Microsoft Word - 24-33 24 | Biology 2014) عام 3(العدد 27المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 27 (3) 2014 Albizia lebbeckالفطريات المستنبتة في أوراق وأغصان اللبخ وفعاليتھا المضادة للفطريات بتول زينل علي احمد عبد األمير محمد جامعة بغداد/ )الصرفة ابن الھيثم( -قسم علوم الحياة/ كلية التربية للعلوم 2014/تشرين االول / 20, قبل في : 2014/ايلول /15استلم في: الخالصة Albizia lebbeckاستھدفت ھذه الدراسة عزل وتشخيص الفطريات المستنبتة في أوراق واغصان نبات اللبخ فطراً مستنبتاً من 57واختبار فعاليتھا المضادة لبعض الفطريات الخيطية المرضية للنبات. أظھرت النتائج الحصول على نوعاً فطرياً سادت فيھا 16، مثلت الفطريات المعزولة %47.43قطعة أوراق وأغصان بشدة استيطان 240مجموعة ونوع واحد أو اكثر من جنس Penicilliumجنس أنواع) وثالث عزالت من Aspergillus )6أنواع جنس Paecilomyces ،Drechslera ،Fusarium ،Curvularia ،Nigrospora وفطر عقيم شفاف، واظھرت النتائج اختالفاً معنوياً في شدة استيطان أو تردد األنواع المختلفة في جزأي النبات المختلفة. اختبرت الفطريات المعزولة بطريقة بينھا وبين ثالثة أنواع من Antagonismعلى الوسط الصلب لدراسة فعالية التضاد Dual cultureزدوجة الزراعة الم Macrophominaو Fusarium oxysporum ،Fusarium graminearumالفطريات الممرضة للنبات: phaseolina طر المستنبت والممرض التي أظھرت النتائج اختالف فعالية التضاد معنوياً تجاه ھذه الممرضات باختالف الف قومت اعتماداً على النسب المئوية للتثبيط، وظھرت عدة حاالت لتضاد وبين ھذه الفطريات والممرضات تراوحت بين تطفل الى تكوين منطقة تثبيط للنمو بينھما. تعطي ھذه النتيجة Competitionالى حالة التنافس Mycoparasitismفطر آخر عمال الفطريات المعزولة في التطبيقات الزراعية كعوامل مقاومة احيائية تجاه الممرضات الفطرية إشارة الى كفاءة است النباتية. الفطريات المستنبتة ونبات اللبخ وفعالية التضاد. الكلمات المفتاحية: 25 | Biology 2014) عام 3(العدد 27المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 27 (3) 2014 المقدمة الفطريات المستنبتة ھي الفطريات التي تغزو انسجة النبات الداخلية من دون احداث اعراض مرضية ظاھرة على . أظھرت العديد من Mutualism]، وھي تستوطن األجزاء الخضرية والتكاثرية والجذور بعالقة تكافلية 1النبات العائل [ ]. 2، 1نباتات التي فحصت منذ اكتشافھا لغاية الوقت الحاضر [الدراسات سعة انتشار ھذه الفطريات ووجودھا في جميع ال كما أظھرت الدراسات ان كل نبات يمكن ان يستوطن بنوع واحد أو اكثر من ھذه الفطريات، وقد يصل عددھا الى مائة نوع ثل الطحالب، ]. فضالً عن النباتات الراقية، إذ أمكن عزل الفطريات المستنبتة من المجاميع النباتية األخرى م3[ ]. 5، 4والحزازيات، والسرخسيات، واالشنات [ تؤدي الفطريات المستنبتة أدواراً حيوية مھمة وإيجابية تجاه عائالتھا النباتية من ضمنھا تحفيزھا للنمو عن طريق ]، 7حرارة العالية []، كما تعمل على زيادة مقاومة النبات لالجھادات البيئية كالجفاف والملوحة ودرجات ال6آليات مختلفة [ ]. وأظھرت الفطريات المستنبتة 8فضالً عن فاعليتھا في تحفيز مقاومة النبات تجاه الممرضات المختلفة وبآليات مختلفة [ قابلية النتاج مواد ايض ثانوية رائدة وفعالة لھا فعاليات احيائية متعددة منھا مضادات السرطان، ومضادات االحياء كسدة، مضادات الحشرات ومركبات مخفضة للمناعة، ومركبات مضادة للطفيليات والفايروسات المجھرية، ومضادات اال ]. كما لقيت ھذه 13، 12]. وأشار العديد من الباحثين الى ان ھذه الفطريات ھي مصانع كيميائية داخل النبات [11، 10، 9[ تي تنتجھا غالباً ما تكون مشابھة لما ھي عليه في الفطريات الكثير من االھتمام في الوقت الحاضر وذلك الن المركبات ال نباتاتھا العائلة وذلك يعود إلى تطورھا ومعيشتھا التكافلية معھا التي قد تؤدي الى انتقال الجينات بينھما، تشمل ھذه المركبات الة التي لھا تطبيقات القلويدات، والفالفونويدات، والكوينونات، وحوامض