2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد Solasodine و Solanidine يالتوصیف الفیزیوكیمیائي والطیفي لمركب Solanum(نبات عنب الذیب والمنقاة جزئیا منالفعالة بایولوجیا nigrum( ساعور كوكب یعقوب ، ، محمد عباس فیاض علي صادق محمد جامعة بغداد ،كلیة العلوم ،قسم التقنیات االحیائیة كلیة التربیة ابن الهیثم ،سم علوم الحیاة ق جامعة بغداد ،كلیة الصیدلة ،فرع الكیمیاء الصیدالنیة الخالصة ب المستخلصة من ثمار واوراق القلویدیة التوصیف الفیزیوكیمیائي والطیفي لبعض المركبات ث بحتضمن ال نبات عن ة ی ،المنتشرة في العراق وهو احد اكثر االعشاب الطبیة ،) Solanum nigrum(الذیب عود للعائلة الباذنجانی )Solanaceae .(الحوامض المركزة من عمالباست القلویدیة الخام اجریت عملیة التحلل المائي الحامضي للمركباتH2SO4 , HCL l للحصول على الجزء القلویدي)aglycon (للمركبJJ ات والتي اعطیت الرموز لها)C, B, A ( مكونات انها تماثل ) C, B,A(الفیزیوكیمیائي للمركبات المنقاة جزئیاالتوصیف اوضح . سترویدیة مستخلصة ومفصولة سابقا على صفائح ) Rf(وقیم الجریان النسبي ) m.p(نصهار تغایرت فیما بینها بدرجات االو القلویدات السترویدیة في صفاتها ). IR(وكذلك طیف االشعة تحت الحمراء ) uv-visible(المرئیة - ةجیوطیف االشعة فوق البنفس) TLC(السلیكا الجاهزة اوته العالیة) A(ظهورالمركب ) HPLC(كما اوضحت تقنیة السائل ذي االداء العالي ما دل فی ،بقمة واحدة مما یدلل على نق solanidin تناظر القیمة النظریة لمركب) (Aالعملیة للمركب ةان القیم ).C.H.N(التحلیل الدقیق للعناصر C27H43NO وتناظر مركب C27H43NO2 Solasodine للمركب)C (ء أثبتوهذا ما ) MS(تحلیل طیف الكتلة من اجرا د /بداللة الكتلة) m/z 397(الذي دل ان له وزنا جزئیا یعادل ) A(للمركب الشحنة والذي یعادل الوزن الجزیئي للقلوی )Solanidine.( المقدمة تعد مركبات القلویدات من اهم المجامیع الفعالة بایولوجیا في عالم الدواء والعالج بالنباتات التي لمعظمها تاثیر ظمها مواد قاتلة او مثبطة لنمو االحیاء مع دكما تع [1]فسیولجي في الكائن الحي حتى وان وجدت بكمیات ضئیلة تكون و ، االجزاء النباتیة وحسب النوع النباتيفي معظم انواعها توجد القلویدات على اختالف. [2] المجهریة المختلفة د )الكافئیین،الكولشیسین ،المورفین (:مثل على هیئة امالح الحماض عضویة على الغالب ونادرا ما تكون بصورة حرة وق ــــال یمان معظمها عد ،)سائل_النیكوتین(تكون بشكل صلب متبلور ماعدا ظها ـولبع) اصفر اللون_الكولشیسین (لون ماعدا ـ ــــوتنتشر في الع ]1[ حریف(طعم مر ,Buxaceae, Verstrum, Apocynaceae, Liliaceae(مثل وائل النباتیة ـــ Solanaceae 2010) 1( 23ة والتطبیقیة المجلدمجلة ابن الھیثم للعلوم الصرف . ]Cephalodiscus, Zoanthi ]3) (مثل ،تتواجد في بعض الفقریات البحریةكما ، وغیرها) من طراز یختلف عن باقي قلویدات اجناس هابصورةعامة بان) Solanum(تمتاز قلویدات الجنس النباتي تكون في بینما ، ) Steroidal Alkaloid( ستیرویدیة قلویدات بكونها نفرداذ ت، االخرى) Solanaceae◌ٍ (العائلة ت هابانتعرف كما ]Atropane Alkaloid, Indol Alkaloid )( ] 4قلویدات نوع خرى مناال االجناس من قلویدا للهیكل التركیبي )C3(كاربون لاوذلك الرتباط وحدة واحدة من السكریات او اكثر بذرة ) Steroidal Glycoalkaloid(ال و، ]5[ ولوجیةالیها تعزى الفعالیة البایو نفسهللهیكل )C17(بذرة كاربون ) Alkaloid(وارتباط قاعدة نایتروجینیة ، للستروید .االشكال الجزیئیة الهم المركبات القلویدیة المتوقع فصلها من هذا النوع ) 1(الشكل یوضح احتوائه على ) Solanum nigrum( عنب الذئب لتي تناولت التركیب الكیمیاوي لنباتاكدت المصادر العلمیة ا ت :(الى جانب مركبات فعالة اخرى مثل [ 6 ] قلویدات سترویدیة بدرجة كبیرة وبكمیات وفیرة الفالفو نینات والصابونینا ثانویة مركبات مركبات رئیسة كما هناك) Solanine ,Solasodine( اتالقلویدات السترویدیة بالمركب وتتمثل .)الخ.… . Flavonoid , Steroidal Saponins)(فضال عن ) ,Spirostanol Furostan(بـ من نوع الكلیكوسیدیة المتمثلة الكمي ولتغایرها ] 7[رلتحضیر العقاقی "نواةالمتزاید هاعمالفي الدراسات الصیدالنیة والستوالهمیة هذه المركبات فقد كرست جهود الباحثین الختیارالنوع النباتي ، ) Solanum(لجنس العائدة نواعالابنسب متغایرة في ولتوزعها والنوعي وكذلك على النباتدون غیره اعتمادا على حصیلته االنتاجیة في اجزاء من كثر مالئمة النتاج قلوید سترویدي معیناال استخدام او ] 8[ ،الخ....