2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد تجاه الفطرین propolisللمستخلص الكحولي للعكبر دراسـة الفعالیة الضد فطریة Botrytis cinerea, Altrnaria sp للعدید من االمراض النباتیة المسببان احمد ساهي دویش الجامعة المستنصریة ، لعلومكلیة ا، قسم علوم الحیاة ـة الخالص ـــر ـــانولي للعكبـ ـــد تــــأثیر تراكیــــز مختلفــــة مــــن المســــتخلص االیثـ p)نفـــذت هــــذه الدراســــة لتحدیـ rop olis) ـــرین إزاء الفطـ .المسببة للعدید من االمراض النباتیة ) Botrytis cinerea, Altrnaria sp(الناقصین .احتواء العكبر على الفالفونات وبصورة اساسیة IRالفعالة باستخدام تقنیة وقد اظهرت نتائج الكشف عن المركبات إلـى تثبـیط النمـو كلیـا علـى مـل/ملغـم )5(إذ أدى التركیـز العـالي ،ة التثبیطیة العالیـة لهـذا المسـتخلص یبینت التجارب الكفا . التأثیرفي مل/ملغم ) 1.25و 2.5(زان بینما تفاوت التركی، ) PDB(و السائلة ) PDA(األوساط الغذائیة الصلبة اوراق نبـــات مــل المرشــوش علــى / ملغــم ) 5(أظهــرت نتــائج البحــث قــدرة المســتخلص الكحــولي للعكبـــر عنــد التركیــز كمــا ـــریات في منع تطور أصابه المرض وحقق حمایة جیدة بشكل ملفت الباذنجان و ش عند الـر السیماثمار الخیار المصابة بالفطــ فـي حـین تفاوتـت قــدرة ، مـن خــالل منـع نمـو وانتشـار الفطـر بشـكل كامـل سـاعة مـن التلقـیح بـالفطر 48 و24بالمسـتخلص بعـد سـاعة مـن التلقـیح بـالفطر علـى منـع حـدوث اإلصـابة بالمقارنـة مــع 48 و 24 قبـلالمسـتخلص الكحـولي للعكبـر المرشـوش .ضي ظهر نمو بطيء للمسبب المر ،اذمعاملة السیطرة المقدمة p)العكبر rop olis) خالل جمع المكونات االساسیة له من طة حشرة النحل مناعبارة عن مادة صلبة راتنجیة تنتج بوس خلیة النحل وذلك وخشب الحور لسد الفتحات والثقوب الموجودة في ،مختلف انواع النباتات واالشجار السیما اشجار الصنوبر الفعالیة العالیة يتعد هذه المادة من المضادات الحیویة الطبیعیة ذ.لمنع دخول مختلف انواع الممرضات الى داخل الخلیة [1,2] .لمختلف انواع البكتریا والفیرسات والفطریات وبقیة انواع الممرضات لمنـاطق وجـود حشـرة النحـل وذلـك بـاختالف وتنـوع المصـادر التركیب الكیمیـائي للعكبـر بـاختالف التوزیـع الجغرافـيیختلف اتج مـن حشــرات نـلـوحظ ان العكبـر ال، اذ ان التركیـب الكیمیــائي للعكبـر یتبـاین مـع تنـوع المصـدر النبــاتي للحشـرة [3] . النباتیـة pالنحـل المعتمـدة فــي تغـذیتها علــى خشـب الحـور op lar یحتـوي علـى p inobanksin ,p inocembrin , chrysin, galanagin , caffeic acid and ferulic acid بینمـا لـوحظ ان العكبـر المنـتج مـن حشـرات ،[4] واسـترات هـذه االحمـاض Eucaly النحل المعتمدة فـي تغـذیتها علـى اشـجار الیوكـالبتوس p tus یحتـوي علـى بعـض المركبـات ذات الـوزن الجزیئـي العـالي وامـل یعتمـدعلى اخـتالف الع الـى االخـرىتالف التركیـب الكیمیـائي للعكبـر مـن منطقـة ان اخ .lupeol alkanoates [5]مثل اجریـت العدیــد مــن [6]لحشــرة النحــل مـن مكــان الـى اخــر اكثـر مــن اخــتالف المصـادر النباتیــة genetic factors الوراثیـة حتوي في تركیبه على العدید من اذ ی، الدراسات والبحوث على العكبر السیما في السنوات االخیرة الهمیتها الطبیة 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد المركبــات الفینولیـة والفالفونــات التــي تمتلــك فعالیــة متعـددة مضــادة للعدیــد مــن انــواع الســیماالمركبـات الفعالــة والمهمــة و :مثــل ،انــواع الفایروسـات عــن طریـق تثبــیط بعـض االنزیمــات المهمـة الموجــودة فیهـاالبكتریـا والفطریـات وتثــبط نمـو العدیــد مـن Reverse transcrip tase , Protease [7,8] .بعض الطفیلیات الممرضة اغشیة وعملها على تحطیم Mالتابعـة لرتبـة Dematiaceaeالعائـدة للعائلــة Botrytis cinerea, Altrnaria sp وتعـد الفطریـات oniliales ضــمن الــ یســبب اذ،تعــد أحـد المسـببات المرضـیة للعدیــد مـن األمـراض النباتیـة ) Imperfect fungi )9 الفطریـات الناقصـة Altrnaria sp مـرض تعفـن البـذور والجـذورSeed & Root Rot و اللفحــات المتـأخرة وأمـراض تبقـع االلترنـاري Late blight &Sp ot مـرض تقـرح السـاق االلترنـاري علـى العدیـد مـن النباتـات وAltrnaria Stem Canker .