فينولية، وتربينات، وغيرھا من المركبات الفع ]. لذلك أشارت العديد من الدراسات الى ان نواتج أيض الفطريات المستنبتة 15، 14فعالة مختلفة زراعية وصناعية وطبية [ يمكن ان تكون بدائل للمركبات والمضادات الصناعية التي تزداد مقاومة االحياء المجھرية لھا بمرور الزمن فضالً عن ]. كما اشير الى انھا مركبات لھا 16، 8البيئة من دون تحلل وتأثيراتھا الصحية في االنسان والحيوان [ إمكانية تراكمھا في فعالية احيائية مشابھة لتلك الموجودة من نباتات العائلة يمكن ان يقلل االعتماد على النباتات والسيما بطيئة النمو أو النادرة در الميكروبي والسيما مصدر الفطريات المستنبتة يعد أكثر اقتصادياً، اذ يمكن او التي تنمو في بيئات محددة، كما ان المص ]. 17، 16ان تزرع الفطريات وتنمى بنحو سريع كما يمكن الحصول على كتلة حيوية كبيرة باستعمال مخمرات كبيرة [ الشوارع والحدائق المنزلية نبات اللبخ ھو من أشجار الظل الكبيرة واسع االنتشار جغرافياً، يزرع في المتنزھات و ويعد من النباتات الطبية المھمة، اذ اشارت الدراسات الى احتوائه على العديد من المركبات الفعالة احيائياً كالفينوالت،و الستيرويدات، واالحماض االمينية، والكربوھيدرات، والدھون كما يحوي على كاليكوسيدات قلبية وصابونينات وتانينات خلص أوراقه له تأثيرات مضادة لالكسدة، مضادة للبكتريا، ويستعمل ھذا النبات في الطب الشعبي لعالج امراض ]. مست18[ العين والعشو الليلي، كذلك يستعمل لعالج االمراض الجلدية والزھرية، لعالج قرحة المعدة، والسعال، واضطرابات الجھاز ]. 19، 18رھا عن الفعاليات األخرى [التنفسي وامراض الدم فضالً من التھاب االسنان وغي لذلك استھدفت ھذه الدراسة التحري عن انتشار ووجود الفطريات المستنبتة في أوراق واغصان اللبخ ودراسة فعاليتھا المضادة لبعض الممرضات النباتية الفطرية. المواد وطرائق العمل سليمة وغير مظھرة Albizia lebbeckلبخ 12وأغصان من تم الحصول على عينات أوراق : تم الحصول عينات النبات- ) من جانبي الكرخ والرصافة في محافظة بغداد، ُجمعت العينات في 2013تشرين األول ( -لألعراض المرضية للمدة أيلول أكياس بالستيكية نظيفة ونقلت إلى المختبر الدراء عزل الفطريات منھا في يوم الجمع نفسه. في ذلك إذ تم غسل عينات األوراق واألغصان بكمية وافرة من ماء الحنفية ]20[أتبعت طريقة مستنبتة: عزل الفطريات ال- ) سم بواسطة المقص وعقمت بالكحول 1-0.5إلزالة األتربة والغبار ثم قطعت األوراق واألغصان إلى قطع صغيرة ( ) دقائق، 4لمدة ( %)2.5لورات الصوديوم بتركيز (لمدة دقيقة واحدة، ثم غمرت بعد ذلك في محلول ھايبوك %)75االثيلي ( مرات بالماء المقطر المعقم وجففت بواسطة 3) ثانية، ثم ُغسلت 30لمدة ( %)75بعدھا عقمت بالكحول األثيلي بتركيز ( غم/ لتر) 0.05) المضاف له الروز بنكال (PDAأوراق ترشيح معقمة. ُزرعت القطع في أطباق بتري حاوية على وسط ( غم/ لتر) بعد 0.05ل التعقيم للحد من نمو الفطريات السريعة النمو كما اضيف المضاد الحيوي كلورامنفيكول بنسبة (قب قطع من أجزاء النبات لكل طبق بأبعاد متجانسة، ثم غلفت األطباق بشريط شمعي 5التعقيم للحد من نمو البكتريا، وزعت (Parafilm) ) أسابيع مع مراقبة نمو المستعمرات يومياً. ُعزلت المستعمرات النامية )4-3) م لمدة (2±25بدرجة حرارة الخالي من اإلضافات لتشخيصھا. تم تشخيص الفطريات باالعتـماد على PDAمن قطع النسيج النباتي ونُميت على وسط ، 22، 21، 20تصنيفية [الصفات المزرعية والمظھرية الدقيقة للعينات بواسطة المجھر الضوئي باالعتماد على المصادر ال وتم حساب النسب المئوية لتردد مستعمرات الفطريات المائل (PDA)ُحفظت العزالت الفطرية على وسط ].24، 23 ]: 25وباالعتماد على ما جاء في [ (Colonization frequency)المستنبتة (النسبة المئوية لالستيطان 100 عدد عزالت الفطر عدد القطع التي ظھرت فيھا مستعمرات الفطر عدد الفطريات الكلي عدد القطع الكلية المزروعة . . النسبة المئوية لالستيطان% 26 | Biology 2014) عام 3(العدد 27المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 27 (3) 2014 ] والمتمثلة