2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد تجاه الفطرین propolisللمستخلص الكحولي للعكبر دراسـة الفعالیة الضد فطریة Botrytis cinerea, Altrnaria sp للعدید من االمراض النباتیة المسببان احمد ساهي دویش الجامعة المستنصریة ، لعلومكلیة ا، قسم علوم الحیاة ـة الخالص ـــر ـــانولي للعكبـ ــز مختلفــــة مــــن المســــتخلص االیثـ ـأثیر تراكیــ ـــد تـــ ـــرین إزاء (propolis)نفـــذت هــــذه الدراســــة لتحدیـ الفطـ .المسببة للعدید من االمراض النباتیة ) Botrytis cinerea, Altrnaria sp(الناقصین .احتواء العكبر على الفالفونات وبصورة اساسیة IRالفعالة باستخدام تقنیة وقد اظهرت نتائج الكشف عن المركبات إلـى تثبـیط النمـو كلیـا علـى مـل/ملغـم )5(إذ أدى التركیـز العـالي ،ة التثبیطیة العالیـة لهـذا المسـتخلص یبینت التجارب الكفا . التأثیرفي مل/ملغم ) 1.25و 2.5(زان بینما تفاوت التركی، ) PDB(و السائلة ) PDA(األوساط الغذائیة الصلبة ــات مــل المرشــوش علــى / ملغــم ) 5(أظهــرت نتــائج البحــث قــدرة المســتخلص الكحــولي للعكبـــر عنــد التركیــز كمــا اوراق نبـ ـــریات في منع تطور أصابه المرض وحقق حمایة جیدة بشكل ملفت الباذنجان و ش عند الـر السیماثمار الخیار المصابة بالفطــ فـي حـین تفاوتـت قــدرة ، مـن خــالل منـع نمـو وانتشـار الفطـر بشـكل كامـل سـاعة مـن التلقـیح بـالفطر 48 و24بالمسـتخلص بعـد سـاعة مـن التلقـیح بـالفطر علـى منـع حـدوث اإلصـابة بالمقارنـة مــع 48 و 24 قبـلالمسـتخلص الكحـولي للعكبـر المرشـوش .ضي ظهر نمو بطيء للمسبب المر ،اذمعاملة السیطرة المقدمة خالل جمع المكونات االساسیة له من طة حشرة النحل مناعبارة عن مادة صلبة راتنجیة تنتج بوس (propolis)العكبر خلیة النحل وذلك وخشب الحور لسد الفتحات والثقوب الموجودة في ،مختلف انواع النباتات واالشجار السیما اشجار الصنوبر الفعالیة العالیة يتعد هذه المادة من المضادات الحیویة الطبیعیة ذ.لمنع دخول مختلف انواع الممرضات الى داخل الخلیة [1,2] .لمختلف انواع البكتریا والفیرسات والفطریات وبقیة انواع الممرضات لمنـاطق وجـود حشـرة النحـل وذلـك بـاختالف وتنـوع المصـادر التركیب الكیمیـائي للعكبـر بـاختالف التوزیـع الجغرافـيیختلف ـائي للعكبـر یتبـاین مـع تنـوع المصـدر النبــاتي للحشـرة [3] . النباتیـة اتج مـن حشــرات نـلـوحظ ان العكبـر ال، اذ ان التركیـب الكیمیـ ,pinobanksin ,pinocembrin , chrysin یحتـوي علـى poplarالنحـل المعتمـدة فــي تغـذیتها علــى خشـب الحـور galanagin , caffeic acid and ferulic acid بینمـا لـوحظ ان العكبـر المنـتج مـن حشـرات ،[4] واسـترات هـذه االحمـاض یحتـوي علـى بعـض المركبـات ذات الـوزن الجزیئـي العـالي Eucalyptus النحل المعتمدة فـي تغـذیتها علـى اشـجار الیوكـالبتوس وامـل یعتمـدعلى اخـتالف الع الـى االخـرىتالف التركیـب الكیمیـائي للعكبـر مـن منطقـة ان اخ .lupeol alkanoates [5]مثل اجریـت العدیــد مــن [6]لحشــرة النحــل مـن مكــان الـى اخــر اكثـر مــن اخــتالف المصـادر النباتیــة genetic factors الوراثیـة حتوي في تركیبه على العدید من اذ ی، الدراسات والبحوث على العكبر السیما في السنوات االخیرة الهمیتها الطبیة 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد ة متعـددة مضــادة للعدیــد مــن انــواع الســیماالمركبـات الفعالــة والمهمــة و ـات الفینولیـة والفالفونــات التــي تمتلــك فعالیــ المركبـ ـد مـن :مثــل ،انــواع الفایروسـات عــن طریـق تثبــیط بعـض االنزیمــات المهمـة الموجــودة فیهـاالبكتریـا والفطریـات وتثــبط نمـو العدیـ Reverse transcriptase , Protease [7,8] .