روالفـط Botrytis cinerea فـأنه یسبب مرض العفن الرماديGray mold [9,10] . یـة فقـد اتجهـت أغلـب األبحـاث والدراسـات الحدیثـة إلـى ئایوبسـبب اآلثـار السـلبیة التـي یخلفهـا االسـتعمال العشـوائي للمبیـدات الكیم نباتات الطبیـة و البریـة السـتعمالها للحـد مـن العدیـد مـن المسـببات المرضـیة التـي تسـبب خسـائر اقتصـادیة كبیـرةاالستفادة من ال [11]. p(التحـري عـن فعالیـة المسـتخلص الكحـولي للعكبـر الـى هـدف هـذا البحـث rop olis ( علـى هـذه المسـببات المرضـیة ومــدى میـائيو التعـرف علـى المحتـوى الكی عدیـدة بیعیـة ضـد هـذه الفطریـات باسـتخدام طرائـقالقدرة التثبیطیة التي تمتلكها هـذه المـادة الط .في هذه الدراسة للعكبر المستعمل المواد و طرائق العمل الفطریات الممرضة عزل - Altrnaria sp عــزل ال فـاتیح من ثمار باذنجان و باالعتمـاد علـى م Botrytis cinereaمن نبات الطماطم في حین عزل . PDA Pot)(جـرى عـزل وتشـخیص الفطریـات علـى وسـط الدكسـتروز البطـاطــا [10]التصنیف المعتمدة ato Dextrose Agar تم تنقیة العزلتان من خالل نقلهما إلى أطباق اذPDA جدیدة. جمع عینات العكبر - –موجـودة فــي قضـاء الخــالص ن خالیـا نحــل مــ 2006جمعـت عینـات العكبــر خـالل شــهري تشـرین الثــاني وكـانون الثــاني عـام . محافظة دیالى وترك لیجـف بدرجـة حـرارة الغرفـة ثـم طحـن رض التخلص من االتربة العالقة بهتم غسل العكبر بالماء العادي ثم الماء المقطر لغ .م ˚ 4العكبر بمطحنة كهربائیة وحفظ المسحوق في عبوات جافة لحین االستعمال وفي درجة حرارة :شخیص المركبات الفعالة الموجودة في العكبرت- Infraredاالشـعة تحـت الحمـراء بجهـاز امتصاصیة قیست IR (Infrared(التشخیص باستخدام طیف االشعة تحت الحمراء Sp ectroscop y كلیـة –وباستخدام اقراص من المركب الذي یراد الكشف عنه فـي صـلب برومیـد البوتاسـیوم فـي قسـم الكیمیـاء . الجامعة المستنصریة / علوم ال ) :propolis(تحضیر مستخلص العكبر - طة امدة ساعة واحدة بوسثم خلط المزیج % 95مل من الكحول االثیلي بتركیز 50غم من مسحوق العكبر واضیف له 2وزن علیا الحاویة على المستخلص ساعة بدرجة حرارة الغرفة ، بعدها سحبت الطبقة ال 24، بعدها ترك مدة Vortexالمازج الدوار .الكحولي ، ثم كررت العملیة على الراسب المتبقي وجمع الراشح واضیف الى الراشح السابق 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد في الفراغ باستخدام جهاز التبخیر ،ثم عرض الراشح للتبخیر ) Whatman No.1(رشح المحلول بواسطة ورق الترشیح مستخلص تم ، بعدها وزن 45الدوار بحرارة . 12] [المادة الجافة المتبقیة التي هي عبارة عن ال : لمستخلص العكبر Antifungal activityدراسة الفعالیة التثبیطیة .لشعاعي للفطریات الممرضةاتأثیر تراكیز مستخلص العكبر في النمو - لمسـتخلص الكحـولي للعكبـر ل) Stock Solution(مـل مـن المحلـول األصـلي أضیف (10,5,2.5) اذ [13]دمت طریقة استخ ) 5,2.5,1.25(التركیــزلغـرض الحصــــول علـى PDAمـل علــى التـوالي مــن وسـط ) 10,15,17.5(مــل إلـى /ملغـم 10بتركیــــز بواقـع ثالثـة مكـررات لكـل تركیـز مـــع وجـود أطبـاق السیطـــرة .اسـة المسـتخدمة فـي هـذه الدر وهـي التراكیـز مل على التـوالي/ ملغم طة ثاقـب املـم مقطـوع بوسـ 6ثم تركت اإلطباق لتتصلب أعقبها زرع اللقاح الفطري المؤلف من قرص بقطـر ) .