروكلوريدت عقارر، وبذلك يصبح تركيز العالمه بالماء المقط طريقه العمل المعتمدة I- بحسب الظروف الفضلى التي تم الوصول اليها بأسلوب المتغير االحادي هيدروكلوريد تحوي محلول عقار تتراسايكلين من متزايدةملليتر حجوم 13سعة الحجميةمن القناني ة الى مجموع تنقل 3.9موالري ملح الديازونيوم مع الرج و 3.330ملليتر من 1.7 الى كل منها ( ميكروغرام ثم يضاف033 –0على ) (موالري 0) ملليتر من حامض الهيدروكلوريك 3.0 بعد اضافةو(. موالري 1) هيدروكسيد الصوديوم محلول ملليتر من نانوميتر مقابل 914لماء المقطر وتقاس قيمة االمتصاص عند الطول الموجي الى العالمه بامزيج التفاعل يكمل حجم المحلول الصوري. II- بحسب الظروف الفضلى التي تم الوصول اليها بأسلوب المتغيرات المتعددة من ميكروغرام( 033 –0)محلول يحتوي من متزايدة حجوم ملليتر 13 سعة حجمية قنان من سلسلة الى تضاف من ملليتر 1و الرج مع الديازونيوم ملح موالري 3.330 من ملليتر 0 يضاف الى كل منها ثم هيدروكلوريد تتراسايكلين محلول من ملليتر 3.0 يضاف وبعد ذلك دقائق جانبا. ثمانية لمدة المزيج ويترك الصوديوم هيدروكسيد موالري 1محلول الموجي الطول عند االمتصاصية قيمة وتقاس المقطر بالماء العالمه الى الحجم ويكمل موالري 0 الهيدروكلوريك حامض .الصوري المحلول مقابل نانوميتر 914 النتائج والمناقشة طيف االمتصاص االولي وتكوين ملح حامض االنثرانلك المؤزوتمع هيدروكلوريدتتراسايكلين اظهرت النتائج االولية امكانية اقتران عقار ( 1) الشكليظهر .نانوميتر مقابل المحلول الصوري 914امتصاص عند الطول الموجي أعظم اعطتمستقرة زو آصبغة على طريقة العمل االولية. اعتماداالمتكون والمحلول الصوري ناتج التفاعلطيف امتصاص كل من الظروف الفضلى إليجاددراسة العوامل المؤثرة حامض مع اقترانه بعد هيدروكلوريد تتراسايكلين عقار لتقدير الفضلى للوصول الى الظروف اسلوبين اتباع تم .المتعددة المتغيرات واسلوب االحادي المتغير دراسة بأسلوب الدراسة بإجراء وذلك المؤزوت االنثرانلك ان من العوامل األساسية التي تسهم في السيطرة على التفاعالت المتضمنة تفاعل االقتران لتكوين صبغة اآلزو هي . تمت [19]دالة الحامضية لوسط التفاعل ودرجة الحرارة التي يحضر فيها ملح الديازونيوم إضافة الى عوامل أخرىال دراسة تأثير الكاشف المؤزوت والزمن الالزم لتفاعله مع العقار اعاله وكمية هيدروكسيد الصوديوم الالزمة للوصول الى كمية حامض الهيدروكلوريك المضاف وترتيب اإلضافة للحصول على اعلى قيمة لالمتصاص. كما وتمت دراسة تأثير اعلى منتوج للتفاعل المعتمد. ملليتر من محلول 3.9موالري من الكاشف المؤزوت و 0.005 ملليتر من محلول 1.7أظهرت النتائج ان استعمال (. كما أظهرت نتائج 7كل قد اعطى افضل النتائج )الش HCLموالري 0ملليتر من محلول 3.0و NaOHموالري 1 يظهر مباشرة بعد اضافة مع ملح حامض االنثرانلك المؤزوت معطيآ محلول اصفر اللون مباشرة العقار يتفاعل الدراسة ان حيث وجد ان هيدروكسيد الصوديوم هي األفضل عند مقارنتها ببقية القواعد المستعملة لغرض توفير الوسط المالئم ،القاعدة (. وقد وجد ان أفضل ترتيب لمزج محاليل الكواشف المستعملة كان بمزج محلول العقار ثم 0ان )الشكل لتفاعل االقتر (. 