2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد So و Solanidine يالتوصیف الفیزیوكیمیائي والطیفي لمركب lasodine Solanum(نبات عنب الذیب والمنقاة جزئیا منالفعالة بایولوجیا nigrum( ساعور كوكب یعقوب ، ، محمد عباس فیاض علي صادق محمد جامعة بغداد ،كلیة العلوم ،قسم التقنیات االحیائیة كلیة التربیة ابن الهیثم ،سم علوم الحیاة ق جامعة بغداد ،كلیة الصیدلة ،فرع الكیمیاء الصیدالنیة الخالصة ب المستخلصة من ثمار واوراق القلویدیة التوصیف الفیزیوكیمیائي والطیفي لبعض المركبات ث بحتضمن ال نبات عن ة ی ،المنتشرة في العراق وهو احد اكثر االعشاب الطبیة ،) Solanum nigrum(الذیب عود للعائلة الباذنجانی )Solanaceae .(الحوامض المركزة من عمالباست القلویدیة الخام اجریت عملیة التحلل المائي الحامضي للمركباتH2SO4 , HCL l للحصول على الجزء القلویدي)aglycon (للمركبJJ ات والتي اعطیت الرموز لها)C, B, A ( مكونات انها تماثل ) C, B,A(الفیزیوكیمیائي للمركبات المنقاة جزئیاالتوصیف اوضح . سترویدیة مستخلصة ومفصولة سابقا على صفائح ) Rf(وقیم الجریان النسبي ) m.p(نصهار تغایرت فیما بینها بدرجات االو القلویدات السترویدیة في صفاتها ). IR(وكذلك طیف االشعة تحت الحمراء ) uv-visible(المرئیة - ةجیوطیف االشعة فوق البنفس) TLC(السلیكا الجاهزة ما دل فی ،بقمة واحدة مما یدلل على نقاوته العالیة) A(ظهورالمركب ) HPLC(كما اوضحت تقنیة السائل ذي االداء العالي solanidin تناظر القیمة النظریة لمركب) (Aالعملیة للمركب ةان القیم ).C.H.N(التحلیل الدقیق للعناصر C27H43NO وتناظر مركب C27H43NO2 Solasodine للمركب)C (تحلیل طیف الكتلة من اجراء أثبتوهذا ما)M S ( د /بداللة الكتلة) m/z 397(الذي دل ان له وزنا جزئیا یعادل ) A(للمركب الشحنة والذي یعادل الوزن الجزیئي للقلوی )Solanidine.( المقدمة تعد مركبات القلویدات من اهم المجامیع الفعالة بایولوجیا في عالم الدواء والعالج بالنباتات التي لمعظمها تاثیر ظمها مواد قاتلة او مثبطة لنمو االحیاء مع دكما تع [1]فسیولجي في الكائن الحي حتى وان وجدت بكمیات ضئیلة تكون و ، االجزاء النباتیة وحسب النوع النباتيفي معظم انواعها توجد القلویدات على اختالف. [2] المجهریة المختلفة د )الكافئیین،الكولشیسین ،المورفین (:مثل على هیئة امالح الحماض عضویة على الغالب ونادرا ما تكون بصورة حرة وق ــــال یمان معظمها عد ،)سائل_النیكوتین(تكون بشكل صلب متبلور ماعدا ظها ـولبع) اصفر اللون_الكولشیسین (لون ماعدا ـ ــــوتنتشر في الع ]1[ حریف(طعم مر Buxaceae, Verst(مثل وائل النباتیة ـــ rum, Ap ocynaceae, Liliaceae, Solan aceae 2010) 1( 23ة والتطبیقیة المجلدمجلة ابن الھیثم للعلوم الصرف . ]Cephalodiscus, Zoanthi ]3) (مثل ،تتواجد في بعض الفقریات البحریةكما ، وغیرها) س هابصورةعامة بان) Solanum(تمتاز قلویدات الجنس النباتي من طراز یختلف عن باقي قلویدات اجنا Solan◌ٍ (العائلة aceae (ستیرویدیة قلویدات بكونها نفرداذ ت، االخرى )Steroidal Alkalo id ( ، تكون في بینما Atقلویدات نوع خرى مناال االجناس rop ane Alkaloid, Indol Alkalo id )( ] 4[ ت هابانتعرف كما من قلویدا Steroidal Gly(ال coalkaloid ( كاربون لاوذلك الرتباط وحدة واحدة من السكریات او اكثر بذرة)C3( للهیكل التركیبي و، ]5[ ولوجیةالیها تعزى الفعالیة البایو نفسهللهیكل )C17(بذرة كاربون ) Alkaloid(وارتباط قاعدة نایتروجینیة ، للستروید .االشكال الجزیئیة الهم المركبات القلویدیة المتوقع فصلها من هذا النوع ) 1(الشكل یوضح احتوائه على ) Solanum nigrum( عنب الذئب لتي تناولت التركیب الكیمیاوي لنباتاكدت المصادر العلمیة ا ت :(الى جانب مركبات فعالة اخرى مثل [ 6 ] قلویدات سترویدیة بدرجة كبیرة وبكمیات وفیرة الفالفو نینات والصابونینا Solanine ,So( اتالقلویدات السترویدیة بالمركب وتتمثل .)الخ.… lasodine (ثانویة مركبات مركبات رئیسة كما هناك Sp(بـ من نوع الكلیكوسیدیة المتمثلة irostanol Furostan, ( فضال عن)(Flavonoid , Steroidal Saponins . الكمي ولتغایرها ] 7[رلتحضیر العقاقی "نواةالمتزاید هاعمالفي الدراسات الصیدالنیة والستوالهمیة هذه المركبات فقد كرست جهود الباحثین الختیارالنوع النباتي ، ) Solanum(لجنس العائدة نواعالابنسب متغایرة في ولتوزعها والنوعي وكذلك على النباتدون غیره اعتمادا على حصیلته االنتاجیة في اجزاء من كثر مالئمة النتاج قلوید سترویدي معیناال استخدام او ] 8[ ،الخ....