بعض الطفیلیات الممرضة اغشیة وعملها على تحطیم ضــمن Monilialesالتابعـة لرتبـة Dematiaceaeالعائـدة للعائلــة Botrytis cinerea, Altrnaria sp وتعـد الفطریـات ـد مـن األمـراض النباتیـة ) Imperfect fungi )9 الفطریـات الناقصـة الــ یســبب اذ،تعــد أحـد المسـببات المرضـیة للعدیـ Altrnaria sp مـرض تعفـن البـذور والجـذورSeed & Root Rot و اللفحــات المتـأخرة وأمـراض تبقـع االلترنـاري Late blight &Spot مـرض تقـرح السـاق االلترنـاري علـى العدیـد مـن النباتـات وAltrnaria Stem Canker .روالفـط Botrytis cinerea أنه یسبب مرض العفن الرمادي . Gray mold [9,10]فـ یـة فقـد اتجهـت أغلـب األبحـاث والدراسـات الحدیثـة إلـى ئایوبسـبب اآلثـار السـلبیة التـي یخلفهـا االسـتعمال العشـوائي للمبیـدات الكیم نباتات الطبیـة و البریـة السـتعمالها للحـد مـن العدیـد مـن المسـببات المرضـیة التـي تسـبب خسـائر اقتصـادیة كبیـرةاالستفادة من ال [11]. علـى هـذه المسـببات المرضـیة ومــدى ) propolis(التحـري عـن فعالیـة المسـتخلص الكحـولي للعكبـر الـى هـدف هـذا البحـث میـائيو التعـرف علـى المحتـوى الكی عدیـدة بیعیـة ضـد هـذه الفطریـات باسـتخدام طرائـقالقدرة التثبیطیة التي تمتلكها هـذه المـادة الط .في هذه الدراسة للعكبر المستعمل المواد و طرائق العمل الفطریات الممرضة عزل - Altrnaria sp عــزل ال فـاتیح من ثمار باذنجان و باالعتمـاد علـى م Botrytis cinereaمن نبات الطماطم في حین عزل . ـا [10]التصنیف المعتمدة PDA Potato Dextrose)(جـرى عـزل وتشـخیص الفطریـات علـى وسـط الدكسـتروز البطـاطـ Agar تم تنقیة العزلتان من خالل نقلهما إلى أطباق اذPDA جدیدة. جمع عینات العكبر - ـاني وكـانون الثــاني عـام –موجـودة فــي قضـاء الخــالص ن خالیـا نحــل مــ 2006جمعـت عینـات العكبــر خـالل شــهري تشـرین الثـ . محافظة دیالى ة ثـم طحـن رض التخلص من االتربة العالقة بهتم غسل العكبر بالماء العادي ثم الماء المقطر لغ وترك لیجـف بدرجـة حـرارة الغرفـ .م ˚ 4العكبر بمطحنة كهربائیة وحفظ المسحوق في عبوات جافة لحین االستعمال وفي درجة حرارة :شخیص المركبات الفعالة الموجودة في العكبرت- Infraredاالشـعة تحـت الحمـراء بجهـاز امتصاصیة قیست IR (Infrared(التشخیص باستخدام طیف االشعة تحت الحمراء Spectroscopy كلیـة –وباستخدام اقراص من المركب الذي یراد الكشف عنه فـي صـلب برومیـد البوتاسـیوم فـي قسـم الكیمیـاء . الجامعة المستنصریة / علوم ال ) :propolis(تحضیر مستخلص العكبر - طة امدة ساعة واحدة بوسثم خلط المزیج % 95مل من الكحول االثیلي بتركیز 50غم من مسحوق العكبر واضیف له 2وزن علیا الحاویة على المستخلص ساعة بدرجة حرارة الغرفة ، بعدها سحبت الطبقة ال 24، بعدها ترك مدة Vortexالمازج الدوار راشح السابق راشح واضیف الى ال .الكحولي ، ثم كررت العملیة على الراسب المتبقي وجمع ال 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد بخیر ) Whatman No.1(رشح المحلول بواسطة ورق الترشیح بخیر ،ثم عرض الراشح للت في الفراغ باستخدام جهاز الت رة مستخلص تم ، بعدها وزن 45الدوار بحرا . 12] [المادة الجافة المتبقیة التي هي عبارة عن ال : لمستخلص العكبر Antifungal activityدراسة الفعالیة التثبیطیة .لشعاعي للفطریات الممرضةاتأثیر تراكیز مستخلص العكبر في النمو - لمسـتخلص الكحـولي للعكبـر ل) Stock Solution(مـل مـن المحلـول األصـلي أضیف (10,5,2.5) اذ [13]دمت طریقة استخ ــز ) 5,2.5,1.25(التركیــزلغـرض الحصــــول علـى PDAمـل علــى التـوالي مــن وسـط ) 10,15,17.5(مــل إلـى /ملغـم 10بتركیــ ة مكـررات لكـل تركیـز مـــع وجـود أطبـاق السیطـــرة .اسـة المسـتخدمة فـي هـذه الدر وهـي التراكیـز مل على التـوالي/ ملغم بواقـع ثالثـ طة ثاقـب املـم مقطـوع بوسـ 6ثم تركت اإلطباق لتتصلب أعقبها زرع اللقاح الفطري المؤلف من قرص بقطـر ) .