2009) 3( 22مجلة ابن الهیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد والمستضد Bالمستضد لبیض ضد األكیاس المائیة باستعمالتمنیع الفئران ا اإلفرازي االبرازي وحیدة رشید علي جامعة بغداد ،ابن الهیثم - كلیة التربیة ،الحیاةقسم علوم الخالصة ة ضــد اإلصــابة تهـدف الدراســة الحالیــة إلــى إمكانیـة الحصــول علــى مستضــد لـه القــدرة علــى تحفیــز االسـتجابة المناعیــ فـــي Echinococcus granulosusن مــن الطــور الكیســـي لــدودة امستضـــد ولهــذا أســتخلص، المائیـــة األكیــاس ضبمــر :األغنام وهما .Bمسضد السائل الكیسي ویسمى المستضد -1 .ESویسمى المستضد Excretion-Secretion المستضد االبرازي اإلفرازي - 2 .1:1هو عبارة عن مزیج من المستضدین أعاله بنسبةB/ES المستضد -3 فـي تمنیـع الفئـران البـیض مـن الـذكور بجرعـة مت مل استعل/ملغم B/ES 60 , 30 15, دللمستضتراكیز إذ حضرت ثالثة .غم لحصول عملیة التمنیع/مایكروغرام 10تقویة واحدة ةوبجرع، من وزن الجسم غم/مایكروغرام20 قدرها تمنیع فـي تولیـد المناعـة ضـد اإلصـابة باألكیـاس المائیــة تراكیـز المستضـد التـي اســتعملت وكفایـة، فحصـت فعالیـة المستضـد .الثانویة عن طریق حساب النسبة المئویة لالختزال في أعداد هذه األكیاس 15, لتركیـزل% 100و % 92.3و % 91.5أظهرت النتائج إن النسبة المئویة لالختزال في مجـامیع الفئـران الممنعـة كانـت .بینها وبین فئران السیطرة الموجبة التي كانت أكثر تقبال لإلصابة ، وسجل فرقغم على التوالي /غراممایكرو 30 , 60 ة بعــد 45وعنــد إجــراء فحــص الحساســیة بعــد ابة أظهــرت الفئــران اســتجابة مناعیــة خلویــة عالیــ ـا مــن اإلصـــ ثـــالث یومـ وكـان هـذا واضـحا لمجمـوعتي ،لفـار بزیـادة فـي سـمك وسـادة القـدمللیسرى ا في وسادة القدم B/ESساعات من حقن المستضد ة فئـران السـیطرة السـیمالتفاعـل كـان أكثـر حـدة فـي الـثالث سـاعات األولـى و اإن إالالسـیطرة الموجبـة والفئـران الممنعـة مجموعـ إال إن التفاعل كان ،أعالهیوما من اإلصابة كانت النتیجة مشابهة لما ذكر 90وعند إعادة التجربة بعد . المصابةالموجبة . أكثر حدة في الثالث ساعات األولى والسیما مجموعة فئران السیطرة الموجبة المقدمة لتجنـب دفاعـات یـةحمایـة عالیـة الكفا E. granulosusالدودة الشریطیة الحبیبیة المشـوكة یمتلك الطور الیرقي لطفیل أثیر المنــاعيظــالمضـیف عــن طریــق أغشــیة ومحف ـة بـالطفیلي مــن التــ إذ یقــوم الطفیلــي بتثبــیط المناعــة ، ة المضــیف المحیطـ مثبطـة IL-4مثـل النترلـوكین Cytokinesإفرازهـا حركیـات خلویـة Th2 عـن طریـق تنشـیط الخالیـا Th1لخالیـا الخلویـة ).1(مما یزید ذلك من شدة المرض Th1لعمل 2009) 3( 22والتطبیقیة المجلدمجلة ابن الهیثم للعلوم الصرفة ة فـي المضــائف وٕاحـداثیمتلـك الطـور الیرقــي مستضـدات عالیــة لتحفیـز الجهـاز المنــاعي اســتجابة مناعیـة خلویـة وخلطیــ ـارات Protoscolicesوتعــد الرؤیســـات األولیــة ، )2(الوســطیة ـائل الكیســي فــي االختبــ ــر خصوصــیة مــن الســ مستضــدا أكثـ ـة فــي الفحوصــات المناعیــة المصــلیة ل ه ممــا یقلــل مــن النتــائج الكاذبــ ـة فیـــ ـات الطفیلیـ ــات اســتعمل). 