ونوع النبات ،التسمید،الحرارة : ( مثل باتانتاجیة الن فيالظروف البیئیة الخاصة التي تؤتر وللفعالیة البیولوجیة المثبتة ضد كثیر من االحیاء المجهریة . In Vitro ([9](مخبریا تقنیات زراعة االنسجة النباتیة . [11]ة لالورام فضال عن اهمیةهذه المركبات مواد مضاد ]10[ المرضیة لعدد من مستخلصات هذا النبات ــــاهتم ــــ ــــیة الجزئیة لمســنقــتالة بـت هذه الدراســـ ــــنب الــــات عـــار واالوراق لنبـتخلصات الثمـ ) Solanum nigrum(ذیب ــــ ــــللحصـول علــى مركبـات قلوی ــــمركب السـیماو دیة ســترویدیة ــ ق ائــر بط ا موتوصــیفه Solasodine) (و ) Solanidine( ى ـــ ــــویمكن ان تعد هذه الدراسة متفـردة فـي الق.مختلفة الفزیوكیمیائي والطیفي باستخدام تقنیات التوصیف طر بهـذا االتجـاه مـع ـــ ــــع ــــ ــــوصع یاسیة من المركبات القلویدیةق فر عیناتادم تو ــ ــــ ن ان ترسم الخطوط العریضة لكثیر مـن ــــویمك.توفیرها وبةــــ ــــبحـوث المال ـــتات الطبیــه التــى تقــــالنباتــتزایدة بــ دون االهتمــام بتنقیتهــا مــن علــى المستخلصــات الخــام ودراســة فعالیتهــا تصرــ ـــــوناتها الكیمیائیة .ومعرفة مكـ المواد وطرائق العمل -: االستخالص والتنقیة الجزئیة - )غم 100( نقعت فیها اوزان متساویة )مستخلصات قلویدیة خامللحصول على (نظم من المذیبات ةثالث البحث عتمدا د . جمعت من بساتین منطقة الكریعات ببغداد ) عنب الذئب (النبات المعروف محلیا ب من مسحوق اوراق وثمار وق تحلل المائي بعد اجراء عملیة ال) A,B,C(الرموز خام اللصات ـــمستخوالناتجة عن ال تخاصات المنقاة جزئیاـطیت المســــاع -:وكما یاتي ، لغرض فصل وتنقیة المركبات القلویدیة منها، [ 12 ],[10] الحامضي لها -A ( بنسبة ) ماء مقطر، استیك اسد ،بمذیب بمیثانول(ناتج من نقع المسحوق ب مستخلص مسحوق اوراق النبات 1:1:1.( -B 1:1(بنسبة )كلورفورم ،ب بمیثانول بمذی (ناتج من نقع المسحوق ب مستخلص مسحوق اوراق النبات.( -C1:1(بنسبة )%2استیك اسد ، 90%بمذیب ایثانول (ناتج من نقع المسحوق ب مستخلص الثمار الجافة للنبات.( وجمع طبقته C6H6ماع الفصل مع مذیب البنزین قستخدام ا با وخلصات كل على حدة عوملت المست، [12][2 ] ف الدوار تم الحصول على مستخلص جاف خام یحوي القلویدات الكلیة الذي اجریت له عملیة التحلل وباستخدام المجف ر A,B,Cالمائي الحامضي للحصول على القلویدات المنقاة جزئیا بحث ولمزید من التفاصیل یراجع المصد وهي قید ال ]10[. للمركبات المنقاة جزئیا )Rf(تحدید قیم السریان النسبي - ــــمن صالمركبات على نوعین تفصل ــــفائح السیلكا الجـ Chromatogram A، Chromatogram B اهزة هي ـــ -:ولنوعین من المحالیل طور متحرك Toluene:Ethy :االول le acetate :diethy lamine 7:2 .]2[ باعتماد طریقة 1: Chloroform:M:الثاني ethanol 19:1 واستخدم كاشف دراجندروف لرش االلواح بعد انتهاء .[13] باعتماد طریقة [14] . التجربة وتعطي القلویدات بقعا باللون البنفسجي والطیفيالتوصیف الفیزیوكیمیائي - melting pتعین درجات االنصهار للمركبات المنقاة جزئیا -1 oint - m.p .).( باسـتخدام خالیـا ند درجـة حـرارة الغرفـةـاس عــــتـم القی) .U V- Visible(بطیـف قیـاس االطیـاف االلكترونیـة المتمثلـة - 2 ) نـانومتر190-800(بـین وحدد الطیـف االلكترونـي للمركبـات ضـمن المنطقـة المحصـورة ، )1cm(مسار ضوئي يسلیكا ذ .زالكلوروفورم من) ملیلتر1(من العینة في ) ملیغرام1(بعد اذابة Infra Red Sp)مـراءس االشـعة تحـت الح قیـا -3 ectrum- IR) للمركبـات )A,B( المحصـورة المنطقـة من ـضـ ) .سم 600-4000(نبی Carlo Erbo Mباسـتخدام جهـاز CHN analysisالتحلیـل الـدقیق للعناصـر -4 icro Analyzer ، فـي كلیـة الصـیدلة فــي جـــنس ن المركبـــات المنقــاة جزئیــا المتوقعــة قورنــت النتــائج العملیــة مـــع نتــائج التحلیــل النظــري لعــدد مــ جامعــة بغــداد Solanum) .( وذلــك یحقـن العینــة فــي عمــود HPLCتقـدیر نقــاوة المركبــات باسـتخدام تنقیــة كراموتوكرافیــا الســائل ذي االلفـة العالیــة -5 M(مال طور متحرك ــــوباستع C18- Carbohydrateالجهاز من النوع ethanol- tris buffer 88:12 ( 7.2عند p H اجـري الفحـص فـي دائـرة الرقابــة (. وبدرجـة حـرارة الغرفـة، ) نـانومتر205(وطـول مـوجي ) دقیقـة/ملیمتـر1.5(وبسـرعة جریـان )فقط Aالدوائیة وللمركب M)تحلیل طیف الكتلة -6 ass Spectrum- M S) ،تحلیل طیف الكتلة لتقدیر الوزن الجزیئـي للمركـب يجر أ )A( )الجامعة االردنیة / في كلیة الصیدلة . Aبعد النتائج المشجعة لنقاوة المركب الشحنة /ة بداللة الكتل النتائج والمناقشة لغـرض ) Solanum nigrum(جافـة مـن نبـات عنـب الـذیب اللثمـار االوراق و لـ ات خـام مستخلصـ ةت ثالثعملاست وقد اعطینا لهـذه المركبـات ، ا وتوصیفها توصیفا فزیوكیمیائیا وطیفیاللمركبات القلویدیة السترویدیة منه) جزئیة(فصل وتنقیة اجریت علـى المستخلصـات الخـام بعـض الكشـوفات الكیمیائیـة للتحقـق مـن طبیعتهـا الكیمیاویـة .