بدون مستخلص( المئویـة لتثبـیط النمـو حسـبت النسـبة . مـدة أسـبوعینضـنت األطبـاق بدرجـة حـرارة الغرفـة ح. فلین من حافـات مزرعـة بعمـر أسـبوع :وحسب المعادلة اآلتیة معاملة السیطرة إلى حافات الطبق لشعاعي عند وصول النمو في ا طباق السیطرة ) سم ( لشعاعي للفطرامعدل النمو عاملةاللشعاعي في أطباق امعدل النمو -في أ م X 0 10 ------------------- --------------------------- % = نسبة تثبیط النمو ألشعاعي معدل النمو ألشعاعي في أطباق السیطرة :دراسة تأثیر تراكیز مستخلص العكبر في الوزن الجاف للفطریات الممرضة - الموصـدة (وعقـم فـي جهـاز التعقـیم PD Brothحضر وسط غذائي سـائل نـوع اذ مع أجراء تعدیلٍ بسیط [14] أتبعت طریقة كـررت كـل معاملـة ،دون أیـة إضـافة مـن مـع تنفیـذ معاملـة المقارنـة، راد دراسـتها یـ الـذي أضیفت تراكیز المستخلص بعد ذلك،) ملـم مـن مسـتعمرة كـل فطـر ممـرض فـي حاضـنة 6 بقطـر حضنت الدوارق بعد تلقیح كل معاملة بقرص واحـد و،مرات ثالث طة ملقــط وغسـل جیــدا االفطــري بعـد نهایـة مــدة التحضـین بوسـسـحب الغـزل ، مـدة أســبوعین )˚م 25( فـي درجـة حــرارة الغرفـة م70بالماء المقطر المعقم و جفف في الفرن في درجة o أخـذت األوزان الجافـة وحسـبت النسـبة المئویـة لتثبـیط النمـو الجـاف كمـا ، .في الفقرة السابقة : تحضیر اللقاح الفطري - Altrnaria sp., Botrytis cابواغ الفطرین تجمع inerea طة إمرار قضیب زجاجي معقم على وسط ابوسPDA أعداد تبوحسجمع العالق في قطارة معقمة و مل ماء مقطر معقم 10حاوي على غزل الفطر بعمر أسبوعین بعد إضافة 10*1وتم تخفیف العدد إلى Haemocytometerطة شریحة العد ااالبواغ بوس 6 ستخدم في لتر وهذا هو المستوى الم/بوغ .التجارب التي أجریت Altrnaria sp., Botrytisتأثیر المستخلص الكحولي للعكبر المرشوش على أوراق نبات الباذنجان الملقح بالفطرین - cinerea بفترات زمنیة معینة: قاتها فـي المـاء وتـم قطعت أوراقها وغمـرت سـویاذ ،نباتات باذنجان من النوع المحلي بعمر شهرین تاخذاذ ]15[اتبعت طریقة لعریض تلقیحها بطریقة البقعة المكویة لغرض الحصول على تقویم كمي لإلصابة بالفطر وذلك بتسخین الرأس ا 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد سـم ثـم أضـیفت قطـرتین 0.5 قعـة المالمسـة بقطـر إلـى مـوت الب فأدى ذلكلمس سطح الورقة لمسمار صغیر على لهب ثم مكــررات و حســـب 3مــل بواقــع /ملغــم 5 زوبتركیــمــن عــالق ســبورات الفطــر المحضــر ورشــت بالمســتخلص الكحـــولي للعكبــر 24 وبعـد Botrytisمجموعـة لقحـت بـالفطر ). سـیطرة (فقـط Botrytisلقحـت المجموعـة األولـى بـالفطر : یةاآلتالمعامالت مجموعــة رشــت ، سـاعة رشــت بالمسـتخلص 48 وبعـد Botrytisمجموعــة لقحـت بــالفطر ،رشــت بالمسـتخلص سـاعة سـاعة لقحــت 48المجموعـة األخیـرة رشـت بالمســتخلص وبعـد . Botrytisسـاعة لقحــت بـالفطر 24بالمسـتخلص وبعـد . .Altrnaria sp لفطرها بالنسبة الى انفس وقد اجریت المعامالت .Botrytisبالفطر ساعة بعد التلقیح بالفطر وذلك بوضع كیس نایلون علیها 48حفظت المعامالت بجو المختبر مع توفیر الرطوبة الالزمة مدة .ثم أزالته و تركت المعامالت مدة عشرة أیام مع مالحظة جمیع التغیرات التي تطرأ على األوراق على مدد Altrnaria sp., Botrytis cinereaبالفطرین ر الملقح الخیا ثمارتأثیر مستخلص العكبر المرشوش - :زمنیة معینة %0.06 طـــة القاصـر التجـاري بتركیـز اأخذت ثمــار خیـار محلیـه وبعـد غســـلها و تعقیمهـا سـطحیا بوس اذ ]15[اتبعت طریقة تـم عمـل .مكـررات3 موعـة تضـمخمـس مجموعـات كـل مج علـى مدة نصف دقیقة ،جففـت و قسـمت) هایبوكلورات الصودیوم( بواقـع قطـرتین لكـل Botrytis cinerea سـم ثـم لقحـت بعـالق الفطـر 0.5ثقبین عند طرف كل ثمرة بطریقة البقعة المكویـة بقطـر مجموعة من ثمار خیار لقحت بالفطر وبعد : تیةمل وحسب المعامالت اآل/ملغم 5بتركیز بمستخلص العكبر بقعة ورشت مجموعـة مـن ، بالمسـتخلص سـاعة رشـت48 مجموعة من ثمار خیار لقحت بالفطر وبعـد ، بالمستخلص ساعة رشت24 ساعة 48مجموعة من ثمار خیار رشت بالمستخلص وبعد . ساعة لقحت بالفطر 24وبعد صبالمستخلثمار خیار رشت لفطـرقـد اجریـت المعـامالت نفسـها بالنسـبة الـى او . طرةلقحـت بـالفطر والمجموعـة األخیـرة مـن ثمـار خیـار ملقحـة بـالفطر للسـی Altrnaria sp. . سـاعة للمحافظـة علـى الرطوبـة الالزمـة وتـم متابعـة تطـور المـرض علــى 48المعـامالت فـي أكیـاس نـایلون مـدة توضـع بعـدها .