Revista Brasileira de Ciências Ambientais – Número 31 – Março de 2014                               ISSN Impresso 1808-4524 / ISSN Eletrônico: 2176-9478 
 

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Impacto da ação antrópica sobre o DNA de Astyanax sp. de duas 
áreas do Córrego Ceroula, Campo Grande-MS, Brasil  

 
Impact of anthropic action on the DNA of Astyanax sp. in two areas of the Ceroula  

stream, Campo Grande-MS, Brazil 
 

RESUMO 
 
O presente estudo avaliou a genotoxicidade em Astyanax sp. de 2 áreas do córrego 
Ceroula/Campo Grande/MS (A1 e A2) com características distintas como estratégia de 
biomonitoramento. Foi realizado o teste do micronúcleo em eritrócitos para detectar danos 
no DNA dos peixes. Os resultados demonstraram que os animais de A2 apresentaram maior 
aumento de eritrócitos micronucleados e núcleos morfologicamente alterados em relação a 
A1, possivelmente pela maior atividade antrópica no entorno de A2 como ausência de mata 
ciliar, vegetação constituída de gramíneas e práticas de agricultura no local, enquanto A1 é 
caracterizada pela presença de mata ciliar residual e ausência da agricultura no entorno. 
 
PALAVRAS-CHAVE: Biomonitoramento, Genotoxicidade, Curso d’água  
 
 
ABSTRACT  
 
This study aimed to evaluate the genotoxicity in Astyanax sp. from two areas of Ceroula 
watercourse, in Campo Grande/MS. The area 1 (A1) and area 2 (A2) have distinctive 
feature. Thus, the micronucleus test was performed in order to evaluate DNA damage in 
fishes. The animals from A2 present increase in micronuclei number and nuclei 
morphologically distorted when comparing with A1, possible due higher antropic 
interference in A2, such as absence of ciliary forest, vegetation consisting by grasses and 
agricultural practices. On the order hand, A1 is characterized by the presence of residual 
ciliary forest and absence of agriculture. 
 
KEYWORDS: Biomonitoring, Genotoxicity, Watercourse. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

 
Susana Elisa Moreno 
Bióloga, Doutora em 
Farmacologia e Docente do 
Programa de Mestrado em 
Biotecnologia Universidade 
Católica Dom Bosco 
Campo Grande, MS, Brasil 
smoreno@ucdb.br 
 
Juceli Gonzalez Gouveia 
Bióloga, mestranda em 
Genética e Biologia Molecular 
 Universidade Estadual de 
Londrina (UEL), 
Londrina, PR, Brasil 
juceligouveia@yahoo.com.br 
 
Brunna Mary Okubo 
Bióloga, Mestre em 
Biotecnologia - Universidade 
Católica Dom Bosco 
Campo Grande, MS, Brasil 
brunnabio2008@gmail.com 
 
Danieli Fernanda Buccini 
Bióloga, Doutoranda em  
Biotecnologia - Universidade 
Católica Dom Bosco 
Campo Grande, MS, Brasil 
dfbuccini@gmail.com 



Revista Brasileira de Ciências Ambientais – Número 31 – Março de 2014                          ISSN Impresso 1808-4524 / ISSN Eletrônico: 2176-9478 12 

INTRODUÇÂO 
 

Nas últimas décadas o 
interesse da comunidade científica 
no conhecimento e controle dos 
agentes de poluição ambiental tem 
aumentado substancialmente. 
Interesse esse que foi intensificado 
com o constante crescimento da 
população mundial e o consequente 
aumento da industrialização, 
incrementando a ação antrópica 
sobre os recursos naturais (VELMA 
et al., 2009). Nessa perspectiva, 
ambientes aquáticos como rios, 
estuários, lagoas e oceanos, 
principalmente próximos às cidades, 
recebem de forma crescente, 
inúmeros compostos xenobióticos 
como resultado da atividade 
antropogênica. Tal fato está 
intimamente ligado à redução da 
qualidade ambiental, bem como ao 
comprometimento da saúde dos 
seres vivos que habitam esses 
ecossistemas (ARIAS et al., 2007; 
HAYASE et al., 2009).  
 As concentrações de 
poluentes na água geralmente 
dependem de fenômenos 
provocados pela chuva e drenagem 
da água por sistemas de irrigação 
(ERGENE et al., 2007b; ROSSI, 2008). 
Organismos aquáticos acumulam 
esses poluentes diretamente da 
água contaminada ou indiretamente 
através da ingestão de outros 
organismos contaminados. Desse 
modo, substâncias genotóxicas 
podem contaminar tanto os 
organismos aquáticos do 
ecossistema, como também outros 
seres vivos por meio da cadeia 
alimentar, com consequências 
futuras imprevisíveis (BERTI et al., 
2009; GRISOLIA et al., 2009). 

Uma abordagem integrada 
do biomonitoramento, incluindo os 
diferentes bioindicadores, e da 
avaliação dos diferentes parâmetros 
genéticos permite uma avaliação 
confiável do impacto da exposição 
de poluentes em diferentes 
ecossistemas (BOLOGNESI et al., 
2006). A utilização de 
biomarcadores nesses ecossistemas 
não só evidenciam os impactos de 

atividades negativas sobre o 
ambiente, mas também a ausência 
de influências antropogênicas em 
determinadas regiões (GORBI et al., 
2008). 

Compreender a influência 
de produtos químicos sobre a 
integridade do material genético dos 
seres vivos é fundamental para 
melhorar a aplicabilidade dos 
ensaios e testes de genotoxicidade 
como forma de biomonitoramento 
(HARA et al., 2009). 