1محلول ملح الكاشف المؤزوت وبعد ذلك يضاف محلول القاعدة )الجدول الكيمياء |403 7312( عام 1العدد ) 03مجلة إبن الهيثم للعلوم الصرفة والتطبيقية المجلد Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 30 (1) 2017 غيرات أسلوب المتعلى باالعتمادعمليا لها القيم الفضلى إليجادرئيس في التفاعل تأثيرمتغيرات ذات ةدرست ثالث عقار تتراسايكلين هيدروكلوريد عند تفاعله مع ملح الديازونيوم لتقدير ]17-20[التراكم المركزي المتعددة نمط تصميم ملح الديازونيوم (موالري 3.330محلول ) حجم . وقد تم اختيار العوامل التي ظهر لها اعلى تأثير في التفاعل وهيالمحضر بعد اضافة القاعدة تفاعل االقتران ( و تأثير زمن2xهيدروكسيد الصوديوم ) (موالري 1محلول ) وحجم x)1المحضر ) (3(x ( و1-، 3، 1والتي يمكن من خاللها ايجاد الشفرة الخاصة بكل قيمة والمتمثل ) (7في جدول)المبينة. x 1 = (X1 – 1.4) /0.6 x 2 = (X7 – 0.6) /0.5 x 3 = (X0 - 10) /10 باالعتماد على موديل والمقترحة ( القيم الحقيقيه للعوامل قيد الدراسه والمراد ايجاد قيمتها الفضلى 0) الجدوليبين الثانية الدرجة مفكوك معادلة استعملت . وقدعمليا قيمة االمتصاصية( المقاسةتصميم التراكم المركزي مع قيم االستجابه ) Linear-quadratic second-order polynomial main) يسيةالرئ التأثيرات ذات تربيعي – خطي نوع effects )( الموديل) الطراز هذا أن للنتائج اإلحصائي التحليل الثالثة. يبين للمتغيرات كدالة االمتصاص قيمة عن للتعبير المقاسة االمتصاصية قيم مع الدراسة قيد المتغيرات قيم بين العالقة أظهرت فقد, مالئما كان المستعمل التجربة تصميم من . رياضية بطريقة( االمتصاص) لالستجابة قيمة أعلى تعطي التي الثالثة المتغيرات قيمة حساب أمكن لذلك جيدا، انطباقا 1= محلول هيدروكسيد الصوديوم وقيمة ملليتر 0= المؤزوت االنثرانلك حامض محلول حجم قيمة أن النتائج أظهرت عقار لتقدير فضليات ظروفا القيم هذه اعتبار ويمكن. دقيقة 2الالزم لالقتران المحسوب فكان الزمن قيمة وأما ملليتر، لهذا االستجابة سطح ( طراز9)يبين الشكل . لحامض االنثرانلك الديازونيوم ملح مع تفاعله عند هيدروكلوريد تتراسايكلين .حالة كل في الفضلى قيمته عند األخر المتغير وتثبيت( االمتصاصية) االستجابة مع الدراسة قيد متغيرين كل بين النظام دراسة استقرارية صبغة االزو المتكونة المحلول بعد التخفيف في فترات زمنيه قيمة امتصاصيةصبغة االزو المتكونة من خالل قياس استقراريهتم دراسة محلول عقار من ملليتر 1ملليتر تحتوي على 13عة من ملح الديازونيوم الى قنينة حجمية سملليتر 1.7مختلفه، اذ تم اضافة ملليتر من محلول هيدروكسيد 3.9اليه اضيفمع الرج ثم ميكروغرام/ملليتر 133بتركيز تتراسايكلين هيدروكلوريد موالري ويكمل الحجم الى 0ملليتر من محلول حامض الهيدروكلوريك المركز 3.0موالري، بعدها يضاف 1الصوديوم فترات زمنية بعد نانوميتر، 914بالماء المقطر ويقاس االمتصاص مقابل المحلول الصوري عند الطول الموجي العالمة ان المعقد مستقر حيث وجد ان قيمة من النتائج التي تم الحصول عليها وقد لوحظ .( ساعة79-3مختلفة تراوحت من ) ساعة في مكان مظلم وفي درجة 79 ترك الناتج لمدة بعداالصلية تها من قيم %40.0بلغت المقاسة المحلول يةامتصاص .(9)الجدول حرارة الغرفة اطياف االمتصاص النهائية من تتراسايكلين هيدروكلوريد مع ملح 1-ملليتر.ميكروغرام 13المتكون من اقتران متصاص المعقدطيف ا تسجيلتم وأظهرت االطياف .المحلول الصوري مقابل مختلفين، وبينبأسل عليها الحصول تم التي الفضلى عند الظروفالديازونيوم ف اطيا( 0)نانوميتر. يبين الشكل 914عند الطول الموجي في كال الحالتين كانت يةاعلى قيمه لالمتصاصان المسجلة .