ونوع النبات ،التسمید،الحرارة : ( مثل باتانتاجیة الن فيالظروف البیئیة الخاصة التي تؤتر وللفعالیة البیولوجیة المثبتة ضد كثیر من االحیاء المجهریة . In Vitro ([9](مخبریا تقنیات زراعة االنسجة النباتیة . [11]ة لالورام فضال عن اهمیةهذه المركبات مواد مضاد ]10[ المرضیة لعدد من مستخلصات هذا النبات ــــاهتم ــــ ــــیة الجزئیة لمســنقــتالة بـت هذه الدراســـ ــــنب الــــات عـــار واالوراق لنبـتخلصات الثمـ ) Solanum nigrum(ذیب ــــ ــــللحصـول علــى مركبـات قلوی ــــمركب السـیماو دیة ســترویدیة ــ ق ائــر بط ا موتوصــیفه Solasodine) (و ) Solanidine( ى ـــ ــــویمكن ان تعد هذه الدراسة متفـردة فـي الق.مختلفة الفزیوكیمیائي والطیفي باستخدام تقنیات التوصیف طر بهـذا االتجـاه مـع ـــ ــــع ــــ ــــوصع یاسیة من المركبات القلویدیةق فر عیناتادم تو ــ ــــ ن ان ترسم الخطوط العریضة لكثیر مـن ــــویمك.توفیرها وبةــــ ــــبحـوث المال ـــتات الطبیــه التــى تقــــالنباتــتزایدة بــ ة فعالیتهــا تصرــ ـات الخــام ودراســ ـا مــن علــى المستخلصـ ـام بتنقیتهـ دون االهتمـ ـــــوناتها الكیمیائیة .ومعرفة مكـ المواد وطرائق العمل -: االستخالص والتنقیة الجزئیة - )غم 100( نقعت فیها اوزان متساویة )مستخلصات قلویدیة خامللحصول على (نظم من المذیبات ةثالث البحث عتمدا د . جمعت من بساتین منطقة الكریعات ببغداد ) عنب الذئب (النبات المعروف محلیا ب من مسحوق اوراق وثمار وق تحلل المائي بعد اجراء عملیة ال) A,B,C(الرموز خام اللصات ـــمستخوالناتجة عن ال تخاصات المنقاة جزئیاـطیت المســــاع -:وكما یاتي ، لغرض فصل وتنقیة المركبات القلویدیة منها، [ 12 ],[10] الحامضي لها -A ( بنسبة ) ماء مقطر، استیك اسد ،بمذیب بمیثانول(ناتج من نقع المسحوق ب مستخلص مسحوق اوراق النبات 1:1:1.( -B 1:1(بنسبة )كلورفورم ،ب بمیثانول بمذی (ناتج من نقع المسحوق ب مستخلص مسحوق اوراق النبات.( -C1:1(بنسبة )%2استیك اسد ، 90%بمذیب ایثانول (ناتج من نقع المسحوق ب مستخلص الثمار الجافة للنبات.( وجمع طبقته C6H6ماع الفصل مع مذیب البنزین قستخدام ا با وخلصات كل على حدة عوملت المست، [12][2 ] ف الدوار تم الحصول على مستخلص جاف خام یحوي القلویدات الكلیة الذي اجریت له عملیة التحلل وباستخدام المجف بحث ولمزید من التفاصیل یراجع المصدر A,B,Cالمائي الحامضي للحصول على القلویدات المنقاة جزئیا وهي قید ال ]10[. للمركبات المنقاة جزئیا )Rf(تحدید قیم السریان النسبي - ــــمن صالمركبات على نوعین تفصل ــــفائح السیلكا الجـ Chromatogram A، Chromatogram B اهزة هي ـــ -:ولنوعین من المحالیل طور متحرك .]2[ باعتماد طریقة Toluene:Ethyle acetate :diethylamine 7:2:1 :االول واستخدم كاشف دراجندروف لرش االلواح بعد انتهاء .[13] باعتماد طریقة Chloroform:Methanol 19:1:الثاني [14] . التجربة وتعطي القلویدات بقعا باللون البنفسجي والطیفيالتوصیف الفیزیوكیمیائي - ).(.melting point - m.pتعین درجات االنصهار للمركبات المنقاة جزئیا -1 باسـتخدام خالیـا ند درجـة حـرارة الغرفـةـاس عــــتـم القی) .U V- Visible(بطیـف قیـاس االطیـاف االلكترونیـة المتمثلـة - 2 ) نـانومتر190-800(بـین وحدد الطیـف االلكترونـي للمركبـات ضـمن المنطقـة المحصـورة ، )1cm(مسار ضوئي يسلیكا ذ .زالكلوروفورم من) ملیلتر1(من العینة في ) ملیغرام1(بعد اذابة المحصـورة المنطقـة من ـضـ )A,B( للمركبـات (Infra Red Spectrum- IR)مـراءس االشـعة تحـت الح قیـا -3 ) .سم 600-4000(نبی فـي كلیـة الصـیدلة ، Carlo Erbo Micro Analyzerباسـتخدام جهـاز CHN analysisالتحلیـل الـدقیق للعناصـر -4 ة بغــداد ـا المتوقعــة قورنــت النتــائج العملیــة مـــع نتــائج التحلیــل النظــري لعــدد مــ جامعــ ــات المنقــاة جزئیـ ـنس ن المركبـ فــي جــ Solanum) .( ـائل ذي االلفـة العالیــة -5 ـة فــي عمــود HPLCتقـدیر نقــاوة المركبــات باسـتخدام تنقیــة كراموتوكرافیــا السـ وذلــك یحقـن العینـ pH 7.2عند ) Methanol- tris buffer 88:12(مال طور متحرك ــــوباستع C18- Carbohydrateالجهاز من النوع اجـري الفحـص فـي دائـرة الرقابــة (. وبدرجـة حـرارة الغرفـة، ) نـانومتر205(وطـول مـوجي ) دقیقـة/ملیمتـر1.5(وبسـرعة جریـان )فقط Aالدوائیة وللمركب )A( تحلیل طیف الكتلة لتقدیر الوزن الجزیئـي للمركـب يجر أ، (Mass Spectrum- MS)تحلیل طیف الكتلة -6 )الجامعة االردنیة / في كلیة الصیدلة . Aبعد النتائج المشجعة لنقاوة المركب الشحنة /ة بداللة الكتل النتائج والمناقشة ة مـن نبـات عنـب الـذیب اللثمـار االوراق و لـ ات خـام مستخلصـ ةت ثالثعملاست لغـرض ) Solanum nigrum(جافـ وقد اعطینا لهـذه المركبـات ، ا وتوصیفها توصیفا فزیوكیمیائیا وطیفیاللمركبات القلویدیة السترویدیة منه) جزئیة(فصل وتنقیة اجریت علـى المستخلصـات الخـام بعـض الكشـوفات الكیمیائیـة للتحقـق مـن طبیعتهـا الكیمیاویـة .