ثمار مدة عشرة أیام مع حساب معدل قطر المتعامد لتوسع اإلصابة التحلیل االحصائي - للكشف عن Least Significant Difference (LSD)النتائج احصائیًا باستخدام طریقة الفرق المعنوي االصغر تلحل . [16]ساعة مع السیطرة 48و 24مصادر الفروقات المعنویة بین قیم المعامالت لرش مستخلص العكبر قبل وبعد النتائج والمناقشة ) propolis( كبر دراسة المواد الفعالة الموجودة في الع- استخدمت مطیافیة االشعة تحت الحمراء في تحلیل العكبر وذلـك ألهمیتهـا البالغـة فـي تعیـین المجموعـة الكیمیائیـة التركیبیـة ممـا .[17]یعیین في معرفة المادة -1608)لمنطقــة اظهـرت مطیافیــة االشـعة تحــت الحمـراء للمســتخلص االیثــانولي للعكبـر اهتــزاز مـط لمجموعــة الكاربونیـل عنــد ا كذلك ظهر اهتزاز مط متناظر وغیر متناظرلمجموعة الكاربوكسیل في المنطقة 1-سم (1643 الهایـدروكاربون المشـبعة (C-H)اهتـزاز مـط لمجموعـة 1-سـم (2990-2850)كمـا اظهـرت المنطقـة 1-سم (1165-1271) ـــى مجموعــــة 1-ســــم (3450-3500)فـــي حــــین ظهــــر اهتـــزاز مــــط فـــي المنطقــــة ، CH2,CH3والمرتبطـــة بمجــــامیع تـــابع الـ . (1)الهایدروكسیل وكما موضح في الشكل رقم 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد متعــددة اذ تعــد الفالفونـات مركبــات فینولیـة ،النتـائج علــى ان الفالفونـات هــي المـواد الرئیســة الموجـودة فــي المسـتخلص هــذه تـدل الكثیـر مــن فـي رتي الكـاربون الثالثـة والسادسـة الحلقـة االروماتیـة وتعمـل الفالفونـات مـادة مضـادة ومـؤثرة الهایدروكسـیل ویـرتبط بـذ تكمـن فعالیـة هـذه المركبـات فـي قابلیتهـا علـى تكـوین معقـد مـع جـدار الخلیـة البكتیریـة والعمـل اذ،سـات و االحیـاء المجهریـة والفایر .[18]اءعلى تمزیق الغش اذ ، والجزائـر ،والیونـان ،وتركیـا ،في دراسة التركیب الكیمیائي للعكبر فـي بلغاریـا [19]وهذه النتیجة تتفق مع الدراسة التي اجراها . وجد انها تحتوي بصورة اساسیة على الفالفونات لشعاعي للفطریاتاتأثیر تراكیز مستخلص العكبر في النسبة المئویة لتثبیط النمو - ـــرین اإلـى أن أعلـى نسـبة مئویـة لتثبـیط النمـو ) 1(نتائج في الجـدول الدل ت ,.Altrnaria sp لشـعاعي سـجلت فـي معاملـة الفطـــ Botrytis cinerea في %)81و 73.75(وسجل أقل نسبة مئویة للتثبیط مل/ ملغم 5عند التركیز %)(100بلغت النسبة اذ . مل/ م ملغ 1.25عند التركیز ینمعاملة الفطر لشــعاعي علـــى الوســط الغـــذائي اتركیــز المســتخلص أدت إلـــى زیــادة فـــي النســبة المئویــة لتثبـــیط النمــو اذ تــدل النتــائج أن زیـــادة ا ن المسـتخلص االیثـانولي للعكبـر أالـى [20]تتفـق مـع مااشـار الیـه ) 1(ان النتـائج الموضـحة فـي الجـدول رقـم . PDAالصـلب ووجد ان الفعالیـة مشـابهة لفعالیـة c. albicansالناتج عن االصابة بالخمیرة candidiasisراض یستخدم وبنجاح في عالج ام Nyالمضاد الفطري st atin . اذ اشارت العدید من الدراسات الى التاثیر الضد مایكروبي للعكبـر الـذي یعـزى لوجـود العدیـد مـن والثنائیــة فضــًال عــن وجـــود ،والتربینــات الثالثیــة ،الحمــاض الفینولیــةواســترات ا ،االحمــاض االروماتیــة :،مثلالفینولیــة المركبــات [21]الفالفونات راسة تأثیر تراكیز مستخلص العكبر في النسبة المئویة لتثبیط الوزن الجاف للفطریات الممرضةد- النمــو فقــة مـع نتـائج تثبـیطجـاءت نتـائج تـأثیر تراكیـز المســتخلص األیثـانولي للعكبـر فـي الــوزن الجـاف للفطریـات الممرضـة متوا تركیـزالحـاوي علـى PD Brothالفطـرین كلیـا علـى الوسـط الســــائل نمـو فقـد أخفـق، ) 2(الجـدول كمـا موضـح فـي لشـعاعيا مــل/ملغـم )2.5,1.25(ین عنـد التراكیـز االقـل لفطـر لتثبـیط الـوزن الجـاف لالنسـبة كانـتفـي حـین ، مـل / ملغـم ) (5المسـتخلص الفطـر الـوزن الجـاف اذ بلغت اقـل نسـب لتثبـیط ،الشعاعي للفطرین على الوسط الصلب النمو تثبیطجربة ل في تتختلف عما سج Altrnaria sp 46.8% بالنسـبة للفطـر %53.4 مـل فیمـا كانـت /ملغـم 1.25عنـد التركیـزBotrytis cinerea عنـد نفـس .