383 علوم الحياة | 2015) عام 3(العدد 28المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham J. for Pure & Appl. Sci. Vol. 28 (3) 2015 عينات محلية ل .Capsicum annuum L الحلو الفلفل لثمارالوراثي التباين RAPD-PCR باعتماد تقانة ومستوردة في العراق حسان عرفان حسين إ شيماء صباح مھدي الصرفة ( أبن الھيثم)/ جامعة بغدادقسم علوم الحياة/ كلية التربية للعلوم 2015/تشرين الثاني/15،قبل البحث في:2015/اب/17استلم البحث في: الخالصة عينة محلية ومستوردة من ثمار الفلفل الحلو التي جمعت من السوق المحلية العراقية 22التباين الوراثي في درس . Random amplified polymorphic DNA (RAPD-PCR) مضخم عشوائياً الالدنا متعدد األشكال باعتماد تقانة حزمة تراوحت أحجامھا الجزيئية بين 292أستعملت خمس بادئات عشوائية في ھذه الدراسة وأن ھذه البادئات قد أنتجت مع %100زوج قاعدي. كانت نسبة التعدد الشكلي لجميع البوادئ 150زوج قاعدي) و 1800كيلو زوج قاعدة ( 1.8 ، بينما لم تنتج البادئات األخر C52كيلو زوج قاعدة عندما أستعمل البادئ 1.8زمة متميزة واحدة وبحجم جزيئي ظھور ح أي حزم متميزة. نتائج شجرة القرابة الوراثية التي رسمت بإألعتماد على النتائج المتحصل عليھا من استعمال البادئات ه الوراثي قد وزعت العينات ضمن التحليل العنقودي إلى ثماني مجاميع للتشاب Jaccardالعشوائية وباألعتماد على مقياس رئيسة. أظھرت شجرة القرابة وجود تشابه عال بين ثمار الفلفل الحلو العراقي/اليوسفية األخضر وثمار الفلفل الحلو األردني الفلفل الحلو األيراني األصفر وبين وھي أعلى قيمة تشابه، بالمقارنة مع تشابه وبقيمة صفر بين ثمار 0.84األصفر بنسبة عينات ثمار الفلفل الحلو األخرى. نسبة التشابه العالية ظھرت أيضاً بين ثمار الفلفل الحلو األيطالي البرتقالي واألحمر ثمار وبين 0.73وكذلك بين ثمار الفلفل الحلو األسباني األحمر وثمار الفلفل الحلو األيطالي األخضر وبقيمة 0.74وبقيمة وبين ثمار الفلفل الحلو العراقي/الصويرة األخضر وبين ثمار 0.72الفلفل الحلو األيراني األحمر واألردني األخضر وبقيمة . 0.69الفلفل الحلو العراقي/يوسفية األخضر وثمار الفلفل الحلو األردني األصفر (يقعان في نفس تحت المجموعة) وبقيمة . أظھرت 0.61د األخضر وثمار الفلفل الحلو الصيني األحمر قد أظھرا تشابھاً وراثياً وبقيمة ثمار الفلفل الحلو العراقي/بل قيم البعد الوراثي بين عينات ثمار الفلفل الحلو المدروسة أعلى قيمة كانت بين عينتي ثمار الفلفل الحلو الصيني األصفر ينتي ثمار الفلفل الحلو األسباني األخضر واأليطالي األصفر ، بينما كان أقل بعد وراثي بين ع5.0واأليراني األخضر وبقمة . 1.0إذ كانت القيمة مساوية إلى Genetic variation ،Capsicum annuum L. ،RAPD ،Bell pepperلمات المفتاحية: الك 384 علوم الحياة | 2015) عام 3(العدد 28المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham J. for Pure & Appl. Sci. Vol. 28 (3) 2015 المقدمة اً مھم اً ومصدر ،بمختلف أنواعه من الخضراوات عالية القيمة الغذائية .Capsicum annuum Lالفلفل يعد وملون طبيعي للطعام فضالً كمنكهيستعمل و، Antioxidantوللعديد من المواد المضادة لألكسدة E، و A ،Cلفيتامينات ومضاد Anti-allergenicومضاد للحساسية Anti-inflammatoryعن فوائده الطبية العديدة كمضاد لأللتھابات . يعود [3,2,1]الفلفل األحمر الناضج استعمالمكانية تقليل خطر السرطان بأإذ تم أثبات ،Anti-carcinogenicللتسرطن وھي Domesticatedنوعاً معروفاً، خمسة منھا فقط مدجنة 30-27ويضم Solanaceaeالفلفل للعائلة الباذنجانية Capsicum annuum ،C. baccatum ،C. chinense ،C. frutescens وC. pubescens [5,4] . يعتقد أن ھذه مشتقان C. baccatum و C. pubescensاألنواع الخمسة المدجنة مشتقة من ثالثة أنساب وراثية متميزة وأن كل من مشتقة من سلف قد يكون C. frutescens و C. annuum ،C. chinenseنسبين مستقلين، بينما األصناف الباقية من C. annuumأن الفلفل .[7,6]منحدراً من نوع مستقل أو غير مستقل ويعتقد بأن أصل الفلفل منحدر من أميركا الجنوبية . الفلفل الحار يحتوي Sweet (mide)والنوع البارد Pungent (Hot)من أھم ھذه األنواع الخمسة ويضم النوع الحار يعد لھا فوائد طبية عديدة وكذلك لھا أھمية في ھذهو (Capsaicinoids)ة مسؤولة عن الطعم الحار وھي على مركبات قلويدي مثل الكاروتينات Nutrientsالصناعات الدوائية يفتقد لھا الفلفل الحلو ولكن ھذا اليمنع كونه مصدراً مھماً للمغذيات المظھرية فقط أحياناً عند األعتماد على المعلومات . أن تصنيف ھذا الجنس محير وصعب[3]والفينوالت والفيتامينات Morpho-agronomic data [5]ر الصفات المظھرية بالعوامل البيئية وعدم دقتھا في التمييز بين الطرز ، وذلك لتأث . [8]الجينية المتقاربة زوجاً كروموسومياً مع حجم مجيني ألحادي المجموعة الكروموسومية 12يتألف من Capsicumأن مجين الـ تطوير وتحسين ، زيادة كفاءة فيأن المعلومات عن التغايرات الوراثية تساعد . [10,9]كيكا زوج قاعدة 3.6-3.3يقدر بـ والصفات المرغوبة بدالً من المزروعات األنواع، إذ أن العديد من المزارعين أتجھوا إلى المزروعات ذات األنتاج العالي لم يحظ لكنه ،الرغم من كون الفلفل من أكثر الخضراوات المستزرعةوب ،Traditional cultivars [12,11]التقليدية في إيجاد واصمات وراثية تكمن إذ أن الصعوبة ،ن الناحية الوراثية والجزيئية مقارنة بالمحاصيل األخرىبدراسة كافية م DNA markers ن مجينه عالي الثبات ألجيدة لدراسة الفلفلHighly conserved خصوصاً الفلفل المستزرع الذي يعتبر أقل تنوعاً من األشكال البرية فضالً عن أن الفلفل الحلو ذو الثمرة الكبيرة يظھر تنوعاً قليالً مقارنة بتنوع ثمرة الفلفل Isozymeمزروع الفلفل قد درس في العديد من الدراسات باستعمال التنوع الوراثي وتشخيص .