بدون مستخلص( المئویـة لتثبـیط النمـو حسـبت النسـبة . مـدة أسـبوعینضـنت األطبـاق بدرجـة حـرارة الغرفـة ح. فلین من حافـات مزرعـة بعمـر أسـبوع :وحسب المعادلة اآلتیة معاملة السیطرة إلى حافات الطبق لشعاعي عند وصول النمو في ا النمو للفطرامعدل طباق السیطرة ) سم ( لشعاعي معاملةاللشعاعي في أطباق امعدل النمو -في أ X 0 10 ------------------- --------------------------- % = نسبة تثبیط النمو ألشعاعي معدل النمو ألشعاعي في أطباق السیطرة :دراسة تأثیر تراكیز مستخلص العكبر في الوزن الجاف للفطریات الممرضة - الموصـدة (وعقـم فـي جهـاز التعقـیم PD Brothحضر وسط غذائي سـائل نـوع اذ مع أجراء تعدیلٍ بسیط [14] أتبعت طریقة كـررت كـل معاملـة ،دون أیـة إضـافة مـن مـع تنفیـذ معاملـة المقارنـة، راد دراسـتها یـ الـذي أضیفت تراكیز المستخلص بعد ذلك،) ملـم مـن مسـتعمرة كـل فطـر ممـرض فـي حاضـنة 6 بقطـر حضنت الدوارق بعد تلقیح كل معاملة بقرص واحـد و،مرات ثالث ة حــرارة الغرفـة طة ملقــط وغسـل جیــدا االفطــري بعـد نهایـة مــدة التحضـین بوسـسـحب الغـزل ، مـدة أســبوعین )˚م 25( فـي درجـ م70بالماء المقطر المعقم و جفف في الفرن في درجة o ، أخـذت األوزان الجافـة وحسـبت النسـبة المئویـة لتثبـیط النمـو الجـاف كمـا .في الفقرة السابقة : تحضیر اللقاح الفطري - PDAطة إمرار قضیب زجاجي معقم على وسط ابوس Altrnaria sp., Botrytis cinereaابواغ الفطرین تجمع أعداد تبوحسجمع العالق في قطارة معقمة و مل ماء مقطر معقم 10حاوي على غزل الفطر بعمر أسبوعین بعد إضافة 10*1وتم تخفیف العدد إلى Haemocytometerطة شریحة العد ااالبواغ بوس ستخدم في لتر وهذا هو المستوى الم/بوغ 6 .التجارب التي أجریت Altrnaria sp., Botrytisتأثیر المستخلص الكحولي للعكبر المرشوش على أوراق نبات الباذنجان الملقح بالفطرین - cinerea بفترات زمنیة معینة: قاتها فـي المـاء وتـم قطعت أوراقها وغمـرت سـویاذ ،نباتات باذنجان من النوع المحلي بعمر شهرین تاخذاذ ]15[اتبعت طریقة لعریض تلقیحها بطریقة البقعة المكویة لغرض الحصول على تقویم كمي لإلصابة بالفطر وذلك بتسخین الرأس ا 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد سـم ثـم أضـیفت قطـرتین 0.5 قعـة المالمسـة بقطـر إلـى مـوت الب فأدى ذلكلمس سطح الورقة لمسمار صغیر على لهب ثم مكــررات و حســـب 3مــل بواقــع /ملغــم 5 زوبتركیــمــن عــالق ســبورات الفطــر المحضــر ورشــت بالمســتخلص الكحـــولي للعكبــر ة لقحـت بـالفطر ). سـیطرة (فقـط Botrytisلقحـت المجموعـة األولـى بـالفطر : یةاآلتالمعامالت 24 وبعـد Botrytisمجموعـ مجموعــة رشــت ، سـاعة رشــت بالمسـتخلص 48 وبعـد Botrytisمجموعــة لقحـت بــالفطر ،رشــت بالمسـتخلص سـاعة سـاعة لقحــت 48المجموعـة األخیـرة رشـت بالمســتخلص وبعـد . Botrytisسـاعة لقحــت بـالفطر 24بالمسـتخلص وبعـد . .Altrnaria sp لفطرها بالنسبة الى انفس وقد اجریت المعامالت .Botrytisبالفطر ساعة بعد التلقیح بالفطر وذلك بوضع كیس نایلون علیها 48حفظت المعامالت بجو المختبر مع توفیر الرطوبة الالزمة مدة .ثم أزالته و تركت المعامالت مدة عشرة أیام مع مالحظة جمیع التغیرات التي تطرأ على األوراق على مدد Altrnaria sp., Botrytis cinereaبالفطرین ر الملقح الخیا ثمارتأثیر مستخلص العكبر المرشوش - :زمنیة معینة ــة القاصـر التجـاري بتركیـز اأخذت ثمــار خیـار محلیـه وبعـد غســـلها و تعقیمهـا سـطحیا بوس اذ ]15[اتبعت طریقة %0.06 طـ تـم عمـل .مكـررات3 موعـة تضـمخمـس مجموعـات كـل مج علـى مدة نصف دقیقة ،جففـت و قسـمت) هایبوكلورات الصودیوم( بواقـع قطـرتین لكـل Botrytis cinerea سـم ثـم لقحـت بعـالق الفطـر 0.5ثقبین عند طرف كل ثمرة بطریقة البقعة المكویـة بقطـر مجموعة من ثمار خیار لقحت بالفطر وبعد : تیةمل وحسب المعامالت اآل/ملغم 5بتركیز بمستخلص العكبر بقعة ورشت مجموعـة مـن ، بالمسـتخلص سـاعة رشـت48 مجموعة من ثمار خیار لقحت بالفطر وبعـد ، بالمستخلص ساعة رشت24 ساعة 48مجموعة من ثمار خیار رشت بالمستخلص وبعد . ساعة لقحت بالفطر 24وبعد صبالمستخلثمار خیار رشت لفطـرقـد اجریـت المعـامالت نفسـها بالنسـبة الـى او . طرةلقحـت بـالفطر والمجموعـة األخیـرة مـن ثمـار خیـار ملقحـة بـالفطر للسـی Altrnaria sp. . سـاعة للمحافظـة علـى الرطوبـة الالزمـة وتـم متابعـة تطـور المـرض علــى 48المعـامالت فـي أكیـاس نـایلون مـدة توضـع بعـدها .