[C, B, A]المختلفة الرموز لـت الناتجــة عــن التنقیــة واســتخدمت التقنیـات االتیــة لتوصــیف المركب.]10[خــاص واحتوائهـا علــى المركبــات القلویدیـة بشــكل -:الجزئیة :-)TLC(لمركبات باستخدام تقنیة كراموتكرافیا الطبقة الرقیقة ل (Rf)نتائج تحدید قیم الجریان النسبي 1- 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد بعـد فحصــها د مواقــع البقـع المنتشـرة وقیاســها ورسـمها علـى اوراق شــفافة االلـواح بعــد انتهـاء مـن التجربــة بتحدیـ اختبـرت [ ،[13] ، االخرمنها بكاشف دراجنـدروف هابعضسم منها الى بخار االیودین ورش قتعریض تحت االشعة فوق البنفسجیة و فـي حـین ، فو ر دراجنـد قبـل رشـها بكاشـف) UV(أي لـون او اسـتجابة عنـد تعریضـها لالشـعة البقع القلویدیـة لم تظهر .14] ــــللم) المفصـولة(بقع الظـاهرة ــــالـذي یؤكـد ان ال ین االیـود بخـارهر معظمها بعد غمرها بــظ هـي قلویـدات ) C, B, A(ركبات ـ [13 ] سجیافاظهرت لونا برتقالیا اوبنف و ر سترویدیة وعند رشها بكاشف دراجند بقعتــین واضــحتینوجـود ) A(نــوع مالظــاهرة علـى الــواح الكرامـوتكرااالول و المتحـرك لطوربــا المفصـولةالبقــع اظهـرت ماعدا ) 0.85_0.95(بین الهم) Rf(تراوحت قیم) C, B, A(جزئیا ةللمركبات المنقا ومتمیزتین مرااسـتخدام الـواح كرامـوتك عنـد مـا ا ,)0.96( تسـاوى) Rf(وغیر متمیـزة وبقیمـة ةفكانت صغیر ) A(البقعة الثانیة للمركب .بقعة واحدة متمیزة لكل مركب) C, B, A(فقد اظهرت المركبات ) B(نوع فقـد اظهـر بقعــة واحـدة لجمیـع المركبــات )B,A(نــوع مامـا عنـد اسـتخدام الطــور المتحـرك الثـاني مــع صـفائح كرامـوتكرا ة یـالنظـام المتحـرك االول اكثـر كفاوهذا یعنـى ان .نفسها في الطور المتحرك االولأ) Rf(قیم يوذ )C, B, A(جزئیا ةالمنقا وجــود اكثـر مــن مركـب ضــمن المركبـات الخــام یؤكـد و ،فـي فصـل وتنقیــة هـذه المركبــات مـن نظــام الطـور المتحــرك الثـاني .من الناحیة الكیمیائیة على الواح السلیكا تغایر المركبات المفصولةو یكا لیالیهــا البحــوث الخــتالف نــوع الســ التــي اشــارت) Rf(لــم تتفــق لجمیــع البقــع الظــاهرة مــع أي مــن قــیم) Rf(ان قـیم .التجربة وكذلك نوع المركبات التي تم فصلها التي تتطلبها ة او سمكها ونوعها وكذلك عدم توافر بعض المحالیلعملالمست ة مع المركبات الخام من المقارنباستخدمت نتائج هذه التجربة للتحقق من نقاوة المركبات التي تم تنقیتها جزئیا لذا فقد الخام للمركبات) Rf(قیم فيتغایر ال سبب اعزى الذى] 16[ التي حصل علیها نفسها تحت الظروف .لها) Rf(حیث قیم تباین و وتقارب صیغها الجزئیة من جهة ) S. nigrum(الطبیعة الكیمیائیة للمركبات القلویدیة التي یحتویها النبات الى .عن قابلیة ذوبانها في نظام الطورین المتحركین االول والثانيفضال ،من جهة اخرىصفائح السلیكا قابلیة امتزازها على .لها) Rf(مما جعل ظهور المركبات القلویدیة متقاربة في قیم Prepللمركبات المفصولة باستخدام السلیكا جل المحضرة اعتمدت هذه الحقائق في التنقیة الحزئیة arative Silica Gel لفصل المركبات المنقاة جزئیا )A,B,C ( واعادة تذویبها في محالیل االستخالص في هذا البحث بقشطها .وبلورتها بعملیة التحلل المائى الحامضى ) C, B, A(تعیین درحات االنصهار للمركبات 2 - M(قیاس درجات االنصهار ت تقنیةاستخدمت elthing Point- m.p الفیزیوكیمیائیة تواحدة من الصفاكونها توصف ). الواحد بتغایر نوع المذیب قد تتغایر للمركب والقلویدیة ،اال انها ]17[یة عد خاصیة ممیزة للمركبات العضو وتلمركبات ل )C, B, A(المنقاة جزئیا دیةالمركبات القلوی. كانت درجة االنصهاراذ ]18[والبلورة في عملیة االستخالص لمعالمست .على التوالي) ْم 210و 204و 198( ي (S. khasianum ) الكلیكوسیدیة المنقاة من النبات ان القلویداتالى ]18[اشار مثل المركب القلوید )Solasodine ( له درجة انصهار بحدود)(اما القلویدات الكلیكوسیدیة في جنس، )مْ 200Solanum (مثل ) - Solan inα (انصهارتتراوح بین اتدرج الهف)(مركب اما.)195-285- Chacon ine α (ر ف له درجة انصها Solan(للقلوید ) °م 290(بـ [15]بینما حددها ،[18] )مْ 243(تقدر in.