[13] الحار الصغيرة أن التغاير في الـ [16]، ولقد وجد Protein polymorphism [19,18,17,16,15,14]والتعدد الشكلي للبروتينات Isozyme قليل جداً في ضروب الفلفلC. annuum ، ولذلك يستعمل تحليل الـIsozyme السيما في برامج تربية الفلفل تعدالتي Molecular markersالواصمات الجزيئية في مثل ھذه البرامج. Capsicumعند أشراك أنواع مختلفة من لكونھا غير Genotypesتوضيح العالقات الجينية بين األنماط الجينية كذلك في و ،فھم المجين والتغاير الجينيفي األفضل تكون سريعة وأكثر كفاءة في كشف الفروقات بين النباتات بشكل أكثر من الصفات كما أنھا و ،متأثرة بالعوامل البيئية ، RAPD [21,1]لفلفل مثل في اي في دراسة التنوع الوراث ةيمن الواصمات الجزيئي . استعملت العديد[20]المظھرية AFLP [24,23,22] ، RFLP [26,25] ، SSR [27] . أن استعمال طريقةRAPD أو استعمالISSR في دراسة . [29,28]التباينات على مستوى الدنا كواصم للتحقق من العالقات التطورية بين النباتات التي تم تشخيصھا بوضوح ختزال الوقت في ظھور النتائج العدة أسباب منھا البساطة ويستعمل في مثل ھذه الدراسات RAPD الجزيئي الواصم وال يتطلب Radioactive probesمجسات مشعة استعمالإذ اليتم ،[30] راثيةمقارنة بباقي الواصمات الو القليلة الكلفةو . إن DNA ، وكذلك يتطلب كمية قليلة من قالب الدناPrimers designالمعرفة المسبقة لتسلسل الدنا في تصميم البوادئ . Dendrogram [5,1] يةالشجرة الوراث يمكنھا أن تجھز معلومات دقيقة لفصل األنواع وتصنيفھا ورسم RAPDطريقة Bell pepper لثمار الفلفل الحلو الكبيرة Polymorphismأن ھدف ھذه الدراسة ھو دراسة أمكانية تحديد التعدد الشكلي الوراثية بين ضروب الفلفل ةقرابالوتحديد RAPD markers استعمالالمزروعة محلياً والمستوردة من بلدان أخرى ب .Unweighted Pair Group Method with Arithmetic Mean (UPGMA)تقانة استعمالالمدروسة ب المواد وطرائق العمل جمع العينات المحلية والمستوردة من السوق المحلية العراقية في محافظة Bell pepperعينة من ثمار الفلفل الحلو 22جمعت اق النباتية ولم يتسنى لنا معرفة فيما أذا كانت العينات بغداد وصنفت باألعتماد على شكل الثمرة لعدم وجود السيقان واألور ).1ضروب مستزرعة أو نباتات محورة وراثياً لعدم معرفة المصدر الحقيقي للبلد المصدر لتلك الثمار (جدول البوادئ المستعملة البوادئمن أنواع 5 استعمالالكندية وحسب الطلب. تم Alpha DNAفي شركة Primersالبوادئ تم تصنيع . البادئ لثمار الفلفل الحلووحسب المراجع العلمية المختصة في دراسات التنوع الوراثي RAPD-PCRالخاصة بدراسات OPB-12 (5´-CCTTGACGCA-3´)والبادئ الثاني OPB-01 (5´-GTTTCGCTCC-3´)ھو المستعملاألول 385 علوم الحياة | 2015) عام 3(العدد 28المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham J. for Pure & Appl. Sci. Vol. 28 (3) 2015 -´C43 (5 الرابعوالبادئ [30]حسب المصدر ب OPB-15 (5´-GGAGGGTGTT-3´) الثالثوالبادئ GGCGGCACAGGA-3´) الخامسوالبادئ C52 (5´-GTCGACGGACGT-3´) تم [1]حسب المصدر ب . وحسب النشرة المرفقة من قبل Nuclease-Free waterالماء الخالي من أنزيم النيوكليز باستعمالأذابة ھذه البادئات الشركة. Bell pepperثمار الفلفل الحلو استخالص الدنا الكلي من تقريباً من ثمار مع بعض التحويرات. أخذ غرام واحد [31]أستخلص الدنا الكلي من ثمار الفلفل الحلو بحسب طريقة تسحق .مليلتر 1.5بحجم Eppendorfفي أنبوبة ووضع Liquid nitrogenالحلو المجفف بالنتروجين السائل الفلفل باستعمال قضيب DNA extraction bufferأستخالص الدنا دارئ منمايكرومليلتر 100في الفلفل الحلوثمار أنسجة EDTAملي مولر 50و Tris-HCl pH=7.5ملي مولر 100( من الدارئثانية. يتكون ھذا 20-15لمدة من بالستيكي pH=7.5 ملي مولر 500وNaCl ملي مولر من 10وβ-mercaptoethanolأضافي من مايكرومليلتر 300ضيف). أ من مايكرومليلتر 40أضيف .وكما في أعالهثانية 20- 15لمدة من ت أيضاً أنسجة ثمار الفلفلسحقأستخالص الدنا و دارئ دقيقة 15لمدة م º 65العينة تحت حرارة تحضن ثانية. 30لمدة Vortex ھزازتم خلطه بالو %20بتركيز SDSمحلول 10من المحلول الخزين DNase-free RNase Aمايكرومليلتر أنزيم من 10 أضيف يا.لغرض تحليل الخال 10أو Proteinase K أنزيممن مايكروغرام 200أضيف دقيقة. 60لمدة ºم 37 حرارةتحت تحضنومليغرام/مليلتر إلىحجم متساو أضيف دقيقة. 60لمدة م º 50 حرارةتحت تحضنومليغرام/مليلتر 20من المحلول الخزين مايكرومليلتر ثانية ومن 30لمدة الھزاز استعمالب تخلطو Phenol/Chloroform/Isoamyl alcohol (25:24:1) خليط من العينة Eppendorfنقل الجزء الطافي إلى أنبوبة .ºم 4 دقائق تحت حرارة 10لمدة دورة/دقيقة 13000مركزياً عند نبذتثم نبذتومن ثم Phenol/Chloroform/Isoamyl alcohol (25:24:1) خليط خرى معستخلص الدنا مرة أأوجديدة 500يفأض نقل الجزء الطافي إلى أنبوبة جديدة.وم º 4دقائق تحت حرارة 10لمدة دورة/دقيقة 13000مركزياً عند لغرض م º 4دقائق تحت حرارة 10لمدة دورة/دقيقة 13000مركزياً عند نبذتومن ثم من الكلورفورممايكرومليلتر أضيفلطافي إلى أنبوبة أختبار جديدة ونقل الجزء ا التخلص من الفينول المتبقي، ويمكن أعادة ھذه الخطوة مرة أخرى. من مادة انف حجميضأوموالري 3بتركيز NaOAcخالت الصوديوم من حجم العينة مادة من مادة 1/10 دقيقة لغرض ترسيب 30لمدة م º 20- حرارةالعينة عند تحضنوخلط جيداً و %95بتركيز أيضاً Ethanolاأليثانول التخلص من الجزء الطافي وغسل تم .ºم 4دقيقة تحت حرارة 30لمدة دورة/دقيقة 13000العينة مركزياً عند نبذت الدنا. 10لمدة دورة/دقيقة 13000ندالعينة مركزياً ع نبذتو %70كحول األيثانول بتركيز باستعمالالجزء الراسب (الدنا) دقائق في المختبر لغرض 10العينة بتركھا لمدة جففتوتم التخلص من الجزء الطافي ومن ثم م º 4حرارة دقائق تحت مليمولر من 10الذي يتكون من TE bufferمن مايكرومليلتر 100مرة أخرى في وعلقتالتخلص من األيثانول المتبقي HCl pH=8-Tris مليمولر من 1وEDTA .