ثمار مدة عشرة أیام مع حساب معدل قطر المتعامد لتوسع اإلصابة التحلیل االحصائي - للكشف عن Least Significant Difference (LSD)النتائج احصائیًا باستخدام طریقة الفرق المعنوي االصغر تلحل . [16]ساعة مع السیطرة 48و 24مصادر الفروقات المعنویة بین قیم المعامالت لرش مستخلص العكبر قبل وبعد النتائج والمناقشة ) propolis( كبر دراسة المواد الفعالة الموجودة في الع- ة فـي تعیـین المجموعـة الكیمیائیـة التركیبیـة ممـا استخدمت مطیافیة االشعة تحت الحمراء في تحلیل العكبر وذلـك ألهمیتهـا البالغـ .[17]یعیین في معرفة المادة -1608)لمنطقــة اظهـرت مطیافیــة االشـعة تحــت الحمـراء للمســتخلص االیثــانولي للعكبـر اهتــزاز مـط لمجموعــة الكاربونیـل عنــد ا كذلك ظهر اهتزاز مط متناظر وغیر متناظرلمجموعة الكاربوكسیل في المنطقة 1-سم (1643 الهایـدروكاربون المشـبعة (C-H)اهتـزاز مـط لمجموعـة 1-سـم (2990-2850)كمـا اظهـرت المنطقـة 1-سم (1165-1271) ـامیع ـة بمجـــ ــر اهتـــزاز مــــط فـــي المنطقــــة ، CH2,CH3والمرتبطــ ـــى مجموعــــة 1-ســــم (3450-3500)فـــي حــــین ظهــ تـــابع الـ . (1)الهایدروكسیل وكما موضح في الشكل رقم 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد متعــددة اذ تعــد الفالفونـات مركبــات فینولیـة ،النتـائج علــى ان الفالفونـات هــي المـواد الرئیســة الموجـودة فــي المسـتخلص هــذه تـدل الكثیـر مــن فـي رتي الكـاربون الثالثـة والسادسـة الحلقـة االروماتیـة وتعمـل الفالفونـات مـادة مضـادة ومـؤثرة الهایدروكسـیل ویـرتبط بـذ تكمـن فعالیـة هـذه المركبـات فـي قابلیتهـا علـى تكـوین معقـد مـع جـدار الخلیـة البكتیریـة والعمـل اذ،سـات و االحیـاء المجهریـة والفایر .[18]اءعلى تمزیق الغش اذ ، والجزائـر ،والیونـان ،وتركیـا ،في دراسة التركیب الكیمیائي للعكبر فـي بلغاریـا [19]وهذه النتیجة تتفق مع الدراسة التي اجراها . وجد انها تحتوي بصورة اساسیة على الفالفونات لشعاعي للفطریاتاتأثیر تراكیز مستخلص العكبر في النسبة المئویة لتثبیط النمو - ـــرین اإلـى أن أعلـى نسـبة مئویـة لتثبـیط النمـو ) 1(نتائج في الجـدول الدل ت ة الفطـــ ,.Altrnaria sp لشـعاعي سـجلت فـي معاملـ Botrytis cinerea في %)81و 73.75(وسجل أقل نسبة مئویة للتثبیط مل/ ملغم 5عند التركیز %)(100بلغت النسبة اذ . مل/ م ملغ 1.25عند التركیز ینمعاملة الفطر ــادة ا ــیط النمــو اذ تــدل النتــائج أن زیـ ــى زیــادة فـــي النســبة المئویــة لتثبـ لشــعاعي علـــى الوســط الغـــذائي اتركیــز المســتخلص أدت إلـ ن المسـتخلص االیثـانولي للعكبـر أالـى [20]تتفـق مـع مااشـار الیـه ) 1(ان النتـائج الموضـحة فـي الجـدول رقـم . PDAالصـلب ووجد ان الفعالیـة مشـابهة لفعالیـة c. albicansالناتج عن االصابة بالخمیرة candidiasisراض یستخدم وبنجاح في عالج ام اذ اشارت العدید من الدراسات الى التاثیر الضد مایكروبي للعكبـر الـذي یعـزى لوجـود العدیـد مـن . Nystatinالمضاد الفطري ـة فضــًال عــن وجـــود ،والتربینــات الثالثیــة ،الحمــاض الفینولیــةواســترات ا ،االحمــاض االروماتیــة :،مثلالفینولیــة المركبــات والثنائیـ [21]الفالفونات راسة تأثیر تراكیز مستخلص العكبر في النسبة المئویة لتثبیط الوزن الجاف للفطریات الممرضةد- ة متوا النمــو فقــة مـع نتـائج تثبـیطجـاءت نتـائج تـأثیر تراكیـز المســتخلص األیثـانولي للعكبـر فـي الــوزن الجـاف للفطریـات الممرضـ ـائل نمـو فقـد أخفـق، ) 2(الجـدول كمـا موضـح فـي لشـعاعيا تركیـزالحـاوي علـى PD Brothالفطـرین كلیـا علـى الوسـط الســـ مــل/ملغـم )2.5,1.25(ین عنـد التراكیـز االقـل لفطـر لتثبـیط الـوزن الجـاف لالنسـبة كانـتفـي حـین ، مـل / ملغـم ) (5المسـتخلص الفطـر الـوزن الجـاف اذ بلغت اقـل نسـب لتثبـیط ،الشعاعي للفطرین على الوسط الصلب النمو تثبیطجربة ل في تتختلف عما سج Altrnaria sp 46.8% بالنسـبة للفطـر %53.4 مـل فیمـا كانـت /ملغـم 1.25عنـد التركیـزBotrytis cinerea عنـد نفـس .