( فر أي معلومات اخرى عن اونظرا لعدم تو س ان تكون المركبات التي تم التوصل فمن المتوقع) (Solanumدرجات انصهار المركبات االخرى الموجودة في جن 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد الیها هي مركبات قلویدیة كونها تنحصر ضمن هذه المدیات في حدود درجات انصهار القلویدات السترویدیة العائدة لهذا .الكیمائي الختالف درجات االنصهار المسجلة فضال عن التوقع بیغایرها في الشكل الجنس . )B, A (المرئیة للمركبات المتبلورة –قیاسات طیف االشعة فوق البنفسجیة -3 القلیویدیین الكالیكوسیدیین التي یمكن قیاسها ضمن ) B,A(للمركبین ) λ - max (لتحدید قیم االمتصاص العظمى یم قد اظهر ق) A(یتبین ان المركب االخرى ومن نتائج قیاس تلك االطیاف .)نانومتر190-700(الطول الموجي من -245(االطوال الموجیة القصیرة والمحصورة قیمها بین اعلى من يذ UV) (امتصاص عظمى في منطقة االشعة M( قیمة امتصاص العظمى ) 2(الشكل یوضح ف، )نانومتیر200 ax-λ ( للمركب)A ( عند طول موجي)ترنانوم238 ( بلغت قیمة ) نانومتر 300(وظهور بقعة اخرى في عند طول الموجي ، وهو ذو نقاوة عالیة 1.56كانت فقد ظهرت ) 3(الشكل ) B(اما المركب .ولم تظهر أي قمة اخرى ضمن االشعة الرئیسة، 0.24امتصاصهاالعظمى ولم تسجل ) 1.70,1.76(على التوال ا العظمى محیث بلغت قیمة امتصاصه) نانومتر305,240(قمتان في طول موجي ل الموجیة االخرى لمركب القلویدي الخام المتبلور نتیجة لفقد اعتمد على ) C(اما المركب ، أي امتصاص على بقیة االطوا وهي قیمة مقبولة الى خلل في الجهاز نامومیتر لحدوث 232.0 امتصاص عند الطول الموجى عنه الذى اظهر اعلى قمة .)4(حد ما شكل من ان معظم القلویدات الكالیكوسیدیة التابعة لجنس ] [20ذكره االحصول علیها تتفق م ان البیانات التي تم )Solanum ( تفتقد الى وجود مجامیع حاملة للون)Chromophoric group s( ، لذا هي تمتص في نهایة االطوال المرئي اعلى من فظهور قیم امتصاص اخرى في مناطق الطیاما .)نانومتر200-245(الموجیة القصیرة والمحصورة بین كما ، فیمكن ان تعزى الى لون المستخلص الخام الناتج ان عملیة تنقیة المركبات وذلك بعد عملیة التبلور) نانومتر 400( ت لذا ان فقدان المجامیع الحاملة للون في هذین المركبین یجعل استخدام الكواشف ال) 2,1(مبین في الشكل خاصة بالقلویدا PC-T(ال امرا مهما الظهارها على صفائح LC ( ر مثل مزیج حامض الكبریتیك فكاشف دراجندرو مثل او أي كاشف اخ anis aldelyاوكاشف ،مع المیثانول) (10 % de H2S04] ]2 [ او استخدام مركبات متبلورة من)BlanKop hor او Tino pal([21] ، ن غیرها من القلویداتمة تمیز القلویدات الكالیكوسیدیة معقدات ملونتكون هذه الكواشف الخاصة اذ ، .واظهارها على صفائح الكراماتوكرافیا كل حسب طبیعة تكوینه مع الكاشف الخاص به ) max -λ(هي مركبات سترویدیة التي اعطت تغیرا واضحا في قیم) B, A( ین ان المركبنستخلص من هذه النتائج Visible-U(ة طیف االشع ضمن V (ة ئمما یعزى انها مركبات متغایرة في طبیعة التركیب الكیمیا ي او المجامیع الفعال . فیها اال انها تشترك في كونها انماط متقاربة من القلویدات السترویدیة IR(Infera Red Sp(تحلیل طیف االشعة تحت الحمراء 4- actram للمركبین)B, A. ( مدة لتشخیص المركبات العضویة من خالل تمطیافیة االشعة تحت الحمراء كونها احدى الطرق المع استخدمت تقنیة functional group(تحدید مناطق امتصاص المجامیع الوظیفیة الفعالة s ( لالستدالل على مدى نقاوة المركبات 12[االولى اتجة عن طریقة االستخالصوقد طبقت هذه التقنیة مع المركبات الن. المفصولة من خالل شكل الحزم وقممها وقد اظهر التحلیل الطیفي ) B, A(والمركبات الناتجة عنها بفعل التحلل المائي الحامضي وهي المركبات المنقاة جزئیا . ] د ). 5 ,6(لهذه المركبات باألشكال ) IR(لل اما مواقع حزم االمتصاص لهذه المركبات اعاله واالشكال الناتجة عنها فق . 1)( ت في الجدول ذكر وجود تماثل عن" الضف، حظ وجود تغایر في مواقع االمتصاص لبعض المجامیع الفعالةلو ]17[عتمادا على نتائجاو لذا ، ائي الحامضيوالمركبات الناتجة عنها بفعل التحلل الم ]16 [ الممیزةبین المركبات الخام في بعض مواقع االمتصاص . وجود تغایر في الصبغ الجزئیة لهذه المركبات دلة علىأیمكن اعتمادها 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد -,CN,- CO(الممثلة المتصاص مجامیع ) cm¹ 600 -1350(ولوجود امتصاص لمواقع الحزم الواقعة ضمن المطقة CH,- OH, (بصمة اصابع ممیزة دوالتي تع)Finger Printing (عظم ـــثیرا مـــه كـــترویدیة تشابـبات القلویدیة السـللمرك Salsol(ومنها مركب [17]ـيـرت فــات التي ذكــبـركــالم idine hy drochloride dehy drate , Solanine ( شكل)7 ( حظ ان طیف المركبات لو كما ). S. nigrum( وعومنها الن) Solanum(لكونها المركبات االكثر شیوعا في الجنس وهذه من االدلة ، ]16[ قد اظهرت قمما وحزما اكثر وضوحا من المركبات الخام التي انتجت منها) B, A(المتبلورة حزم لومن متابعة المواقع . التحلل المائي الحامضي لعملیة التنقیة التي اتبعت في هذه الدراسة طریقة ةیاالخرى على كفا فیما ) Solanidine(یتوقع ان طیف االشعة تحت الحمراء للمركب االول معبرا لمركب ) B, A(االمتصاص للمركبین Solasodin(یكون معبرا لمركب e (من طبیعة المركبات المتبلورةمن حیث محتواها من ثبتوللت. في المركب الثاني)N, H, C (اجري التحلیل الدقیق لعناصر بعض المركبات . C.H.N Any(التحلیل الدقیق للعناصر 5- lsis (مركبات المنقاة جزئیالل)C, A( At(استخدمت تقنیة االمتصاص الذري omic Absorp tion ( لتشخیص المركبین)C, A ( للتعرف على القیم)العملیة ( C.H.N Any(النتروجین، الهیدروجین، التي تمثل التحلیل الدقیق لعناصر الكاربون lsis (ة التى بمقارنتها مع القیم النظری ان المركب ) 2(یتبین من الجدول ، یمكن التوصل الى اقرب المركبات المفصولة المحسوبة القرب المركبات المتوقعة Solan(هو االقرب لمركب ) A(المفصول idine ( ذي الصیغة الجزئیةC27H43NO ، مما یدعم توقعنا لنتیجة طیف )IR (المركب المفصول بینما یمثل، لهذا المركب)C ( وهو االقرب لمركب)Solasodine ( ذي الصبغة الجزیئیة C27H43NO2 ). ولم یتم اجراء هذا التحلیل للمركبات المنقاة)B ((ونظرا لدخول عناصر ). لتعذر ذلك( N,H,C مكونات كما ان النتائج التي تم الحصول .لذا یعد استخدام هذه التقنیة امرا شائعا لتحلیل هذه المركبات، ]23[ي قلوید رئیسة ال وهذا امر متوقع نظرا ، للمركبات القلویدیة السترویدیة) Aglycons(او) Alkamines(علیها لهذه المركبات تشیر الى انها ت تالجراء عملیة التحلل المائي الحامضي للتخلص من االجزاء السكریة المرتبطة بالمركبات المفصولة بشكل مس خلصا ان المركبات التي تم الكشف عنها وتحلیلها على قدر كبیر من النقاوة نظرا ، كن التوقع من نتائج هذه التجربةكما یم. خام ) N, H, C(لعناصر) العملیة(اذ كانت النسبة الئویة ،للمركبات المفصولة )العملیة(لتقارب القیم النظریة مع القیم فهي ) C(للمركب ) العملیة(اما القیم). Solanidine(المركب ها فيأنفستقارب النسب المئویة للعناصر )A(للمركب .)2( جدول ) Solasodine(في المركب ) N, H, C(مقاربة للنسب المئویة النظریة لعناصر )HPLC(باستخدام تنقیة ) A(تقدیر نقاوة المركب 6- اســتخدمت . مــن خـالل النقـاط السـابقة) Solanidine(المتوقـع انـه ) A(بعـد الـدالئل التـي تـوافرت عــن نقـاوة المركـب على الرغم من عـدم تـوافر عینـات قیاسـیة للمركبـات ، لتحدید مدى نقاوة هذا المركب(HPLC) تقنیة السائل ذي االداء العالي من ان اعتمــاد الطــور المتحــرك المحضـــر .ولــم یجــر مــع المركبــات المنقــاة االخــرى) Solanum(القلویدیــة التــي تعــود لجــنس ــــتمده لتحــــظم المعــنـونه افضل الــجراء هذا التحلیل كال [20] هذه لیل ـ ة ، المركبات عند استخدام هذه التقنیة اذ اشار الى انه افضل نظم االذابة المستخدمة لفصل الكلوكوسیدات االحادی ).aglycones(كامینات او مایعرف بفضال عن االل والثنائیة والثالثیةعن بعضها RT ((1.48(وعند زمن االحتجاز ) A( ظهور قمة واحدو متمیزة وحادة لعموم المركب) 8(الشكل من یتبین mint) Retention time ، ــــزم ندــعوظهور قیم امتصاص یكاد یكون معدوما .)mint 2,67 , 4.43(جاز ــن االحتــ 2010) 1( 23ن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلدمجلة اب ة یكما تدلل على كفا .تدل داللة واضحة على النقاوة العالیة للمركب المفصول (A)ان ظهور قمة واحدة ومتمیزة للمركب Acid Hy)طریقة التحلل المائي الحامضي drolysis)، وطریقة السلیكا المحضرة)Prep arative TLC (ن یاللت .المركب ااعتمدتا لتنقیة المركب الخام الذي فصل منه هذ Mبداللة طیف الكتلة ) A(ن الوزن الجزیئي للمركب یتعی 7- ass sp ectra Solan(انه والمتوقع) A(استخدمت تقنیة طیف الكتلة للمركب idine ( بعد الدالئل التي تشیر الى نقاوته العالیة . ذلك لتعذر اذ لم یتم اجراؤها مع بقیة المركبات المنقاة جزئیا، تم التطرق الیها في الفقرات السابقة والتي یعد طیف الكتلة من الطرق الفیزیوكیمیائیة المهمة التي استخدمت حدیثا في تطبیقات تشخیص المركبات اذ یعتمد على تبخیر المركبات ،)m/z(بة الكتلة الى الشحنةوالتي یستفاد منها لتعیین الوزن الجزیئي بقیاس نس، العضویة .] 