3(كثــرة المكونـ ت المنتجـ ة ضـد إصــابة لیاالیضـیة لألطـوار ا رقیـة للدیـدان الشــریطیة فـي تمنیـع األغنـام ضــد الطـور الیرقـي مكتسـبة بــذلك مناعـة عالیـ كمـا تـزداد درجـة التمنیـع بزیـادة عـدد الجرعـات . ة تحـت الجلـدوبحقـن الجرعـة الجنینیـ، E. granulosusالتحـدي ببیـوض لهـذا الطفیلــي وتـم الحصـول علــى مسـتوى عـال مــن الوقایـة خـالل التمنیــع التجریبـي لألغنــام بمستضـد السـائل الكیســي). 4( ة بمجموعــة الســیطرة الخلطیــة تــؤدي إلــى تحفیــز المناعــة Mitogensمشــطرة "امـوادتعمــل مستضــدات الطفیــل ). 5(مقارنـ ـا لـوحظ ارتفـاع مسـتوى ، وزیـادة الكلوبیولینـات المناعیـة خــالل أسـبوع مـن اإلصـابة واختفــاءه فـي األسـابیع الالحقــة IgMكمـ )6 .( ـا مــن الطـور الكیســي للــدودة ومـن الخالصــات المــاخوذة مـن 23لقـد شــخص یســات األولیــة أو رؤیال مستضـدا مختلفـ ـاط ، 5 أوA والمستضـد 4 أوB المستضـد هـي وأكثـر هـذه المستضـدات تواجـدا .جـدار الكـیس وهمـا األكثـر اسـتعماال اللتقـ ـا إن المستضـد .لطفیـللهـذا ا األجسـام المضـادة النوعیــة نــه الA ثــر استضـدادیة وخصوصـیة مــن المستضـدأكB كمـ Inاالیضـیة للرؤیسـات المنمــات فـي الزجـاج إن المنتجـات ) . 6(ودیــدان شـریطیة أخـرى E. multicularisشـترك مـع م vitro ـة ـارات المناعیـ وتقــوم المستضــدات االبرازیــة اإلفرازیــة ، أجســام مضــادة نوعیــة لهــذه المستضــدات االیضــیة فــي االختبـ Excretion-secretion (ES) antigens مـن الطـور الیرقـي وتطـور الغشـاء الجرثـومي ومـن ایـض الرؤیسـات األولیـة علـى ) .8,7(واسع من األجسام المضادة التي لها دور في تشخیص وحث مقاومة فعالة ضد الطفیلي إنتاج مدى ة فــي المضــائف الوســطیة فــي الحیوانــات بكفا ة یــهنالــك محــاوالت لعمــل لقــاح مضــاد لطفیــل األكیــاس المائیـــ ة عالیـــ ومن ثم Recombinant DNAوباستعمال تقنیات ، Oncospheres antigensالشریطیات أجنة باستعمال مستضدات وألجل ) 10,9% (99 وبنسبة القضاء على المرض في اإلنسان والقضاء على الطفیلي في مضائفه الوسطیة للطـور الكیســي Bالمستضـدات االبرازیـة اإلفرازیــة للمستضـد ة إلـى إحــداث مناعـة نوعیـة باســتعمالذلـك تهـدف الدراســة الحالیـ . التقلیل من االمراضیة التي تنجم عن اإلصابة داخل جسم المضیف الوسطي ومن ثم ر األكیاسلكبح نمو وتطو ق العمل ائالمواد وطر تراوحـت نوبـأوزا، یومـا 30-35وبعمـر Albino Swiss miceأجریـت التجـارب علـى الفئـران البـیض مـن سـاللة .الذكور نفارا م) 75(وبعدد ،غم 25-30ن بی بنغازي في الجماهیریة اللیبیة جمعت عینات األكیاس المائیة مـن أكبـاد ورئـات األغنـام المصـابة لعـزل مجزرة من ـائل الكیسـي إذ عقــالرؤیسـات األولیــة وفصـلها وجمــ د ســحب عــوب ،% 70م الســطح الخـارجي بــالكحول االثیلــي بتركیـز ع السـ وسـحب الراشـح ووضـع فـي قنینـة ، دقیقـة /دورة 2000بذ المركزي بسرعة ل اجري النم10جمیع السائل الكیسي بمحقنة سعة .