التركیز Altrnaria sp., Botrytisاق نبات الباذنجان الملقح بالفطرین أور فيتأثیر المستخلص الكحولي للعكبر المرشوش - cinerea زمنیة معینة على مدد. ســاعة مـــن التلقــیح بــالفطر 48او 24المســتخلص الكحـــولي للعكبــر ســـواء قبــل بســجلت معاملــة أوراق الباذنجـــان المرشوشــة Botrytis cinerea منــع اذ ،سـاعة 48,24 اخـتالف كبیــر مـع معاملـة السـیطرة أو مــع معـامالت الـرش بالمسـتخلص بعــد وكمـا هـو موضـــح فـي المعاملـة ولـم تظهـر أي أعـراض للمـرض فـي موقـع التلقـیح نمو الفطر بالكامل مـن بـدء مستخلص العكبر حیویـة الفطـر ومنــع نمـوه و انتشـاره مــن فــيرة مباشـرة أثــر بصـو أن المســتخلص الكحـولي للعكبـر اذ. )2(والشـكل ) 3 (ـدول الجـ ـات االیضـیة للفطــر خـال سـاعة فقــد 48,24بعـد تلقیحهــا بـالفطر سـواء بعــد بالمســتخلصأمـا األوراق المرشوشـة .ل منعـه للفعالیـ (1-1.5)البقعـة وقـد بلـغ معـدل قطـر ، التجربـة ءللفطر أعقبه توقف لتطور االصابه في الیوم السادس من بد بطیأ" اأظهرت نمو ـال أن الفتــرة ــیة لبـدأ نمــو الفطــر و مســتخلصالتـي ســبقت الـرش بالسـم وٍیمكــن تفسـیر هــذه النتیجـة علــى أسـاس احتمـ كانـت كافـــ ـــد الرش أنه حدث خمول للفطر بع آال.استقراره على النبات وظهور أعراض المرض 2010) 1( 23المجلد مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة ـاره لمـا للمسـتخلص وتو أثیر قـــــف النتشـــ ــــج تطـور بقــــع االصـابه علـى أوراق نبـحوتـم . الفطـر فـيمـن تـ ـات الباذنجــان سـاب نتائــ ـــرة اذ أكتــف Botrytis cineraالمصاب بالفطر ة ، وسـجل زیـادة فـي معـــــمل تـــطور البقـع إلـى أصـي معاملـة السیطـ دل ـابه ناجحـ .وتمثلت األعراض على األوراق بوجود سبورات رمادیة اللون تتطایر بسهوله مع كتله لنمو الفطر. سم) 4.8( قطر بلغ ة ثمــار الخیـار الم مـل فقــد ظهــرت أعـراض المــرض فــي ثمــار /غــممل 5بتركیــز رشوشــة بالمســتخلص الكحـولي للعكبــر أمـا تجربــ pectinaseنتیجـة إلفـرازات الفطـر اإلنزیمیـة مثـل أنـزیم البكتنیـز یج الثمـرة حول اللقاح مع هرس لنسبنمو بني ةالسیطرة متمثل وقد بلغ معدل قطـر االصـابه ).3(أدى إلى تلون وموت النسیج النباتي وترك الثمرة منكمشة و بنیة و لینة كما في الشكل [9] ).4(سم كما موضح في الجدول رقم 6 سـم 0.5سـاعة وبقـى معـدل القطـر 24و48سـواء قبـل مسـتخلصر المرشوشـة بالفـي حـین لـم تظهـر األعـراض علـى ثمـار الخیـا سـم علـى ) 1,2(سـاعة بلـغ 24و48بعـد مسـتخلصبینما حدث نمو بسـیط للفطـر علـى ا لثمـار المرشوشـة بال.التجربة طوال مدة .نوهي نتیجة تتفق مع تجربة أوراق الباذنجا)) 4(الجدول (التوالي في الیوم األخیر للتجربة Altrnaria اسـتخدام الفطـرعنـد هانفسـ وقد دلت النتائج التي تم الحصول علیها الى تقارب النتـائج المتحصـل علیهـا مـن التجربـة sp 6(و)5( ینوكما موضح في الجدول( . p <0.05عنـد عـدم وجـود فـرق معنـوي (LSD)كما دلـت نتـائج التحلیـل االحصـائي باسـتخدام طریقـة الفـرق المعنـوي االصـغر ــیطرة كــذلك عـــدم وجــود فـــرق معنــوي عنـــد یللیــوم ـامالت و السـ بـــین معــامالت الـــرش p<0.05ن االول والثــاني ولجمیـــع المعـ عند معـامالت الـرش بالمسـتخلص بعـد p<0.05في حین لوحظ وجود فرق معنوي كبیر عند ،ساعة 48و 24بالمستخلص قبل . ساعة من االصابة والسیطرة 48و 24 فـي ةوحصـول االصـاب المـرضعلـى أحـداث Botrytis cinera ،Altrnaria sp ین نتج أن قابلیة الفطـر وعلیه یمكن أن نست بالمسـتخلص الكحـولي للعكبـر وبتركیـز یمكـن أن تتضـاءل عنـد رشـها) سـواء كـان أوراق الباذنجـان او ثمـار الخیـار(العائل النباتي جانبیـة سـواء علـى أعـراضن ان یسـبب أي و دبـلمسـتخدم واطـئ و وكـذلك كـون التركیـز ا قبـل أحـداث المـرضالسـیما مـل /غـممل 5 ة یمكـن أن تــدفع البـاحثین إلـى أجــراء المزیـد مـن الدراســات المستفیضـة حـول قابلیــة . [22]او الحیـوان اإلنسـانصـحة وهــذه النتیجـ تصادیة كبیرةها أن تسبب خسائر اقمختلفة یمكن ل ةهذا المستخلص في الحد من اإلمراض التي تسببها مسببات مرضی References 1.Koo, H. ;Rosalen, PL.; Cury, JA.; Ambrosano, GM B.; Murata, RM.; Yatsuda, R.; Ikegaki, M.;Alencar, SM. and Park, YK.