بطريقة 26الطريقة التي اعتمدھا [اتبعت اختبار فعالية التضاد للفطريات المستنبتة تجاه بعض الفطريات: - وذلك بأخذ قرص من النمو الفطري لكل من الفطريات على الوسط الصلب Dual culture methodsالزراعة المزدوجة 7من مزارع حديثة بعمر ) M. phasealinaو F. oxysporum) ،F. graminearumالمستنبتة والفطريات المختبرة سم، 5ما نحو بمسافة فاصلة بينھ PDAملم، وضع القرصان في طبق حاوي على وسط 3أيام بواسطة ثاقب الفلين بقطر كما استعملت أطباق مقارنة للفطر الممرض لوحده بثالثة مكررات للمعاملتين. تم حضن األطباق في درجة حرارة م لحين وصول طبق السيطرة إلى الحافة، وتم حساب قطر المستعمرة (معدل قطرين متعامدين) للفطر الممرض، )25±2°( لى أساس نسبة تثبيط الفطريات الممرضة وبحسب المعادلة اآلتية:وقدرت القدرة التضادية للفطريات المستنبتة ع ق ق ق النسبة المئوية للتثبيط % = = قطر مستعمرة الفطر الممرض وحده 1قإذ ان: = قطر مستعمرة الفطر الممرض من المزرعة المزدوجة2ق وتمت مالحظة ما إذا كان التداخل بينھما بصورة تثبيط (تكوين منطقة منع للنمو) أو نمو إحداھما فوق االخر. وتم تحليل ) والذي يوضح:27الذي اعتمده ( (Scale)نتائج التجربة باالعتماد على المقياس 0 = No growth 1 = 1 – 25 % growth inhibition 2 = 26 – 50 % growth inhibition 3 = 51 – 75 % growth inhibition 4 = 76 – 100 % growth inhibition النتائج والمناقشة 240) المستحصل عليھا من مجموع 1أظھرت نتائج عزل الفطريات المستنبتة فــي أوراق وأغصان اللبخ جـدول ( الحصول على عدد كلي للفطريات المعزولة قطعة أغصان)، 120قطعة أوراق و 120قطعة من األوراق واألغصان ( عزلة من األوراق بنسبة استيطان 31توزعت بين %47.43فطراً مستنبتاً بنسبة استيطان كلية مساوية الى 57بواقع من أن األوراق )28، 25( . تتفق ھذه النتيجة مع ما وجده%21.64عزلة من األغصان بنسبة استيطان 26و 25.79% بأن االختالفات في نسبة عزل الفطريات من االوراق عن )27(تحوي بنسبة في الفطريات أعلى من األغصان، كما ذكر ھذه الفطريات لألنسجة المختلفة التي تعكس قابليتھا لالستغالل أو المعيشة في مادة (Affinity)الساق قد تعود إلى ألفة 14نوعاً فطرياً موزعاً بين 16) الحصول على 1وتركيب كيميائي مختلف) يوضح الجدول (أساس معينة (أنسجة لھا شكل على بقية األنواع وتمثلت Aspergillusنوعاً في األوراق وعشرة أنواع من األغصان، سادت في الجزأين أنواع جنس لكال النوعين على التوالي من %4.16و %5التي سادت في جزأي النبات بنسبة استيطان A. flavus و A. nigerباألنواع من األوراق وھي Aspergillusلكال النوعين من االغصان. كما تم عزل أنواع أخرى من جنس %3.33االوراق بنسبة A. fumigatus ،A. glauscus وA. raperi لكل منھم من االوراق، اما من االغصان فلم يعزل %0.83بنسبة استيطان %0.83و 2.50بنسبة A. fumigatus و A. raperi ي ظھر في قطع األوراق، وُعزل النوعانالذ A. glauscusالنوع على التوالي. كما أمكن الحصول على عدد من عزالت البنسليوم مختلفة الصفات المظھرية للمستعمرات والمتمثلة بـ Pen.sp.1, 2, 3 كما آوت االوراق األنواع Curvularia cymbopogonis ،Fusarium solani ،F. verticilloides ،Paecilomyces sp. وP. variotii التي لم يتم عزلھا من االغصان، بالمقابل ظھر النوعA. sclerotioniger في االغصان ولم يعزل من األوراق كما عزل الفطر Drechslera australiensis من جزأي النبات يم شفاف من قطع االغصان. فضالً عن عزل فطر عق %1.66متساوية بنسبة استيطان ؛ سجلت كذلك في %8.33- 0.83ان نسب عزل الفطريات المستنبتة من جزأي النبات في ھذه الدراسة التي تراوحت بين ]. ان انخفاض نسبة العزل ھذه قد تعود الى 28، 26، 1دراسات عديدة تختص بالفطريات المستنبتة في نباتات أخرى [ ] وقد يكون السبب نتيجة التأثيرات البيئية التي تؤثر في انتشار وتوزيع 29لفطريات [احتواء النبات لمواد مضادة ل الفطريات المستنبتة. كما ان أغلب الفطريات التي عزلت في ھذه الدراسة تتطابق مع الفطريات المعزولة في دراسات أخرى ]. 