الـ استعمالين تركيز ونقاوة الدنا بعNanodrop ستخراج نسبة اب 280/A260A 20تحت حرارة بعد ذلك العينة تحفظو، [32] 0.1±1.8ھي له وأن الدنا النقي تكون قيمة نسبة األمتصاص- º .م RAPD-PCRطريقة باعتماد لثمار الفلفل الحلو التباين الوراثي Random amplifiedالدنا متعدد األشكال مضخم عشوائياً باعتماد تقانة لثمار الفلفل الحلوالتباين الوراثي درس polymorphic DNA (RAPD-PCR) حضر الـخليط األساسي .Master Mix األول للبادئOPB-01 والبادئ حسب ب C52الخامسوالبادئ C43 الرابعلبادئ لو ،[30]حسب المصدر ب OPB-15الثالثوالبادئ OPB-12الثاني المزود من شركة Go Taq® Green Master Mix. استعمل تحت ظروف مبردة مع بعض التحويرات [1]المصدر Promega 1مايكرومليلتر وبتركيز 12.5األميركية بحجمX والبادئPrimer 1مايكرومليلتر وبتركيز 2.5بحجم 25نانوغرام وكان الحجم الكلي للتفاعل 100مايكرومليلتراً وبتركيز 2حجم ب DNA template قالب الدنامايكرومولر و برنامج الجھاز وضبطلغرض تضخيم الدنا Thermocyclerالعينات في جھاز التدوير الحراري مايكرومليلتراً. وضعت Denature templateالقالب كانت لمسخ OPB-15 و OPB-01 ،OPB-12 ادئوبلل للحصول على ظروف التفاعل ألتحامو ثانية 30لمدة مº 94حرارة بدرجة Initial denaturationبتدائي اال والمسخدقائق 5ولمدة م º 94حرارة بدرجة لمدة م º 72حرارة بدرجة Extensionولمدة دقيقة واحدة واألستطالة م º 38.60درجة حرارة ب Annealingالبادئ وألتحامبتدائي اال المسخدقائق. مراحل 10لمدة م º 72حرارة بدرجة Final Extensionدقيقتين واألستطالة النھائية بدرجة Denature templateالقالب مسخل C52و C43 ادئوبلل ظروف التفاعلو دورة. 45ستطالة كانت لـ البادئ واال البادئ التحامو ثانية 30لمدة م º 94حرارة بدرجة Initial denaturation بتدائي اال مسخوال دقائق 5لمدة م º 94حرارة Annealing 56حرارة بدرجة º م للبادئC43 52.58و º م للبادئC52 ستطالة واال ثانية 15لمدةExtension بدرجة مسخدقائق. مراحل ال 5لمدة م º 72حرارة بدرجة Final Extensionستطالة النھائية واال دقيقة واحدةلمدة م º 72حرارة 386 علوم الحياة | 2015) عام 3(العدد 28المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham J. for Pure & Appl. Sci. Vol. 28 (3) 2015 لعينات أعاله البادئات استعمالنواتج تضخيم الدنا الناتج من حملت دورة. 40البادئ واألستطالة كانت لـ ألتحامبتدائي واال الواصم الجزيئي الوراثي حمل، كما %1.5في المكان المخصص لھا في ھالم اآلكاروز الذي كان بتركيز الفلفل الحلو . حملت صبغة التحميل البروموفينول األزرق زوج قاعدةكيلو 1.5حسب النشرة المرفقة معه الذي كان بحجم ب Bromophenol blue تجاه ان القطب األسود السالب بلتر ورحلت العينات كھربائياً ممليمايكرو 3في كل عينة بحجم يد ھالم اآلكاروز بصبغة األثيديوم بروما صبغساعات. 4-3ولمدة من اً فولت 75القطب األحمر الموجب تحت جھد كھربائي Ethidium bromide (EtBr) جھاز توثيق الھالم بواسطةقطع الدنا المتضخمة وشوھدت وصورت ،دقيقة 15لمدة Gel documentation system .المزود بكاميرا خاصة التحليل األحصائي Two-dimensional matrixإلى مصفوفة ثنائية البعد RAPD-PCR بتقانةحولت نتائج الحزم المتحصل عليھا Pastبرنامج أحصائي متخصص استعماللعدم وجودھا. حللت النتائج ب 0عند وجود الحزمة ورقم 1وذلك بأعطاء رقم software ver. 1.92 [33] . تقانة استعمالالمدروسة ب الفلفل الحلودرست العالقة الوراثية بين ضروب UPGMA ، إذ للتشابه الوراثي كما درس البعد الوراثي Jaccardس باستعمال مقيا Dendrogramشجرة القرابة الوراثية درست بين عينات الفلفل الحلو المدروسة. تم حساب النسبة المئوية لعدد Euclidean coefficientباألعتماد على نسبة التشابه .100بتقسيم عددھا على عدد الحزم الرئيسة مضروباً في Polymorphic bandsالحزم المتعددة األشكال النتائج والمناقشة في ثمار الفلفل الحلو RAPD-PCRباستعمال تقانة األشكالالتضخيم العشوائي للدنا متعدد نتائج لغرض تعيين التباين الوراثي في ثمار الفلفل الحلو األشكالالتضخيم العشوائي للدنا متعدد استعملت خمس بوادئ في 81أنتج OPB-01حزمة. البادئ 292البادئات المستعملة في ھذه الدراسة للعينات المحلية والمستوردة في العراق. أنتجت زوج قاعدي، إذ كان أقل عدد 450كيلو زوج قاعدة وبين 1.5حزم وبحجم جزيئي يتراوح بين 6- 2حزمة تباين عددھا من الحلو األردني البرتقالي، من الحزم قد أنتجت من عينة ثمار الفلفل الحلو الصيني البرتقالي، بينما عينات ثمار الفلفل األسباني األخضر، العراقي/بلد األخضر، الصيني األحمر واألصفر واأليراني البرتقالي واألصفر لم تنتج أي حزم عندما أ،ب ؛ 1ولم يظھر ھذا البادئ أي حزم متميزة (شكل %100أستعمل ھذا البادئ. كانت نسبة التعدد الشكلي لھذا البادئ كيلو زوج قاعدة 1.2حزمة وبحجم جزيئي يتراوح بين 6-2حزمة تباين عددھا من 49أنتج OPB-12 ). البادئ2جدول زوج قاعدي، كان أقل عدد من الحزم قد أنتجت من عينة ثمار الفلفل الحلو األردني األحمر والصيني البرتقالي، 200وبين خضر، األسباني األخضر، العراقي/بلد األخضر، األسباني بينما عينات ثمار الفلفل الحلو األردني البرتقالي، األردني األ الطويل األخضر، األيراني األحمر والبرتقالي واألصفر واأليطالي األصفر لم تنتج أي حزم عندما أستعمل ھذا البادئ. كانت OPB-15لبادئ ). ا2أ،ب ؛ جدول 2ولم يظھر ھذا البادئ أي حزم متميزة (شكل %100نسبة التعدد الشكلي لھذ البادئ زوج قاعدي، إذ 250كيلو زوج قاعدة وبين 1.5حزمة وبحجم جزيئي يتراوح بين 6- 1حزمة تباين عددھا من 48أنتج كان أقل عدد من الحزم قد أنتجت من عينة ثمار الفلفل الحلو األيطالي البرتقالي، بينما عينات ثمار الفلفل الحلو األردني األخضر، الصيني البرتقالي، األيراني البرتقالي واألصفر واألخضر، األيطالي األحمر البرتقالي واألحمر، األسباني أن تعدد واألصفر واألخضر واألسباني األحمر واألسباني الطويل األحمر لم تنتج أي حزم عندما أستعمل ھذا البادئ. لسالت النيكلوتيدات