(2000) Effect of a new variety of Apis mellifera propolis on mutans streptococci. Curr Microbiol 41: 192-196. 2.Popova, M.; Silici, S.; Kaftanoglu, O.; Bankova, V.(2005). Antibacterial activity of Turkish propolis and its qualitative and quantitative chemical composition. Phytomedicine 12: 221-228. 3.Velikova M., Bankova V., Tsvetkova I., Kujumgiev A. and Marcucci M. C. (2000), Antibacterial ent-kaurenefrim Brazilian propolis of native stingless bees. Fitoofterapia 71, 693D696. 4.Bankova , V.; Popova, M .; Bogdanov, S .;SABATINI, A.(2002).Chamical composition of European propolis; expected and unexpected results. Z –naturforsch- [c]; 57(5-6):530-3 5. Kosalec I, Bakmaz M, Pepeljnjak S.(2003). Analysis of propolis from the continental and Adriatic regions of Croatia. Acta Pharm 53: 27 - 5 285. 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد 6.Custodio , A.R.; Ferreira , M.M.C.; Negeri, G.; Salatino ,A.(2003) .Clustering of comb and propolis waxes Based on the Distribution of Aliphatic constituents .j .Barz .Chem . Soc ., 14 (3) : 354-357 . [Article]. 7.Havsteen ,B.H. (2002) .The biochemistry and medical significance of the flavonoids 202. –3) : 67 -(2 96Ther ., -.Pharmacol 8. Castaldo , S. & Capasso , F. (2002) .Propolis an old remedy used in modern medicine . 6.-( suppl 1) : 1 73Fitoterapia 9- Agrios. George, N. (1997). Plant Pathology . 4th. Edition. وزارة الثقافــة . مطبعـة أدورد للطباعـة الفنیـة الحدیثـة . أفـات الطمـاطم . حـازم عبـد العزیــز، محمـود. زهیـر عزیـز ،أسـطفان -10 ).1998.(واألعالم دار . جامعـة الموصــل . وزارة التعلـیم العـالي والبحــث العلمـي . المبیــدات . المــالح ، نـزار مصـطفى ;شـعبان ،عـواد 11 - ).1993.( 502ص . لكتب للطبع والنشر ا 12.Rhajaoui ,M.;Oumzil, H.;Faid ,M.;Lyagoubi, M.;Elyachioui,M.;Benjouad, A. . (Research )3 (,3 (2001).Antibactrial activity of Moroccan propolis extracts,science letters , Article). أثیر مستخلصــات نباتــات ســم الفــراخ والصفصــاف والمیرمیــة علــى نمــو بعـــض ) 2000(الخفــاجي ، باســمة ربیــع احمــد 13- ، تــ . رسالة ماجستیر كلیة العلوم ، الجامعة لمستنصریة . الفطریات الجلدیة 14 -Suberu, H. Preliminary studies of inhibitions of Aspergillus flavus with extract of tow lichens and Bentex- T fungicides. African J. of Biotech. 3(9):468-472.(2004). ة ذبــول الخیــار ) 2004(دینــا یوســف محمــد’یوســف -15 ة فــي مكافحــ دور حــامض السالیســلك وبعــض المبیــدات الكیمیائیــ . الجامعة المستنصریة /ماجستیر مقدمة الى كلیة العلوم رسالة. Pythium ultimumالمتسبب عن الفطر 16- Zar,J.H.(1984)Biostatistical Analysis .2nd ed .Prentice Hall INC. Englewood Cliffs, N.J. 17.Silverstein , O.M .; Bassler, G.K.;Morrill, T.S. (1990) Spectrometric Identification of Organic Compounds.4th ed. 18. Cowan ,M.M. (1999). Plant Product’s as antimicrobial agents: clinical microbiology reviews , 12(4) : 564-582. 19.Velikova, M.; Bankova, V.;Sorkun,K.;Houcine, S.; Tsvetkova I., Kujumgiev A. (2000), propolis from the Mediterranean region: chemical composition and antimicrobial activity.Z- naturforsch-[C] 55(9-10) :790-3. 