ةالصوري هاليلامحلصبغة االزو المتكونة ولمتصاص اال منحنيات المعايرة والمعالجة اإلحصائية B و A( 0تم بناء منحنيات معايرة بتطبيق الظروف الفضلى السلوبي المتغير األحادي والمتغيرات المتعددة )الشكل على التوالي. وقد اظهر كال المنحنيين ان النظام اللوني الناتج من تفاعل االقتران يخضع لقانون بير في مديات من التراكيز ( عند طبيق الظروف الفضلى لالسلوبين ميكروغرام/ملليتر 03-3.0( و )ملليتر/ميكروغرام 03-3.0تراوحت بين ) تتراسايكلين ة لتقديرعقارالمقترح للطريقة التحليلية بعض الخصائص 0المذكوربن على التوالي. ويبين الجدول هيدروكلوريد . حساب الدقة والضبط للطريقة المقترحة محلول من 1-ملليتر.ميكروغرام (03, 13, 0مختلفة )تم قياس ثالثة تراكيز الطريقةلغرض حساب دقة وتوافقية ولثالثة تكرارات لكل منها وذلك بتطبيق الطريقة المقترحة تحت مجموعة الظروف التجريبية التي تتراسايكلين هيدروكلوريد انه أمكن الحصول على 0لمبينة في الجدول تم الوصول اليها بأسلوبي المتغير األحادي والمتغيرات المتعددة. أظهرت النتائج ا -0.4630( و ) 0.2800-0.0011-نتائج دقيقة ومضبوطة في كال الحالتين, اذ تراوحت قيم النسبة المئوية للخطاء النسبي ) ( عند تطبيق الطريقة تحت 1.040-0.327( و )0.420-0.170( وقيم النسبة المئوية لالنحراف القياسي النسبي )0.9200 المتعددة على التوالي. والمتغيرات األحادي المتغير الظروف المستحصلة بأسلوبي الكيمياء |404 7312( عام 1العدد ) 03مجلة إبن الهيثم للعلوم الصرفة والتطبيقية المجلد Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 30 (1) 2017 المعقد المتكون دراسة صيغة هيدروكلوريد مع ملح حامض االنثرانلك المؤزوت لتكوين صبغة االزو، تتراسايكلين لتعيين النسبة التي يقترن بها عقار لكل من العقار M 4-10 (5.1986المحضرة باستعمال محاليل متساوية التركيز) االزو لصبغة تكافؤيةالدراسة تتم النتائج التي تم ثبتتا (.2 الشكل) المولية والمتغيرات المستمرة وباالعتماد على طريقتي النسبة والكاشف المؤزوت يوضح (7. مخطط )(1:1)هي المؤزوت ان نسبة العقار الى الكاشفالحصول عليها بالطريقتين المذكورتين اعاله الصيغة المقترحة لصبغة االزو المتكونة.الميكانيكية المقترحة للتفاعل مع (6مخطط ) دراسة تأثير المتداخالت وقد دلت النتائج على امكانية ، تم دراسة تأثير عدد من المتداخالت المتعارف وجودها في المستحضرات الصيدالنية ( يوضح 2جدول ) .من تلك المتداخالت دون حدوث اي تأثير يذكر 1-ملليتر.ميكروغرام 1333بوجود الطريقةتطبيق النتائج التي تم التوصل اليها. تتراسايكلين هيدروكلوريد في المستحضرات الصيدالنية تقدير عقار المتوفرة في االسواق المحلية الصيدالنيةالمستحضرات بعض تتراسايكلين هيدروكلوريد فيتقدير عقار أمكانيةبحث تم تصميم التراكم المعتمدة بحسب الظروف الفضلى التي تم الوصول اليها بنمط طريقة العمل مختلفتين بأعتمادولشركتين الطريقة بنجاح لتقدير العقار اعاله في تلك امكانية تطبيق النتائج . اظهرتالمتغيرات المتعددة( طريقة)المركزي ( يبين النتائج المستحصلة وقيم 2جدول ). المستحضرات وبدون تأثير يذكر من المتداخالت المتواجدة في تلك المستحضرات .%40( وعند مستوى ثقة t-testالدقة والضبط اضافة الى اختبار ) الكيمياء |405 7312( عام 1العدد ) 03مجلة إبن الهيثم للعلوم الصرفة والتطبيقية المجلد Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 30 (1) 2017 المصادر 1. Budavari, S. (2001) The Merck index, New Jersey, Merck Company, Inc. 2. Talaro, K., and Talaro, A., 1996. Foundations in Microbiology, 2nd. ed. WCB publishers, Dubuque, IA. 366. 