[C, B, A]المختلفة الرموز ة بشــكل ـات القلویدیـ لـت الناتجــة عــن التنقیــة واســتخدمت التقنیـات االتیــة لتوصــیف المركب.]10[خــاص واحتوائهـا علــى المركبـ -:الجزئیة :-)TLC(لمركبات باستخدام تقنیة كراموتكرافیا الطبقة الرقیقة ل (Rf)نتائج تحدید قیم الجریان النسبي 1- 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد بعـد فحصــها د مواقــع البقـع المنتشـرة وقیاســها ورسـمها علـى اوراق شــفافة االلـواح بعــد انتهـاء مـن التجربــة بتحدیـ اختبـرت [ ،[13] ، االخرمنها بكاشف دراجنـدروف هابعضسم منها الى بخار االیودین ورش قتعریض تحت االشعة فوق البنفسجیة و فـي حـین ، فو ر دراجنـد قبـل رشـها بكاشـف) UV(أي لـون او اسـتجابة عنـد تعریضـها لالشـعة البقع القلویدیـة لم تظهر .14] ــــللم) المفصـولة(بقع الظـاهرة ــــالـذي یؤكـد ان ال ین االیـود بخـارهر معظمها بعد غمرها بــظ هـي قلویـدات ) C, B, A(ركبات ـ [13 ] سجیافاظهرت لونا برتقالیا اوبنف و ر سترویدیة وعند رشها بكاشف دراجند بقعتــین واضــحتینوجـود ) A(نــوع مالظــاهرة علـى الــواح الكرامـوتكرااالول و المتحـرك لطوربــا المفصـولةالبقــع اظهـرت ماعدا ) 0.85_0.95(بین الهم) Rf(تراوحت قیم) C, B, A(جزئیا ةللمركبات المنقا ومتمیزتین مرااسـتخدام الـواح كرامـوتك عنـد مـا ا ,)0.96( تسـاوى) Rf(وغیر متمیـزة وبقیمـة ةفكانت صغیر ) A(البقعة الثانیة للمركب .بقعة واحدة متمیزة لكل مركب) C, B, A(فقد اظهرت المركبات ) B(نوع فقـد اظهـر بقعــة واحـدة لجمیـع المركبــات )B,A(نــوع مامـا عنـد اسـتخدام الطــور المتحـرك الثـاني مــع صـفائح كرامـوتكرا ة یـالنظـام المتحـرك االول اكثـر كفاوهذا یعنـى ان .نفسها في الطور المتحرك االولأ) Rf(قیم يوذ )C, B, A(جزئیا ةالمنقا ـام یؤكـد و ،فـي فصـل وتنقیــة هـذه المركبــات مـن نظــام الطـور المتحــرك الثـاني وجــود اكثـر مــن مركـب ضــمن المركبـات الخـ .من الناحیة الكیمیائیة على الواح السلیكا تغایر المركبات المفصولةو ـارت) Rf(لــم تتفــق لجمیــع البقــع الظــاهرة مــع أي مــن قــیم) Rf(ان قـیم یكا لیالیهــا البحــوث الخــتالف نــوع الســ التــي اشـ .التجربة وكذلك نوع المركبات التي تم فصلها التي تتطلبها ة او سمكها ونوعها وكذلك عدم توافر بعض المحالیلعملالمست ة مع المركبات الخام من المقارنباستخدمت نتائج هذه التجربة للتحقق من نقاوة المركبات التي تم تنقیتها جزئیا لذا فقد م للمركبات) Rf(قیم فيتغایر ال سبب اعزى الذى] 16[ التي حصل علیها نفسها تحت الظروف .لها) Rf(حیث قیم الخا تباین و وتقارب صیغها الجزئیة من جهة ) S. nigrum(الطبیعة الكیمیائیة للمركبات القلویدیة التي یحتویها النبات الى .عن قابلیة ذوبانها في نظام الطورین المتحركین االول والثانيفضال ،من جهة اخرىصفائح السلیكا قابلیة امتزازها على .لها) Rf(مما جعل ظهور المركبات القلویدیة متقاربة في قیم Preparativeللمركبات المفصولة باستخدام السلیكا جل المحضرة اعتمدت هذه الحقائق في التنقیة الحزئیة Silica Gel لفصل المركبات المنقاة جزئیا )A,B,C ( واعادة تذویبها في محالیل االستخالص في هذا البحث بقشطها .وبلورتها بعملیة التحلل المائى الحامضى ) C, B, A(تعیین درحات االنصهار للمركبات 2 - الفیزیوكیمیائیة تواحدة من الصفاكونها توصف ).Melthing Point- m.p(قیاس درجات االنصهار ت تقنیةاستخدمت الواحد بتغایر نوع المذیب قد تتغایر للمركب والقلویدیة ،اال انها ]17[یة عد خاصیة ممیزة للمركبات العضو وتلمركبات ل )C, B, A(المنقاة جزئیا دیةالمركبات القلوی. كانت درجة االنصهاراذ ]18[والبلورة في عملیة االستخالص لمعالمست .على التوالي) ْم 210و 204و 198( ي (S. khasianum ) الكلیكوسیدیة المنقاة من النبات ان القلویداتالى ]18[اشار مثل المركب القلوید )Solasodine ( له درجة انصهار بحدود)(اما القلویدات الكلیكوسیدیة في جنس، )مْ 200Solanum (مثل ) - Solaninα (انصهارتتراوح بین اتدرج الهف)(مركب اما.)195-285- Chaconine α (ر ف له درجة انصها فر أي معلومات اخرى عن اونظرا لعدم تو ).Solanin(للقلوید ) °م 290(بـ [15]بینما حددها ،[18] )مْ 243(تقدر ان تكون المركبات التي تم التوصل فمن المتوقع) (Solanumدرجات انصهار المركبات االخرى الموجودة في جنس 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد الیها هي مركبات قلویدیة كونها تنحصر ضمن هذه المدیات في حدود درجات انصهار القلویدات السترویدیة العائدة لهذا .