التركیز Altrnaria sp., Botrytisاق نبات الباذنجان الملقح بالفطرین أور فيتأثیر المستخلص الكحولي للعكبر المرشوش - cinerea زمنیة معینة على مدد. ســاعة مـــن التلقــیح بــالفطر 48او 24المســتخلص الكحـــولي للعكبــر ســـواء قبــل بســجلت معاملــة أوراق الباذنجـــان المرشوشــة Botrytis cinerea منــع اذ ،سـاعة 48,24 اخـتالف كبیــر مـع معاملـة السـیطرة أو مــع معـامالت الـرش بالمسـتخلص بعــد وكمـا هـو موضـــح فـي المعاملـة ولـم تظهـر أي أعـراض للمـرض فـي موقـع التلقـیح نمو الفطر بالكامل مـن بـدء مستخلص العكبر حیویـة الفطـر ومنــع نمـوه و انتشـاره مــن فــيرة مباشـرة أثــر بصـو أن المســتخلص الكحـولي للعكبـر اذ. )2(والشـكل ) 3 (ـدول الجـ سـاعة فقــد 48,24بعـد تلقیحهــا بـالفطر سـواء بعــد بالمســتخلصأمـا األوراق المرشوشـة .ل منعـه للفعالیــات االیضـیة للفطــر خـال (1-1.5)البقعـة وقـد بلـغ معـدل قطـر ، التجربـة ءللفطر أعقبه توقف لتطور االصابه في الیوم السادس من بد بطیأ" اأظهرت نمو ــیة لبـدأ نمــو الفطــر و مســتخلصالتـي ســبقت الـرش بالسـم وٍیمكــن تفسـیر هــذه النتیجـة علــى أسـاس احتمــال أن الفتــرة كانـت كافـــ ـــد الرش أنه حدث خمول للفطر بع آال.استقراره على النبات وظهور أعراض المرض 2010) 1( 23المجلد مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة ــــج تطـور بقــــع االصـابه علـى أوراق نبـحوتـم . الفطـر فـيمـن تـأثیر قـــــف النتشــــاره لمـا للمسـتخلص وتو ـات الباذنجــان سـاب نتائــ ـــرة اذ أكتــف Botrytis cineraالمصاب بالفطر دل ـابه ناجحـة ، وسـجل زیـادة فـي معـــــمل تـــطور البقـع إلـى أصـي معاملـة السیطـ .وتمثلت األعراض على األوراق بوجود سبورات رمادیة اللون تتطایر بسهوله مع كتله لنمو الفطر. سم) 4.8( قطر بلغ مـل فقــد ظهــرت أعـراض المــرض فــي ثمــار /غــممل 5بتركیــز رشوشــة بالمســتخلص الكحـولي للعكبــر أمـا تجربــة ثمــار الخیـار الم pنتیجـة إلفـرازات الفطـر اإلنزیمیـة مثـل أنـزیم البكتنیـز یج الثمـرة حول اللقاح مع هرس لنسبنمو بني ةالسیطرة متمثل ectinase وقد بلغ معدل قطـر االصـابه ).3(أدى إلى تلون وموت النسیج النباتي وترك الثمرة منكمشة و بنیة و لینة كما في الشكل [9] ).4(سم كما موضح في الجدول رقم 6 سـم 0.5سـاعة وبقـى معـدل القطـر 24و48سـواء قبـل مسـتخلصر المرشوشـة بالفـي حـین لـم تظهـر األعـراض علـى ثمـار الخیـا سـم علـى ) 1,2(سـاعة بلـغ 24و48بعـد مسـتخلصبینما حدث نمو بسـیط للفطـر علـى ا لثمـار المرشوشـة بال.التجربة طوال مدة .نوهي نتیجة تتفق مع تجربة أوراق الباذنجا)) 4(الجدول (التوالي في الیوم األخیر للتجربة Altrnaria اسـتخدام الفطـرعنـد هانفسـ وقد دلت النتائج التي تم الحصول علیها الى تقارب النتـائج المتحصـل علیهـا مـن التجربـة sp 6(و)5( ینوكما موضح في الجدول( . pعنـد عـدم وجـود فـرق معنـوي (LSD)كما دلـت نتـائج التحلیـل االحصـائي باسـتخدام طریقـة الفـرق المعنـوي االصـغر <0.05 pن االول والثــاني ولجمیـــع المعــامالت و الســـیطرة كــذلك عـــدم وجــود فـــرق معنــوي عنـــد یللیــوم بـــین معــامالت الـــرش 0.05> pفي حین لوحظ وجود فرق معنوي كبیر عند ،ساعة 48و 24بالمستخلص قبل عند معـامالت الـرش بالمسـتخلص بعـد 0.05> . ساعة من االصابة والسیطرة 48و 24 فـي ةوحصـول االصـاب المـرضعلـى أحـداث Botrytis cinera ،Altrnaria sp ین نتج أن قابلیة الفطـر وعلیه یمكن أن نست بالمسـتخلص الكحـولي للعكبـر وبتركیـز یمكـن أن تتضـاءل عنـد رشـها) سـواء كـان أوراق الباذنجـان او ثمـار الخیـار(العائل النباتي جانبیـة سـواء علـى أعـراضن ان یسـبب أي و دبـلمسـتخدم واطـئ و وكـذلك كـون التركیـز ا قبـل أحـداث المـرضالسـیما مـل /غـممل 5 وهــذه النتیجـة یمكـن أن تــدفع البـاحثین إلـى أجــراء المزیـد مـن الدراســات المستفیضـة حـول قابلیــة . [22]او الحیـوان اإلنسـانصـحة تصادیة كبیرةها أن تسبب خسائر اقمختلفة یمكن ل ةهذا المستخلص في الحد من اإلمراض التي تسببها مسببات مرضی Re ferences 1.Koo, H. ;Rosalen, PL.; Cury , JA.; Ambrosano, GM B.; M urata, RM .; Yatsuda, R.; Ikegaki, M .;Alencar, SM . and Park, YK.