3. Alwan, A.A.S., and Abou, Y.Z. (1990) Iraqi Drug Guide, National Boand for the Selective of Drugs and Central Drug Information Burean, Baghdad, 45,112-113, 210,219,221,230 4. British Pharmacopeia (2012) CD-ROM, Majesty,s Stationary office, London , BP, Co.- UK. 5. Connell, S. R.; Tracz, D. M.; Nierhaus, K. H. and Taylor, D. E. (2003) Ribosomal protection proteins and their mechanism of tetracycline resistance, Antimicrob Agents Chemother, 47(12):3675-3681. 6. Shalaby, A.; Abou-Raya, S.; Wafaa, H. and Mehaya, F. (2011) Validation HPLC method for determination of tetracycline residue in chicken meat and liver. Food Chem., 124(4):1660-1666. 7. William, A., M. and Raida, H.(1995) Rapid HPLC Determination of Tetracycline Antibiotics in Milk, J. Agric. Food Chem., 43 (4), 931–934 8. Kazo, I.; Norio, O. and Mitsuru, Y. (1992) Determination of tetracycline antibiotics by reversed phase high-performance liquid chromatography with fluorescence detection. J. Chromatog. A, 623(1):153-158. 9. Innocenzo, G. and Fabio, P. (2009)Determination of tetracycline residues by liquid chromatography coupled with electrochemical detection and solid phase extraction. J. Agric. Food Chem., 57(19):8735-8741. 10. Parviz, N.; Reza, M. and Parandis, D. (2007) FFT-Adsorptive voltammetric technique for pico-level determination of tetracycline in capsules at a micro electrode in flowing solutions. Turk. J. Chem., 31(3):279-291. 11. Saisunee, L.; Boonson L.; Surasat W. and Wirt R. (2006) Flow injection spectrophotometric determination of tetracycline in a pharmaceutical preparation by complexation with aluminium III. Anal.Sci.22(1),15-19. 12. Jose, L.; Patricia, L.; Helena, R. and Pezza, L. (2009) Flow injection spectrophotometric determination of tetracycline and doxycycline in pharmaceutical formulations using chloramines-T as oxidizing agent. Quim Nova, 32(7):1764-1769. 13. Prinya, M.; Saisunee, L. and Suphachock, U. (2008) Spectrophotometric flow-injection analysis assay of tetracycline antibiotics using a dual light-emitting diode based detector, Mj.Int.J.Sci.Tech., 2(1):201-209. 14. Ronald, B. (2006). Determining trace levels of tetracycline in solid and liquid samples utilizing complexation with transition metal cation.Anal.Chem.3(4-6):114-123 15. Ayad, M.; El-Sadik, M. and Mostaffa, S. (1986) 4-Aminoantipyrine as an analytical reagent for the colorimetric determination of tetracycline and oxytetracycline. Anal.Lett., 19(21-22):2169-2181. 16. Al-Abbasi, K. (2009). Spectrophotometric determination of tetracycline by azo dye formation with diazotized p-nitroaniline-application to pharmaceutical preparation and biological fluids. J.Raf.Sci., 20(1):61-74. 