منه Bمعقمة لتحضیر المستضد مـن Bالسـتخالص المستضـد ) .Williams et al ( 12و 11)( .Oriol et alالموضـحة مـن طریقـةالاسـتخدمت :تيمایأالسائل الكیسي وك ـام فــي كــیس الــدیلزة مــل 500وضـع -1 ـائل الكیســي لألغنـ وغمــر بمــادة البــولي اثیلــین Dialysis membrane مــن السـ وثم غسل السـطح الخـارجي للكـیس بالمـاء ، ملیلتر 250لتركیزه إلى حجم م 4بدرجة ) دالتون 2000ئي یبوزن جز ( كالیكول . ثیلین كالیكولأثار البولي آالجاري ثم بالماء المقطر للتخلص من 2009) 3( 22جلة ابن الهیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلدم Acetate buffer مـن السـائل الكیسـي ضـد دارئ الخـالتمـل 100لحجـم Dialysis يإجـراء عملیـة الفـرز الغشـائ -2 .الدارئمع تبدیل م 4ساعة بدرجة 24مدة 5وباس هیدروجیني ، ملي مول5عیاریة ل م 500حجم ـة 30دقیقــة مـــدة /دورة 50000فصــل الراســـب بالنبــذ المركـــزي بســـرعة -3 أهمـــل الراشـــح الحتوائــه علـــى األلبـــومین ، دقیقـ Phosphate bufferمـن محلــول دارئ الفوســفات مــل 30وأذیـب الراســب فــي ، وكلوبیـولین غیــر النــوعي للمضــیف solution (PBS) 8مول وبأس هیدروجیني 5 بعیاریه. قـدرها وبشكل تدریجي لحین الوصول إلى نسـبة تشـبع ) (SO4 NH4أضیف محلول مشبع من سلفات االمونیوم -4 .م 4دقیقة بدرجة 30وترك مدة ،400% ة مـدة /دورة 5000إجراء النبذ المركـزي بسـرعة -5 وأهمـل ، دقیقـة لفصـل الراشـح الحـاوي علـى مستضـدات الطفیلـي 60دقیقـ .الراسب الحتوائه على الكلوبیولینات النوعیة للمضیف مــرر 7- .دقیقـة/ دورة 50000ٕاجـراء النبـذ المركـزي بسـرعةدقیقـة، و 15بغلـي الراشـح مـدة Bاسـتخلص المستضـد -6 .Bنقاوة المستضد لزیادة) مایكرومیتر Millipore filter)0.22 الراشح بمرشح دقیق وجفــد المستضــد بجهــاز التجفیــد مـــادة حافظــة،% 0.01مــادة المیرثوالیــت بتركیــز B أضــیف للمستضــد -8 lyophilizer م4حفظ بدرجة و. ). Whitaker and Granum )13وفق طریقة على Bوقدر تركیز البروتین للمستضد -9 وغسـلت الطبقـة المولـدة ، ل األكیـاس المائیـةجمعت الرؤیسات األولیة من سائل األكیاس المائیة لألغنام المصابة بطفی ایكروغرا 100وحـدة دولیـة مـن البنسـلین و 100حـاو علـى Normal salineللكـیس ثـالث مـرات بمحلـول فسـلجي معقـم /ممـ ة بعــد ســات فـــي محلــو یوعلقـــت الرؤ ، مـــن الستربتومایســین لمــ ـال مـــن المضــادات الحیویـــ إجـــراء فحــص حیویـــة ل فســـلجي خـ مكـررات السـتخراج التركیـز النهـائي لعـدد الرؤیسـات الموجـودة ةیوسین المائیـة واخـذ معـدل ثالثـآلاألولیة بصبغة ا الرؤیسات .في المحلول :يلمستضد االبرازي اإلفرازي وكما یأتلتحضیر ا) Aure and Aspok )8استخدمت طریقة ة باسـتعمال تعلقـ -1 RPMلزرعـي ماثـل لحجـم الرشـح المسـحوب بالوسـط احجـم م الرؤیسـات األولیـ I1640 ) المصـنع مـن ایكرو غـرا 100على الستربتومایسین والبنسلین بتركیز يلحاو ا) sigmaشركة لزرعـي فـي دوارق الـزرع ن الوسـط امـل مـ/ ممـ .