Trabalhos com 
genotoxicidade em peixes são 
considerados uma importante 
ferramenta na avaliação da 
qualidade da água, efeitos de 
poluentes e ação antrópica sobre 
organismos aquáticos. Assim, com o 
intuito de reduzir os riscos aos seres 
vivos e ao ambiente, inúmeras 
técnicas têm sido utilizadas em 
pesquisas para identificar o 
potencial efeito genotóxico de 
substâncias ou alterações nos 
ecossistemas, com especial interesse 
nos organismos aquáticos, 
considerados excelentes indicadores 
biológicos, uma vez que esses são 
sensíveis a alterações em ambientes 
(BUCKER et al., 2006; SILVA et al., 
2007; HOVHANNISYAN, 2010). 

Atualmente o teste do 
micronúcleo é bastante utilizado 
para detecção de agentes 
clastogênicos e aneugênicos, onde o 
micronúcleo é correspondente a um 
núcleo supranumerário visível por 
microscopia óptica no citoplasma de 
uma célula, e tem sido empregado 
em laboratório como ensaio de 
genotoxicidade de compostos 
químicos presentes na água 
(AYOOLA et al., 2012; SCHNELL et al, 
2013; FUZINATTO et al., 2013). A 
incidência de micronúcleos serve 
como um indicador do índice de 
danos no DNA. A avaliação é feita 
por meio de contagem de 
micronúcleos na amostra estudada, 
sendo essa rápida, menos exigente 
tecnicamente e com alto grau de 
confiabilidade (FLORES e 
YAMAGUCHI, 2008). Este teste é 
empregado para estudos de análises 
ambientais, onde muitos trabalhos 

utilizam peixes, pela sensibilidade 
desses organismos, às mudanças 
ambientais ou agentes químicos 
dispersos na água (ABDEL-GAWAD 
et al., 2010).  

Peixes do gênero Astyanax 
são bastante utilizados para 
consumo humano, possuem um 
grande valor ecológico como espécie 
forrageira e são também 
considerados transformadores de 
partículas orgânicas em proteína, 
que por sua vez deverá alimentar 
aves e peixes pertencentes a outros 
níveis tróficos. Sua utilização como 
forma de biomonitoramento em 
diferentes cursos hídricos, é uma 
ferramenta de fácil aplicação devido 
a sua ampla distribuição (TRUJILLO-
JIMÉNEZ  et al., 2014; RAMSDORF et 
al., 2012; ERBE et al., 2011). 

O córrego Ceroula está 
situado no município de Campo 
Grande, MS, e pertence à área de 
preservação permanente (APP). 
Atualmente a ocupação em suas 
margens é evidenciada pela 
construção e pelo cultivo de 
subsistência, podendo ser detectada 
a fragmentação da vegetação em 
vários trechos de sua margem 
(BRONAUT e PARANHOS-FILHO, 
2006). Em razão da inexistência de 
trabalhos com biomonitoramento 
nas mediações do córrego Ceroula, o 
presente trabalho teve por objetivo 
avaliar a genotoxicidade em 
lambaris (Astyanax sp.) em 2 áreas 
do córrego Ceroula, com 
caracterizações distintas, em Campo 
Grande, MS. Também foi conduzido 
bioensaio com herbicida para 
verificar o efeito desse composto no 
material genético da espécie 
estudada e comparar com dados 
encontrados nos espécimes do 
córrego. 

 
MATERIAIS E MÉTODOS 

 
Obtenção das Amostras 
Biológicas 

 
 Diante da ampla 

distribuição e relativa abundância, 
foram utilizados 15 indivíduos de 



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Lambaris (Astyanax sp.), por data de 
coletas realizadas em duas áreas do 
córrego Ceroula situado em Campo 
Grande, MS, ( Área 1 (A1): S 20° 22’ 
19” W 54° 33’ 57” e Área 2 (A2): S 
20° 22’ 47” W 54° 39’ 27”). As duas 
áreas se encontram a 
aproximadamente 3 km de distância 
uma da outra. Foram realizadas três 
repetições de coleta do sangue 
periférico durante o ano em 
diferentes dias, para posterior 
análise que foi realizada no 
laboratório de Farmacologia e 
Mutagênese/Bio-Saúde/UCDB. Os 
exemplares foram coletados por 
meio de varas de pesca específicas 
para lambaris e acondicionados em 
recipiente com água, devidamente 
aerados. A amostra de sangue de 
cada indivíduo foi coletada ainda no 
local, pelo método de decapitação e 
feito o esfregaço na lâmina de vidro, 
para análise da frequência de 
eritrócitos micronucleados e 
alterações morfológicas no núcleo 
das células. 

Para os ensaios em sistema 
controlado foram utilizados também 
15 indivíduos de Astyanax sp. 
obtidos em piscicultura e do mesmo 
modo, foi feito o esfregaço de 

sangue periférico, ainda na 
piscicultura, sem a realização de 
experimento em laboratório. Após a 
coleta os animais foram 
acondicionados em sacos plásticos 
identificados e armazenados em 
freezer para posterior incineração.    
 
Bioensaio 
 

Foram utilizados 30 
indivíduos de Astyanax sp. obtidos 
em piscicultura e acondicionados em 
aquários de 40 litros a cada 15 
indivíduos, em condições de 
laboratório. Quinze indivíduos foram 
utilizados em experimento com 
exposição a 1500 µg/L de glifosato,  
adaptado de doses utilizadas por 
Rossi (2008). Os indivíduos expostos 
ao glifosato foram eutanasiados 
após 24, 48 e 72 horas (cinco 
animais por tempo de estudo), para 
realização de esfregaço e análise da 
genotoxicidade por meio do teste do 
micronúcleo. Outros 15 indivíduos 
foram utilizados para coleta de 
sangue sem a exposição ao 
agrotóxico, e eutanasiados nos 
mesmos tempos descritos 
anteriormente, para obtenção do 
sangue e análise de eritrócitos 

micronucleados e núcleos 
morfologicamente alterados, para 
posterior relação com os peixes 
coletados no córrego Ceroula. Após 
a coleta os animais foram 
acondicionados em sacos plásticos 
identificados e armazenados em 
freezer para posterior incineração. O 
protocolo acima foi devidamente 
apreciado e aprovado pelo Comitê 
de Ética em Pesquisa da 
Universidade Católica Dom Bosco, 
sob o número 048/2008A.  
 