17. Khairi, F. (2008). Analysis of tetracycline and oxytetracycline through charge transfer complexation, Amer.J.,3(3):212-218. http://pubs.acs.org/author/Moats%2C+William+A. http://pubs.acs.org/author/Harik-Khan%2C+Raida الكيمياء |406 7312( عام 1العدد ) 03مجلة إبن الهيثم للعلوم الصرفة والتطبيقية المجلد Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 30 (1) 2017 18. Yongnian, Ni.; Deng, Na. and Serge, K. (2010) Simple Kinetic spectrophotometric method for simultaneous determination of tetracycline by use of chemometrics”. Anal.Methods, 2(9):1302-1309. 19. Hemn, A. Q. (2007) Batch and flow-injection spectrophotometric determination of nitrite in curing meat and nitrate in wastewater samples. M.Sc. Thesis. Department of Chemistry, College of Education, Salah Al-din University, Erbil, Iraq:44. 20. Palaniyappan, M..; Vijayagopal, V.; Renuka V. and Viruthagiri, T. (2009) Statistical Optimization of Substrate, Carbon and Nitrogen Source by Response Surface Methodology for Pectinase Production Using Aspergillus fumigatus MTCC 870 in Submerged Fermentation, African Journal of Biotechnology 8 (22):6355-6363. 21. Narongchai, S.; Putipong, B. and Bandhita, P.(2006) Central Composite Design in Optimization of the Factors of Automatic Flux Cored Arc Welding for Steel ST37, Proceeding of the 2 nd ed IMT-GT Regional Conference on Mathematics, Statistics and Applications Universiti Sains Malaysia, Penang:13-15. هيدروكلوريد تتراسايكلينمن محلول 0-ملليتر.ميكروغرام 01تسلل االضافة على امتصاص تأثير (1جدول ) .موالري من ملح الديازونيوم 1.115ملليتر من 0.6 باستخدام Order of mixing Absorbance 0 6 3 Drug Salt Base 0.3241 Drug Base Salt 0.2828 Salt Base Drug 0.1673 .المستخدمة للمتغيراتالمشفرة ( مدى القيم المشفرة وغير 6جدول) Independent variable Coded unit -1 0 1 Volume of salt (mL) 0.8 1.4 2.0 Volume of NaOH (mL) 0.1 0.6 1.1 Time (min.) 0.0 10.0 20.0 الكيمياء |407 7312( عام 1العدد ) 03مجلة إبن الهيثم للعلوم الصرفة والتطبيقية المجلد Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 30 (1) 2017 1.115 باستخدام هيدروكلوريد من محلول تتراسايكلين 0-ملليتر.ميكروغرام 01 لتقدير المركزي التراكم تصميم( 3)جدول .الصوديوم هيدروكسيد من موالري 0و الديازونيوم ملح من موالري 0.6 باستخدامهيدروكلوريد تتراسايكلينمن محلول 0-ملليتر.ميكروغرام 01 ( تأثير الزمن على امتصاص4جدول ) .موالري من ملح الديازونيوم 1.115ملليتر من Time/(hour) Absorbance 0.0 0.3241 0.5 0.3241 1.0 0.3240 1.5 0.3238 3.0 0.3237 6.0 0.3235 8.0 0.3199 24.0 0.3030 A Time (mint) Volume of NaOH (mL) Volume of salt (mL) Standard Run 0.3067 10 1.1 1.4 1 0.0545 0 0.1 2.0 7 0.2343 20 1.1 2.0 0 0.0375 20 0.1 2.0 9 0.2728 10 0.6 1.4 0 0.2728 10 0.6 1.4 0 0.2728 10 0.6 1.4 2 0.2728 10 0.6 1.4 2 0.2001 20 0.6 1.4 4 0.2775 10 0.6 0.8 13 0.2905 0 0.1 0.8 11 0.2728 10 0.6 1.4 17 0.1952 20 1.1 0.8 10 0.1942 10 0.1 1.4 19 0.2525 0 0.6 1.4 10 0.2345 0 1.1 2.0 10 0.2606 0 1.1 0.8 12 0.2728 10 0.6 1.4 12 0.1603 20 0.1 0.8 14 0.3104 10 0.6 2.0 73 الكيمياء |408 7312( عام 1العدد ) 03مجلة إبن الهيثم للعلوم الصرفة والتطبيقية المجلد Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 30 (1) 2017 تقدير عقار تتراسايكلين هيدروكلوريد عند الظروف القياسيةالمعتمدة ل للطريقة التحليلية ( بعض الخصائص5جدول ) .