20. Martins , R.S;Pereira , E.S.J ;Lima , S.M.; Senna, M.I.B.; Mesquita ,R.A.; Santos, V. R (2002) . Effect of commercial ethanol propolis extract on the in vitro growth of candida albicans collected from HIV-seropositive and HIV–seronegative Barazilian patients with oral candidiasis .J-oral-sci., 44(1):41-8. 21. Bankova, V.; De Castro, S. L. and Marcucci M. C. (2000), Propolis: advances in chemistry and plant origin. Apidologie 31, 3D15. 22. Hartwich, A.; Lequtko,J.; Wszolek , J.(2000). Propolis: properties and administration to patients treated for some surgical diseases .Przegl_Lek,57(4): 191-4. 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد النمو الشعاعي لبعض تأثیر تراكیز مستخلص العكبر في النسبة المئویة لتثبیط : )1(جدول PDA وسط الفي الفطریات الناقصة تأثیر تراكیز مستخلص العكبر في النسبة المئویة لتثبیط الوزن الجاف لبعض الفطریات): 2(جدول .Broth PD الناقصة في الوسط السائل 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد بالمستخلص Botrytis cinerea لفطر تأثیر رش أوراق نبات الباذنجان المصابة با): 3(جدول التركیز الفطر مل/ ملغم النسبة المئویة للتثبیط Botrytis cinerea 5 100 2.5 78.7 1.25 73.7 التركیز الفطر مل/ ملغم النسبة المئویة للتثبیط Alternaria sp 5 100 2.5 87 1.25 81 التركیز الفطر مل/ ملغم النسبة المئویة لتثبیط الوزن الجاف Botrytis cinerea 5 100 2.5 62.2 1.25 53.4 التركیز الفطر مل/ ملغم النسبة المئویة لتثبیط الوزن الجاف Alternaria sp 5 100 2.5 79.4 1.25 46.8 مل/ ملغم 5الكحولي للعكبر وبتركیز األیام معامالت سم/ال ــــة أوراق نبات ملقحــ ــالفطر وبعد ساعة 24بـ رشت ـــة ـــات ملقحــ أوراق نبـ ساعة 48بالفطر وبعد رشت لفطر أوراق نبات ملقحة با ساعة رشت 24وقبل ل 48أوراق نبات ملقحة بالفطر وقب ة رشت ساع أوراق نبات ملقحة بـالفطر فقط للسیطرة *0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 األول 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 الثاني 0.8 0.5 0.5 0.8 0.7 الثالث 1.5 0.5 0.5 1.2 0.8 الرابع 2.2 0.5 0.5 1.5 1 الخامس 2.4 0.5 0.5 2.2 1 السادس 3.2 0.5 0.5 2.2 1 السابع 3.5 0.5 0.5 2.2 1 الثامن 4.8 0.5 0.5 2.2 1 التاسع 4.8 0.5 0.5 2.2 1 العاشر بالمستخلص الكحولي للعكبر وبتركیز Botrytis cinerea تأثیر رش ثمار الخیار المصابة بالفطر ): 4(جدول مل/ ملغم 5 األیام سم/المعامالت ثمار خیار ة ب ـالفطر ملقحـ 24وبعد ساعة رشت ــــار ــــ ــار خی ــــ ثمـ ة بـــ الفطر ملقحــ سـاعة 48وبعـد رشت ثمار خیار ملقحة بالفطر ساعة 24وقبل رشت ثمار خیار ملقحة ساعة 48بالفطر قبل رشت ــــة ــــ ــار ملقحـ ــــ ــار خیـــ ــــ ثمــ بالفطر فقط للسیطرة *0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 األول 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 الثاني 1.2 0.5 0.5 0.8 0.6 الثالث 2.1 0.5 0.5 1 0.9 الرابع 2.8 0.5 0.5 1.8 1.5 الخامس 3.7 0.5 0.5 2.9 1.6 السادس 4.6 0.5 0.5 4.1 1.8 السابع 5.5 0.5 0.5 4.1 2 الثامن 5.8 0.5 0.5 4.1 2.1 التاسع 6 0.5 0.5 4.1 2.1 العاشر سم 0.5قطر رأس المسمار * 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد بالمستخلص الكحولي Altrnaria sp تأثیر رش أوراق نبات الباذنجان المصابة بالفطر ): 5(جدول مل/ ملغم 5للعكبر وبتركیز معامالت سم/ال األیام أوراق نبات ـــالفطر ـــ ــــة ب ملقحــ ساعة 24وبعد رشت أوراق نبات ملقحة 48بالفطر وبعد ساعة رشت ق نبات ملقحة أورا وقبل 24بالفطر ساعة رشت أوراق نبات ملقحة ل وقب 48بالفطر ساعة رشت ـــات ــ ــ أوراق نب ـــة ــ ــ ــ ــ ــ ــ ــ ــ ملقحـ ــط ــ ــالفطر فق بـ للسیطرة *0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 األول 