الكیمائي الختالف درجات االنصهار المسجلة فضال عن التوقع بیغایرها في الشكل الجنس . )B, A (المرئیة للمركبات المتبلورة –قیاسات طیف االشعة فوق البنفسجیة -3 القلیویدیین الكالیكوسیدیین التي یمكن قیاسها ضمن ) B,A(للمركبین ) λ - max (لتحدید قیم االمتصاص العظمى م قد اظهر ق) A(یتبین ان المركب االخرى ومن نتائج قیاس تلك االطیاف .)نانومتر190-700(الطول الموجي من ی -245(االطوال الموجیة القصیرة والمحصورة قیمها بین اعلى من يذ UV) (امتصاص عظمى في منطقة االشعة ) ترنانوم238(عند طول موجي ) A(للمركب ) Max-λ( قیمة امتصاص العظمى ) 2(الشكل یوضح ف، )نانومتیر200 بلغت قیمة ) نانومتر 300(وظهور بقعة اخرى في عند طول الموجي ، وهو ذو نقاوة عالیة 1.56كانت فقد ظهرت ) 3(الشكل ) B(اما المركب .ولم تظهر أي قمة اخرى ضمن االشعة الرئیسة، 0.24امتصاصهاالعظمى ولم تسجل ) 1.70,1.76(على التوال ا العظمى محیث بلغت قیمة امتصاصه) نانومتر305,240(قمتان في طول موجي ل الموجیة االخرى لمركب القلویدي الخام المتبلور نتیجة لفقد اعتمد على ) C(اما المركب ، أي امتصاص على بقیة االطوا وهي قیمة مقبولة الى خلل في الجهاز نامومیتر لحدوث 232.0 امتصاص عند الطول الموجى عنه الذى اظهر اعلى قمة .)4(حد ما شكل من ان معظم القلویدات الكالیكوسیدیة التابعة لجنس ] [20ذكره االحصول علیها تتفق م ان البیانات التي تم )Solanum ( تفتقد الى وجود مجامیع حاملة للون)Chromophoric groups( ، لذا هي تمتص في نهایة االطوال المرئي اعلى من فظهور قیم امتصاص اخرى في مناطق الطیاما .)نانومتر200-245(الموجیة القصیرة والمحصورة بین كما ، فیمكن ان تعزى الى لون المستخلص الخام الناتج ان عملیة تنقیة المركبات وذلك بعد عملیة التبلور) نانومتر 400( ت لذا ان فقدان المجامیع الحاملة للون في هذین المركبین یجعل استخدام الكواشف ال) 2,1(مبین في الشكل خاصة بالقلویدا او أي كاشف اخر مثل مزیج حامض الكبریتیك فكاشف دراجندرو مثل ) PC-TLC(ال امرا مهما الظهارها على صفائح او BlanKophor(او استخدام مركبات متبلورة من ] anis aldelyde H2S04] ]2اوكاشف ،مع المیثانول) (10 % Tino pal([21] ، ن غیرها من القلویداتمة تمیز القلویدات الكالیكوسیدیة معقدات ملونتكون هذه الكواشف الخاصة اذ ، .واظهارها على صفائح الكراماتوكرافیا كل حسب طبیعة تكوینه مع الكاشف الخاص به ) max -λ(هي مركبات سترویدیة التي اعطت تغیرا واضحا في قیم) B, A( ین ان المركبنستخلص من هذه النتائج ة ئمما یعزى انها مركبات متغایرة في طبیعة التركیب الكیمیا) Visible-UV(ة طیف االشع ضمن ي او المجامیع الفعال . فیها اال انها تشترك في كونها انماط متقاربة من القلویدات السترویدیة ) .B, A(للمركبین Infera Red Spactram)IR(تحلیل طیف االشعة تحت الحمراء 4- مدة لتشخیص المركبات العضویة من خالل تمطیافیة االشعة تحت الحمراء كونها احدى الطرق المع استخدمت تقنیة لالستدالل على مدى نقاوة المركبات ) functional groups(تحدید مناطق امتصاص المجامیع الوظیفیة الفعالة 12[االولى اتجة عن طریقة االستخالصوقد طبقت هذه التقنیة مع المركبات الن. المفصولة من خالل شكل الحزم وقممها وقد اظهر التحلیل الطیفي ) B, A(والمركبات الناتجة عنها بفعل التحلل المائي الحامضي وهي المركبات المنقاة جزئیا . ] د ). 5 ,6(لهذه المركبات باألشكال ) IR(لل اما مواقع حزم االمتصاص لهذه المركبات اعاله واالشكال الناتجة عنها فق . 1)( ت في الجدول ذكر وجود تماثل عن" الضف، حظ وجود تغایر في مواقع االمتصاص لبعض المجامیع الفعالةلو ]17[عتمادا على نتائجاو ذا ، ائي الحامضيوالمركبات الناتجة عنها بفعل التحلل الم ]16 [ الممیزةبین المركبات الخام في بعض مواقع االمتصاص ل . وجود تغایر في الصبغ الجزئیة لهذه المركبات دلة علىأیمكن اعتمادها 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد -,CN,- CO(الممثلة المتصاص مجامیع ) cm¹ 600 -1350(ولوجود امتصاص لمواقع الحزم الواقعة ضمن المطقة CH,- OH, (بصمة اصابع ممیزة دوالتي تع)Finger Printing (عظم ـــثیرا مـــه كـــترویدیة تشابـبات القلویدیة السـللمرك ) 7(شكل ) Salsolidine hydrochloride dehydrate , Solanine(ومنها مركب [17]ـيـرت فــات التي ذكــبـركــالم حظ ان طیف المركبات لو كما ). S. nigrum( وعومنها الن) Solanum(لكونها المركبات االكثر شیوعا في الجنس وهذه من االدلة ، ]16[ قد اظهرت قمما وحزما اكثر وضوحا من المركبات الخام التي انتجت منها) B, A(المتبلورة حزم لومن متابعة المواقع . التحلل المائي الحامضي لعملیة التنقیة التي اتبعت في هذه الدراسة طریقة ةیاالخرى على كفا فیما ) Solanidine(یتوقع ان طیف االشعة تحت الحمراء للمركب االول معبرا لمركب ) B, A(االمتصاص للمركبین ,N(من طبیعة المركبات المتبلورةمن حیث محتواها من ثبتوللت. في المركب الثاني) Solasodine(یكون معبرا لمركب H, C (اجري التحلیل الدقیق لعناصر بعض المركبات . )C, A(مركبات المنقاة جزئیالل) C.H.N Anylsis(التحلیل الدقیق للعناصر 5- ) العملیة(للتعرف على القیم ) C, A(لتشخیص المركبین ) Atomic Absorption(استخدمت تقنیة االمتصاص الذري ة التى) C.H.N Anylsis(النتروجین، الهیدروجین، التي تمثل التحلیل الدقیق لعناصر الكاربون بمقارنتها مع القیم النظری ان المركب ) 2(یتبین من الجدول ، یمكن التوصل الى اقرب المركبات المفصولة المحسوبة القرب المركبات المتوقعة مما یدعم توقعنا لنتیجة طیف ، C27H43NOذي الصیغة الجزئیة ) Solanidine(هو االقرب لمركب ) A(المفصول )IR (المركب المفصول بینما یمثل، لهذا المركب)C ( وهو االقرب لمركب)Solasodine ( ذي الصبغة الجزیئیة C27H43NO2 ). ولم یتم اجراء هذا التحلیل للمركبات المنقاة)B ((ونظرا لدخول عناصر ). لتعذر ذلك( N,H,C مكونات كما ان النتائج التي تم الحصول .لذا یعد استخدام هذه التقنیة امرا شائعا لتحلیل هذه المركبات، ]23[ي قلوید رئیسة ال وهذا امر متوقع نظرا ، للمركبات القلویدیة السترویدیة) Aglycons(او) Alkamines(علیها لهذه المركبات تشیر الى انها ت تالجراء عملیة التحلل المائي الحامضي للتخلص من االجزاء السكریة المرتبطة بالمركبات المفصولة بشكل مس خلصا ان المركبات التي تم الكشف عنها وتحلیلها على قدر كبیر من النقاوة نظرا ، كن التوقع من نتائج هذه التجربةكما یم. خام ) N, H, C(لعناصر) العملیة(اذ كانت النسبة الئویة ،للمركبات المفصولة )العملیة(لتقارب القیم النظریة مع القیم فهي ) C(للمركب ) العملیة(اما القیم). Solanidine(المركب ها فيأنفستقارب النسب المئویة للعناصر )A(للمركب .)2( جدول ) Solasodine(في المركب ) N, H, C(مقاربة للنسب المئویة النظریة لعناصر )HPLC(باستخدام تنقیة ) A(تقدیر نقاوة المركب 6- ابقة) Solanidine(المتوقـع انـه ) A(بعـد الـدالئل التـي تـوافرت عــن نقـاوة المركـب اســتخدمت . مــن خـالل النقـاط السـ على الرغم من عـدم تـوافر عینـات قیاسـیة للمركبـات ، لتحدید مدى نقاوة هذا المركب(HPLC) تقنیة السائل ذي االداء العالي ـاد الطــور المتحــرك المحضـــر .ولــم یجــر مــع المركبــات المنقــاة االخــرى) Solanum(القلویدیــة التــي تعــود لجــنس من ان اعتمـ ــــتمده لتحــــظم المعــنـونه افضل الــجراء هذا التحلیل كال [20] هذه لیل ـ ة ، المركبات عند استخدام هذه التقنیة اذ اشار الى انه افضل نظم االذابة المستخدمة لفصل الكلوكوسیدات االحادی ).aglycones(كامینات او مایعرف بفضال عن االل والثنائیة والثالثیةعن بعضها RT ((1.48(وعند زمن االحتجاز ) A( ظهور قمة واحدو متمیزة وحادة لعموم المركب) 8(الشكل من یتبین mint) Retention time ، ــــزم ندــعوظهور قیم امتصاص یكاد یكون معدوما .)mint 2,67 , 4.43(جاز ــن االحتــ 2010) 1( 23ن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلدمجلة اب ة یكما تدلل على كفا .تدل داللة واضحة على النقاوة العالیة للمركب المفصول (A)ان ظهور قمة واحدة ومتمیزة للمركب ن یاللت) Preparative TLC(وطریقة السلیكا المحضرة ،(Acid Hydrolysis)طریقة التحلل المائي الحامضي .المركب ااعتمدتا لتنقیة المركب الخام الذي فصل منه هذ Mass spectraبداللة طیف الكتلة ) A(ن الوزن الجزیئي للمركب یتعی 7- بعد الدالئل التي تشیر الى نقاوته العالیة ) Solanidine(انه والمتوقع) A(استخدمت تقنیة طیف الكتلة للمركب . ذلك لتعذر اذ لم یتم اجراؤها مع بقیة المركبات المنقاة جزئیا، تم التطرق الیها في الفقرات السابقة والتي یعد طیف الكتلة من الطرق الفیزیوكیمیائیة المهمة التي استخدمت حدیثا في تطبیقات تشخیص المركبات اذ یعتمد على تبخیر المركبات ،)m/z(بة الكتلة الى الشحنةوالتي یستفاد منها لتعیین الوزن الجزیئي بقیاس نس، العضویة .] 