31، 30، 28، 27، 1من نباتات أخرى [ اشارت العديد من الدراسات الى تداخالت فعالية التضاد للطريات المعزولة اتجاه بعض الفطريات المرضية للنبات: - ) ان 2التضاد بين االحياء المجھرية يمكن ان تعتمد في المقاومة االحيائية تجاه الممرضات. أظھرت النتائج في (جدول تنبتة والمعزولة تجاه الممرضات الثالثة المختبرة باختالف الفطر المستنبت ھنالك اختالفاً في فعالية التضاد للفطريات المس (النسبة المئوية للتثبيط F. oxysporumأعلى فعالية تضاد تجاه الفطر A. niger والممرض. من الجدول أظھر الفطر ومقياس %60.30يط (نسبة التثبPaecilomyces variotii و F. verticilloides) تاله النوعان 3ومقياس 67.30% و F. solani ،Mycelia sterilia ،A. fumigatus ،A. sclerotioniger ،C. cymbopogonis). اما العزالت 3 Pen. sp.2 3التي تقع كذلك ضمن المقياس %50.33واوطأ نسبة %57فأظھرت نسب تثبيط تراوحت بين أعاله ، .2وظھر المقياس %40>50وأظھرت بقية العزالت نسب تثبيط < 27 | Biology 2014) عام 3(العدد 27المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 27 (3) 2014 C. cymbopogonisفأظھرت الفطريات اآلتية: F. graminearumاما تضاد ھذه الفطريات تجاه الفطر ، 59.67، 59.97نسب تثبيط F. verticilloides و A. niger ،A. sclerotioniger، )%60.70(نسبة التثبيط نسب Mycelia sterilia و A. fumigatus ،F. solani ،Paecilomycesعلى التوالي، وأظھرت العزالت 59.33% ضمن مستوى %40>50كذلك. اما بقية العزالت فأظھرت نسبة تثبيط < 3وضمن المستوى %51.83-56.23تثبيط بين 2. فأظھرت أجمعھا نسب تثبيط أقل مما اظھرته تجاه M. phaseolinaاما تضاد الفطريات المستنبتة تجاه الفطر ) %50.56(نسبة التثبيط Mycelia steriliaھو الفطر 3وكان اعالھا تثبيطاً ضمن المستوى Fusariumنوعي الفطر مما يدل 2أي ضمن المستوى %26.63وأوطئھا %46.60اما بقية العزالت فأظھرت نسب تثبيط تراوحت بين أعالھا ضي من الفطريات.على الفعالية التضادية الواطئة للفطريات قيد الدراسة تجاه ھذا النوع المر ) ان 1وتظھر فعالية التضاد بين الفطريات المستنبتة والفطريات المرضية التي تالحظ نتائجھا كذلك في الصورة ( ھنالك عدة حاالت للتضاد ظھرت في ھذه الدراسة بين الفطريات المستنبتة والممرضات المختبرة وھي: أ) وفي ھذا المجال اشارت الدراسات الى أن نمو أحد 1.الفطر المستنبت المضاد ينمو فوق الفطر الممرض (صورة 1 الذي يؤدي إلى (Mycoparasitism)الفطريات فوق اآلخر بطريقة الزراعة المزدوجة يدل على فعالية التطفل الفطري ).32(لفطر الشريك وقد تقتله إفراز أنزيمات من الفطر الطفيلي تحلل جدران ھـايفات ا .Fب) وفي ھذه الحالة أظھر الفطر الممرض 1.الفطر الممرض ينمو فوق الفطر المستنبت المضاد (صورة 2 oxysporum فعالية ضعيفة للنمو فوق الفطر المستنبتC. cymbopogonis التي تدل على فعالية التطفل الفطري (Mycoparasite) للفطرF. oxysporum ه الفطر المستنبت.تجا جـ) دون تكوين منطقة منع 1.نمو كال النوعين من الفطريات باتجاه اآلخر، ويتوقفان عند نقطة التماس بينھما (صورة 3 للنمو، اذ يظھر النوعان تنافساً على الغذاء والمكان وتعتمد على سرعة ومعدل نمو الفطر وتختلف باختالف الفطر المضاد والممرض. أن من بين كل حاالت ) 13(د، ھـ، و، ز) وفي ھذا الصدد ذكر 1ة منع للنمو بين الفطرين الناميين (صورة .وجود منطق4 التضاد التي لوحظت تعّد الحالة األخيرة ھي المھمة التي تدل على فعالية الفطر المستنبت او الممرض في إفراز مواد باحثين الى ان وجود منطقة منع للنمو بين الفطرين بطريقة مضادة تمنع نمو وتطور الفطر الشريك، كما أشار عدد من ال ). 35، 34الزراعة المزدوجة تدل على إفراز أحد الفطرين مواد مضادة أو سموم اتجاه االخر ( وخالصة القول أظھرت النتائج كفاءة بعض الفطريات المستنبتة في منافستھا للفطريات الممرضة على الغذاء أو أو سموم وقابليتھا على التطفل على الفطريات Antibioticفضالً عن قابليتھا النتاج مواد مضادة Competitionالمكان Mycoparasitism وان كل ھذه الفعاليات تعطي إشارة الى كفاءة الفطريات المستنبتة في المقاومة االحيائية ، Biological control 36الفطريات التي اكدتھا كذلك العديد من الدراسات [للسيطرة على امراض النبات المتسببة عن ، 37.