23[) 1000 اقل من(االوزان الجزیئیة الواطئة يذ fragmentation p(اذ تتوضح فیه نماذج التجزئة ) A(طیف الكتلة للمركب لنتیجة ) 9(یبین الشكل attern ( او االوزان الجزیئیة لالیونات ) m/z 272 ,204 ,150 ,98 ,55(القمم فیما تمثل ، االنشطارات الناتجة عن المركب المتاین %, 25 %(وبوفرة نسبیة )m/z 204(اعظمها وتلیها القمة) m/z 150(كما تمثل القمة . الناتجة عن انشطار المركب شابه في تیظهر انشطارات م) Solanidine(من ان قلوید [24]ان اقرب تفسیر لهذا الطیف ما ذكره .على التوالي)100 ما یظهر وزنا جزیئیا ــاذ ینشطر الشكل المتباین لهذا القلوید الى ایونین غیر متناظرین في الوزن الجزیئي احداه، هاأنفسالقیم ).10(كما في المخطط الموضح في الشكل ) m/z 150(جزیئي ــوزن الــــواالخر له ال) m/z 204(قدره )11(فقد امكن وضع المخططات الموضحة في الشكل، )A(جزئة للمركب المفصول اما االلیة المتوقعة لنماذج الت ه ، سیر االیونات الناتجة عن عملیة التجزؤ مع قیم اوزانها الجزیئیةـلتف .]26[ ] 25[،اعتمادا على ما ورد في التي تشاب ). Solanidine-5en-3Bol(كبیر المركب الى حد Solan(المركب انه ) A(یدا على تشخیص المركب تاك دان هذه النتیجة تع idine.( وتحلیل ، )HPLC(تحلیل دل علیه على درجة عالیة من النقاوة كما ، )A(كما یمكن القول ان المركب المفصول من (Aglycone)الذي هو) Solanidine(الوزن الجزیئي لمركب نا جزیئیا یقارب وز الذي اعطى طیف الكتلة للعدید .)10( الحظ الشكل ). Chaconine(و) Solanine(في جنس السوالنم ومنها المركبات السكریدیة المصادر .المملكة السعودیة -ریاضال. دار المریخ للنشر . النباتات الطبیة زراعتها ومكوناتها).1981(فوزي طه ، قطب -1 2- Handa, Sukhder S., Decpak M undkinajeddu and Anup am K. M angal (1998). Indian Herbal p haemacopoeia. Vol I. Ajoint p ublication of Regional Research laboratory and Indian Drug M anufacturers, Association. India. P 139- 3- M aalanina, G.G.; L.I. Klimov a; L.M . M orozovskay a.; O.S. Anisimova,; L.M . Alekseeva and N.N Suvorov, farm. Zhur. (1974). Chem. Abs. 81, 63874. y . Secondar8o lanum Alkaloids in Vol. S -Isop renoi Alkaloids ,Roddick, J.G. (1980)-4 p lant p roducts, by E. A. Bell New York and B.V. Ch arl wood. Encyclop edia of 5- Friedman,M . and M cDonald ,G.M . (1997). Pot ato glycoalkaloids:Chemistry , analysis, 132. -55 :(1) 16. Plant Sci. softy and p lant p hy siology Crit Rev 6- Bruneton, J. (1993). Pharmacognosy . Phyt ochemist ry of M edicinal p lants. Lavoisier, p arts2nd ed pp .877. 2010) 1( 23جلدمجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة الم 7- Harrison, D.M . (1976).Solanum and Veratrum st eroidal Alkaloids Chapter 14 in the Ed. By M .F. Review of t he literature p ublishes. t he chemical Grundon. A .6Alkaloids Vo l. society , Burlington House. London 8- Yaniv, Z., M . Weissenberg; D. p alevitic and A. levy (1981) Effect of seed Number and fruit weight on content and Localization of Glycoalkaloids in Solanum hasianum. J Plants 306 -:30342,medica من خالیا )vinblastine(انتاج مركب ). 2000(كوكب یعقوب، ساعور؛صباح مهدي، هادي؛علي صادق، دمحم 9- .109-79 )2 (:13. المجلة العراقیة للعلوم البیطریة. Cotharanthus roseusكالس نبات عین البزون Solanum nigrum ب الذیب استخالص وتنقیة مركبات من نبات عن). 2003(محمد عباس فیاض ، الدلیمي-10 جامعة بغداد ، كلیة العلوم. رسالة ماجستیر. وتاثیراتها على االحیاء المجهریة المرضیة في دنا Solanum nigramفعالیة المستخلصات القلویدیة الخام لنبات عنب الذئب )2008(فیاض ،محمد عباس -11 23 - 13 )1: (21.ابن الهیثم للعلوم التطبقیة والصرفة مجلة .الهالم يالمرحل ف PBR322 البالزمید 12- Shaban a, M .M . and T.S. El-Alfy,(1978). Investigation of the Constituents of Solanum 347 -337)4 -1:( 19AIT fllowers. Egy pt. J. harm Sci lacinia tum 13- Bhathnagar J.K. and Ravinder K. p uri (1974) Solanum Platanifolium a New source of solasodine Lloy idia June 318-319. 14-Stahal,E. (1969).Thin lay er chromatogr aphy .2 nd edition-Berlin.Heidel ber g. New York . 15- Harborn, J.B. (1973). Phy tochemical methods. Chap han and Hall Itd. London –New York p p 278 Solanumالتوصیف الفیزیوكیمیائي والطیفي للمركبات الفعالة بایولجیا لنبات عنب الذیب )2009(علي صادق،محمد -16 nigrum ،2مجلة ام سلمة المجلد . مار النباتالمستخلصات القلویدیة الكلیة الخام الوراق ولث -أ 17- Pouchert, Charles J. (1981). The Aldrich Library of Infra Red Sp ectra, Steroids and Indole alkalo ids Edition III, AldrichChemical comp any, Inc.P 1491-1514. 