عیة وبمعدل رؤیس حیوي في كل دورقمن المادة الزر مل 10-15إذ وضع مل 25المخروطیة حجم ة حــرارة - 2 ة الرؤیســاتمــع الوســط ا" ایومــ 7-15م مــدة 37حضــنت الــدوارق بدرجــ وقـــد ، لزرعــي یومیــا مــع فحــص حیویــ . ساعة 24فیها خالل Evaginationأظهرت نسبة كبیرة من الرؤیسات حصول عملیة االنبعاج المادة الزرعیـة بعـدها وجمعت، المضیفساعة الحتوائها على بروتینات مصل 24الزرعیة المسحوبة بعد أهملت المادة -3 . م 4عقمة محكمة الغلق وتحفظ في درجة قناني م یومیا في بتمریـره مـع تنقیـة الراشـح ،دقـائق خمـس دقیقـة مـدة /دورة 1500 المسـحوبة بسـرعةالنبـذ المركـزي للمـادة الزرعیـة إجـراء - 4 .معقمةظروف مایكومیتر في 0.22بأوراق المرشح الدقیق دالتـون مـدة 6000ئـي یجز كالیكـول بـوزنوغمـر بـالبولي اثیلـین ،الـدیلزةبوضـعه فـي كـیس لمـ100كـز الراشـح إلـى ر 5- .المقطرساعة ثم بالماء 24مدة 7.2 برقم هیدروجیني PBSوٕاجراء الفرز الغشائي ضد دارئ الفوسفات ،ساعة48 .االستعمال م لحین 4وجفد وحفظ بدرجة ،)Whitaker and Granum )13وفق طریقة على در تركیز البروتینق -6 -:التمنیع اآلتي تضمنت تجارب مجـامیع كـل ثـالثعلـى قسـمت "ایومـ 30-25ر بعمـر مـن الـذكو فأرا) 75(استخدم في هذه التجربة :األولىالتجربة ة التمنیـع باسـتعمال لكل تفارا وأجری 25مكونة مجموعة ( تراكیـز منـه ةوحضـرت ثالثـ ES المستضـد مجموعـة عملیـ ایكرو غــرا60,30,15 ایكرو را 20وحقنــت كـل مجموعــة بجرعــة ، )مـل/ممـ ـا 21وبعــد غــم مـن وزن جســم الحیـوان / ممـ یومـ إلجـراء عملیـة Subcutaneous roteتحـت الجلـدي المسـلك باسـتعمال م غـ /میكروغـرام 10 حقنت بجرعة تقویة مقـدارها وبعد ثمانیة أیام حقنت كل المجامیع بجرعة التحدي ، التمنیع Challenge rote لخلبي رؤیس أولي حیوي في جوفها ا 3000لبالغة ا.Intraperitoneally -:ي اتفأرا ذكور قسمت كما ی 45استعمل في هذه التجربة :الثانیةالتجربة . مجموعة سیطرة موجبة حقنت بجرعة التحدي مباشرةاستعملت افار 25األولى شملت من عة و المجم . مجموعة سیطرة سالبة طبیعیةتركت فارا 25المجوعة الثانیة مكونة من ا 90شـرحت مجــامیع الفئــران بعـد ا مــن اإلصــابة بالرؤیسـات األولیــة وفحصــت األعضـاء الداخلیــة للحیــوان عیانیــ یومــ -:تي یأاموك) 14(وفق طریقة على واستخدمت معادلة لحساب النسبة المئویة الختزال األكیاس المائیة ��� یومـا مـن حقـن 90و 45بعـد ) Sanchez et al. )15 وفـق طریقـة علـى لمجـامیع الفئـرانالحساسـیة حـص أجـرى ف بعـد مـل 0.03وحقنـت بوسـادة القـدم الیسـرى للفـأر بحجـم ، B/ESللمستضـد مـل /ملغـم 0.03تركیـز وحضـر، جرعة التحدي ،مـل 1سـعة محقنـهواسـتعملت ، الملـح الفسـلجي المعقـم مـن نفسـه الحجمبـوسادة القدم الیمنـى وحقنت ،تعقیم منطقة الحقن باســتعمال ) سـاعة 3, 24, 48 (وقـیس فـرق السـمك فـي وسـادة القـدم الیســرى للفئـران قبـل حقـن المستضـد وبعـد الحقـن مــدة .Vernier القدمة النتائج ة فــي جوفهـا أ ـكل غیـر منــتظم اظهـر تشــریح فئـران مجموعــة السـیطرة الموجبــة وجـود األكیــاس المائیـ لخلبــي موزعـة بشـ هلخلبي وهي مغروسة بهذا وكانت ملتصقة بالكبد والمعدة والحجاب الحجز والغشاء. منتشرة أحیانا بشكل كتل متجمعةو ملـم وجـدار رقیـق شـفاف یبـدو مـن خاللـه السـائل 1-8بـین وبـدت بشـكل كـرات متباینـة الحجـم تراوحـت أقطارهـا، األعضـاء ). 