[ المصادر 1-Anitha, D.; Vijaya, T.; Pragathi, D.; Reddy, N. V.; Mouli, K. C.; Venkateswarulu, N. & Bhargav, D. S. (2013). Isolation and characterization of endophytic fungi from endemic medicinal plants of Tirumala hills. Internat. J. Life Sci. Biotechn. & Pharm. Res., 2(3): 367- 373. 2-Powthong, P.; Jantrapanukorn, B.; Thongmee, A. & Suntronthiticharoen, P. (2012). Evalution of endophytic fungi extract for their antimicrobial activity from Sesbania grandiflora. Int. J. Pharmac. & Biomed. Res., 3(2): 132-136. 3-Sanchez Marquez, S.; Bills, G. F. & Zabalgogeazcoa, I. (2007). The endophytic mycobiota of the grass Dactylis glomerata. Fungal Divers., 27: 171-195. 4-Zucucro, A.; Schoch, C. L.; Spatafora, J. W.; Kohlmeyer, J. (2008). Detection and identification of fungi intimately associated with the brown seaweed Fucus serratus. Appl. Environ. Microbiol., 74(40: 931-941. 5-Suryanarayanan, T. S.; Venkatachalam, A.; Thirunavukkarasu, N.; Ravishankar, J. P.; Doble, M. & Geetha, V. (2010). Internal mycobiota of marine macroalgae from the Tamilnadu coasti: distribution, diversity and biotechnological. Botanica Marina, 53: 457-468. 6- Dai, C. C.; Yu, B. Y. & Li, X. (2008). Screening of endophytic fungi that promote the growth of Euphorbia pekinensis. Afric. J. Biotechn., 7(19): 3505-3510. 28 | Biology 2014) عام 3(العدد 27المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 27 (3) 2014 7-Malinowski, D. P. & Belesky, D. P. (2000). Adaptations of endophyte-infected cool-season grasses to environmental stresses: Mechanisms of drought and mineral stress tolerance. Crop Sci., 40(4): 923-940. 8- Mandyam, K. & Jumpponen, A. (2005). Seeking the elusive functions of the root colonizing dark septa endophytic fungi. Studies Mycol., 53: 173-189. 9-Aly, A. H., Debbab, A.; Clements, C.; Ebel, R. A. E.; Orlikova, B.; Diederich, M.; Wrary, V.; Lin, W.H. & Proksch, P. (2011). NF Kappa B inhibitors and antitrypanosomal metabolites from endophytic fungus Penicillium sp. Isolated from Limonium tubiflorum. Bioorganic & Medicinal Chemistry, 19(1):414-412. 10- Huang, W. Y.; Cai, Y. Z.; Xing, J.; Corke, H. & Sun, M. (2007). Potential antioxidant resource endophytic fungi isolated from traditional Chinese medicinal plants. Econ. Bot., 61(1): 14-30. 11- Isaka, M; Bekkaew, P.; Intereya, K.; Komwijit, S. & Sathitkunanon, T. (2007). Antiplasmoidial and antiviral cyclohexadepsi peptides from the endophytic Pullularia sp. BCC 8613. Tetrahedron, 63(29): 6855-6860. 12- Tejesivi, M. V.; Kini, K. R.; Prakash, H. S.; Subbiah, V. & Shetty, H. S. (2007). Genetic diversity and antifungal activity of species of Pestalotiopsis isolated as endophytes from medicinal plants. Fungal Div., 24: 37-54. 13-Prabavathy, D. & Vallinachiyar, C. (2013). Antimicrobial and antidiabetic activity of an endophytic fungi isolated from Adathoda beddomei. Int. J. Pharm. & Pharmac. Sci., 5(3): 780-783. 14- Strobel, G. & Daisy, B. (2003). Bioprospecting for microbial endophytes and their natural products. Microbiol. & Molec. & Biol. Rev., 67(4): 491-502. 15-Lou, J.; Fu, L.; Luo, R.; Wang, X.; Luo, H. & Zhou, L. (2013). Endophytic fungi from medicinal herb Salvia mitiorrhiza bunge and their antimicrobial activity. Afr. J. Microbiol. Res., 7(4): 5343-5349. 