(2000) Effect of a new variety of Apis mellifera p rop olis on mutans streptococci. Curr M icrobiol 41: 192-196. 2.Pop ova, M .; Silici, S.; Kaftanoglu, O.; Bankova, V.(2005). Ant ibacterial activity of Turkish p rop olis and its qualitative and quantitative chemical composition. Phy tomedicine 12: 221-228. 3.Velikova M ., Bankova V., Tsvetkova I., Kujumgiev A. and M arcucci M . C. (2000), Ant ibacterial ent-kaurenefrim Brazilian p rop olis of native st ingless bees. Fitoofterap ia 71, 693D696. 4.Bankova , V.; Pop ova, M .; Bogdanov, S .;SABATINI, A.(2002).Chamical comp osition of European p rop olis; exp ected and unexp ected results. Z –naturforsch- [c]; 57(5-6):530-3 5. Kosalec I, Bakmaz M , Pep eljnjak S.(2003). Analysis of p rop olis from the continental and Adriatic regions of Croatia. Acta Pharm 53: 27 - 5 285. 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد 6.Cust odio , A.R.; Ferreira , M .M .C.; Negeri, G.; Salatino ,A.(2003) .Clustering of comb and p rop olis waxes Based on the Dist ribution of Aliphatic const ituents .j .Barz .Chem . Soc ., 14 (3) : 354-357 . [Article]. 7.Havst een ,B.H. (2002) .The biochemist ry and medical si gnificance of the flavonoids 202. –3) : 67 -(2 96Ther ., -.Pharmacol 8. Castaldo , S. & Cap asso , F. (2002) .Prop olis an old remedy used in modern medicine . 6.-( supp l 1) : 1 73Fitoterap ia 9- Agrios. Geor ge, N. (1997). Plant Pathology . 4th. Edition. وزارة الثقافــة . مطبعـة أدورد للطباعـة الفنیـة الحدیثـة . أفـات الطمـاطم . حـازم عبـد العزیــز، محمـود. زهیـر عزیـز ،أسـطفان -10 ).1998.(واألعالم دار . جامعـة الموصــل . وزارة التعلـیم العـالي والبحــث العلمـي . المبیــدات . المــالح ، نـزار مصـطفى ;شـعبان ،عـواد 11 - ).1993.( 502ص . لكتب للطبع والنشر ا 12.Rhajaoui ,M .;Oumzil, H.;Faid ,M .;Ly agoubi, M .;Elyachioui,M .;Benjouad, A. . (Research )3 (,3 (2001).Ant ibactrial activity of M oroccan prop olis extracts,science letters , Art icle). ، تــأثیر مستخلصــات نباتــات ســم الفــراخ والصفصــاف والمیرمیــة علــى نمــو بعـــض ) 2000(الخفــاجي ، باســمة ربیــع احمــد 13- . رسالة ماجستیر كلیة العلوم ، الجامعة لمستنصریة . الفطریات الجلدیة 14 -Suberu, H. Preliminary st udies of inhibitions of Aspergillus flavus with extract of tow lichens and Bentex- T fungicides. African J. of Biotech. 3(9):468-472.(2004). دور حــامض السالیســلك وبعــض المبیــدات الكیمیائیــة فــي مكافحــة ذبــول الخیــار ) 2004(دینــا یوســف محمــد’یوســف -15 . الجامعة المستنصریة /ماجستیر مقدمة الى كلیة العلوم رسالة. Pythium ultimumالمتسبب عن الفطر 16- Zar,J.H.(1984)Biost atist ical Analysis .2 nd ed .Prentice Hall INC. Englewood Cliffs, N.J. 17.Silverstein , O.M .; Bassler, G.K.;M orrill, T.S. (1990) Sp ectrometric Identification of Organic Compounds.4t h ed. 18. Cowan ,M .M . (1999). Plant Product’s as antimicrobial agents: clinical microbiology reviews , 12(4) : 564-582. 19.Velikova, M .; Bankova, V.;Sorkun,K.;Houcine, S.; Tsvetkova I., Kujumgiev A. (2000), p rop olis from the M editerranean region: chemical comp osition and antimicrobial activity .Z- naturforsch-[C] 55(9-10) :790-3. 