في مناطق البوادئ األشكال ينتج بسبب وجود الطفرات الوراثية أو بسبب حدوث أعادة الترتيب في تس تقانة استعمالأو في المناطق المحصورة بين البوادئ ولھذا فأن تعدد األشكال يعين بوجود أو عدم وجود الحزم عند RAPD ھا في تشخيص الكائنات المتباينة استعمال، كما أن البوادئ العشوائية تعتبر واصمات جزيئية سائدة ولھذا اليمكن أي أن كل بادئ يتجه ،بأتجاه خاص Anneal، كذلك يجب على البادئ العشوائي أن يلتحم Heterozygotesالزيجة بأتجاه البادئ اآلخر، كما أنه يجب أن تكون مسافة معينة بينھما وعندما تكون المسافة كبيرة بين البدئين فال يتم أكمال تفاعل PCR ألسباب أعاله. كانت نسبة التعدد الشكلي لھذ لظھور حزم قد يعود ، ولھذا فأن عدم[34]وال يؤدي إلى أنتاج حزم حزمة تباين عددھا 78أنتج C43). البادئ 2أ،ب ؛ جدول 3ولم يظھر ھذا البادئ أي حزم متميزة (شكل %100البادئ ن الحزم قد إذ كان أقل عدد م زوج قاعدي، 150كيلو زوج قاعدة وبين 1.4حزمة وبحجم جزيئي يتراوح بين 8-1من أنتجت من عينة ثمار الفلفل الحلو األسباني الطويل األخضر، بينما عينات ثمار الفلفل الحلو األردني األخضر، األسباني األخضر واألحمر، الصيني األصفر واأليراني األصفر لم تنتج أي حزم عندما أستعمل ھذا البادئ. كانت نسبة التعدد الشكلي حزمة تباين 36أنتج C52). البادئ 2أ،ب ؛ جدول 4ھر ھذا البادئ أي حزم متميزة (شكل ولم يظ %100لھذا البادئ زوج قاعدي، إذ كان أقل عدد من الحزم 220كيلو زوج قاعدة وبين 1.8حزم وبحجم جزيئي يتراوح بين 4- 1عددھا من ألخضر، األسباني الطويل األخضر، قد أنتجت من عينة ثمار الفلفل الحلو األسباني األخضر واألحمر، العراقي/بلد ا األيراني البرتقالي واأليطالي األخضر، بينما عينات ثمار الفلفل الحلو األردني البرتقالي، الصيني األصفر والبرتقالي مع ظھور حزمة %100واأليراني األصفر لم تنتج أي حزم عندما أستعمل ھذا البادئ. كانت نسبة التعدد الشكلي لھذ البادئ كيلو زوج قاعدة ظھرت عند استعمال ھذا البادئ في عينة الفلفل األسباني األحمر ولم 1.8زة واحدة وبحجم جزيئي متمي 387 علوم الحياة | 2015) عام 3(العدد 28المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham J. for Pure & Appl. Sci. Vol. 28 (3) 2015 ). أن ھذه الدراسة قد نجحت في التمييز بين 2أ،ب ؛ جدول 5تظھر في بقية العينات وعند استعمال البوادئ األخرى (شكل قد أظھرت ھذه النتائج تبايناً واضحاً السيما في نسبة عدد الحزم المتعددة عينات ثمار الفلفل الحلو المحلية والمستوردة و األشكال المتحصل عليھا عند استعمال ھذه البادئات العشوائية. البادئات المستعملة في ھذه الدراسة قد أخذت من الدراسة ادئات متعددة األشكال المظھرية في دراسة ب 9بادئاً عشوائياً كان منھا 13، والذين أستعملوا [30]التي قام بھا الباحثون حزمة مع حجم جزيئي لھا 63من الفلفل الحلو والحار. أنتجت ھذه البادئات المتعدد األشكال المظھرية 23التباين الوراثي لـ و Monomorphic bandsحزمة أحادية الشكل 35زوج قاعدي والتي كان منھا 2754زوج قاعدي إلى 391يتباين من . كان عدد الحزم المنتجة من قبل البادئات العشوائية %44.4حزمة متعددة األشكال مع نسبة مئوية للتعدد الشكلي كان 28 حزم لكل بادئ، كما 7مع معدل OPB-15و OPB-01حزم للبادئان 9إلى OPB-10للبادئ 5المستعملة يتراوح من أليجاد التباين الوراثي [5]. وفي دراسة أخرى قام بھا %66.7لى إ 14.29كانت نسبة الحزم المتعددة األشكال تتباين من ، وجدوا ھؤالء الباحثن بأن ھناك RAPDبين مستزرعات أنواع من الفلفل الحلو باستعمال الواصم الجزيئي العشوائي - ت النباتية والمظھريةتباينات وراثية ضمن وبين أنواع الفلفل الحلو المدروسة، وأن ھذه النتائج كانت متوافقة مع التصنيفا .Botanical and morpho-agronomic classificationالزراعية -RAPDباألعتماد على نتائج تقانة لثمار الفلفل الحلو مخطط التحليل العنقودي (شجرة القرابة) PCR رسمت شجرة القرابة الوراثية إعتماداً على النتائج المتحصلة من استعمال البادئات العشوائية وباستعمال تقانة RAPD-PCR على عينات ثمار الفلفل الحلو المدروسة وباستعمال مقياسJaccard للتشابه الوراثي. يتضح من الشكل ن مجاميع رئيسة. المجموعة األولى ضمت ثمارالفلفل الحلو ) بأن العينات قد توزعت ضمن التحليل العنقودي في ثما6( األسباني األخضر والمجموعة الثانية تكونت من تحت مجموعة واحدة ضمت ثمار الفلفل الحلو األردني واأليراني الحلو البرتقالي، أما المجموعة الثالثة فضمت ثمار الفلفل الحلو الصيني األصفر والمجموعة الرابعة ضمت ثمار الفلفل الصيني البرتقالي. المجموعة الخامسة ضمت ثمار الفلفل الحلو األسباني الطويل األخضر، بينما تكونت المجموعة السادسة من أثنين من تحت المجموعة ضمت التحت مجموعة األولى ثمار الفلفل الحلو األردني األحمرواألسباني الطويل األحمر الثانية فقد ضمت ثمار الفلفل الحلو األسباني األحمر واأليطالي األخضر والبرتقالي واأليطالي األصفر، أما تحت المجموعة واألحمر واأليراني األخضر. المجموعة السابعة فتكونت من ثالث تحت المجموعة. ضمت تحت المجموعة األولى ثمار ت المجموعة الثانية ثمار الفلفل الحلو الفلفل الحلو العراقي/الصويرة واليوسفية األخضر واألردني األصفر، بينما ضمت التح األيراني األحمر واألردني األخضر، أما تحت المجموعة الثالثة فقد ضمت ثمار الفلفل الحلو الصيني األحمر والعراقي/بلد األخضر، وأخيراً المجموعة الثامنة التي ضمت ثمار األيطالي األصفر. الفلفل الحلو العراقي/اليوسفية األخضر وثمار الفلفل الحلو لقد أوضح ھذا المخطط وجود تشابه عال بين ثمار وھي أعلى قيمة تشابه بالمقارنة مع تشابه وبقيمة صفر بين ثمار الفلفل الحلو األيراني 0.84األردني األصفر وبنسبة لفل الحلو األيطالي األصفر وبين عينات ثمار الفلفل الحلو األخرى. نسبة التشابه العالية قد ظھرت أيضاً بين ثمار الف وكذلك بين ثمار الفلفل الحلو األسباني األحمر وثمار الفلفل الحلو األيطالي األخضر وبقيمة 0.74البرتقالي واألحمر وبقيمة وبين ثمار الفلفل الحلو العراقي/الصويرة 0.72وبين ثمار الفلفل الحلو األيراني األحمر واألردني األخضر وبقيمة 0.73 ن ثمار الفلفل الحلو العراقي/يوسفية وثمار الفلفل الحلو األردني األصفر (يقعان في نفس تحت المجموعة) األخضر وبي . 