التراكم المركزي( )تصميم والمتغيرات المتعددة االحادي المتغير بأسلوبيالتي تم الوصول اليها Parameter Value Univariate Multivariate λmax (nm) 419 419 Color Yellow Yellow Linearity range (µg.mL-1) 0.5 – 50.0 0.5 – 60 Molar absorptivity (L.mol-1.cm- 1) 16350 14619 Regression equation A = 0.0340[ Tet. µg.mL-1] - 0.0161 A = 0.0304[ Tet. µg.mL-1] + 0.0427 Calibration Sensitivity (L.mg-1) 0.0340 0.0304 Sandal’s Sensitivity (µg.cm-2) 0.0294 0.0329 Correlation of Linearity (R2) 0.9996 0.9998 Correlation coefficient (R) 0.9998 0.9999 Detection limit (µg.mL-1) 0.2781 0.2813 .هيدروكلوريد عند الظروف القياسيةتتراسايكلين عقار تقدير المعتمدة ل الطريقة( دقة وضبط 2جدول ) R.S.D.* % S. D. Relative Error % Tetracycline hydrochloride Conc. (µg.mL-1) Method Found Taken 0.419 0.021 0.283 5.014 5 Univariate 0.170 0.017 -0.110 9.989 10 0.413 0.125 0. 940 30.282 30 1.031 0.052 0.920 5.046 5 Multivariate 0.325 0.098 0.463 30.139 30 0.402 0.202 0.544 50.272 50 * Average of three determinations. من عقار 0-ملليتر.ميكروغرام 01في تقدير الدوائيةمن المتداخالت 0-ملليتر.ميكروغرام 0111وجود تأثير (7جدول ) .)طريقة المتغيرات المتعددة( التراكم المركزيبطريقة تصميم تتراسايكلين هيدروكلوريد Excipients Tetracycline hydrochloride 1-Conc.Taken10 µg.mL 1-Conc. Found µg.mL % Recovery glucose 10.391 103.91 Sucrose 10.370 103.70 Lactose 10.106 101.06 Starch 9.958 99.58 sodium Citrate 10.454 104.54 *Average of three determinations. الكيمياء |409 7312( عام 1العدد ) 03مجلة إبن الهيثم للعلوم الصرفة والتطبيقية المجلد Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 30 (1) 2017 حسب طريقة العمل المقترحة في الصيدالنيةعقار تتراسايكلين هيدروكلوريد في بعض المستحضرات ( تقدير8جدول ) .المتغيرات المتعددة( طريقة)المركزي تصميم التراكم * Average of three determinations. ** Theoretical value for t-test at 95% confidence limit were N=2 is 4.303. ملليتر.ميكروغرام 01صبغة االزو المتكونة من اقتران ): A االولية لكل من اطياف االمتصاص ( 0شكل ) من 0- : المحلول الصوري مقابل الماء Bحامض االنثرانلك المؤزوت( مقابل المحلول الصوري، -هيدروكلويد تتراسايكلين المقطر، عند الظروف التمهيدية. 01 امتصاص حامض الهيدروكلوريك علىوهيدروكسيد الصوديوم و ملح الديازونيوموم محاليل تأثير حج( 6شكل ) عقار تتراسايكلين هيدروكلوريد تحت الظروف التجريبة. من 0-ملليتر.ميكروغرام Sample Labeled amount mg Found amount mg Conc. taken µg.mL-1 Conc.* found µg.mL-1 Reco. % S.D* R.S.D* % t-test** SAMACYCLINE (Tetracycline HCl ) 250 mg/ Capsule SDI/Iraq 250 248.80 10 9.9521 99.521 0.1758 1.7665 0.1202 246.71 30 29.6053 98.684 0.5823 1.9669 1.1742 APCYCLINE (Tetracycline HCl ) 250 mg/ Capsule Ajanta/India 250 246.49 10 9.8596 98.596 0.1709 1.7333 1.4224 251.13 30 30.1580 100.530 0.5587 1.8526 0.4908 الكيمياء |410 7312( عام 1العدد ) 03مجلة إبن الهيثم للعلوم الصرفة والتطبيقية المجلد Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 30 (1) 2017 من االوساط انواع مختلفةتفاعل العقار مع الكاشف المؤزوت وزمن تفاعل االزدواج وتأثير استعمال ( تأثير زمن 3) شكل تحت الظرف التجريبية.