23[) 1000 اقل من(االوزان الجزیئیة الواطئة يذ او ) fragmentation pattern(اذ تتوضح فیه نماذج التجزئة ) A(طیف الكتلة للمركب لنتیجة ) 9(یبین الشكل االوزان الجزیئیة لالیونات ) m/z 272 ,204 ,150 ,98 ,55(القمم فیما تمثل ، االنشطارات الناتجة عن المركب المتاین نشطار المركب %, 25 %(وبوفرة نسبیة )m/z 204(اعظمها وتلیها القمة) m/z 150(كما تمثل القمة . الناتجة عن ا شابه في تیظهر انشطارات م) Solanidine(من ان قلوید [24]ان اقرب تفسیر لهذا الطیف ما ذكره .على التوالي)100 نفسالقیم ما یظهر وزنا جزیئیا ــاذ ینشطر الشكل المتباین لهذا القلوید الى ایونین غیر متناظرین في الوزن الجزیئي احداه، هاأ ).10(كما في المخطط الموضح في الشكل ) m/z 150(جزیئي ــوزن الــــواالخر له ال) m/z 204(قدره )11(فقد امكن وضع المخططات الموضحة في الشكل، )A(جزئة للمركب المفصول اما االلیة المتوقعة لنماذج الت ه ، سیر االیونات الناتجة عن عملیة التجزؤ مع قیم اوزانها الجزیئیةـلتف .]26[ ] 25[،اعتمادا على ما ورد في التي تشاب ). Solanidine-5en-3Bol(كبیر المركب الى حد ).Solanidine(المركب انه ) A(یدا على تشخیص المركب تاك دان هذه النتیجة تع نقاوة كما ، )A(كما یمكن القول ان المركب المفصول یل ، )HPLC(تحلیل دل علیه على درجة عالیة من ال وتحل للعدید من (Aglycone)الذي هو) Solanidine(الوزن الجزیئي لمركب نا جزیئیا یقارب وز الذي اعطى طیف الكتلة .)10( الحظ الشكل ). Chaconine(و) Solanine(في جنس السوالنم ومنها المركبات السكریدیة المصادر .المملكة السعودیة -ریاضال. دار المریخ للنشر . النباتات الطبیة زراعتها ومكوناتها).1981(فوزي طه ، قطب -1 2- Handa, Sukhder S., Decpak Mundkinajeddu and Anupam K. M angal (1998). Indian Herbal phaemacopoeia. Vol I. Ajoint publication of Regional Research laboratory and Indian Drug Manufacturers, Association. India. P 139- 3- Maalanina, G.G.; L.I. Klimova; L.M. Morozovskaya.; O.S. Anisimova,; L.M. Alekseeva and N.N Suvorov, farm. Zhur. (1974). Chem. Abs. 81, 63874. y . Secondar8olanum Alkaloids in Vol. S -Isoprenoi Alkaloids ,Roddick, J.G. (1980)-4 plant products, by E. A. Bell New York and B.V. Charl wood. Encyclopedia of 5- Friedman,M. and McDonald ,G.M. (1997). Potato glycoalkaloids:Chemistry, analysis, 132. -55 :(1) 16. Plant Sci. softy and plant physiology Crit Rev 6- Bruneton, J. (1993). Pharmacognosy . Phytochemistry of Medicinal plants. Lavoisier, parts2nd ed pp.877. 2010) 1( 23جلدمجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة الم 7- Harrison, D.M. (1976).Solanum and Veratrum steroidal Alkaloids Chapter 14 in the Ed. By M.F. Review of the literature publishes. the chemical Grundon. A .6Alkaloids Vol. society, Burlington House. London 8- Yaniv, Z., M. Weissenberg; D. palevitic and A. levy (1981) Effect of seed Number and fruit weight on content and Localization of Glycoalkaloids in Solanum hasianum. J Plants 306 -:30342,medica من خالیا )vinblastine(انتاج مركب ). 2000(كوكب یعقوب، ساعور؛صباح مهدي، هادي؛علي صادق، دمحم 9- .109-79 )2 (:13. المجلة العراقیة للعلوم البیطریة. Cotharanthus roseusكالس نبات عین البزون Solanum nigrum ب الذیب استخالص وتنقیة مركبات من نبات عن). 2003(محمد عباس فیاض ، الدلیمي-10 جامعة بغداد ، كلیة العلوم. رسالة ماجستیر. وتاثیراتها على االحیاء المجهریة المرضیة في دنا Solanum nigramفعالیة المستخلصات القلویدیة الخام لنبات عنب الذئب )2008(فیاض ،محمد عباس -11 23 - 13 )1: (21.ابن الهیثم للعلوم التطبقیة والصرفة مجلة .الهالم يالمرحل ف PBR322 البالزمید 12- Shabana, M.M. and T.S. El-Alfy,(1978). Investigation of the Constituents of Solanum 347 -337)4 -1:( 19AIT fllowers. Egypt. J. harm Sci laciniatum 13- Bhathnagar J.K. and Ravinder K. puri (1974) Solanum Platanifolium a New source of solasodine Lloyidia June 318-319. 14-Stahal,E. (1969).Thin layer chromatography .2 nd edition-Berlin.Heidel berg. New York . 