18- Bezbruah, Balamani. (1981) .A Sample method for p urification Of glycoalcooides. In 81.-77,43 Khasianum. Plant medica . quantitative est imation of Solanum the 19- Zeiger, Errol, (1998).α- chaconine and α- Solanine Review of Toxicological Iiterature , National Institute of Envirommental He alth Int .La . Sy st ems 20-Crabble, Phillip Graham and Colin fry er,(1980)Rap id Quantitative Analysis of Solasodin , Solasodin e Glycosides And solasodinene by ligh-p ressure liquid chromato graphy .Journal 100. -87, 187of Chromatography , Brighteners as t hin-laye chromatographic r 21- Jellema, R.; E.T.Elema and Th.M . M alingre (1980). Opt ical Detection reagents for glycoalkaloids and steroid alkaloids in So lanum sp ecies J. of Chromatography 189 ,406-409. 22- James, W.O.,(1950). Alkaloids in p lants. In “ M ansk R.H., The Alkaloids VIP. 1-23, Academic p res New York, London“ . 1كلیـة العلــوم ط-جامعــة بغـداد. متـرجم، لطیفیـة فـي الكیمیــاء العضـویةالطــرق ا). 1986(جـورج بوناتـان، سـركیس -23 . شركة التایمس للطبع والنشر المساهمة 24- At ta-ur- Rahman and M .IqboI Choudhary (1998). Chemistry and Biology of Steroidal Alkaloids . In the Alkaloids. In T he Alkaloids Chemist ry and Biology by Geoffrey A. Cordell. Cop y righ by Academic press Vol. 50. USA 25- Cordell, Geoffrey A.(1998). T he Alkaloids. Chemist ry and Biology . Copy righ by Academic p ress USA .50:61-103 26- Hardman. R. (1987). Recent Develop ments hn our knowledge of Steroids. Plantamedica P. 233-238 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد ـــا للمركبات القلویدیة المتوقع فصلها من اجــزاء نبات :)1(شكل ـــ یبین االشكال الجزیئیة االكثر شیوعــ igrum n Sol anum 24( و)19( و) 17( عن ( 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد ) A( القلویدي المرئیة للمركب– طیف اكتصاص االشعة فوق البنفسجیة ) ٢( شكل 2010) 1( 23المجلد مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة ) B( المرئیة للمركب القلوی��دي –طیف امتص�اص االش�عة ف�وق البنفس��جیة ) ٣( شكل ت الحمراء ) ٥( شكل ) A( للمركب القلویدي المتبلور ) IR( طیف امتصاص االشعة تح 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد متصاص االشعة فوق البنفس��جیة) ٤( شكل C المرئیة للمركب - طیف ا A Solanine جنس نماذج من اطیاف االشعة تحت الحم��راء لبع��ض القلوی��دات الس��تیرویدیة ف��ي ) ٧( شكل ) Pouchart, 1981( عن . السوالنم Salsolidine hydrochloride dihydrate B A-Solanin e B-So lsolidine hydrochloride dehydrate شك 7 2010) 1( 23جلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد )یوضح مواقع حزم االمتصاشضص في اطیاف االشعة تحت الحمراء 1 جدول ( BوAللمركبات Aالمركب المنقى جزئیا Bالمركب المنقى جزئیا مة حز العدد املوجي لل bands rangs cm-1 تذبذب ا�موعة Proposed assignmem ذبذب واملالحظات ة نوع الت دد املوجي للحزم الع bands rangs cm-1 ة ذبذب ا�موع ت Proposed assignmem الحظات ذب وامل نوع التذب 3430(b) O-H حزم مط االصرة الكحولیة ممتدة ل االمین الثانوي N-Hال 3780 O-H الكحولیة حزمة مط االصرة Stretc hing alcoholic موذج الن " ذو رطوبة عالیة " 3070-3000 =C-H حزم مط االصرة لمجموعة االلكین 3213-3142 =C-H حزم مط مجموعة االلكین Stretching alkene 2997 (w) C-H حزم مط المجموعةCH3 3000- 2865(w.b) -C-H حزم مط مجامیع المثیل والمثیل 1749 (s-b) 1700 (s-b) -C-O جموعة الكاربونیل (s-b)1749حزم مط م 1700(s-b) -C=O * 1686 (s ) C=C حزم مط اصرة االلكین تدة لحد بضمنھا االصرة المم cm-1 0165 1628 (w) C=C اللكین بضمنھا ة ا حزم مط اصر exocyclic olاالصرة ific ة الممتد cm-1 1650لحد 1628 ( m) 1557 (w) C=C حزم مط اصرة االلكین exocyclicبضمنھا االصرة olific الممتدة لحد cm-1 1650 1479 (m) -C-H حنى م ال ساسیة bandحز اال وعة المثیلین لاللكین الحلقى لمجم 1500 (w) C~N ط االصرة االلیفاتیة حزم م (cyamid) 1400-1382 (d ) -C-H ل حنى لمجموعة المثی م ال