Teste de Micronúcleos 

 
Após a captura dos peixes, foi 

retirado o sangue por método de 
decapitação e realizado o esfregaço, 
com secagem do material por 12 
horas e coloração com Giemsa. Para 
a avaliação do potencial genotóxico, 
a frequência de eritrócitos 
micronucleados (MN) e núcleos 
morfologicamente alterados (NMA) 
foram avaliados pela contagem de 
3000 células por indivíduo. A 
confecção das lâminas e a contagem 
foram realizadas pelo procedimento 
duplo-cego, as lâminas foram 
examinadas em microscópio óptico 
(NIKON ECLIPSE E-200) em objetiva 

 

A1 

A2 

 

 
 

Figura 1: Imagem de satélite do córrego Ceroula e foto mostrando as duas áreas de estudo. A1: foto ilustrativa da área 1 (A1). A2: foto 
ilustrativa da área 2 (A2). Fonte:Imagem Satélite Google Maps (http://maps.google.com.br/maps?hl=pt-BR&tab=wl). Acesso em 

13/11/2008. 
 
 
 
 
 

http://maps.google.com.br/maps?hl=pt-BR&tab=wl


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de imersão (10x100).  
 

Análise Estatística 
 

Nos casos de diferentes 
grupos, o teste de análise de 
variância (ANOVA) foi utilizado para 
comparar as diferenças entre eles. 
Em todos os casos, comparações 
individuais foram testadas teste de 
Bonferroni (comparações múltiplas) 

ou teste t de Student (comparações 
entre duas amostras) para amostras 
não pareadas. Os resultados foram 
expressos como média ± EPM e o α 
= 0,05. 
 
Resultados  
 

A área 1 (A1: S 20° 22’ 19” 
W 54° 33’ 57”), corresponde a uma 
parte do córrego Ceroula, com 

presença de mata ciliar residual e 
ausência da prática de agricultura 
em seu entorno. A área 2 (A2: ): S 
20° 22’ 47” W 54° 39’ 27” ), 
correspondente a uma outra parte 
do córrego que se encontra 
represado formando uma lagoa 
permanente, com ausência de mata 
ciliar, e vegetação do seu entorno 
constituída de gramíneas, com 
práticas de agricultura no local. A 
água do córrego possui o fluxo na 

 

 

A1 A2
0.0

2.5

5.0

7.5

10.0

12.5

*
A

M
N

/3
00

0 
E

ri
tr

óc
it

os

A1 A2
0

3

6

9

12
*

B

M
N

/3
00

0 
E

ri
tr

óc
it

os

A1 A2
0

2

4

6

8

10

*

C

M
N

/3
00

0 
E

ri
tr

óc
it

os

 
 

Figura 2: Número de Micronúcleos (MN)/3000 eritrócitos analisados em diferentes datas de coleta nas duas áreas do córrego 
Ceroula. Os peixes coletados com vara e pesca específica para lambari (n=15) na Área 1 (A1) e Área 2 (A2). Painel A: primeira 

coleta realizada na segunda quinzena de maio de 2008 na A1 e A2 no córrego Ceroula. Painel B: segunda coleta realizada agosto 
de 2008 na A1 e A2 no córrego Ceroula. Painel C: terceira coleta realizada em setembro de 2008 na A1 e A2 no córrego Ceroula. 

Foram comparados os números de micronúcleos (coloração de Giemsa a 5%). Resultados expressos como média + EPM do número 
de micronúcleos por 3000 eritrócitos. *p<0,05 comparado as duas áreas do córrego (teste t de Student). 

 
 
 
 

 

 

 
 

Figura 3: Número de Micronúcleos (MN) em bioensaio com diferentes horas de exposição com Glifosato 1500 µg/L e sem 
Glifosato em aquários experimentais. Os peixes lambari (Astyanax sp.) submetidos em aquário com 40 L de água e exposição do 
glifosato (1500 µg/L)  e aquários sem Glifosato ( n= 15)  e coletados amostra de sangue, respectivamente por 24 horas, 48 horas e 

72 horas (n=5 indivíduos a cada hora de coleta). Foram comparados os números de micronúcleos (coloração de Giemsa a 5%). 
Resultados expressos como média + EPM do número de micronúcleos por 3000 eritrócitos. *p<0,05 comparado com os demais 

grupos. (ANOVA, seguida do teste de Bonferroni).   
 

 
 
 

 



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direção da A1 para A2 (Figura 1). 
Para obtenção da 

amostragem apresentada no 
presente estudo, não foram 
encontradas dificuldades na coleta 
dos indivíduos nas duas áreas do 
córrego, em todas as datas de 
coleta, o gênero Astyanax foi 
bastante abundante nas duas áreas 
do córrego (Figura I). O número total 
de indivíduos coletados durante o 
ano foi de 45 indivíduos em cada 
área do córrego, sendo considerado 
um número amostral adequado para 
esse estudo. 

Foram observadas 
diferenças estatísticas significativas, 
na presença de micronúcleos 
encontrados, quando comparado as 
duas áreas do córrego, onde a A2 
apresentou indivíduos com maior 
frequência de eritrócitos 
micronucleados em relação a A1 
(Figura 2: painéis A, B e C e Figura 6, 
painel B). 

O bioensaio com a 
exposição do lambari (Astyanax sp.) 
ao herbicida glifosato, por diferentes 
períodos de tempo, teve como 
intuito caracterizar a presença de 
micronúcleos (MN) e núcleos 
morfologicamente alterados (NMA) 
em eritrócitos de peixe, induzida por 
esse composto, para posterior 
comparação com os animais 
coletados no córrego Ceroula. Os 

resultados obtidos demonstram que 
após 24 horas da exposição ao 
glifosato, os peixes não 
apresentaram aumento no número 
de micronúcleos, quando 
comparado ao grupo controle. Por 
outro lado, após 48 e 72 horas, 
houve aumento significativo na 
frequência de eritrócitos 
micronucleados, em relação ao 
grupo não exposto ao glifosato 
(Figura 3 e Figura 6, painel B).     