هيدروكلوريد تتراسايكلينمن محلول 0-ملليتر.ميكروغرام 01على امتصاص القاعدية وحامض هيدروكلوريد تتراسايكلين عقار بين التفاعل ناتج المتصاص االستجابة لسطح البيانية ( الرسوم4شكل ) (.الفضلى قيمته الثالث عندثبوت المتغير عند) كدالة لكل متغيرين قيد الدراسة االنثرانلك المؤزوت تتراسايكلين من 0-ملليتر.ميكروغرام 01) ة من اقترانالمتكوناطياف االمتصاص النهائية لصبغة االزو (5شكل ) التي تم الوصول اليها بأسلوب: عند الظروف الفضلىحامض االنثرانلك المؤزوت( مقابل المحلول الصوري -هيدروكلويد (A,المتغير األحادي )B) المتغييرات المتعددة، واطياف امتصاص المحلول الصوري مقابل الماء المقطر عند الظروف ) (.D,Cالفضلى اعاله على التوالي ) الكيمياء |411 7312( عام 1العدد ) 03مجلة إبن الهيثم للعلوم الصرفة والتطبيقية المجلد Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 30 (1) 2017 حسب طريقة العمل المعتمدة عند الظروف الفضلى تتراسايكلين هيدروكلوريد عقار لتقدير القياسية ات( المنحني2شكل ) ( المتغيرات المتعددة.B( المتغير األحادي، )Aالتي تم التوصل اليها بأسلوب: ) 5.1986 المتغيرات المستمرة( باستعمال -B المولية النسبة -Aايجاد تكافوية المقعد المتكون بطريقة ) ( 7شكل ) ملح الديازونيوم المحضر(موالري من الكاشف ) 5.1986 10-4 و من تتراسايكلين هيدروكلوريد موالري 4-10 الكيمياء |412 7312( عام 1العدد ) 03مجلة إبن الهيثم للعلوم الصرفة والتطبيقية المجلد Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 30 (1) 2017 Spectrophotometric Determination of Tetracycline Hydrochloride in Pure Form and Pharmaceutical Preparation by Coupling with Diazotized Anthranilic Acid Maryam Muhson Abd Sarmad Bahjat Dikran Ali Khalil Mahmood Dept. of Chemistry/ College of Education for Pure Science (Ibn- Al Haitham)/ University of Baghdad Received in:8/May/2016,Accepted in:5/June/2016 Abstract A simple, fast and sensitive spectrophotometric method has been applied for the determination of tetracycline hydrochloride in its pure form and in pharmaceutical preparations. The method based on coupling reaction of the antibiotic with diazotized anthranilic acid to form a stable yellow azo dye which shows a maximum absorption at 419 nm. Uni- and multivariate approaches were followed in optimizing the experimental conditions. Under optimum experimental conditions obtained via multivariate (Central Composite Design), the linearity of the constructed calibration curve was in the range of 0.5- 60 μg.mL-1 with molar absorptivity of 14619 L.mol-1.cm-1 and the value of detection limit was 0.2813μg.mL-1. The capability of the method for the analysis of real tetracycline samples was evaluated. The results show that the method could successfully be applied with no significant interference from the common excipients. Keyword: Spectrophotometry, Tetracycline Hydrochloride, Azo, Uni and Multivariate.