1 ,2 ,3 ,4(الكیسي صورة ـغیرة الحجــم أو ظهـر تشــریح الفئـران الممنعــة وجـود األكیــاس المائیـة الثانویــة أیضـا ولكــن فـي بعــض منهـا فقــط وكانـت صـ ــم 1-2بقطـر ـاء ةوقلیلــمل ـدد ملتصـقة بالكبــد أو المعــدة أو األمعـ وكانـت نســبة الفئــران الممنعــة المصــابة ،) 4(صــورة العـ خــر وجـود أورام حبیبیــة فقـط بلغــت آلابعضـها واظهــر، )75مــن أصـل 5= الفئـران عــدد% 6.7( باألكیـاس المائیــة الثانویـة ).6(كما في الصورة )3= الفئران عدد% 4(نسبتها ة فـي الفئـران التجریبیـة الممنعـة وجـود انخفـاض واضـح أوضـحت نتـائج النسـبة المئویـة لالختـزال األكیـاس المائیـة الثانویـ ة بفئـران واظهـر ، لخلبيا في عدد األكیاس المائیة في أحشائها وجوفها ا مناعـة مطلقـة ضـد إصـابة التحـدي مقارنـ بعـض منهـ ة یـالفـرق فـي كفا )1(ویوضـح الجـدول ،اكیسـ) 13(التي بلغ فیها معدل األكیـاس المائیـة الثانویـة ةمجموعة السیطرة الموجب ایكرو غــرا 15 ,30 ,60(المحضـــرة ةبتراكیــزه الثالثــ B/ESالمستضــد كانـــت النســبة المئویــة لالختـــزال إذ ،)غــم / ممـــ التحـدي وبمعــدلعالیـة فـي االسـتجابة إلصـابة ةیــكفا B/ES واظهـر المستضـد ،التـواليعلــى % %91.5 ,%92.3 ,100 94.6.% ـة عــن تاختبـر ة فــي الفئــران التجریبیـ الحاصــل فــي وســادة القــدم ریــق قیــاس فــرق الســمكط االســتجابة المناعیــة الخلویــ یوما من حقن 90و 45و بعد مرور ، ) ساعة48 ، 24 ، 3( بمدة B/ESالیسرى للحیوان قبل وبعد حقن المستضد ـام 4ســاعات مــن حقـن المستضــد بعــد 3لیسـرى بعــد اأظهــرت النتــائج وجـود زیــادة فــي وســادة القــدم . جرعـة التحــدي مــن ایـ ملـم ووصـل 1.2ساعة انخفض الفـرق إلـى 24وبعد ،ملم 1.2وكان معدل فرق السمك ، اإلصابة لمجموعة السیطرة الموجبة مـایو 90سـاعات مـن حقـن المستضـد وبعـد ثـالث كانت اكبر زیـادة فـي السـمك بعـد ) . 1( ملم شكل 1ساعة إلى 48بعد 48ملـم وانخفضـت بعـد 1.4ساعة انخفض الفرق إلـى 24ملم وبعد 1.8كان مستوى فرق السمك ،اذجریبیةمن اإلصابة الت أما الفئـران الممنعـة المصـابة باألكیـاس المائیـة فإنهـا . السیطرة الموجبة التجریبیة لمجموعةاإلصابة ملم في 1.1ساعة إلى ة مــن حیـث أظهـرت التـدرج بفــرق السـمك فــي وسـادة القـدم لیســرى إذ كـان أعلــى فروقـا تشــبه فـروق مجموعـة الســیطرة الموجبـ وأوضـحت نتـائج تحلیـل التبـاین عنـد اعتمـاد مـدة . ساعة 24ثم یقل أكثر عند 24عند ثم انخفضساعات ثالثسمك عند وان الفروق كانت (p≤0.05)معنویة في سمك وسادة القدم عند مستوى احتمالیة "أقد أظهرت فروق یوما 90و 45الفحص .من اإلصابة "ایوم90 أكثر وضوحا بعد المناقشة RPMلزرعــي االمسـتخلص مــن تنمیـة عـدد مـن الرؤیســات األولیـة فـي الوسـط B/ESمستضـد االبـرازي اإلفـرازي لل I- ـات الطفیلیـة فیــه ة وخصوصــیة عالیـة لكثـرة الیـعلـى تحفیــز االسـتجابة المناعیـة الخلویــة والخلطیـة بكفا ةالقابلیـ 1964 مكونـ لوجـوده فـي السـائل الكیسـي وغـالف الرؤیسـات األولیـة والخالیـا الحشـویة Bاستعمل المستضد الحالیة الدراسة وفي ). 