Na figura 4 estão 
representados os resultados 
referentes à média de micronúcleos 
das três coletas nas áreas 1 e 2 do 
córrego Ceroula, os resultados da 
exposição dos animais ao glifosato 
(72 horas) e seu respectivo controle 
(controle negativo 2). Também estão 
expressos os resultados obtidos 
após avaliação de peixes de 
piscicultura, não mantidos em 
ambientes de laboratório. Os 
resultados obtidos demonstram que 
a A2 apresentou aumento 
significativo no número de 
micronúcleos quando comparado 
aos grupos controle (1 e 2) e em 
relação à A1. Porém os animais da 
A2 apresentaram número de 
micronúcleos inferiores àqueles 
observados nos peixes expostos ao 
glifosato. 

Com o objetivo de 
confirmar os dados referentes à 

genotoxicidade obtidos com o teste 
de micronúcleos, foram avaliados 
em todos os animais, os números de 
núcleos morfologicamente alterados 
(NMA) (Figura 6, painel A). Os 
resultados corroboram os obtidos 
com a avaliação de micronúcleos 
(Figura 5), onde os animais 
coletados na A2 apresentaram maior 
frequência de NMA, em relação á A1 
e controles negativos. Do mesmo 
modo, a exposição ao glifosato por 
72 induziu o aumento significativo 
dos NMA em relação aos demais 
grupos analisados. 

 
DISCUSSÃO 
 

Pesquisas de 
genotoxicidade em peixes 
demonstram a importância desses 
organismos como bioindicadores 
ambientais, avaliando riscos aos 
ecossistemas, onde estudos têm 
destacado o uso do micronúcleo 
como teste de avaliação do impacto 
da presença de agentes químicos na 
água ou danos ambientais e seus 
efeitos na integridade do DNA de 
peixes (NORMANN et al., 2008; 
GALINDO et al., 2012). 

 Os resultados obtidos 
demonstram que A2 em 
comparação com A1 apresentou 
peixes com aumento 
estatisticamente significativo no 

 
 

 
Figura 4 - Número de Micronúcleos (MN) nas duas áreas do córrego e diferentes controles. Os peixes coletados com vara e pesca 

específica para lambari (n=15) na área 1 (A1) e área 2 (A2). Os lambaris coletados em piscicultura, não receberam tratamento (n=15) 
correspondente ao controle negativo 1. Peixes submetidos a aquários experimentais com 40 l de água sem tratamento algum, como 
controle negativo 2 (n=5) com coleta de sangue após 72 horas no aquário. Peixes tratados com de Glifosato (1500 µg/L)  em 72 horas 

de exposição (n=5). Foram comparados os números de micronúcleos (coloração de Giemsa a 5%). Resultados expressos como média + 
EPM do número de micronúcleos por 3000 eritrócitos. *p<0,05 comparado com os demais grupos. (ANOVA, seguida do teste de 

Bonferroni).   
 

 
 



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número de eritrócitos 
micronucleados, possivelmente 
devido às características observadas 
nas duas áreas do córrego. O fluxo 
da água no córrego Ceroula é de A1 
para A2, de modo que dejetos 
potenciais contaminantes fluem 
nesta direção de A1 para A2. Aliado 
ao fato de que A2 demonstra ter 
uma maior atividade antrópica e 
ausência de mata ciliar, isso pode 
explicar o aumento de eritrócitos 
micronucleados e alterações no 
núcleo em peixes dessa área. 
Segundo Padovesi-Fonseca et al. 
(2010), as práticas antropogênicas 
podem alterar o ambiente como, 
por exemplo, agricultura intensiva, 
atividade agropecuária, elevado 
consumo de insumos ferti-sanitários, 
pouca presença de cobertura 
vegetal nas margens dos cursos 

d’água, poderá apresentar 
condições favoráveis ao processo de 
contaminação e poluição das águas 
superficiais. 

Poluentes na água podem 
induzir a danos no DNA de 
organismos aquáticos, e trabalhos 
que visem verificar a ação desses 
compostos, como forma de 
biomonitoramento é de grande 
relevância (ALI et al., 2008; FEDATO 
et al., 2010; MARTÍNEZ-GÓMEZ et 
al., 2010), sendo que, agentes 
agrotóxicos são grandes precursores 
de danos em cursos d’água no Brasil, 
onde a maioria dos agricultores 
possuem e necessidade da utilização 
de herbicidas para controle de 
pragas e de ervas daninha ( MATUS 
et al. 2013).   

O herbicida escolhido para 
realização do ensaio visando 

mimetizar a exposição dos peixes a 
agrotóxicos na água, foi o glifosato, 
sendo esse o de maior uso no estado 
de Mato Grosso do Sul. Observando 
a genotoxicidade desse composto 
podemos confirmar a importância 
de avaliar riscos ambientais 
relacionados aos produtos utilizados 
nas práticas de agricultura que 
podem alcançar os cursos d’água, 
posto que, segundo Azevedo-Santos 
et al. (2010), a poluição dos 
ecossistemas aquáticos pode 
provocar prejuízos à biodiversidade, 
implicando na diminuição ou 
desaparecimento de populações 
locais e até mesmo introdução de 
novas espécies. 