16-Sadrati, N.; Daoud, H.; Zerroug, A.; Dahamna, S. & Bousharati, S. (2013). Screening of antimicrobial and antioxidant secondary metabolites from endophytic fungi isolated from wheat (Tritcum durum). J. Plant Prot. Res., 53(2): 128-136. 17- Idris, A. M.; Al-Tahir, I. & Idris, E. (2013). Antibacterial activities of endophytic fungi extracts from the medicinal plant Kigelia africana Egypt. Acad. J. Biol., 5(1): 1-9. 18- Affandi, H.; Nuryadin, A. & Read, R. W. (1998). Studies on natural products of Albizia sp. Biotropia, 11: 1-8. 19- Saha, A.; & Ahmed, M. (2009). The analgesic and anti-inflammatory activities of the extracts of Albizia lebbeck in animal model. Pak. J. Parmac. Sci, 22(1): 74-77. 20- Chhetri, B. K.; Maharjan, S. & Budhathoki, U. (2013). Endophytic fungi associated with twigs of Buddle asiaticalour. J. Sci. Engin. & Technol., 9(1): 90-95. 21- Ellis, M. B. (1971). Dematiaceous hyphomycites Kew: Common wealth mycological institute: 608. 22- Barnett, H. L. & Hunter, B. B. (1972). Illustrated genera of imperfect fungi: 3rd edition, Burgess Publishing Company: 273. 23-Qualhato, T. F.; Lopes, F. A.; Steindroff, A. S.; Brandao, R. S.; Jesuino, R. S. & Ulhoa, C. J. (2013). Mycoparasitism studies of Trichoderma species against three phytopathologenic fungi: Evaluation of antagonism and hydrolytic enzyme production. Biotechnol. Lett., 35(9): 1461-1468. 23- Samson, R. A.; Hoekstra, E. S. & Oorschot, C. A. N. (1984). Introduction to food-borne fungi. 2nd ed. Boarn, Netherlands: Centeral odbureau voor Schimmel cultures: 284. 24- Samson, R. A.; Noonim, P.; Mejer, M.; Houbraken, J.; Frisvad, J. C. & Varga, J. (2007). Diagnostic tools to identify black aspergilli. Studies Mycol., 59(1): 129-145. 29 | Biology 2014) عام 3(العدد 27المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 27 (3) 2014 25- Goveas, S. W.; Madtha, R.; Nivas, S. K. and D'souza, L. (2011). Isolation of endophytic fungi from Coscinium fenestratum -a red listed endangered medicinal plant. EurAsian J. Biosci., 5: 48-53. 26- Gomathi, S. & Ambikapathy, V. (2011). Antagonistic activity of fungi against Pythium debarynum (Hesse) isolated from chilli field soil. Advances in Appl. Sci. Res., 2(4): 291-299. 27-Zivkovic, S.; Stojanovic, S.; Ivanovic, Z.; Gavrilovic, V.; Popovic, T. & Balaz, J. (2010). Screening of antagonistic activities of microorganisms against Colletotrichum acutatum and Colletotricum gloesporioides. Arch. Biol. Sci., 62(3): 611-623. 28-Jeffrey, L. S. H.; Son, R. & Tosiah, T. (2008). Preliminary screening of endophytic fungi isolated from medicinal plant at MARDI sessang, Sarawak for their bioactivity. J. Trop. Agric. & Food Sci., 36(1): 121-126. 29-Huang, Y.; Wang, J.; Li, G.; Zheng, Z. & Su, W. (2001). Antitumor and antifungal activities in endophytic fungi isolated from pharmaceutical plants Taxus mairei, Cephalataxus fortune and Torreya grandis. FEMS Immunol. & Med. Microb., 31(2): 163-167. 30-Khan, R.; Shahzad, S.; Choudhary, M. I.; Khan, S. A. & Ahmed, A. (2010). Communities of endophytic fungi in medicinal plant Withania somnifera. Pak. J. Bot., 42(2): 1281-1287. Imperata cylindrical). عزل وتشخيص الفطريات المستنبتة من نباتي االدغال الحلفاء 2013علوان، نور موفق (-31 (cogongrass) لطرطيح (الحمض) واSchangina eagyptiaca (Suwad) ونشاطھا المضاد لبعض الفطريات .68الممرضة لنبات. رسالة ماجستير، كلية العلوم، الجامعة المستنصرية: 32-Rajagopal, K.; Kalavathy, S.; kokila, S.; Karthikeyan, S.; Kathiravan, G. & Prasad, P. (2010). Diversity of fungal endophytes in few medicinal herbs of south India. Asian J. Exper. Biol. Sci., 1(2): 415-418. 