14( ه یعطـي التشــخیص المنـاعي النــوعي 6)(وجــدارها محــافظ الحضـنة يوفـ، لهـا ولهـذا المستضــد تفاعـل منـاعي جیــد كمـا انــ الن الفئـران ایومـ 30- 25لتمنیـع الفئـران بعمـر B/ESالمستضـد لمالدراسـات العلمیـة ولهـذا اسـتعتـه وهـذا مااكد، للطفیـل عمرها عن شهرین تكون أكثر قابلیة لإلصابة باألكیاس المائیة الثانویة من تلك التي یزید عمرها عـن الشـهرین دالتي ال یزی )17.( كمـا ، ة التمنیـعیـلمائیة الثانویة في المجامیع الممنعة مما یؤكد كفالوحظ انخفاض واضح في معدالت عدد األكیاس ا ــة لالختــزال ــي عــدد إن النســبة المئویـ ــز فـ ـة زادت بزیــادة تركیـ ــز B/ESاألكیـــاس المائیــة الثانویــ ا فــي التركیـ 60حتــى إنهـــ ا واصـغر حجمـا عنـد وان األكیاس التـي ظهـرت فـي مجـامیع الفئـران الممنعـة كانـت اقـل عـدد، %100وصلت إلى غم /ملغم صغیرة التي بدت بشكل كتل بیض، حبیبیة فقط ابعض منها أورامكما اظهر .مقارنتها مع أكیاس مجموعة السیطرة الموجبة ة بألیـــاف وتجمعــات مــن الخالیـــا االلتهابیــة الناتجـــة مــن التفاعـــل ـارة عــن رؤیســات أولیـــة محاطــ الحجــم وهــي فـــي الواقــع عبــ ة بهـا Eosinophils والحمضـة Neutrophils،العدلــة خالیـا : مثــل االلتهـابي للمضـیف ـا ، فــي األنسـجة المحیطــ وخالیـ وخالیـا مولـدة لأللیـاف ، Giant cellsوخالیـا عمالقـة Mast cells ، وخالیـا بدینـة ،Macrophagesبلعمیـة كبیـرة Fibroblasts كما تكثر فیها الخالیا البالزمیة Plasma cells )18.( (300قلتهـا قـد یرجـع إلـى حجـم جرعـة التحـدي من رغمبالأن وجود بعض األكیاس المائیة الثانویة في الفئران الممنعة كمـا إن الجـرع ، یـوم مـن التنمیـة 17إذ أظهـرت الرؤیسـات حركـة حیویـة حتـى بعـد ،وحیویة الرؤیسات األولیـة، )رؤیس أولي وكـذلك زیــادة تركیــز المستضـد المحقــون فــي ،داخـل جســم المضــیف يالطفیلــلیــة الكبیـرة تــؤدي إلـى تثبــیط منــاعي نتیجـة لفعا ة فیهـا بـالرغم مـن تمنیعهـا أظهـرت مجموعـة السـیطرة . الفئران مما اضعف مقاومتها للمرض وقاد إلى ظهـور األكیـاس الثانویـ ة فیهــا ـائل غشــاء رقیــ غیــر ملتصــقة باألعضـاء ومفــردة وذي الموجبـة وجــود األكیــاس المائیــة الثانویــ ق یبــدو مــن داخلــه السـ ).20و19( في دراستین سابقتین و جاء ذلك مطابقا لما وجد ،الكیسي ـتعماله لتولیـد مناعــة ضـد األكیــاس المائیـة فــي B/ESلمستضــد ل سـتنتج مــن ذلـك إنی استضـدادیة عالیــة ویمكـن اسـ .ة عالیة في التمنیعیوسطیة وبكفابوصفها مضائف الفئران المصادر 1.Vuitton, D.A.; Zhang, S.L.;Yng,Y.; Godot,V.; Burton, I.; Mantion, G. and Bresson-Hadni, 55.-51: 55Int., Parasitol. .S.(2006) 20.-: 1667 Immunol.S. and Dixon,J.B.(1989). Clarke,-Marshaii ; D.A Cox,.2 433.-: 4322Lancet, and Avila, R. (1968) . .P Abrantes, .3 17.