  Com objetivo de comparar 
os dados coletados no córrego com 
dados confirmados de 
mutagenicidade de compostos na 

 
 

 
 

Figura 5 - Número de núcleos morfologicamente alterados (NMA) nas duas áreas do córrego e diferentes controles. Os peixes 
coletados com vara de pesca específica para lambari (n=15), na Área 1 (A1) e Área 2 (A2). Os lambaris coletados em 

piscicultura, não receberam tratamento (n=15) correspondente ao controle negativo (CN). Peixes tratados com de Glifosato 
(1500 µg/L) em 72 horas de exposição (n= 5),  como controle positivo (CP). Foram comparados os números de micronúcleos 
(coloração de Giemsa a 5%). Resultados expressos como média + EPM do número de núcleos morfologicamente alterados 

(NMA) por 3000 eritrócitos. *p<0,05 comparado com os demais grupos e #p<0,05 comparando A1 e A2 (ANOVA, seguida do 
teste de Bonferroni).  

 
 
 

 
 

 
 

Figura 6 - Foto ilustrando o núcleo morfologicamente alterado (NMA) e eritrócito micronucleado 
 A: eritrócito com núcleo morfologicamente alterado (NMA). B: eritrócito micronucleado. Microscopia óptica, aumento 1000X.  

 
 
 



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água, o uso do bioensaio realizado 
nesse trabalho permitiu estudar os 
efeitos genotóxicos do herbicida 
glifosato de forma isolada, 
minimizando a influência das 
variáveis ambientais, sob condições 
controladas em laboratório. Os 
resultados obtidos pelo bioensaio 
não podem ser extrapolados 
diretamente para o ambiente 
estudado, mas auxilia no 
fornecimento de uma base de dados 
visando um melhor entendimento 
dos fatores que estão interferindo 
na saúde dos organismos e 
alterando as condições ambientais. 

O glifosato é um herbicida 
utilizado para remoção de plantas 
daninhas em práticas de agricultura, 
sendo o mais utilizado no mundo 
por ser considerado um composto 
pouco tóxico para animais, porém 
há controversas quanto aos limites 
toleráveis de glifosato na água e no 
solo (AMARANTE-JUNIOR et al., 
2002; QUEIROZ et al., 2011). Em 
trabalho realizado com o mesmo 
herbicida, Çavas e Könen (2007) 
analisaram danos no DNA do peixe 
Carassius auratus, em diferentes 
dias de exposição, concluindo que os 
peixes são sensíveis para testar 
produtos químicos demonstrando a 
importância de mais investigação da 
genotoxicidade do glifosato. 
Chapadense et al. (2009), usando 
outro herbicida, constataram que as 
alterações nas frequências dos 
micronúcleos apresentam 
características clastogênicas, 
podendo induzir a eventos 
mutagênicos na espécie estudada 
por eles Colossoma macropomum 
(tambaqui). Esses trabalhos 
demonstram a sensibilidade em 
exposição a agentes genotóxicos em 
peixes de diferentes espécies e a 
importância dessa avaliação, já que 
o grau de genotoxicidade também é 
considerada controversa (ALVAREZ-
MOYA et al., 2011; CEREGATTI et al., 
2013). E Espécies do gênero 
Astyanax já foram utilizadas em 
estudos de genotoxicidade, como 
Astyanax fasciatus, demonstrando 
ser bons biomarcadores para 
avaliação de contaminantes em 

cursos d’água (ZENKNER et al., 
2013). 

 Pesquisadores constataram 
em seus trabalhos que fontes de 
contaminação nas águas superficiais 
muitas vezes são de produtos 
suposta ou parcialmente tratados, 
sendo que descargas das indústrias 
químicas, petroquímicas indústrias, 
refinarias de petróleo, os 
derramamentos de petróleo, 
fábricas de laminagem de aço, 
esgotos domésticos não tratados e 
os pesticidas estão entre atividades 
de impactos no ambiente, nos 
organismos aquáticos e na 
qualidade da água, enfatizando 
ainda a importância de uma 
avaliação com ensaios que devem 
ser incluídos como parâmetros 
adicionais na avaliação da qualidade 
da água e acompanhamento de 
programas de biomonitoramento 
(OHE et al. (2004); MACEDO e 
SIPAÚBA-TAVARES, 2010). Podemos 
ainda observar em um estudo feito 
por Dhillon et al. (2011) que uma 
série de variáveis que podem 
provocar danos irreversíveis ao 
material genético e 
consequentemente mutações, 
podendo ocasionar doenças como o 
câncer em longo prazo em diversas 
espécies incluindo o ser humano.  

Trabalhos desse tipo são 
sensíveis e confiáveis para a 
detecção de atividades de 
compostos mutagênicos no meio 
aquático, e demonstram que danos 
no material genético das espécies 
podem levar à diminuição da 
biodiversidade devido à diminuição 
no processo de reprodução, indução 
de anormalidades nucleares, câncer, 
alterações histopatológicas, dentre 
outros impactos ainda 
desconhecidos (ERGENE et al., 
2007b; SPIVAK et al., 2009; SCALON 
et al., 2010). 

 Os resultados obtidos no 
presente trabalho demonstram a 
importância da preservação das 
áreas das matas ao longo dos cursos 
d’água, e os cuidados com a 
utilização de compostos químicos 
em seu entorno, posto que o 
número de compostos presentes na 

água está diretamente ligado com a 
qualidade da mesma, e esses 
cuidados são de suma importância 
para preservação da biodiversidade, 
(BORTOLUZZI et al., 2006;  NUNES  e 
PINTO, 2007) onde não só nos 
centros urbanos, mas também na 
área rural, existem poluentes que 
afetam a biota aquática  (ZENKNER 
et al., 2013; MATUS et al., 2013).   

Nessa perspectiva, 
podemos concluir que espécies de 
peixes do gênero Astyanax, podem 
ser utilizado como bioindicador em 
trabalhos com genotoxicidade como 
forma de biomonitoramento em 
cursos d’água, e que trabalhos dessa 
natureza são importantes para 
preservação da biodiversidade, 
fundamentando os programas e 
estratégias de recuperação e 
preservação de bacias hidrográficas.  