20. M artins , R.S;Pereira , E.S.J ;Lima , S.M .; Senna, M .I.B.; M esquita ,R.A.; Santos, V. R (2002) . Effect of commercial ethanol p rop olis extract on the in vitro growt h of candida albicans collected from HIV-seropositive and HIV–seronegative Barazilian p atients with oral candidiasis .J-oral-sci., 44(1):41-8. 21. Bankova, V.; De Castro, S. L. and M arcucci M . C. (2000), Prop olis: advances in chemist ry and plant origin. Ap idologie 31, 3D15. 22. Hartwich, A.; Lequtko,J.; Wszolek , J.(2000). Prop olis: p rop erties and administ ration to p atients treated for some surgical diseases .Przegl_Lek,57(4): 191-4. 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد النمو الشعاعي لبعض تأثیر تراكیز مستخلص العكبر في النسبة المئویة لتثبیط : )1(جدول PDA وسط الفي الفطریات الناقصة تأثیر تراكیز مستخلص العكبر في النسبة المئویة لتثبیط الوزن الجاف لبعض الفطریات): 2(جدول .Broth PD الناقصة في الوسط السائل 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد بالمستخلص Botrytis cinerea لفطر تأثیر رش أوراق نبات الباذنجان المصابة با): 3(جدول التركیز الفطر مل/ ملغم النسبة المئویة للتثبیط Botrytis c inerea 5 100 2.5 78.7 1.25 73.7 التركیز الفطر مل/ ملغم النسبة المئویة للتثبیط Alternaria sp 5 100 2.5 87 1.25 81 التركیز الفطر مل/ ملغم النسبة المئویة لتثبیط الوزن الجاف Botrytis c inerea 5 100 2.5 62.2 1.25 53.4 التركیز الفطر مل/ ملغم النسبة المئویة لتثبیط الوزن الجاف Alternaria sp 5 100 2.5 79.4 1.25 46.8 مل/ ملغم 5الكحولي للعكبر وبتركیز األیام معامالت سم/ال ــــة أوراق نبات ملقحــ ــالفطر وبعد 24بـ ساعة رشت ـــة ـــات ملقحــ أوراق نبـ ساعة 48بالفطر وبعد رشت لفطر أوراق نبات ملقحة با ساعة رشت 24وقبل ل ر وقب 48أوراق نبات ملقحة بالفط ة رشت ساع أوراق نبات ملقحة بـالفطر فقط للسیطرة *0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 األول 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 الثاني 0.8 0.5 0.5 0.8 0.7 الثالث 1.5 0.5 0.5 1.2 0.8 الرابع 2.2 0.5 0.5 1.5 1 الخامس 2.4 0.5 0.5 2.2 1 السادس 3.2 0.5 0.5 2.2 1 السابع 3.5 0.5 0.5 2.2 1 الثامن 4.8 0.5 0.5 2.2 1 التاسع 4.8 0.5 0.5 2.2 1 العاشر بالمستخلص الكحولي للعكبر وبتركیز Botrytis cinerea تأثیر رش ثمار الخیار المصابة بالفطر ): 4(جدول مل/ ملغم 5 األیام سم/المعامالت ثمار خیار ـالفطر ملقحـة ب 24وبعد ساعة رشت ــــار ــــــار خیــــ ثمـ الفطر ملقحــة بـــ سـاعة 48وبعـد رشت ثمار خیار ملقحة بالفطر ساعة 24وقبل رشت ثمار خیار ملقحة ساعة 48بالفطر قبل رشت ــــة ــــ ــــــار ملقحـ ــــــار خیـــ ثمــ بالفطر فقط للسیطرة *0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 األول 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 الثاني 1.2 0.5 0.5 0.8 0.6 الثالث 2.1 0.5 0.5 1 0.9 الرابع 2.8 0.5 0.5 1.8 1.5 الخامس 3.7 0.5 0.5 2.9 1.6 السادس 4.6 0.5 0.5 4.1 1.8 السابع 5.5 0.5 0.5 4.1 2 الثامن 5.8 0.5 0.5 4.1 2.1 التاسع 6 0.5 0.5 4.1 2.1 العاشر سم 0.5قطر رأس المسمار * 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد بالمستخلص الكحولي Altrnaria sp تأثیر رش أوراق نبات الباذنجان المصابة بالفطر ): 5(جدول مل/ ملغم 5للعكبر وبتركیز معامالت سم/ال األیام أوراق نبات ـــالفطر ـــ ــــة ب ملقحــ 24وبعد ساعة رشت أوراق نبات ملقحة د 48بالفطر وبع ساعة رشت ق نبات ملقحة أورا وقبل 24بالفطر ساعة رشت أوراق نبات ملقحة ل وقب 48بالفطر ساعة رشت ـــات ــ ــ أوراق نب ـــة ــ ــ ــ ــ ــ ــ ــ ــ ملقحـ ــط ــالفطر فقــ بـ للسیطرة 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 األول * 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 