0.61. ثمار الفلفل الحلو العراقي/بلد األخضر وثمار الفلفل الحلو الصيني األحمر أظھرا تشابھاً وراثياً وبقيمة 0.69وبقيمة تكون صعبة ألن يظھر تباينات Capsicum speciesنواع الفلفل أل Taxonomic identityأن الشخصية التصنيفية ، فقد وجد ھذا الباحث وآخرون في [21]خصوصاً في الشكل المظھري للثمار والتي تعتبر من المنتجا ت المھمة أقتصادياً تشابھاً RAPDواصم جزيئي عشوائي 27وباستعمال Capsicumدراسة التباين المظھري ولون الثمار في أنواع الفلفل RAPD. وفي دراسة على عشرة مستزرعات من الفلفل في تايلند باستعمال الواصم العشوائي %88-23وراثياً وبنسبة نسبة [30]. وجد الباحثون [1] 0.891و 0.209وجد الباحثون أن قيم التشابه الوراثي بين ھذه المستزرعات تباين من نمطاً وراثياً من الفلفل الحار. تعد ھذه الدراسة من أول الدراسات 23اسة على في در 0.97إلى 0.42تشابه تراوحت من في العراق لدراسة التباين الوراثي في ثمار الفلفل الحلو المحلية والمستوردة، وبالنظر لعدم وجود مصادر رسمية تؤكد ع ثمار الفلفل الحلو في بلدانھا األصلية أصل ومنشأ عينات ثمار الفلفل الحلو المستوردة كان من الصعوبة أجراء مقارنة م أو لجينات في ھذه الدراسة للحزم الناتجة DNA sequencingلتسلسل التتابعي للدنا مما يستلزم أجراء دراسات مستقبلية ل و http://genome.ucsc.eduللفلفل والمنشور في المواقع العالمية مثل ومقارنتھا مع الجينوم الكامل معينة network.org-http://www.dnabank وhttp://www.ncbi.nlm.nih.gov لغرض معرفة المنشأ الحقيقي لتلك الثمار المستوردة. RAPD-PCRباألعتماد على نتائج تقانة الفلفل الحلوقيم األبعاد الوراثية بين عينات ثمار أعتماداً على نسبة Pastقدر البعد الوراثي بين عينات ثمار الفلفل الحلو المدروسة باستعمال البرنامج األحصائي ة بعد ). أظھرت النتائج بأن أعلى قيم3وكما في الجدول ( Euclidean coefficientالتشابه باستعمال معامل أحصائي ھو ، بينما كان أقل بعد وراثي بين عينتي 5.0وراثي بين عينتي ثمار الفلفل الحلو الصيني األصفر واأليراني األخضر وبقيمة 388 علوم الحياة | 2015) عام 3(العدد 28المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham J. for Pure & Appl. Sci. Vol. 28 (3) 2015 . بقية عينات ثمار الفلفل الحلو 1.0ثمار الفلفل الحلو األسباني األخضر واأليطالي األصفر إذ كانت القيمة مساوية إلى . أوضحت ھذه النتائج أن األقل تشابھا يملك أكبر بعد وراثي. 5.0و 1.0دھا الوراثية بين المدروسة فقد تراوحت قيم أبعا المصادر 1. Sitthiwong, K.;Matsui,T.; Sukprakarn, S.; Okuda, N. and Kosugi, Y. (2005). Classification of pepper (Capsicum annuum L.) accessions by RAPD analysis. Biotechnology. 4(4):305- 309. 2. Kumari, S. (2013). Genetic variability studies in bell pepper (Capsicum annuum L.). Asian J. Horticulture. 8(1): 280-284. 3. Shaha, R.K.; Rahman, S. and Asrul, A. (2013). Bioactive compounds in chilli peppers (Capsicum annuum L.). at various ripening (green, yellow and red) stages. Ann. Biolo. Res. 4(8):27-34. 4. Andrews, J. (1984). Peppers: The domesticated capsicums. Austin: University of Texas Press. 5. Rabelo da Costa1, F.; Pereira, T. N. S. P.; Vitória1, A. P.; de Campos, K. P.; Rodrigues, R.; da Silva, D. H. and Pereira, M. G. (2006). Genetic diversity among Capsicum accessions using RAPD markers. Crop Breeding and Appl. Biotech. 6:18-23. 6. Eshbaugh, W. H. (1993). Peppers: History and exploitation of a serendipitous new crop discovery. In Janick J; Simon, J. F., editors. New crops. New York, USA: Wiley pp.132- 139. 7. Pickersgill, B. (1997). Genetic resources and breeding of Capsicum spp. Euphytica.96:129- 133. 8. Aktas, H.; Abak, K. and Sensoy, S. (2009). Genetic diversity in some Turkish pepper (Capsicum annuum L.) genotypes revealed by AFLP analyses. African J. Bioteh. 8(18):4378-4386. 9. Arumuganathan, K. and Earle, E. (1991). Nuclear DNA content of some important plant species. Plant Mol. Bio. Reporter 9:208–218. 10. Moscone, E. A.; Baranyi, M.; Ebert, I., Greilhuber. J.; Ehrendorfer, F., et al. (2003). Analysis of nuclear DNA content in Capsicum (solanaceae) by flow cytometry and feulgen densitometry. Ann. Bot. 92:21–29. 11. Geleta, L. F.; Labuschagne M. T. and Viljoen C. D. (2005). Genetic variability in pepper (Capsicum annuum L.) estimated by morphological data and amplified fragment length polymorphism markers. Biodivers Conserv 14, 2361-2375. doi:10.1007/s10531-004-1669- 9. 12. Krishnamurthy, S. L.; Rao, A. M.; Reddy, M. K.; Reddy, S.; Ramesh, S.; Hittalmani, S. and Rao, M. G. (2013). Limits of parental divergence for the occurrence of heterosis through morphological and AFLP marker in chili Capsicum annuum L. Current Sci. 104(6):738-746. 13. Kochieva, E. Z. and Ryzhova, N.N. (2003). Molecular AFLP analysis of the genotypes of pepper Capsicum annuum cultivars. Russian J. Genet. 39(12):1345-1348. 14. Panda, R. C.; Aniel Kumar, O. and Raja Rao, K.G. (1986). The use of seed protein electrophoresis in the study of phylogenetic relationships in chili pepper (Capsicum L.). Theor. Appl. Genet. 