33-Khan, R.; Shahzad, S.; Chovdhary, M. I.; Khan, S. A. & Ahmed, A. (2007). Biodiversity of the endophytic fungi isolated from Calotropis procera (A1T) R.B.R. Pak. J. Bot., 39(6): 2233-2239. 34- El-Nagerbi, S. A. F.; Elshafie, A. E. & Alkhanjari, S. S. (2013). Endophytic fungi associated with Ziziphus species from mountainous area of Oman and new records. Biodiversitas, 14(1): 10-16. 35- Qualhato, T. F.; Lopes, F. A.; Steindroff, A. S.; Brandao, R. S.; Jesuino, R. S. & Ulhoa, C. J. (2013). Mycoparasitism studies of Trichoderma species against three phytopathologenic fungi: Evaluation of antagonism and hydrolytic enzyme production. Biotechnol. Lett., 35(9): 1461-1468. 36- Garoe, N. T.; Cabrera, R.; Andreea, C.; Martin, T. T. & Cristina, G. (2013). Survey of Banana endophytic fungi isolated in artificial culture media from an applied viewpoint. J. Horticulture, Forestry & Biotechnol., 17(2): 22-35. 37-Sharma, P. (2011). Complexity Trichoderma-Fusarium interaction and manifestation of biological control. Austr. J. Crop Sci., 5(8): 1927-1038. 38-Suciatmih & Rahmansyah, M. (2013). Endophytic fungi isolated from mangrove plant and have antagonism role against Fusarium wilt. ARPN J. Agric. & Biol. Sci., 8(3): 251-257. 39-Siameto, E. N.; Okoth, S.; Amugune, N. O. & Chege, N. C. (2010). Antagonism of Trichoderma farzianum isolates on soil borne plant pathogenic fungi from Embu District Kenya. J. Yeast & fungi Res., 1(3): 47-54. 40-Sundram, S. (2013). First report: Isolation of endophytic Trichoderma from oil palm (Elaeis guineensis Jacq.) and their in vitro antagonistic assessment on Ganoderma boninense. J. oil Palm Res., 25 (3): 368-372. 30 | Biology 2014) عام 3(العدد 27المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 27 (3) 2014 والنسب المئوية لشدة Albizia lebbeck): الفطريات المستنبتة المعزولة من أوراق وأغصان نبات اللبخ 1جدول رقم ( .(Colonization frequency)االستيطان الفطريات المعزولة Total اغصان اوراق C.F (%) No. Colonies C.F (%) No. Colonies C.F (%) Aspergillus spp. 14 11.65 13 10.83 22.48 Aspergillus flavus 5 4.16 4 3.33 7.49 Aspergillus fumigatus 1 0.83 1 0.83 1.66 Aspergillus glaucus 1 0.83 0 0.00 0.83 Aspergillus niger 6 5.00 4 3.33 8.33 Aspergillus raperi 1 0.83 3 2.50 3.33 Aspergillus sclerotioniger 0 0.00 1 0.83 0.83 Curvularia cymbopogonis 1 0.83 0 0.00 0.83 Drechslera australiensis 2 1.66 2 1.66 3.32 Fusarium solani 1 0.83 0 0.00 0.83 Fusarium verticilloides 1 0.83 0 0.00 0.83 Paecilomyces sp. 2 1.66 0 0.00 1.66 Paecilomyces variotii 3 2.5 0 0.00 2.50 Penicillium spp. 7 5.83 10 8.33 14.16 Penicillium sp.1 1 0.83 3 2.25 3.33 Penicillium sp.2 3 2.50 4 3.33 5.83 Penicillium sp.3 3 2.50 3 2.50 5.00 Mycelia sterilia (Hyaline) 0 0.00 1 0.83 0.83 Total 31 25.79 26 21.64 47.43 **4.119* 4.265* 7.253 (Chi-square)قيمة مربع كاي (P ≤ 0.01)** (P ≤ 0.05)* 31 | Biology 2014) عام 3(العدد 27المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 27 (3) 2014 ): النسب المئوية لتثبيط بعض الفطريات المستنبتة المعزولة من نبات اللبخ اتجاه بعض الفطريات المرضية 2جدول رقم ( .