 
REFERÊNCIAS 

ABDEL-GAWAD, F. K. H.; EL-SEEHY, 
M. A.; EL-SEEHY, M. M. 
Clastogenicity in fish genome and 
aquatic pollution. World Journal of 
Fish and Marine Sciences, Giza, v.2, 
n.4, p.335-342, 2010.  

 

ALI, F. K. H.; EL-SHEHAWI, A. M.; 
SEEHY, M. A. Micronucleus test in 
fish genome: A sensitive monitor for 
aquatic pollution. African Journal of 
Biotechnology, Cairo, v.7, n.5, 
p.606-612, 2008. 

  
AMARANTE-JUNIOR, O. P.; SANTOS, 
T. C. R.; BRITO, N. M.; RIBEIRO, M. L. 
Glifosato: Propriedades, toxicidade, 
usos e legislação. Quimica Nova, São 
Luis, v.25, n.4, p.589-593, 2002. 
 
ARIAS, A. R. L.; BUSS, D. F.; 
ALBURQUERQUE, C.; INÁCIO, A. F.; 
FREIREI, M. M.; EGLER, M.; MUGNAI, R.; 
BAPTISTA, D. F. Utilização de 
bioindicadores na avaliação de impacto e 
no monitoramento da contaminação de 
rios e córregos por agrotóxicos. Ciência & 
Saúde Coletiva, Rio de Janeiro, v.12, n.1, 
p.61-72, 2007.  
 



Revista Brasileira de Ciências Ambientais – Número 31 – Março de 2014                          ISSN Impresso 1808-4524 / ISSN Eletrônico: 2176-9478 18 

AZEVEDO-SANTOS, V. M.; COSTA-NETO, 
E. M.; LIMA-STRIPARI, N. Concepção dos 
pescadores artesanais que utilizam o 
reservatório de Furnas, Estado de Minas 
Gerais, acerca dos recursos pesqueiros: 
um estudo etnoictiológico. Biotemas, 
Passos-MG, v.23, n.4, p.135-145, 2010. 
 
ALVAREZ-MOYA, C.; SILVA, M. R.; 
ARÁMBULA, A. R. V.; SANDOVAL, A. I.; 
VASQUEZ, H. C.; MONTES, R. M. G. 
Evaluation of genetic damage induced by 
glyphosate isopropylamine salt using 
Tradescantia bioassays. Genetics and 
Molecular Biology, Nogales, v.34, n.1, 
p.127-130, 2011. 
 
AYOOLA SO, BASSEY BO, ALIMBA CG, 
AJANI EK. Textile effluent induced 
genotoxic effects and oxidative 
stress in Clarias gariepinus . Pak J 
Biol Sci. v.1, n.15(17):804-12, 2012. 
 
BERTI, A. P.; DÜSMAN, E.; SOARES, L. C.; 
GRASSI, L. E. A. Efeitos da contaminação 
do ambiente aquático por óleos e 
agrotóxicos. Revista de Saúde e Biologia, 
Maringá, v.4, n.1, p.45-51, 2009. 
 
BOLOGNESI, C.; PERRONE, E.;  
ROGGIERI, P.; SCIUTTO A. 
Bioindicators in monitoring long 
term genotoxic impact of oil spill: 
Haven case study. Marine 
Environmental Research, Genoa, 
v.62, p.287-291, 2006. 
 
BORTOLUZZI, E. C.; RHEINHEIMER, D. 
S.; CELSO, S.; GONÇALVES, C. S.; 
JOÃO, B. R.; PELLEGRINI, J. B. R.; 
ZANELLA, R.; COPETTI, A. C. C. 
Contaminação de águas superficiais 
por agrotóxicos em função do uso 
do solo numa microbacia 
hidrográfica de Agudo, RS. Revista 
Brasileira de Engenharia Agrícola e 
Ambiental, Campina Grande, v.10, 
n.4, p.881-887, 2006. 
 
BRONAUT, R. P. M.; PARANHOS-FILHO, A. 
C. Avaliação do uso de imagens de 
satélite Landsat Etm+ na identificação e 
monitoramento das áreas de 
preservação permanente ao longo dos 
corpos hídricos. In: 1º SIMPÓSIO DE 
GEOTECNOLOGIAS NO PANTANAL, 
Campo Grande-MS, 2006. Anais... 

Campo Grande-MS: Embrapa Informática 
Agropecuária/INPE, 2006. p.431-437. 
 
BUCKER, A.; CARVALHO, W.; ALVES-
GOMES, J. A. Avaliação mutagênese 
e genotoxicidade em Eigenmannia 
virescens (Teleostei: 
Gymnotiformes) exposto ao 
benzeno. Acta Amazonica, Manaus, 
v.36, n.3, p.357-364, 2006. 
 
ÇAVAS, T.; KÖNEN, S. Detection of 
cytogenetic and DNA damage in 
peripheral erythrocytes of goldfish 
(Carassius auratus) exposed to a 
glyphosate formulation using the 
micronucleus test and the comet assay. 
Mutagenesis, Turkey, v.22, n. 4, p. 63-
268, 2007. 

 
CHAPADENSE, P. F. G.; CASTRO, F. J.; 
ALMEIDA, J. Al.; MORON, S. E. 
Toxicidade do herbicida atrazina em 
Colossoma macropomum. Revista 
Brasileira de Saúde e Produção 
Animal, Araguaína, v.10, n.2, p.398-
405, 2009. 
 
CEREGATTI, M. G.; BIOLCHI, M.; 
PEREIRA,L. M. A.; CASA, M. S.; 
OLIVEIRA, A.; ABIDO, L. H. C.; 
MOREIRA, M. C. S.; LIPOSKI, D.;  
VOGEL. C. I. G. Análise de 
genotoxicidade em peixes nos rios 
do sistema aquífero Guarani. Revista 
UNIPLAC, v. 1, n. 1, 2013.        
 