72:665–670. 15. Conicella, C.; Errico, A. and Saccardo, F. (1990). Cytogenetic and isozyme studies of wild and cultivated Capsicum annuum. Genome. 33:279–282. 16. Belletti, P.; Lanteri, S. and Saracco, F. (1992). Allozyme variability in Capsicum. In: Proceedings of the Eighth Meeting on Genetics and Breeding on Capsicum and Eggplant, Rome, Italy, 7–10 September 1992, pp. 221–226. 17. Posch, A.; van den Berg, B. M.; Duranton, C. and Görg, A. (1994). Polymorphism of pepper (Capsicum annuum L.) seed proteins studied by two dimensional electrophoresis 389 علوم الحياة | 2015) عام 3(العدد 28المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham J. for Pure & Appl. Sci. Vol. 28 (3) 2015 with immobilized pH gradients: methodical and genetic aspects. Electrophoresis 15, 297– 304. 18. Lucchese, C.; Dinelli, G.; Miggiano, A. and Lovato, A. (1999). Identification of pepper (Capsicum spp.) cultivars by field and electrophoresis tests. Seed Sci. Technol. 27, 37–47. 19. Odeigah, P. G. C.; Oboh, B. and Ahhalokpe, I. O. (1999). The characterization of Nigerian varieties of pepper, Capsicum annuum, and Capsicum fructescens by SDS- polyacrylamide gel electrophoresis of seed proteins. Genet. Res. Crop Evol. 46, 127–131. 20. Hayden, M. J.; Tabone, T. L.; Nguyen, T. M.; Coventry, S.; Keiper, F.J.; Fox, R. L.; Chalmers, K. J.; Mather, D. E. and Eglinton J. A. (2010). An informative set of SNP markers for molecular characterization of Australian barley germplasm. Crop Plant Sci. 61:70-83. 21. Thul, S. T.; Darokar, M. P.; Shaseny, A. K. and Khanuja, S. P. S. (2011). Molecular profiling of genetic variability in Capsicum species based on ISSR and RAPD markers. Mol. Biotechnol. 51(2):137-147. 22. Vos, P.; Hogers, R.; Bleeker, M.; Reijanas, M.; de Lee, T. V.; Hornes, M.; Frijters, A.; Pot, J.; Peleman, J.; Kuiper, M. and Zabeau, M. (1995). AFLP: a new technique for DNA fingerprinting. Nucleic Acid Res. 23(21):4407-4414. 23. Paran, I.; Aftergoot, E. and Shifriss, C. (1998). Variation in Capsicum annuum revealed by RAPD and AFLP markers. Euphytica 99:167-173. 24. Toquica, S. P.; Rodriquez, F.; Martinez, E.; Duque, M. C. and Tohme, J. (2003). Molecular characterization by AFLPs of Capsicum germplasm from the Amazon department in Columbia, characterization by AFLPs of Capsicum. Genet Res Crop Evol. 50:639-647. 25. Prince, J. P.; Loiaza, F. and Tanksley, S. D. (1992). Restriction fragment length polymorphism and genetic distance among mexican accessions of Capsicum. Genome 35: 726-732. 26. Prince, J. P.; Lackney, V. K.; Angeles, C.; Blauth, J. R. and Kyle, M. M. (1995). A survey of DNA polymorphism within the genus Capsicum and the fingerprinting of pepper cultivars. Genome 38:224-231. 27. Hanáček, P.; Vyhnánek, T.; Rohrer, M.; Cieslarova, J. and Stavělíkova, H. (2009). DNA polymorphism in genetic resources of red pepper using microsatellite markers. Hort Sci. (PRAGUE). 36: 127-132. 28. Rodrigues, J. M.; Berke, T.; Engle, L. and Nienhuis, J. (1999). Variation among and within Capsicum species revealed by RAPD markers. Theoretical and Appl. Genet. 99:147-156. 29. Ince, A. G.; Karaca, M. and Onus, A. N. (2010). Genetic relationships within and between Capsicum species. Biochem. Genet. 48:83-95. 30. Bahurupe, S. B.; Sakhare, S. B.; Kulwal, P.L.; Akhare, A. A. and Pawar, B. D.(2013). Genetic diversity analysis in chilli (Capsicum annuum L.) using RAPD markers. The Bioscan. 8(3):915-918. 31. Kang, T. J. and Yang, M. S. (2004). Rapid and reliable extraction of genomic DNA from various wild-type and transgenic. BMC Biotechnology. 4(20):1-12. 32. Clark, M. S. (1997). In: Plant Molecular Biology - A Laboratory Manual, pp 305-328, Springer-Verlog Berlin Heidelberg, New York. 33. Hammer, Ø.; Harper, D. A.T. and Ryan, P. D. (2001). PAST: Palaeontological statistics software package for education and data analysis. Paleontologia Eletronica. 4(1):1-9. 34. Kumar, N. S. and Gurusubramanian, G. (2011). Random amplified polymorphic DNA (RAPD) markers and its applications. Sci. Vis. 11 (3):116-124. 