-5 :64., Acta Trop D. (1997). D. and Heath, .B Holcman,.4 478.-: 47120 . J. Parasitol.Int M.W. (1990). Lightowlers,.5 .349-:337 65J. Parasitol., .J.F. (1979) Williams, .6 104.-:10171Hyg., Med. Trop. .Soc. .Roy M. (1977) . Trans R, Matossian, .7 8. Auer, H. and Aspock, H. (1986). Studies on antigens from In vitro cultivated protoscolices of Echinococcus multilocularis and their possible use in the serodiagnosis of human Echinococcosis, Taeniasis (cysticercosis) and Hydatidosis (Echinococcosis). Second Int. Symp.(2-7) Des : 7-15. (Abstract).693-:68562 h.Ums Ther., (2005). B. Gottstein, .9 43.-:3955Int., W.(2006). Parasitol. M. Lightowlers, .10 11. Oriol, R.; Williams, J. F. ;Perez-Esandi, M.V. and Oriol, C.(1971). Am.J.. Trop. Med. 574.-: 56920Hyg., : 20Hyg. Med . R.(1971). Am. J. Trop.and Oriol, V. Esandi, M.-Perez F.; .J Williams, .12 575-579. 159.-:156109Ann.Biochem.,.) 1980. (L M. Granum, A. and Whitaker, .13 24.-:196J. Parasitol., D.(1976). Int. Heath, D. .14 165.-:15746 ,Parasitol. Exp. .1978). (Z Khan,-Ali .15 16. Sanchez, F.; Garicia, J.; March, F.;Gardenosa, N.; Colli, P.; Munoz, C.; Auladell,C.and 447.-:44115 Immunol.Parasite Pyats,G.(1993). 17. Maddison, S. E.; Slemenda, S. B.;Schantz, P.M.;Fried, J. A.;Wilson, M .and Isang, V.C.W. 383.-:37740 Hyg., Med. Trop. J. 1989).( 36.-:1816Rev., Microbiol. Clin. P.(2003). D. McManus, and. J Li, W.; Zhang, .18 19. AL-Saegh.V.A.(1978).Behavior of the larval stage of Echinococcus granulosus in laboratory animals. M.Sc.Thesis, Coll. Med.,Univ. Baghdad . 20. Varela-Diaz,V.M.;Williams,J.F.;Cottort,E.A. and Williams,C.S.F. (1974) Survival of cyst of Echinococcus granulosus after transplant into homologous and .heterologous hosts. J. 612.-:60860Parasitol., لمئویة الختزال) 1(جدول ومجموعتي B/ESاألكیاس المائیة لمجموعة الفئران الممنعة بالمستضد عدد النسبة ا لبة .السیطرة الموجبة والسا الفئ��ران الممنع��ة بتراكی���ز مایكرو B/ES(المستضد )غم/مغرا النسبة المئویة لالختزال عدد األكیاس المائیة ل االنحراف المعد المعیاري 15 1.1 0.95 91.5 94.6 30 1.5 0.85 92.3 60 0 0 100 0 0 3.27 13 سیطرة موجبة 0 0 0 0 سیطرة سالبة 2009) 3( 22مجلة ابن الهیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد ملم 1-2فأر مصاب باألكیاس المائیة بقطر :1صورة ملم 2-5 باألكیاس المائیة بقطر فأر مصاب: 2صورة 2009) 3( 22مجلة ابن الهیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد ملم 8فأر مصاب باألكیاس المائیة بقطر : 3صورة ملم10 فأر مصاب باألكیاس المائیة بقطر توضح : 4صورة 2009) 3( 22مجلة ابن الهیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد ملم 1-2احد الفئران الممنعة الحاویة على أكیاس مائیة بقطر ) :5(صورة