الثاني 0.8 0.5 0.5 0.8 0.7 الثالث 1.5 0.5 0.5 1 0.8 الرابع 2 0.5 0.5 1.5 1 الخامس 2.4 0.5 0.5 2 1 ادسالس 3.1 0.5 0.5 2 1 السابع 3.5 0.5 0.5 2 1 الثامن 4.5 0.5 0.5 2 1 التاسع 4.5 0.5 0.5 2 1 العاشر بالمستخلص الكحولي Altrnaria sp تأثیر رش ثمار الخیار المصابة بالفطر ): 6(جدول مل/ ملغم 5للعكبر وبتركیز األیام مس/المعامالت ثمار خیار ـالفطر ملقحـة بــ ساعة 24وبعد رشت ثمار خیار ملقحـة ـــد ـــالفطر وبعـ 48بـ ساعة رشت ثمار خیار ملقحة بالفطر 24 وقبل ساعة رشت ثمار خیار ملقحة بالفطر ساعة 48وقبل رشت ــة ــ ــار ملقحـ ـــار خیــ ثمـ بالفطر فقط للسیطرة *0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 األول 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 الثاني 1.2 0.5 0.5 0.8 0.6 الثالث 2.1 0.5 0.5 1 0.9 الرابع 2.8 0.5 0.5 1.8 1.5 الخامس 3.8 0.5 0.5 2.9 1.6 السادس 4.7 0.5 0.5 3 1.9 السابع 5.5 0.5 0.5 3 2 الثامن 6 0.5 0.5 3 2.1 التاسع 6 0.5 0.5 3 2.1 العاشر سم 0.5قطر رأس المسمار * 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد للمستخلص االیثانولي للعكبر (IR)طیف االشعة تحت الحمراء ):1(شكل في منع نمو الفطر مل / ملغم 5یوضح تأثیر رش أوراق الباذنجان بالمستخلص الكحولي للعكبر وبتركیز ) : 2(شكل Botrytis وحسب المعامالت آالتیة: .ساعة رشت بالمستخلص24 وبعد Botrytis لقحت بالفطر -1 .ساعة رشت بالمستخلص 48 وبعد Botrytis لقحت بالفطر - 2 .Botrytis ساعة لقحت بالفطر24 رشت بالمستخلص وبعد -3 . Botrytis الفطرساعة لقحت ب48 رشت بالمستخلص وبعد -4 .للسیطرة Botrytisلقحت أوراق النبات بالفطر -5 2 1 5 4 3 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد Botrytisفي منع نمو الفطر مل / ملغم 5یوضح تأثیر رش ثمار الخیار بالمستخلص الكحولي للعكبر وبتركیز ): 3(شكل :اآلتیة توحسب المعامال .ساعة رشت بالمستخلص 24وبعد Botrytisثمار خیار لقحت بالفطر -1 .ساعة رشت بالمستخلص 48وبعد Botrytisثمار خیار لقحت بالفطر -2 .Botrytis بالفطرساعة لقحت 24 ثمار خیار رشت بالمستخلص وبعد -3 . Botrytis بالفطرساعة لقحت 48 ت بالمستخلص وبعد ثمار خیار رش -4 .فقط للسیطرة Botrytis ثمار خیار ملقحة بالفطر -5 IBN AL- HAITHAM J. FOR PURE & APPL. S CI. VOL.23 (1) 2010 3 1 2 4 5 Antifungal Activity of Propolis Ethanol Extract Against Botrytis cinerea, Altrnaria sp Which Caused Many Plant Diseases A. S.Darweesh Departme nt of Biology, College of sciences, Unive rsity of AL-Mustansiriya Abstract This st udy was conducted to determine the effect of different concentrations of ethanol extract of p rop olis against two fungi Botrytis cinerea, Altrnaria sp . The most imp ortant chemical constituents of p rop olis diagnosed by the Infra Red Sp ectroscop y , were the Flavonoids sp ecificaly. Results showed a high antifungal activity of ethanol extract of p rop olis, evidently with a high concentration of extract (5) mg\ml, which comp letely inhibited the radial growt h on both solid and liquid media (PDA &PD Broth ) of both fungi . We observed that , ethanol extract p rop olis at concentration of 5 mg\ml were sp rayed on exp erimental infection on some p lants (eggp lant leavers & cucumber ) which were effected by fungal. The sp raying of ethanol extract of p rop olis before 24, 48 hour p revented development of disease and made a good p rotection of the mentioned p lants from being infected with this fungus. While, the ability of fungus to grow after 24, 48 hours from ethanol extract of p rop olis treatment was reduce markedly as comp ared with control ,such treatment show a slow growt h of p athogen infect.