حز 1484-1466 -CH2 حزم الحني لمجموعةCH2 1300(w ) -O-H حني في م ال Planeحز 1400 C-H 1235حزم الحنى لمجموعة المثیلین (m.b ) 1114 (m ) -C-O حموعة الكحولیة الصرة للم حزم مط ا وعة االمینیة واالیثریة المجم و 1208 1142 1050 -C-O -C-O حزم مط االصرة للمحموعة الكحولیة والمجموعة االمینیة واالیثریة 1020-1000 (md) C-N حزم مط االصرة االمینیة 886 -C-H ى الخارجیة حزم الحن جموعة االلكین لم 946 (w) -C-H حنى لالصرة م ال حز 700-715 -O-H ي الخارجیة لالصرة حزم الحن كحولیة ال 886(m) -C-H م الحنى الخارجیة لمجموعة حز االلكین 700(s) -O-H الخارجیة لالصرة حني م ال حز حولیة الك موجودة ضمن ظهور هذه المجموعة ضمن المركب المفصول قد تعزى الى استخدام حامض الخلیك المركز ،اذ انها غیر * .مجامیع القلویدات الستیرویدیة ،وعموما فهي غیر مؤثرة على نقاوة المركب ة المجلد 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقی التي شخصت بتقنیة المفصولة والمنقاة جزئیاA,Bللمركبات القلویدیة المتوقعة )العملیة (القیم النظریة و :)2(جدول C.H.N. التحلیل الدقیق للعناصر )العملیة ( القیم النظریة الوزن الجزیئي M.W الصیغة الجزیئیة المركب والرمز % N % H % C 3.52245 (3.60 ) 10.89998 ( 10.86) 81.55644 ( 81.18 ) 397.64 - C27H43NO - Solan idine ( A) 3.38612 ( 3.658 ) 10.47811 ( 9.990 ) 78.39986 (78.801 ) 413.65 - C27H43NO2 - Solasodin e (C ) الجراء القیاسات النظریة (N-14.0067)و(H-1.00797)و(C-12.01115)االتیة اعتمدت االوزان الذریة 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد المفصول من اوراق نبات عنب) A(تقدیر نقاوة المركب -) 8(شكل ni( الذئب grum S. ( باستخدام تقنیةHPLC Solوع المفصول من اوراق نبات الن) A(یوضح طیف الكتلة للمركب –) 9( شكل anum nigrum 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد S( مخطط یوضح الیة طیف الكتلة لمركب السوالندین :) 10( شكل olaniden ( عن) ( 24 A B C D EF HO H N [C 2 7H4 3 NO ] M .W . 397m /z HO + I CH HO H B C D A H + 2 72 m /z1 25 m /z N CH 3 CH 3 + C1 5 H 22 20 4 m /zH + B C D +C H2 = CH – C = CH 2 O H + I I II I C D C H2 ~ 150 m /z + +C H2 =C H-CH =C H2 5 4 m/ z 98 m/z +. +CH 2= CH 2 متوقع����ة لنم����اذج التجزئ����ة للمرك����ب ) (11ش����كل المفص����ول م�����ن ) A( االلی����ة ال عن�����ب ال�����ذیب (nigrumاوراق نب�����ات S. ( باس����تخدام تقنی�����ةMS عن) 10 ( IV V VI مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة 2010) 1( 23المجلد ) B( للمركب القلویدي المتبلور ) IR( طیف امتصاص االشعة تحت الحمرء ) ٦( شكل IBN AL- HAITHAM J. FOR PURE & APPL. S CI. VOL.23 (1) 2010 Physiochemical and Spectral Characterization For a Biological Active, Solanidine&Solasodine Partial Purification Compounds From (Solanum nigrum L) A. S. Mohammed , M. A. Fayidh , K. Y.Saooer Departme nt of Biotechnology , College of Science ,Unive rsity of Baghdad Departme nt of Biology ,College of Education Ibn Al-Haitham, Unive rsity of Baghdad College of Pharmacology Abstract This st udy includes a p hy siochemical and a sp ectrocpical characterization to some alkaloid comp ounds in the (ANAB AL- THEAB) p lant (Solanum nigrun L.). It’s t he most imp ortant medicinal herb belonging to the family (Solanaceae). Acid hy drolysis was p erformed by using limited conc. of Hcl and H2SO4, to obtain the aglycon p art of p reviously sep arated st eroidal comp onants as (A, B and C). The characterization of the(A,B and C) comp ounds indicates that they varied between them as the sep arated st eroidal like-alkaloids, carried by using melting p oint (m.p.), thin layer chromatography (TLC), Infra -Red sp ectroscop y (IR) and Ultra violet-Visible sp ectroscop y (UV - Visible).High p erformance liquid chromatography (HPLC) indicated the p resence of single characterist ic intense p eak belonging to (A) comp onent which confirms the purity of comp onents. The M ass- sp ectra (M S) of this comp ound gave (397m/z) molecular weight p eak related to (Solanidine) alkaloid, when the chararacteristic to comp ound (C) showed that same as solasodine alkaloid . .