DHILLON, V. S.; THOMAS, P.; 
IARMARCOVAI, G.; KIRSCH-
VOLDERS, M.; BONASSI, S.; FENECH, 
M. Genetic polymorphisms of genes 
involved in DNA repair and 
metabolism influence micronucleus 
frequencies in human peripheral 
blood lymphocytes. Mutagenesis, 
Oxford, v.26, n.1, p.33-42, 2011. 
 
ERBE MC, RAMSDORF WA, VICARI T, 
CESTARI MM. Toxicity evaluation of 
water samples collected near a 
hospital waste landfill through 
bioassays of genotoxicity piscine 
micronucleus test and comet assay 
in fish Astyanax and ecotoxicity 
Vibrio fischeri and Daphnia magna. 

Ecotoxicology. v.20, n.2, p.320-8, 
2011. 
 
ERGENE, S.; ÇELIK, A.; ÇAVAŞ, T.; 
KAYA. F. Genotoxic biomonitoring 
study of population residing in 
pesticide contaminated regions in 
Göksu Delta: micronucleus, 
chromosomal aberrations and sister 
chromatid exchanges. Environment 
International, Turkey, v.33, p.877-
885, 2007b. 
 
FEDATO, R. P.; SIMONATO, J. D.; 
MARTINEZ, C. B. R.; SOFIA, S. H. 
Genetic damage in the bivalve 
mollusk Corbicula fluminea induced 
by the water-soluble fraction of 
gasoline. Mutation Research, 
Londrina, v.700, p.80-85, 2010.  
 
FLORES, M.; YAMAGUCHI, M. U. 
Teste do micronúcleo: uma triagem 
para avaliação genotóxica. Revista 
Saúde e Pesquisa, Maringá, v.1, n.3, 
p.337-340, 2008. 
 
FUZINATTO CF, FLOHR L, MELEGARI 
SP, MATIAS WG. Induction of 
micronucleus of Oreochromis 
niloticus exposed to waters from the 
Cubatão do Sul River, southern 
Brazil. Ecotoxicol Environ Saf, v.;98, 
p.103-9, 2013. 
 
GALINDO, T.; SILVA, E.; ROSÁRIO, I. 
Indução de micronúcleos e 
toxicidade por efluente doméstico 
em duas populações de Bathygobius 
soporator (valenciennes, 1837) 
(teleostei, gobbidae) no litoral de 
salvador (BA), Brasil. Brazilian 
Journal of Aquatic Science and 
Technology, Portugal, v.16, n.1, p.1-
7, 2012.  
 
GORBI, S.; LAMBERTI, C.V.; NOTTI, 
A.; BENEDETTI, M.; FATTORINI, D.; 
MOLTEDO, G.; REGOLI, F. An 
ecotoxicological protocol with caged 
mussels, Mytilus galloprovincialis, 
for monitoring the impact of an 
offshore platform in the Adriatic sea. 
Marine Environmental Research, 
Roma, v.65, p.34-49, 2008.  
 

http://www.revistauniplac.net/ojs/index.php/uniplac/issue/view/3
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21153435
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21153435
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21153435
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21153435
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21153435
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21153435
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21153435


Revista Brasileira de Ciências Ambientais – Número 31 – Março de 2014                          ISSN Impresso 1808-4524 / ISSN Eletrônico: 2176-9478 19 

GRISOLIA, C. K.; RIVERO, C. L.G.; 
STARLING, F. L. R. M.; SILVA, I. C. R.; 
BARBOSA, A. C.; DOREA, J. G. Profile 
of micronucleus frequencies and 
DNA damage in different species of 
fish in a eutrophic tropical lake. 
Genetics and Molecular Biology, 
v.32, n.1, p.138-143, 2009. 
 
HARA, R. V.; LOPES, B. P. V.; 
SANTOS, F. P.; OLIVEIRA, R. J. 
Aplicabilidade de ensaios da 
genética toxicológica no 
biomonitoramento de ambientes 
aquáticos e promoção da saúde 
humana. Revista Terra e Cultura, 
Filadélfia, n.48 e 49, p.20-25, 2009. 
 
HAYASE, D.; HORAI, S.; ISOBE, T.; 
MILLER, T. W.; TAKAHASHI, S.; 
OMORI, K.; TANABE, S. Monitoring 
Trace Elements in Coastal Waters 
Using Sardine as a Bioindicator. 
Interdisciplinary Studies on 
Environmental Chemistry, Japão, 
p.167-175, 2009. 
 
HOVHANNISYAN, G. G. Fluorescence 
in situ hybridization in combination 
with the comet assay and 
micronucleus test in genetic 
toxicology. Hovhannisyan Molecular 
Cytogenetics, Yerevan, v.3, n.1, p.1-
11, 2010. 
 
MACEDO, C. F.; SIPAÚBA-TAVARES, 
L. H. Eutrofização e qualidade da 
água na piscicultura: consequências 
e recomendações. Boletim do 
Instituto de Pesca, São Paulo, v.36, 
n.2, p.149-163, 2010. 
 
MATUS, E. M.; PERAZZO, G. X.; 
VIEIRA, L. C.;  LORO, V. L. Avaliação 
da Genotoxicidade em Hoplias 
malabaricus Expostas Agentes 
Agrotóxicos na Barragem da 
Unipampa, Uruguaiana, RS, Brasil. 
Anais do Salão Internacional de 
Ensino, Pesquisa e Extensão, v. 5, n. 
2, 2013. 
 
MARTÍNEZ-GÓMEZ C.; VETHAAK, A. 
D.; HYLLAND, K.; BURGEOT, T.; 
KÖHLER, A.; LYONS, B. P.; THAIN, J.; 
GUBBINS, M. J.; DAVIES, I. M. A 
guide to toxicity assessment and 

monitoring effects at lower levels of 
biological organization following 
marine oil spills in European waters. 
Journal of Marine Science, 
Amsterdam, v.67, p.1105-1118, 
2010. 
 