15- Harborn, J.B. (1973). Phytochemical methods. Chaphan and Hall Itd. London –New York pp278 Solanumالتوصیف الفیزیوكیمیائي والطیفي للمركبات الفعالة بایولجیا لنبات عنب الذیب )2009(علي صادق،محمد -16 nigrum ،2مجلة ام سلمة المجلد . مار النباتالمستخلصات القلویدیة الكلیة الخام الوراق ولث -أ 17- Pouchert, Charles J. (1981). The Aldrich Library of Infra Red Spectra, Steroids and Indole alkaloids Edition III, AldrichChemical company, Inc.P 1491-1514. 18- Bezbruah, Balamani. (1981) .A Sample method for purification Of glycoalcooides. In 81.-77,43 Khasianum. Plant medica . quantitative estimation of Solanum the 19- Zeiger, Errol, (1998).α- chaconine and α-Solanine Review of Toxicological Iiterature , National Institute of Envirommental Health Int .La . Systems 20-Crabble, Phillip Graham and Colin fryer,(1980)Rapid Quantitative Analysis of Solasodin , Solasodine Glycosides And solasodinene by ligh-pressure liquid chromatography.Journal 100. -87, 187of Chromatography, Brighteners as thin-laye chromatographic r 21- Jellema, R.; E.T.Elema and Th.M . Malingre (1980). Optical Detection reagents for glycoalkaloids and steroid alkaloids in Solanum species J. of Chromatography 189 ,406-409. 22- James, W.O.,(1950). Alkaloids in plants. In “ Mansk R.H., The Alkaloids VIP. 1-23, Academic pres New York, London“ ـاء العضـویةالطــرق ا). 1986(جـورج بوناتـان، سـركیس -23 ة فـي الكیمیـ . 1كلیـة العلــوم ط-جامعــة بغـداد. متـرجم، لطیفیـ . شركة التایمس للطبع والنشر المساهمة 24- Atta-ur- Rahman and M.IqboI Choudhary (1998). Chemistry and Biology of Steroidal Alkaloids . In the Alkaloids. In The Alkaloids Chemistry and Biology by Geoffrey A. Cordell. Copyrigh by Academic press Vol. 50. USA 25- Cordell, Geoffrey A.(1998). The Alkaloids. Chemistry and Biology. Copyrigh by Academic press USA .50:61-103 26- Hardman. R. (1987). Recent Developments hn our knowledge of Steroids. Plantamedica P. 233-238 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد ـــا للمركبات القلویدیة المتوقع فصلها من اجــزاء نبات :)1(شكل ـــ یبین االشكال الجزیئیة االكثر شیوعــ igrum n Solanum 24( و)19( و) 17( عن ( 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد ) A( القلویدي المرئیة للمركب– طیف اكتصاص االشعة فوق البنفسجیة ) ٢( شكل 2010) 1( 23المجلد مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة ) B( المرئیة للمركب القلوی��دي –طیف امتص�اص االش�عة ف�وق البنفس��جیة ) ٣( شكل ) A( للمركب القلویدي المتبلور ) IR( طیف امتصاص االشعة تحت الحمراء ) ٥( شكل 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد C المرئیة للمركب - طیف امتصاص االشعة فوق البنفس��جیة) ٤( شكل A Solanine جنس نماذج من اطیاف االشعة تحت الحم��راء لبع��ض القلوی��دات الس��تیرویدیة ف��ي ) ٧( شكل ) Pouchart, 1981( عن . السوالنم Salsolidine hydrochloride dihydrate B A-Solanine B-Solsolidine hydrochloride dehydrate شك 7 2010) 1( 23جلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد )یوضح مواقع حزم االمتصاشضص في اطیاف االشعة تحت الحمراء 1 جدول ( BوAللمركبات Aالمركب المنقى جزئیا Bالمركب المنقى جزئیا العدد املوجي للحزمة bands rangs cm-1 تذبذب ا�موعة Proposed assignmem ذبذب واملالحظات لت دد املوجي للحزمة نوع ا الع bands rangs cm-1 ذبذب ا�موعة ت Proposed assignmem نوع التذبذب واملالحظات 3430(b) O-H حزم مط االصرة الكحولیة االمین الثانوي N-Hالممتدة ل 3780 O-H الكحولیة حزمة مط االصرة Stretching alcoholic النموذج " ذو رطوبة عالیة " 3070-3000 =C-H حزم مط االصرة لمجموعة االلكین 3213-3142 =C-H حزم مط مجموعة االلكین Stretching alkene 2997 (w) C-H حزم مط المجموعةCH3 3000- 2865(w.b) -C-H حزم مط مجامیع المثیل والمثیل 1749 (s-b) 1700 (s-b) -C-O 1749حزم مط مجموعة الكاربونیل(s-b) 1700(s-b) -C=O * 1686 (s ) C=C حزم مط اصرة االلكین بضمنھا االصرة الممتدة لحد cm-1 0165 1628 (w) C=C حزم مط اصرة االلكین بضمنھا الممتدة exocyclic olificاالصرة cm-1 1650لحد 1628 ( m) 1557 (w) C=C حزم مط اصرة االلكین exocyclicبضمنھا االصرة olific الممتدة لحد cm-1 1650 1479 (m) -C-H حزم الحنىband االساسیة لمجموعة المثیلین لاللكین الحلقى 1500 (w) C~N حزم مط االصرة االلیفاتیة (cyamid) 