حبیبیةال ورام ألاحد الفئران الممنعة الحاویة على أ: ) 6(صورة 2009) 3( 22والتطبیقیة المجلد مجلة ابن الهیثم للعلوم الصرفة IBN AL- HAITHAM J. FO R PURE & APPL. SC I VO L.22 (3) 2009 Immunization of White Mice against Hydatid Cyst Using Antigen B and Excretion - Secretion Antigen 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1.8 2 ى سر ك وسادة القدم الی سم ق ل فر معد ) ملم ( في B/ESساعة من حقن المستضد 3 , 24 ,4متوسط وسادة القدم الیسرى بعد 2)(شكل یوما من حقن جرعة التحدي 90الفئران الممنعة بتراكیزه الثالثة بعد في B/ESساعة من حقن المستضد 4,24,3متوسط وسادة القدم الیسرى بعد 1)(شكل یوما من حقن جرعة التحدي 45الفئران الممنعة بتراكیزه الثالثة بعد Con+ 60 30 15 Con+ 60 30 15 Con+ 60 30 15 ساعة 48ساعة بعد 24ساعة بعد 3بعد Con+ 60 30 15 Con+ 60 30 15 Con+ 60 30 15 ساعة 48ساعة بعد 24ساعة بعد 3بعد ى سر ك وسادة القدم الی سم ق ل فر معد ) ملم ( W. R. Ali Department of Biology, College of Education, Ibn-AL-Haitham, University of Baghdad. Abstract The aim of this study was toward the possibility of producing antigen that has the ability to stimulate the immune response against the infection with the hydatid cyst. To do so antigens were extracted from sheep hydatid cyst fluid of Echinococcus granulosus .These were: 1- The hydatid cyst fluid called antigen B. 2- Excretion-secretion called ES antigen. 3-B/ES antigen is a mixture (1:1) of the above two antigens. Three concentrations (15, 30 and 60 µg/ml) from antigen B/ES were prepared to immunize the white mice (males) with 20 µg/gr body weight and one booster dose (10 µg/gr) to stimulate immunity . The efficiency of these antigen concentrations against secondary infections was investigated by the calculation of the reduction in percentage of cysts numbers The results revealed that the reduction percentages of cyst in immunized group were 91.5% , 92.3% and 100% for concentration antigen 15, 30 and 60µg/g for Thr Immunized groups respectively.. There was a significant difference (p≤0.05) between and the positive control group infection. After 45 days of infection, the sensitivity test showed that the highest cellular immune response occurred after three hours of the injection of the B/ES antigen in the left footpad of the animals. This response was measured through the increase in the thickness of the footpad. The reaction was clear in the positive control and in the infected immunized animals. When the test was repeated after 90 days of the infection, the results were similar to the above, but the reaction was more acute than in the first time especially in the positive control groups of mice.