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 الثاني 0.8 0.5 0.5 0.8 0.7 الثالث 1.5 0.5 0.5 1 0.8 الرابع 2 0.5 0.5 1.5 1 الخامس 2.4 0.5 0.5 2 1 ادسالس 3.1 0.5 0.5 2 1 السابع 3.5 0.5 0.5 2 1 الثامن 4.5 0.5 0.5 2 1 التاسع 4.5 0.5 0.5 2 1 العاشر بالمستخلص الكحولي Altrnaria sp تأثیر رش ثمار الخیار المصابة بالفطر ): 6(جدول مل/ ملغم 5للعكبر وبتركیز األیام مس/المعامالت ثمار خیار ــ ـالفطر ملقحـة ب ساعة 24وبعد رشت ثمار خیار ملقحـة ـــد ـــالفطر وبعـ 48بـ ساعة رشت ثمار خیار ملقحة بالفطر 24 وقبل ساعة رشت ثمار خیار ملقحة بالفطر ساعة 48وقبل رشت ــة ــ ــار ملقحـ ــ ـــار خی ثمـ بالفطر فقط للسیطرة *0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 األول 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 الثاني 1.2 0.5 0.5 0.8 0.6 الثالث 2.1 0.5 0.5 1 0.9 الرابع 2.8 0.5 0.5 1.8 1.5 الخامس 3.8 0.5 0.5 2.9 1.6 السادس 4.7 0.5 0.5 3 1.9 السابع 5.5 0.5 0.5 3 2 الثامن 6 0.5 0.5 3 2.1 التاسع 6 0.5 0.5 3 2.1 العاشر سم 0.5قطر رأس المسمار * 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد للمستخلص االیثانولي للعكبر (IR)طیف االشعة تحت الحمراء ):1(شكل في منع نمو الفطر مل / ملغم 5یوضح تأثیر رش أوراق الباذنجان بالمستخلص الكحولي للعكبر وبتركیز ) : 2(شكل Botrytis وحسب المعامالت آالتیة: .ساعة رشت بالمستخلص24 وبعد Botrytis لقحت بالفطر -1 .ساعة رشت بالمستخلص 48 وبعد Botrytis لقحت بالفطر - 2 .Botrytis ساعة لقحت بالفطر24 رشت بالمستخلص وبعد -3 . Botrytis الفطرساعة لقحت ب48 رشت بالمستخلص وبعد -4 .للسیطرة Botrytisلقحت أوراق النبات بالفطر -5 2 1 5 4 3 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد Botrytisفي منع نمو الفطر مل / ملغم 5یوضح تأثیر رش ثمار الخیار بالمستخلص الكحولي للعكبر وبتركیز ): 3(شكل :اآلتیة توحسب المعامال .ساعة رشت بالمستخلص 24وبعد Botrytisثمار خیار لقحت بالفطر -1 .ساعة رشت بالمستخلص 48وبعد Botrytisثمار خیار لقحت بالفطر -2 .Botrytis بالفطرساعة لقحت 24 ثمار خیار رشت بالمستخلص وبعد -3 . Botrytis بالفطرساعة لقحت 48 ت بالمستخلص وبعد ثمار خیار رش -4 .فقط للسیطرة Botrytis ثمار خیار ملقحة بالفطر -5 IBN AL- HAITHAM J. FOR PURE & APPL. SCI. VOL.23 (1) 2010 3 1 2 4 5 Antifungal Activity of Propolis Ethanol Extract Against Botrytis cinerea, Altrnaria sp Which Caused Many Plant Diseases A. S.Darweesh Department of Biology, College of sciences, University of AL-Mustansiriya Abstract This study was conducted to determine the effect of different concentrations of ethanol extract of propolis against two fungi Botrytis cinerea, Altrnaria sp . The most important chemical constituents of propolis diagnosed by the Infra Red Spectroscopy, were the Flavonoids specificaly. Results showed a high antifungal activity of ethanol extract of propolis, evidently with a high concentration of extract (5) mg\ml, which completely inhibited the radial growth on both solid and liquid media (PDA &PD Broth ) of both fungi . We observed that , ethanol extract propolis at concentration of 5 mg\ml were sprayed on experimental infection on some plants (eggplant leavers & cucumber ) which were effected by fungal. The spraying of ethanol extract of propolis before 24, 48 hour prevented development of disease and made a good protection of the mentioned plants from being infected with this fungus. While, the ability of fungus to grow after 24, 48 hours from ethanol extract of propolis treatment was reduce markedly as compared with control ,such treatment show a slow growth of pathogen infect.