390 علوم الحياة | 2015) عام 3(العدد 28المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham J. for Pure & Appl. Sci. Vol. 28 (3) 2015 السوق العراقية في محافظة بغداد): العينات المدروسة المحلية والمستوردة والمتحصل عليھا من 1جدول ( لون الثمرة العينة أنتاج نوع ومصدر ت أخضر، أحمر ، برتقالي، أصفر فلفل حلو أردني 1 أخضر فلفل حلو عراقي / منطقة بلد 2 أخضر فلفل حلو عراقي / منطقة اليوسفية 3 أخضر فلفل حلو عراقي / منطقة الصويرة 4 أخضر، أحمر فلفل حلو أسباني 5 أخضر، أحمر فلفل حلو أسباني طويل 6 أحمر، برتقالي، أصفر فلفل حلو صيني 7 أخضر، أحمر، برتقالي، أصفر فلفل حلو أيراني 8 أخضر، أحمر، برتقالي، أصفر فلفل حلو أيطالي 9 ): نواتج الحزم المتعددة األشكل والنسبة المئوية للتعدد الشكلي2جدول ( النسبة المئوية للتعدد الشكلي عدد الحزم المتعددة األشكال عدد الحزم الرئيسة البادئأسم ت 1 OPB-01 6 6 100% 2 OPB-12 6 6 100% 3 OPB-15 6 6 100% 4 C43 8 8 100% 5 C52 4 4 100% 391 علوم الحياة | 2015) عام 3(العدد 28المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham J. for Pure & Appl. Sci. Vol. 28 (3) 2015 OPB-01 بادئال باستعمالثمار الفلفل الحلو لدنا %1.5بتركيز ): ھالم الترحيل الكھربائيأ1( شكل RAPD-PCRاألشكال متعدد التضخيم العشوائي للدنا تقانةو L) فلفل أردني 3: فلفل أردني أحمر، 2: فلفل أردني برتقالي، 1كيلو زوج قاعدة)، 1.5: الدليل الحجمي : /يوسفية : فلفل عراقي7: فلفل عراقي/بلد أخضر، 6: فلفل أسباني أخضر، 5: فلفل أردني أخضر، 4أصفر، : فلفل صيني 11: فلفل صيني أصفر، 10: فلفل عراقي/صويرة أخضر، 9: فلفل صيني أحمر، 8أخضر، برتقالي. OPB-01 بادئال ثمار الفلفل الحلو باستعماللدنا %1.5بتركيز ): ھالم الترحيل الكھربائيب1( شكل RAPD-PCRاألشكال متعدد التضخيم العشوائي للدنا تقانةو L :) 14: فلفل أيراني أحمر، 13: فلفل أسباني طويل أخضر، 12كيلو زوج قاعدة)، 1.5الدليل الحجمي : : فلفل 18: فلفل أيطالي برتقالي، 17: فلفل أيطالي أحمر، 16: فلفل أيراني أصفر، 15فلفل أيراني برتقالي، : فلفل 22باني طويل أحمر، : فلفل أس21: فلفل أسباني أحمر، 20: فلفل أيطالي أخضر، 19أيطالي أصفر، أيراني أخضر. 392 علوم الحياة | 2015) عام 3(العدد 28المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham J. for Pure & Appl. Sci. Vol. 28 (3) 2015 OPB-12 بادئال ثمار الفلفل الحلو باستعماللدنا %1.5بتركيز ): ھالم الترحيل الكھربائيأ2( شكل RAPD-PCRاألشكال متعدد التضخيم العشوائي للدنا تقانةو L) فلفل أردني 3دني أحمر، : فلفل أر2: فلفل أردني برتقالي، 1كيلو زوج قاعدة)، 1.5: الدليل الحجمي : : فلفل عراقي/يوسفية 7: فلفل عراقي/بلد أخضر، 6: فلفل أسباني أخضر، 5: فلفل أردني أخضر، 4أصفر، : فلفل صيني 11: فلفل صيني أصفر، 10: فلفل عراقي/صويرة أخضر، 9: فلفل صيني أحمر، 8أخضر، برتقالي. OPB-12 بادئال ثمار الفلفل الحلو باستعماللدنا %1.5بتركيز ): ھالم الترحيل الكھربائيب2( شكل RAPD-PCRاألشكال متعدد التضخيم العشوائي للدنا تقانةو L) 14: فلفل أيراني أحمر، 13: فلفل أسباني طويل أخضر، 12كيلو زوج قاعدة)، 1.5: الدليل الحجمي : : فلفل 18: فلفل أيطالي برتقالي، 17 : فلفل أيطالي أحمر،16: فلفل أيراني أصفر، 15فلفل أيراني برتقالي، : فلفل 22: فلفل أسباني طويل أحمر، 21: فلفل أسباني أحمر، 20: فلفل أيطالي أخضر، 19أيطالي أصفر، أيراني أخضر. 393 علوم الحياة | 2015) عام 3(العدد 28المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham J. for Pure & Appl. Sci. Vol. 28 (3) 2015 OPB-15 بادئال ثمار الفلفل الحلو باستعماللدنا %1.5بتركيز ): ھالم الترحيل الكھربائيأ3( شكل RAPD-PCRاألشكال متعدد التضخيم العشوائي للدنا تقانةو L) فلفل أردني 3: فلفل أردني أحمر، 2: فلفل أردني برتقالي، 1كيلو زوج قاعدة)، 1.5: الدليل الحجمي : : فلفل عراقي/يوسفية 7: فلفل عراقي/بلد أخضر، 6: فلفل أسباني أخضر، 5: فلفل أردني أخضر، 4أصفر، : فلفل صيني 11: فلفل صيني أصفر، 10: فلفل عراقي/صويرة أخضر، 9ر، : فلفل صيني أحم8أخضر، برتقالي. OPB-15 بادئال ثمار الفلفل الحلو باستعماللدنا %1.5بتركيز ): ھالم الترحيل الكھربائيب3( شكل RAPD-PCRاألشكال متعدد التضخيم العشوائي للدنا تقانةو L) 14: فلفل أيراني أحمر، 13: فلفل أسباني طويل أخضر، 12 كيلو زوج قاعدة)، 1.5: الدليل الحجمي : : فلفل 18: فلفل أيطالي برتقالي، 17: فلفل أيطالي أحمر، 16: فلفل أيراني أصفر، 15فلفل أيراني برتقالي، : فلفل 22: فلفل أسباني طويل أحمر، 21: فلفل أسباني أحمر، 20: فلفل أيطالي أخضر، 19أيطالي أصفر، ر.أيراني أخض 394 علوم الحياة | 2015) عام 3(العدد 28المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham J. for Pure & Appl. Sci. Vol. 28 (3) 2015 تقانةو C43 بادئال ثمار الفلفل الحلو باستعماللدنا %1.5بتركيز ): ھالم الترحيل الكھربائيأ4( شكل RAPD-PCRاألشكال متعدد التضخيم العشوائي للدنا L) فلفل أردني 3: فلفل أردني أحمر، 2: فلفل أردني برتقالي، 1كيلو زوج قاعدة)، 1.5: الدليل الحجمي : : فلفل عراقي/يوسفية 7: فلفل عراقي/بلد أخضر، 6: فلفل أسباني أخضر، 5أردني أخضر، : فلفل 4أصفر، : فلفل صيني 11: فلفل صيني أصفر، 10: فلفل عراقي/صويرة أخضر، 9: فلفل صيني أحمر، 8أخضر، برتقالي. تقانةو C43 بادئال ثمار الفلفل الحلو باستعماللدنا %1.5بتركيز ): ھالم الترحيل الكھربائيب4( شكل RAPD-PCRاألشكال متعدد التضخيم العشوائي للدنا L) 14: فلفل أيراني أحمر، 13: فلفل أسباني طويل أخضر، 12كيلو زوج قاعدة)، 1.5: الدليل الحجمي : : فلفل 18: فلفل أيطالي برتقالي، 17: فلفل أيطالي أحمر، 16: فلفل أيراني أصفر، 15فلفل أيراني برتقالي، : فلفل 22: فلفل أسباني طويل أحمر، 21: فلفل أسباني أحمر، 20: فلفل أيطالي أخضر، 19الي أصفر، أيط أيراني أخضر. 395 علوم الحياة | 2015) عام 3(العدد 28المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham J. for Pure & Appl. Sci. Vol. 28 (3) 2015 تقانةو C52 بادئال ثمار الفلفل الحلو باستعماللدنا %1.5بتركيز ): ھالم الترحيل الكھربائيأ5( شكل RAPD-PCRاألشكال متعدد التضخيم العشوائي للدنا L فلفل أردني 3: فلفل أردني أحمر، 2: فلفل أردني برتقالي، 1كيلو زوج قاعدة)، 1.5الحجمي (: الدليل : : فلفل عراقي/يوسفية 7: فلفل عراقي/بلد أخضر، 6: فلفل أسباني أخضر، 5: فلفل أردني أخضر، 4أصفر، ل صيني : فلف11: فلفل صيني أصفر، 10: فلفل عراقي/صويرة أخضر، 9: فلفل صيني أحمر، 8أخضر، برتقالي. تقانةو C52 بادئال ثمار الفلفل الحلو باستعماللدنا %1.5بتركيز ): ھالم الترحيل