ايام 7م ولمدة °2±25ودرجة حرارة PDAبطريقة الزراعة المزدوجة على وسط عزالت الفطريات المستنبتة الخطأ القياسي± المتوسط F. oxysporum F. graminearum M. phaseolina A. fumigatus 54.03 ±0.73 56.23 ±0.73 45.07 ±0.77 A. glaucus 42.93 ±0.73 44.40 ±1.27 46.60 ±0.00 A. niger 67.30 ±1.31 59.97 ±1.29 34.17 ±0.44 A. raperi 42.00 ±1.15 51.83 ±0.73 34.77 ±1.47 A. sclerotioniger 54.00 ±1.52 59.67 ±1.45 45.13 ±0.73 C. cymbopogonis 54.77 ±1.47 60.70 ±1.50 33.30 ±1.27 D. australiensis 50.53 ±1.98 43.27 ±0.47 26.67 ±1.17 F. solani 57.00 ±1.96 55.50 ±0.00 26.67 ±1.17 F. verticilloides 60.00 ±0.58 59.33 ±0.77 32.63 ±0.77 Paecilomyces sp. 45.30 ±1.02 56.17 ±0.77 36.23 ±0.73 Paecilomyces variotii 60.30±1.0249.57 ±0.43 40.00 ±1.33 Pen. sp.2 50.33 ±0.76 49.57 ±1.97 36.97 ±0.73 Mycelia sterilia (Hyaline) 55.50 ±1.27 56.23 ±0.73 50.56 ±0.73 *LSD 3.917* 3.096* 2.766قيمة (P ≤ 0.05)* 32 | Biology 2014) عام 3(العدد 27المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 27 (3) 2014 ): فعالية التضاد بين الفطريات المستنبتة والفطريات المرضية1صورة ( Mycelia sterilia (Hayaline)الفطر المستنبت - أ M. phaseolineاتجاه F. oxysporumاتجاه C. cymbopogonisالفطر المستنبت - ب M. phaseolineاتجاه .Paecilomyces spالفطر المستنبت - جـ F. graminearumاتجاه .Paecilomyces sp الفطر المستنبت -د .Fاتجاه Aspergillus glaucusالفطر المستنبت - ھـ graminearum F. graminearumتجاه ا Mycelia sterilia (Hyaline) - و F. graminearumتجاه ا Penicillium sp.2الفطر - ز 33 | Biology 2014) عام 3(العدد 27المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci. Vol. 27 (3) 2014 Endophytic Fungi from Leaves and Twigs of Albizia lebbeck and Their Antifungal Activity Batoal Z. Ali Ahmed A. M. Alfayed Dept. of Biology/ College of Education for Pure Science( Ibn Al-Haitham )/ University of Baghdad Received on :15 /September/2014 , Accpted on: 20/October/2014 Abstract The study was conducted to isolate and identify endophytic fungi from leaves and twigs of lebbeck (Albizia lebbeck) and study their antagonistic activity against some plant fungal pathogens. Results showed isolation of 75 isolate endophytic fungi from 240 segments of leaves and twigs representing colonization frequency of 47.43%. Isolated fungi included different species of Aspergillus which prevail over other species (6 species), and three different isolates of Penicillium, one more species of Paecilomyces, Drechslera, Fusarium, Curvularia, Nigrospora and hyaline sterile fungus. Results showed variation in colonization frequencies within all species isolated from the two plant parts. Dual culture methods for testing antagonistic activity of isolated endophytes against three plant fungal pathogens, Fusarium oxysporium, Fusarium graminearum and Macrophomina phaseolina showed different antagonistic activities with different endophytes and pathogens, antagonistic activity was evaluated as percentage of inhibition of fungal pathogen. Moreover different antagonistic interactions revealed range between mycoparasitism to competition and production of inhibition zones between the two fungi interaction. These results give indication of the efficiency of using endophytic as fungi as a biocontrol agents in agricultural application against fungal plant pathogens. Key words: Endophytic fungi, Lebbeck, Antagonistic activity.