1400-1382 (d ) -C-H ل حنى لمجموعة المثی حزم ال 1484-1466 -CH2 حزم الحني لمجموعةCH2 1300(w ) -O-H حني في Planeحزم ال 1400 C-H 1235حزم الحنى لمجموعة المثیلین (m.b ) 1114 (m ) -C-O الصرة للمحموعة الكحولیة حزم مط ا والمجموعة االمینیة واالیثریة 1208 1142 1050 -C-O -C-O حزم مط االصرة للمحموعة الكحولیة والمجموعة االمینیة واالیثریة 1020-1000 (md) C-N حزم مط االصرة االمینیة 886 -C-H حزم الحنى الخارجیة لمجموعة االلكین 946 (w) -C-H حنى لالصرة حزم ال 700-715 -O-H حزم الحني الخارجیة لالصرة الكحولیة 886(m) -C-H حزم الحنى الخارجیة لمجموعة االلكین 700(s) -O-H الخارجیة لالصرة حني حزم ال الكحولیة موجودة ضمن ظهور هذه المجموعة ضمن المركب المفصول قد تعزى الى استخدام حامض الخلیك المركز ،اذ انها غیر * .مجامیع القلویدات الستیرویدیة ،وعموما فهي غیر مؤثرة على نقاوة المركب 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد التي شخصت بتقنیة المفصولة والمنقاة جزئیاA,Bللمركبات القلویدیة المتوقعة )العملیة (القیم النظریة و :)2(جدول C.H.N. التحلیل الدقیق للعناصر )العملیة ( القیم النظریة الوزن الجزیئي M.W الصیغة الجزیئیة المركب والرمز % N % H % C 3.52245 (3.60 ) 10.89998 ( 10.86) 81.55644 ( 81.18 ) 397.64 - C27H43NO - Solanidine ( A) 3.38612 ( 3.658 ) 10.47811 ( 9.990 ) 78.39986 (78.801 ) 413.65 - C27H43NO2 - Solasodine (C ) الجراء القیاسات النظریة (N-14.0067)و(H-1.00797)و(C-12.01115)االتیة اعتمدت االوزان الذریة 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد المفصول من اوراق نبات عنب) A(تقدیر نقاوة المركب -) 8(شكل HPLCباستخدام تقنیة ) .nigrum S( الذئب Solanum nigrumوع المفصول من اوراق نبات الن) A(یوضح طیف الكتلة للمركب –) 9( شكل 2010) 1( 23مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة المجلد 24 ) (عن ) Solaniden( مخطط یوضح الیة طیف الكتلة لمركب السوالندین :) 10( شكل A B C D EF HO H N [C 2 7H4 3 NO ] M .W . 397m /z HO + I CH HO H B C D A H + 2 72 m /z1 25 m /z N CH3 CH3 + C1 5 H 22 20 4 m /zH + B C D +C H2 = CH – C = CH 2 OH + I I II I C D CH2 ~ 150 m /z + +CH2=CH-CH =CH2 5 4 m/ z 98 m/z +. +CH2=CH2 المفص����ول م�����ن ) A( االلی����ة المتوقع����ة لنم����اذج التجزئ����ة للمرك����ب ) (11ش����كل عن�����ب ال�����ذیب ) 10 (عن MSباس����تخدام تقنی�����ة ) .nigrum) Sاوراق نب�����ات IV V VI مجلة ابن الھیثم للعلوم الصرفة والتطبیقیة 2010) 1( 23المجلد ) B( للمركب القلویدي المتبلور ) IR( طیف امتصاص االشعة تحت الحمرء ) ٦( شكل IBN AL- HAITHAM J. FOR PURE & APPL. SCI. VOL.23 (1) 2010 Physiochemical and Spectral Characterization For a Biological Active, Solanidine&Solasodine Partial Purification Compounds From (Solanum nigrum L) A. S. Mohammed , M. A. Fayidh , K. Y.Saooer Department of Biotechnology , College of Science ,University of Baghdad Department of Biology ,College of Education Ibn Al-Haitham, University of Baghdad College of Pharmacology Abstract This study includes a physiochemical and a spectrocpical characterization to some alkaloid compounds in the (ANAB AL- THEAB) plant (Solanum nigrun L.). It’s the most important medicinal herb belonging to the family (Solanaceae). Acid hydrolysis was performed by using limited conc. of Hcl and H2SO4, to obtain the aglycon part of previously separated steroidal componants as (A, B and C). The characterization of the(A,B and C) compounds indicates that they varied between them as the separated steroidal like-alkaloids, carried by using melting point (m.p.), thin layer chromatography (TLC), Infra -Red spectroscopy (IR) and Ultra violet-Visible spectroscopy (UV - Visible).High performance liquid chromatography (HPLC) indicated the presence of single characteristic intense peak belonging to (A) component which confirms the purity of components. The Mass- spectra (MS) of this compound gave (397m/z) molecular weight peak related to (Solanidine) alkaloid, when the chararacteristic to compound (C) showed that same as solasodine alkaloid . .