NORMANN, C. A. B. M..; MOREIRA, J. C. 
F.;  CARDOSO, V. V. Micronuclei in red 
blood cells of armored catfish 
Hypostomus plecotomus exposed to 
potassium dichromate. African Journal of 
Biotechnology, Porto Alegre, v.7, n.7, 
p.893-896, 2008. 
 
NUNES, F. P.; PINTO, M. T. C. 
Conhecimento local sobre a 
importância de um reflorestamento 
ciliar para a conservação ambiental 
do alto São Francisco, Minas Gerais. 
Biota Neotropica, Belo Horizonte, 
v.7, n.3, p.171-179, 2007. 
 
OHE, T.; WATANABE, T.; WAKABAYASHI, 
K., Mutagens in surface waters: a review. 
Mutation Research, Kyoto, v.567, p.109-
149, 2004. 
 
PADOVESI-FONSECA, C.; CORRÊA, A. C. 
G.; LEITE, A. F. M. L.; JOVELI, J. C.; COSTA, 
L. S.; PEREIRA, S. T. Diagnóstico da sub-
bacia do ribeirão Mestre d’ Armas por 
meio de dois métodos de avaliação 
ambiental rápida, Distrito Federal, Brasil 
Central. Revista Ambiente & Água, 
Taubaté, v.5, n.1, p.43-56, 2010. 
  
QUEIROZ, G. M. P.; SILVA, M. R.; 
BIANCO, R. J. F. Transporte de 
Glifosato pelo escoamento 
superficial e por lixiviação em solo 
agrícola. Quimica Nova, Blumenau, 
v.34, n.2, p.190-195, 2011. 
 
RAMSDORF WA, VICARI T, DE 
ALMEIDA MI, ARTONI RF, CESTARI 
MM. Handling of Astyanax sp. for 
biomonitoring in Cangüiri Farm 
within a fountainhead (Iraí River 
Environment Preservation Area) 
through the use of genetic 
biomarkers. Environ Monit Assess. 
v.184, n.10, p.5841-9, 2012. 
 
ROSSI, S. Uso de biomarcadores 
para a detecção de efeitos subletais 
dos pesticidas Roundup® e 

Hexaron® em Astyanax sp. (Pisces, 
Teleostei), 2008. 65 f. Dissertação 
(Mestrado em Farmacologia) - 
Universidade Federal do Paraná, 
Curitiba, 2008. 
 
SCALON, M. C. S.; RECHENMACHER, 
C.; SIEBEL, A. M.; KAYSER, M. L.; 
RODRIGUES, M. T.; MALUF, S. W.; 
RODRIGUES, M. A. S.; SILVA, L. B. 
Evaluation of Sinos River water 
genotoxicity using the comet assay 
in fish. Brazilian Journal of Biology, 
Novo Hamburgo, v.70, n.4, p.1217-
1222, 2010. 
 
SCHNELL S, OLIVARES A, PIÑA B, 
ECHAVARRI-ERASUN B, LACORTE S, 
PORTE C.  The combined use of the 
PLHC-1 cell line and the recombinant 
yeast assay to assess the 
environmental quality of estuarine 
and coastal sediments. Mar Pollut 
Bull. v.15, p. 282-9,. 2013. 
 
SILVA, J.; SIMEONI, N.; GROFF, A. A.; 
IANISTCKI, M.; BENVEGNÚ, V.; 
SCHRODER, N. T. O ensaio cometa 
na avaliação da genotoxicidade 
induzida por poluentes atmosféricos 
utilizando como biomonitor o 
moluco Cantareus aspersus (Muller, 
1774).  Journal of the Brazilian 
Society of Ecotoxicology, Canoas, 
v.2, n.1, p.45-51, 2007. 
 
SPIVAK, G.; COX, R. A.; HANAWALT, 
P. C. New Applications of the Comet 
Assay: Comet-FISH and 
Transcription-Coupled DNA Repair. 
Mutation Research, Stanford, v.681, 
n.1, p.44-50, 2009. 
 
TRUJILLO-JIMÉNEZ P, SEDEÑO-DÍAZ 
JE, LÓPEZ-LÓPEZ E. Assessing the 
health condition profile in the 
freshwater fish Astyanax aeneus in 
Champoton River, Mexico. J Environ 
Biol. v.35, n. 1, p.137-45, 2014. 
 
VELMA, V.; VUTUKURU, S. S.; 
TCHOUNWOU, P. B. Ecotoxicology of 
Hexavalent Chromium in Freshwater 
Fish: A Critical Review. Reviews on 
Environmental Health, Mississippi, 
v.24, n.2, p.129-145, 2009. 
 

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22821320
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22821320
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22821320
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22821320
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22821320
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22821320
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24139644
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24139644
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24139644
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24139644
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24139644
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24579529
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24579529
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24579529
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24579529


Revista Brasileira de Ciências Ambientais – Número 31 – Março de 2014                          ISSN Impresso 1808-4524 / ISSN Eletrônico: 2176-9478 20 

ZENKNER, F. F.;  AQUINO, T.;  
ABLING, F.;  DALLEMOLE, D. R.;  
KÖHLER, A.;  l PRÁ, D.;  RIEGER, A. 
Avaliação da genotoxicidade do rio 
pardinho utilizando o ensaio cometa 
em Astyanax fasciatus Cuvier, 1819. 
Caderno de Pesquisa, série Biologia, 
v, 25, n. 3, p. 79-93, 2013. 
 

 
 
 
 
 
Recebido em: mar/2012 
Aprovado em: mar/2014 
 


	CEREGATTI, M. G.; BIOLCHI, M.; PEREIRA,L. M. A.; CASA, M. S.; OLIVEIRA, A.; ABIDO, L. H. C.; MOREIRA, M. C. S.; LIPOSKI, D.;  VOGEL. C. I. G. Análise de genotoxicidade em peixes nos rios do sistema aquífero Guarani. Revista UNIPLAC, v. 1, n. 1, 2013. ...