الكھربائيب5( شكل RAPD-PCRاألشكال متعدد التضخيم العشوائي للدنا L) 14: فلفل أيراني أحمر، 13: فلفل أسباني طويل أخضر، 12كيلو زوج قاعدة)، 1.5: الدليل الحجمي : : فلفل 18: فلفل أيطالي برتقالي، 17: فلفل أيطالي أحمر، 16: فلفل أيراني أصفر، 15أيراني برتقالي، فلفل : فلفل 22: فلفل أسباني طويل أحمر، 21: فلفل أسباني أحمر، 20: فلفل أيطالي أخضر، 19أيطالي أصفر، أيراني أخضر. السھم يوضح الحزمة المتميزة. ) RAPD-PCRقيم األبعاد الوراثية لعينات الفلفل المستوردة بأعتماد نتائج تقانة الدنا متعدد األشكال مضخم عشوائياً ( ): 3جدول (  أعلى قيمة بعد وراثي  أقل قيمة بعد وراثي Samples Jordan /O Jordan /R Jordan /Y Jordan /G Spain/ G Iraqi (B)/G Iraqi (Y)/G China/ R Iraqi (S)/G China/ Y China/ O Spain (L)/G Iran/R Iran/O Iran/Y Italy/ R Italy/ O Italy/ Y Italy/ G Spain/ R Spain (L)/R Iran/G Jordan/O 0 Jordan/R 3.464 0 Jordan/Y 4.359 3 0 Jordan/G 4.472 3.742 3.317 0 Spain/G 2.828 3.742 4.796 3.742 0 Iraqi (B)/G 3.162 4 3.606 3.162 3.162 0 Iraqi (Y)/G 4.359 3 2 3.317 4.796 3.606 0 China/R 3.317 4.359 3.464 4.123 4.123 2.646 3.162 0 Iraqi (S)/G 4.359 3.317 2.828 3.606 4.796 4.123 3.162 3.742 0 China/Y 4.123 4.796 4 3.606 3.317 3 4.243 3.464 4.690 0 China/O 3 3.317 4.243 4.123 2.646 3.606 4.243 4 4.243 3.464 0 Spain (L)/G 3.317 3.317 4.243 3 2.236 3.317 4.243 4.243 4.472 3.742 2.828 0 Iran/R 4.359 3.873 3.464 2.236 3.873 3 3.464 3.742 3.464 3.742 4 3.464 0 Iran/O 2 3.464 4.359 4.243 2.450 3.162 4.583 3.317 4.123 4.123 3.317 3 3.873 0 Iran/Y 2.646 3.873 4.899 3.873 1 3.317 4.899 4.243 4.899 3.162 2.450 2.450 4 2.646 0 Italy/R 4.472 3.162 3.873 4 4 4.690 3.873 4.796 3.606 4.359 3.606 3.873 4.123 4.472 4.123 0 Italy/O 4.359 3.317 4 3.873 4.123 4.583 3.464 4.243 3.742 4.472 3.742 3.742 3.742 4.359 4.243 2.236 0 Italy/Y 3.873 2.646 4 3.317 3.317 4.123 4 4.690 3.742 4.690 3.464 3.162 3.162 3.606 3.464 3 2.828 0 Italy/G 4.243 3.162 3.873 3.742 3.742 4.472 3.873 4.359 3.873 4.123 3.606 3.317 3.873 3.742 3.873 2.450 2.646 3 0 Spain/R 4.243 3.162 4.123 3.464 3.162 4.472 3.873 4.583 4.123 3.873 3 3 3.873 4 3.317 2.450 2.646 3 2 0 Spain (L)/R 4.123 2.646 3.742 3.873 3.606 4.359 4 4.690 3.742 4.472 3.464 3.162 4.243 3.873 3.742 3.317 3.464 2.828 3 3.317 0 Iran/G 4 3.162 3.873 4.243 4.472 4.690 3.606 4.123 3.317 5 3.873 4.123 4.123 4 4.583 2.828 2.646 3 2.828 3.162 3.606 0 الفلفل المدروسة ثمار لعينات RAPD-PCRبأستعمال تقانة األشكالأعتماداً على نتائج التضخيم العشوائي للدنا متعدد Dendrogramشجرة القرابة الوراثية ): 6شكل ( للتشابه الوراثي Jaccardبحسب معامل   398 علوم الحياة | 2015) عام 3(العدد 28المجلد مجلة إبن الھيثم للعلوم الصرفة و التطبيقية Ibn Al-Haitham J. for Pure & Appl. Sci. Vol. 28 (3) 2015 Genetic diversity of Capsicum annuum L. in local and imported samples in Iraq by using RAPD-PCR Ihsan A. Hussein Shaymaa S. Mahdi Dept. of Biology/ College of Education for Pure Science ( Ibn- Al Haithim)/ University of Baghdad Received in:17/August/2015,Acceped in:15/November/2015 Abstract Genetic variation was studied in 22 local and imported samples collected from local Iraqi market by using random amplified polymorphic DNA (RAPD-PCR). Five randomly primers set were used in this study. These primers produced 292 bands. Molecular weights of these bands ranged between 1.8 Kb (1800 bp) to 150 bp. The percentage of polymorphic bands is 100%, with one distinguished band which is produced by using C52 primer. The other primers did not produce any distinguished band. The results of Dendrogram of the studied samples depended on RAPD-PCR results by using Jaccard coefficient for genetic similarity was distributed the samples into 8 groups. This Dendrogram revealed a higher similarity between Iraqi/Yousifia green bell pepper and Jordanian yellow bell pepper with 0.84 values. This value is the highest between samples in comparison with lowest values (0.0) which are found between Iranian yellow bell pepper and the other samples. There are another high values were revealed between Italian orange and red bell pepper with 0.74 values. Also, other high similarity values revealed between Spanish red bell pepper and Italian green bell pepper with 0.73 values; Iranian red bell pepper and Jordanian green bell pepper with 0.72 values; Iraqi/Souwyera green bell pepper and Iraqi/Yousifia green bell pepper with Jordanian yellow bell pepper (the last two samples in same subgroup) with 0.69 values, and last between Iraqi/Balad green bell pepper and Chinese red bell pepper with 0.61 values. The genetic distance between studied samples by using Euclidean coefficient revealed the highest values between Chinese yellow bell pepper and Iranian green bell pepper with 5.0 values, in comparison with the lowest genetic distance between Spanish green bell pepper and Italian yellow bell pepper with 1.0 value. Keywords: Genetic variation, Capsicum annuum L. , RAPD, Bell pepper 383-395 396-397 398